對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類局部麻醉藥物的分析文檔第一頁，共45頁。本章主要內(nèi)容結構與性質(zhì)鑒別試驗特殊雜質(zhì)與檢查含量測定體內(nèi)藥物分析第二頁，共45頁。

局部麻醉藥（localanaesthetics）,是一類能在用藥局部可逆性的阻斷感覺神經(jīng)沖動發(fā)生與傳遞的藥品，簡稱“局麻藥”。局麻藥物的化學結構通常包括三個部分：①親脂性芳香環(huán)②中間連接功能基③親水性胺基。第三頁，共45頁。第一節(jié)對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類藥物的結構與性質(zhì)芳胺類藥物芳伯氨基未被取代芳伯氨基被?；谒捻?，共45頁。對氨基苯甲酸酯類藥物基本結構與典型藥物1、本類藥物分子中都具有對氨基苯甲酸酯的母體，結構通式如下：第五頁，共45頁。2、典型藥物

苯佐卡因(Benzocaine）

鹽酸普魯卡因(ProcaineHydrochloride)

鹽酸丁卡因(TetracaineHydrochloride)第六頁，共45頁。說明抗心律失常藥鹽酸普魯卡因胺：其化學結構與鹽酸普魯卡因僅存在羧酸酯與酰胺的差異，化學性質(zhì)與本類藥物很相似，故也在此一并列入討論。第七頁，共45頁。二、酰苯胺類藥物基本結構與典型藥物1、基本結構本類藥物均系苯胺的?；苌铮浣Y構共性是具有芳酰氨基結構通式為：第八頁，共45頁。2、典型藥物鹽酸利多卡因(LidocaineHydrochloride)鹽酸布比卡因(BupivacaineHydrochloride)鹽酸羅哌卡因(RopivacaineHydrochloride)第九頁，共45頁。三、主要理化性質(zhì)1、芳伯氨基特性對氨基苯甲酸酯類藥物的結構中具有芳伯氨基(除鹽酸丁卡因外)，故顯重氮化-偶合反應與芳醛縮合成Schiff堿反應易氧化變色等。酰苯胺類藥物結構中具有芳酰氨基，在酸性溶液中也可水解為芳伯氨基化合物，而顯芳伯氨基特性反應。第十頁，共45頁。2、水解特性對氨基苯甲酸酯類藥物因分子結構中含有酯鍵，故易水解。影響藥物水解反應的快慢因素，光、熱或堿性條件苯佐卡因、鹽酸普魯卡因?qū)Π被郊姿?PABA)、鹽酸氯普魯卡因4-氨基-2-氯苯甲酸、鹽酸丁卡因?qū)Χ“被郊姿?BABA）。第十一頁，共45頁。3、弱堿性脂烴胺側鏈為叔胺氮原子(除苯佐卡因外)，具有一定堿性，可以成鹽，能與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應，只能在非水溶劑體系中滴定。第十二頁，共45頁。4、與重金屬離子反應特性因酰苯胺類藥物分子結構中酰氨基上的氮可在水溶液中與銅離子或鈷離子絡合，生成有色的配位化合物沉淀。此沉淀可溶于氯仿等有機溶劑而呈色。5、吸收光譜特性因該類藥物分子結構中均含有苯環(huán)及相應的取代基與脂烴胺側鏈，具有特征的紫外吸收光譜與紅外光譜行為。第十三頁，共45頁。6、其他特性其游離堿多為堿性油狀液體或低熔點固體，難溶于水，可溶于有機溶劑其鹽酸鹽均系白色結晶性粉末，具有一定的熔點，易溶于水和乙醇，難溶于有機溶劑。第十四頁，共45頁。第二節(jié)鑒別試驗一、重氮化-偶合反應分子結構中具有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物，均可發(fā)生重氮化反應，生成的重氮鹽可與堿性β-萘酚偶合生成有色的偶氮染料。第十五頁，共45頁。芳香第一胺類鑒別反應：第十六頁，共45頁。說明：鹽酸丁卡因分子結構中不具有芳伯氨基，無此反應，但其分子結構中的芳香仲胺在酸性溶液中與亞硝酸鈉反應，生成N-亞硝基化合物的乳白色沉淀，可與具有芳伯氨基的同類藥物區(qū)別。第十七頁，共45頁。二、與金屬離子反應1、鹽酸利多卡因的鑒別方法ChP2010取本品0.2g，加水20ml溶解后，取溶液2ml，加硫酸銅試液0.2ml與碳酸鈉試液1ml，即顯藍紫色，加三氯甲烷2ml，振搖后放置，三氯甲烷層顯黃色。說明：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸氯普魯卡因和鹽酸丁卡因等，在同樣條件下不發(fā)生此反應。第十八頁，共45頁。其在酸性溶液中與氯化鈷試液反應，生成亮綠色細小鈷鹽沉淀。鹽酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化后，加硝酸汞試液煮沸，顯黃色對氨基苯甲酸酯類藥物顯紅色或橙黃色，可與之區(qū)別。第十九頁，共45頁。2、鹽酸普魯卡因胺的鑒別方法ChP2010取本品0.1g，加水5ml，加三氯化鐵試液與濃過氧化氫溶液各1滴，緩緩加熱至沸，溶液顯紫紅色，隨即變?yōu)榘底厣磷睾谏?。羥肟酸鐵鹽反應：

