專業(yè)資料生化實(shí)驗(yàn)室操作技巧考試題庫及答案一、單選題（共10題，每題2分）1.在進(jìn)行分光光度法測定時，若樣品溶液顏色較深，應(yīng)選擇的比色皿厚度是？A.0.5cmB.1.0cmC.2.0cmD.3.0cm2.離心操作時，應(yīng)將密度較大的樣品置于？A.離心管的中心B.離心管的邊緣C.離心管的頂部D.離心管的底部3.配制0.1mol/L的鹽酸溶液時，應(yīng)選擇哪種濃度的濃鹽酸？A.0.5mol/LB.1.0mol/LC.12mol/LD.18mol/L4.使用移液管吸取液體時，應(yīng)如何判斷已吸取所需體積？A.視線與刻度平行B.視線與刻度垂直C.視線高于刻度D.視線低于刻度5.在進(jìn)行酶活性測定時，應(yīng)避免哪種情況？A.溫度恒定B.pH值穩(wěn)定C.底物濃度過高D.初始反應(yīng)速率較慢6.使用pH計(jì)測量溶液pH值時，應(yīng)先校準(zhǔn)電極，校準(zhǔn)點(diǎn)通常選擇？A.4,7,10B.3,7,9C.4,7,10D.3,7,107.在進(jìn)行血清生化檢測時，空腹采血通常要求禁食？A.4小時B.6小時C.8小時D.12小時8.使用微量移液器時，為減少誤差，應(yīng)？A.快速吸取B.緩慢吸取C.多次吸取D.先吸后放9.在進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳時，應(yīng)將DNA樣品置于？A.加樣孔的底部B.加樣孔的頂部C.瓊脂糖凝膠表面D.瓊脂糖凝膠邊緣10.使用高壓滅菌鍋時，應(yīng)確保鍋內(nèi)有？A.少量空氣B.充足水分C.密閉狀態(tài)D.開放狀態(tài)二、多選題（共5題，每題3分）1.進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn)時，以下哪些操作需要佩戴手套？A.配制試劑B.處理有毒物質(zhì)C.觀察顯微鏡樣本D.洗滌玻璃器皿2.在進(jìn)行分光光度法測定時，影響測定結(jié)果的因素包括？A.比色皿厚度B.溶液濃度C.光源強(qiáng)度D.溫度變化3.使用離心機(jī)時，應(yīng)注意哪些事項(xiàng)？A.離心管平衡B.轉(zhuǎn)速選擇C.離心時間D.溫度控制4.配制緩沖溶液時，應(yīng)考慮哪些因素？A.pH值B.離子強(qiáng)度C.溫度D.溶劑選擇5.在進(jìn)行酶活性測定時，應(yīng)控制哪些條件？A.溫度B.pH值C.底物濃度D.初始反應(yīng)速率三、判斷題（共10題，每題1分）1.使用移液管時，為減少誤差，應(yīng)快速吸取和排放液體。（×）2.進(jìn)行血清生化檢測時，空腹采血通常要求禁食8小時。（√）3.在進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳時，DNA樣品應(yīng)置于加樣孔的頂部。（√）4.使用高壓滅菌鍋時，應(yīng)確保鍋內(nèi)有充足水分。（√）5.使用pH計(jì)測量溶液pH值時，應(yīng)先校準(zhǔn)電極。（√）6.進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn)時，所有操作都需要佩戴手套。（×）7.使用離心機(jī)時，轉(zhuǎn)速越高越好。（×）8.配制緩沖溶液時，pH值是唯一需要考慮的因素。（×）9.在進(jìn)行酶活性測定時，底物濃度越高越好。（×）10.使用微量移液器時，應(yīng)多次吸取以減少誤差。（×）四、簡答題（共5題，每題5分）1.簡述分光光度法測定的原理及其應(yīng)用。