芳酰胺結構羥肟酸

羥肟酸鐵第二十頁，共45頁。三、水解產(chǎn)物反應對氨基苯甲酸酯類藥物分子中有些具有酯鍵結構，在堿性條件下可水解，利用其水解產(chǎn)物的特性或與某些試劑的反應可進行鑒別。第二十一頁，共45頁。1、鹽酸普魯卡因ChP（2010）取本品約0.1g，加水2ml溶解后，因具對氨基苯甲酸酯的結構，加10%氫氧化鈉試液即析出白色沉淀，加熱變?yōu)橛蜖钗铮ㄆ蒸斂ㄒ颍?，繼續(xù)加熱可水解，產(chǎn)生揮發(fā)性二乙氨基乙醇，能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變?yōu)樗{色，同時可生成可溶于水的對氨基苯甲酸鈉，放冷，加鹽酸酸化，即生成對氨基苯甲酸的白色沉淀。第二十二頁，共45頁。2、苯佐卡因ChP（2010）取本品約0.1g，加氫氧化鈉試液5ml，煮沸，即有乙醇生成，加碘試液，加熱，即生成黃色沉淀，并發(fā)生碘仿的臭氣。第二十三頁，共45頁。四、制備衍生物測定熔點

鹽酸丁卡因的鑒別：取本品約0.1g，加5%醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸銨溶液1ml，即析出白色結晶；濾過，結晶用水洗滌，在80℃干燥后，熔點約為131℃.第二十四頁，共45頁。五、吸收光譜特征1、紫外吸收光譜例如：鹽酸布比卡因在0.01mol／L鹽酸中，照紫外-可見分光光度法測定，在263nm和271nm的波長處有最大吸收，其吸光度分別是0.56~0.58和0.43~0.48。2、紅外吸收光譜第二十五頁，共45頁。第三節(jié)特殊雜質(zhì)與檢查一、鹽酸普魯卡因中對氨基苯甲酸的檢查雜質(zhì)來源：水解產(chǎn)生、脫羧、氧化黃色第二十六頁，共45頁。檢查方法：HPLC雜質(zhì)對照品法固定相：十八烷基烷鍵合硅膠流動相：0.1%庚烷磺酸鈉的0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(磷酸調(diào)節(jié)pH至3.0)-甲醇（68:32）檢測波長：279nm系統(tǒng)適應性：理論板數(shù)按對氨基苯甲酸峰計算不低于2000，鹽酸普魯卡因峰和對氨基苯甲酸峰的分離度大于2.0按外標法以峰面積計算，不得過0.5%第二十七頁，共45頁。二、鹽酸普魯卡因注射液中有關物質(zhì)和光解產(chǎn)物的檢查水解產(chǎn)物：4-氨基-2-氯苯甲酸檢查方法HPLC法：USP34-NF29LC/MS法：雜質(zhì)成分的分離鑒別第二十八頁，共45頁。4-氨基-2-氯苯甲酸的MS圖譜第二十九頁，共45頁。光照雜質(zhì)：鹽酸羥基普魯卡因第三十頁，共45頁。三、鹽酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其他雜質(zhì)的檢查檢查方法：HPLC供試品溶液：2mg/ml對照品溶液：0.02mg/ml2,6-二甲基苯胺對照品溶液：0.8μg/ml供試品溶液的色譜圖中如有與2,6-二甲基苯胺保留時間一致的色譜峰，其峰面積不得大于對照品溶液主峰面積的0.5倍（0.5%），其他各雜質(zhì)峰面積的總和不得大于對照品主峰面積（1.0%）第三十一頁，共45頁。四、鹽酸羅哌卡因的光學純度檢查S型為有效構型R型:心臟毒性較大需嚴格控制含量