2.簡述離心操作的基本步驟及注意事項(xiàng)。3.簡述配制緩沖溶液的基本原則及常用緩沖液種類。4.簡述酶活性測定的基本原理及影響因素。5.簡述高壓滅菌鍋的操作步驟及注意事項(xiàng)。五、操作題（共5題，每題10分）1.配制100mL0.1mol/L的鹽酸溶液，詳細(xì)說明操作步驟。2.使用移液管吸取1mL0.1mol/L的NaOH溶液，詳細(xì)說明操作步驟。3.進(jìn)行血清生化檢測的樣品處理，詳細(xì)說明操作步驟。4.進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，詳細(xì)說明操作步驟。5.使用高壓滅菌鍋滅菌實(shí)驗(yàn)器材，詳細(xì)說明操作步驟。答案及解析單選題答案及解析1.B解析：樣品溶液顏色較深時，應(yīng)選擇較薄的比色皿以減少光程，從而提高測定精度。2.B解析：密度較大的樣品會下沉，置于離心管的邊緣可以減少離心時的劇烈運(yùn)動，提高分離效果。3.C解析：配制0.1mol/L的鹽酸溶液時，應(yīng)選擇12mol/L的濃鹽酸進(jìn)行稀釋。4.A解析：使用移液管吸取液體時，應(yīng)視線與刻度平行，以減少視差。5.C解析：底物濃度過高會導(dǎo)致非酶促反應(yīng)，影響酶活性測定的準(zhǔn)確性。6.D解析：校準(zhǔn)pH計(jì)通常選擇3,7,10三個點(diǎn)，以覆蓋不同pH范圍。7.C解析：空腹采血通常要求禁食8小時，以保證血液生化指標(biāo)的準(zhǔn)確性。8.B解析：使用微量移液器時，應(yīng)緩慢吸取和排放液體，以減少誤差。9.B解析：在瓊脂糖凝膠電泳時，DNA樣品應(yīng)置于加樣孔的頂部，以保證電泳效果。10.B解析：使用高壓滅菌鍋時，應(yīng)確保鍋內(nèi)有充足水分，以保證滅菌效果。多選題答案及解析1.A,B解析：配制試劑和處理有毒物質(zhì)時需要佩戴手套，而觀察顯微鏡樣本和洗滌玻璃器皿通常不需要。2.A,B,C,D解析：比色皿厚度、溶液濃度、光源強(qiáng)度和溫度變化都會影響分光光度法測定結(jié)果。3.A,B,C,D解析：使用離心機(jī)時，應(yīng)注意離心管平衡、轉(zhuǎn)速選擇、離心時間和溫度控制。4.A,B,C,D解析：配制緩沖溶液時，應(yīng)考慮pH值、離子強(qiáng)度、溫度和溶劑選擇。5.A,B,C,D解析：進(jìn)行酶活性測定時，應(yīng)控制溫度、pH值、底物濃度和初始反應(yīng)速率。判斷題答案及解析1.×解析：使用移液管時，應(yīng)緩慢吸取和排放液體，以減少誤差。2.√解析：空腹采血通常要求禁食8小時，以保證血液生化指標(biāo)的準(zhǔn)確性。3.√解析：在瓊脂糖凝膠電泳時，DNA樣品應(yīng)置于加樣孔的頂部，以保證電泳效果。4.√解析：使用高壓滅菌鍋時，應(yīng)確保鍋內(nèi)有充足水分，以保證滅菌效果。5.√解析：使用pH計(jì)測量溶液pH值時，應(yīng)先校準(zhǔn)電極，以保證測量精度。6.×解析：進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn)時，并非所有操作都需要佩戴手套，應(yīng)根據(jù)具體情況決定。7.×解析：使用離心機(jī)時，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的轉(zhuǎn)速，并非轉(zhuǎn)速越高越好。8.×解析：配制緩沖溶液時，需要考慮pH值、離子強(qiáng)度、溫度和溶劑選擇等多個因素。9.