檢查方法：毛細管電泳法步驟：溶液配制沖洗毛細管系統(tǒng)適用性實驗測定樣品檢測波長：206nm第三十二頁，共45頁。第四節(jié)含量測定一、亞硝酸鈉滴定法1.基本原理伯芳氨基或水解后有芳伯氨基的藥物在酸性溶液中與亞硝酸鈉定量發(fā)生重氮化反應，生成重氮鹽，可用永停滴定法指示反應終點。反應式為：第三十三頁，共45頁。2.測定條件（1）加入適量溴化鉀加快反應速度（KBr是催化劑）在不同無機酸體系中，重氮化反應速度不同，HBr>HCl>HNO3、H2SO4鹽酸條件下，重氮化反應為機制為：第三十四頁，共45頁。因為K1>>K2加入KBr,可增大被測溶液中NO的濃度，因此加快了重氮化反應速度+第三十五頁，共45頁。因為K1>>K2加入KBr,可增大被測溶液中NO的濃度，因此加快了重氮化反應速度+第三十六頁，共45頁。（2）加入過量鹽酸加速反應作用：1.加快反應速度2.增加重氮鹽的穩(wěn)定性3.防止生成偶氮氨基化合物而影響測定結果

酸度增加，反應向左進行，若酸度過大，又可阻礙芳伯氨基的游離，反而影響重氮化反應速度芳胺：鹽酸1:2.5-6

第三十七頁，共45頁。（3）反應溫度

1.反應速度加快溫度過高2.重氮鹽加速分解3.滴定液易分解室溫條件下滴定（4）滴定速度避免亞硝酸揮發(fā)和分解，先快后慢滴定管尖端插入液面下約2/3處，一次將大部分亞硝酸鈉滴定液在攪拌條件下迅速加入，使其盡快反應。

第三十八頁，共45頁。3.指示終點的方法（1）永停滴定法（chp2010）

導致在兩電極間有電子流動，從而回路中有電流產(chǎn)生，使得電流計指針發(fā)生偏轉(zhuǎn)并且不再返回零點。電位法，外指示劑法，內(nèi)指示劑法第三十九頁，共45頁。4、滴定法（先快后慢）鹽酸普魯卡因的含量測定：取本品約0.6g，精密稱定，照永停法滴定，在15~25℃，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol／L）滴定。

第四十頁，共45頁。二非水溶液滴定基于鹽酸丁卡因、鹽酸利多卡因和鹽酸布比卡因側鏈叔胺氮具有弱堿性，因此采用非水溶液滴定法測含量，在滴定鹽酸丁卡因時，因其在冰醋酸中堿性弱，加醋酐可以增加其堿性，因醋酐合乙酰氧離子比醋酸和質(zhì)子的酸性強，可增加堿性。2(CH3CO)2O(CH3CO)3O+CH3COO+-第四十一頁，共45頁。三紫外分光光度法

鹽酸丁卡因pH=6條件下于310nm波長處有最大吸收，其紫外光譜吸收特征，可用于原料及其制劑的含量測定。第四十二頁，共45頁。四高效液相色譜法鹽酸利多卡因注射液測定法

精密量取本品適量（約相當于鹽酸利多卡因1.00mg),至50ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