×解析：在進(jìn)行酶活性測定時，底物濃度過高會導(dǎo)致非酶促反應(yīng)，影響測定準(zhǔn)確性。10.×解析：使用微量移液器時，應(yīng)緩慢吸取和排放液體，多次吸取會增加誤差。簡答題答案及解析1.分光光度法測定的原理是基于物質(zhì)對特定波長光的吸收特性。當(dāng)光通過溶液時，溶液中的物質(zhì)會吸收特定波長的光，吸收程度與物質(zhì)的濃度成正比。通過測定溶液對特定波長光的吸收程度，可以計(jì)算出溶液中物質(zhì)的濃度。分光光度法廣泛應(yīng)用于生化實(shí)驗(yàn)中，如蛋白質(zhì)、核酸和氨基酸等物質(zhì)的定量分析。2.離心操作的基本步驟包括：準(zhǔn)備離心管，將樣品加入離心管中，蓋上離心管蓋，平衡離心管，放置于離心機(jī)中，設(shè)置合適的轉(zhuǎn)速和時間，啟動離心機(jī)，待離心完成后取出離心管。注意事項(xiàng)包括：離心管平衡、轉(zhuǎn)速選擇、離心時間和溫度控制。離心操作常用于分離和純化生物大分子，如細(xì)胞、蛋白質(zhì)和核酸等。3.配制緩沖溶液的基本原則是選擇合適的弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸，使溶液在加入少量酸或堿時，pH值保持相對穩(wěn)定。常用緩沖液種類包括磷酸緩沖液、Tris緩沖液和醋酸緩沖液等。配制緩沖溶液時，需要考慮pH值、離子強(qiáng)度、溫度和溶劑選擇等因素。4.酶活性測定的基本原理是酶催化底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的速率。通過測定一定時間內(nèi)產(chǎn)物的生成量或底物的消耗量，可以計(jì)算出酶的活性。影響因素包括溫度、pH值、底物濃度和初始反應(yīng)速率等。酶活性測定常用于研究酶的催化特性和動力學(xué)參數(shù)。5.高壓滅菌鍋的操作步驟包括：檢查滅菌鍋內(nèi)是否有充足水分，將待滅菌物品放入滅菌鍋內(nèi)，關(guān)閉滅菌鍋蓋，設(shè)置合適的溫度和壓力，啟動滅菌鍋，待滅菌完成后取出物品。注意事項(xiàng)包括：滅菌鍋內(nèi)有充足水分、溫度和壓力設(shè)置正確、滅菌時間足夠等。高壓滅菌鍋常用于滅菌實(shí)驗(yàn)器材和試劑。操作題答案及解析1.配制100mL0.1mol/L的鹽酸溶液的操作步驟：a.準(zhǔn)確稱取3.65g鹽酸（36%-38%）于燒杯中。b.加入少量蒸餾水，攪拌溶解。c.將溶液轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中。d.用蒸餾水洗滌燒杯和玻璃棒，洗滌液一并轉(zhuǎn)移至容量瓶中。e.加入蒸餾水至容量瓶刻度線，蓋緊瓶塞，顛倒搖勻。2.使用移液管吸取1mL0.1mol/L的NaOH溶液的操作步驟：a.左手握住移液管活塞，右手持移液管，將移液管尖端插入NaOH溶液中。b.緩慢推動活塞，使液面下降至所需刻度線以上。c.移開移液管，用濾紙吸去尖端外部液滴。d.將移液管垂直放入接收容器中，緩慢推動活塞，使液面下降至刻度線。e.移開移液管，等待液滴完全流入接收容器。3.進(jìn)行血清生化檢測的樣品處理操作步驟：a.采集空腹靜脈血5mL。b.將血液置于抗凝管中，充分混勻。c.靜置血液，待血清析出。d.用離心機(jī)離心5分鐘，分離血清。e.將血清轉(zhuǎn)移至干凈試管中，待檢。4.進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳的操作步驟：a.配制瓊脂糖凝膠，加入核酸染料。b.將瓊脂糖凝膠倒入電泳槽中，插入梳子制作加樣孔。c.待凝膠凝固，加入電泳緩沖液。d.將DNA樣