2025年實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)操作技能考核答案及解析一、單項(xiàng)選題1.以下哪種儀器常用于精確測(cè)量液體體積（）A.量筒B.燒杯C.移液管D.錐形瓶2.革蘭氏染色中，革蘭氏陽(yáng)性菌呈現(xiàn)的顏色是（）A.紅色B.紫色C.藍(lán)色D.無(wú)色3.下列哪種物質(zhì)常用于DNA的提取（）A.乙醇B.異丙醇C.苯酚D.氯仿4.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，常用的培養(yǎng)基是（）A.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基B.高氏一號(hào)培養(yǎng)基C.伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基D.RPMI1640培養(yǎng)基5.蛋白質(zhì)電泳中，常用的染色劑是（）A.考馬斯亮藍(lán)B.結(jié)晶紫C.番紅D.甲基綠6.以下哪種方法可用于檢測(cè)細(xì)菌的耐藥性（）A.藥敏試驗(yàn)B.革蘭氏染色C.菌落計(jì)數(shù)D.生化反應(yīng)7.免疫熒光技術(shù)中，常用的熒光素是（）A.異硫氰酸熒光素B.羅丹明C.藻紅蛋白D.以上都是8.以下哪種酶常用于DNA的切割（）A.DNA聚合酶B.限制性內(nèi)切酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.連接酶9.細(xì)胞凋亡的檢測(cè)方法不包括（）A.流式細(xì)胞術(shù)B.DNAladder分析C.臺(tái)盼藍(lán)染色D.吖啶橙染色10.以下哪種物質(zhì)可用于細(xì)胞固定（）A.甲醛B.乙醇C.丙酮D.以上都是二、多項(xiàng)選題1.以下屬于實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)常用的儀器設(shè)備有（）A.顯微鏡B.離心機(jī)C.移液器D.培養(yǎng)箱E.分光光度計(jì)2.以下哪些是細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件（）A.合適的培養(yǎng)基B.適宜的溫度C.一定的濕度D.無(wú)菌環(huán)境E.充足的氧氣3.蛋白質(zhì)純化的方法包括（）A.鹽析B.凝膠過(guò)濾C.離子交換層析D.親和層析E.電泳4.以下哪些是分子生物學(xué)常用的技術(shù)（）A.PCRB.基因克隆C.核酸雜交D.測(cè)序E.蛋白質(zhì)印跡5.以下哪些是微生物學(xué)常用的染色方法（）A.革蘭氏染色B.抗酸染色C.芽孢染色D.莢膜染色E.鞭毛染色三、填空題1.實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有_____、_____、_____等。2.細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)包括_____、_____、_____、_____等。3.核酸包括_____和_____，它們的基本組成單位是_____。4.免疫細(xì)胞包括_____、_____、_____、_____等。5.細(xì)胞周期包括_____、_____、_____、_____四個(gè)時(shí)期。四、判斷題（√/×）1.所有的細(xì)菌都具有細(xì)胞壁。（）2.病毒是一種非細(xì)胞型微生物。（）3.蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)是指氨基酸的排列順序。（）4.DNA的復(fù)制是半保留復(fù)制。（）5.細(xì)胞凋亡是一種程序性細(xì)胞死亡。（）6.免疫反應(yīng)分為特異性免疫和非特異性免疫。（）7.酶的活性中心是指酶分子中與底物結(jié)合并催化反應(yīng)的特定區(qū)域。（）8.凝膠電泳可以根據(jù)分子的大小和電荷分離DNA或蛋白質(zhì)。（）9.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中需要添加血清。（）10.革蘭氏陽(yáng)性菌比革蘭氏陰性菌更易被抗生素殺死。（）五、簡(jiǎn)答題1.簡(jiǎn)述革蘭氏染色的原理和步驟。2.簡(jiǎn)述PCR技術(shù)的原理和應(yīng)用。六、案例分析患者，男性，35歲，因發(fā)熱、咳嗽、咳痰1周入院。患者1周前無(wú)明顯誘因出現(xiàn)發(fā)熱，體溫最高達(dá)39.5℃，伴有咳嗽、咳痰，痰為黃色膿性，量較多，不易咳出。無(wú)胸痛、呼吸困難等不適。既往體健。查體：T38.5℃，P90次/分，R20次/分，BP120/80mmHg。神志清楚，精神可，全身皮膚黏膜無(wú)黃染，淺表淋巴結(jié)未觸及腫大。咽部充血，雙側(cè)扁桃體無(wú)腫大。雙肺呼吸音粗，可聞及散在濕啰音。心率90次/分，律齊，各瓣膜聽(tīng)診區(qū)未聞及雜音。腹平軟，無(wú)壓痛及反跳痛，肝脾肋下未觸及。血常規(guī)：WBC15×10?/L，N0.85，L0.15。胸部X線片示：雙肺紋理增多、增粗，右下肺可見(jiàn)斑片狀陰影。問(wèn)題1：請(qǐng)寫出該患者的初步診斷及診斷依據(jù)。問(wèn)題2：為明確診斷，還需要進(jìn)一步做哪些檢查？試卷答案一、單項(xiàng)選題（答案）1.答案：C解析：移液管精度高，用于精確量取液體。2.答案：B解析：革蘭氏陽(yáng)性菌染成紫色，陰性菌染成紅色。3.答案：C解析：苯酚可用于DNA提取。4.答案：D解析：RPMI1640是常用細(xì)胞培養(yǎng)基。5.答案：A解析：考馬斯亮藍(lán)是蛋白質(zhì)電泳常用染色劑。6.答案：A解析：藥敏試驗(yàn)可測(cè)細(xì)菌耐藥性。7.答案：D解析：異硫氰酸熒光素等都是常用熒光素。8.答案：B解析：限制性內(nèi)切酶可切割DNA。9.答案：C解析：臺(tái)盼藍(lán)用于細(xì)胞活性檢測(cè)，非凋亡檢測(cè)。10.答案：D解析：甲醛、乙醇、丙酮都可用于細(xì)胞固定。二、多項(xiàng)選題（答案）1.答案：ABCDE解析：這些都是實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)常用儀器設(shè)備。2.答案：ABCDE解析：這些都是細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件。3.答案：ABCD解析：電泳主要用于分離鑒定，非純化。4.答案：ABCDE解析：這些都是分子生物學(xué)常用技術(shù)。5.答案：ABCDE解析：這些都是微生物學(xué)常用染色方法。三、填空題（答案）1.答案：高壓蒸汽滅菌法、干熱滅菌法、紫外線滅菌法解析：這是實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法。2.答案：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)解析：細(xì)菌基本結(jié)構(gòu)包括這些。3.答案：DNA、RNA、核苷酸解析：核酸包括DNA和RNA，基本單位是核苷酸。4.答案：淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞解析：這些是常見(jiàn)免疫細(xì)胞。5.答案：G1期、S期、G2期、M期解析：細(xì)胞周期包括這四個(gè)時(shí)期。四、判斷題（答案）1.答案：×解析：支原體無(wú)細(xì)胞壁。2.答案：√解析：病毒無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)。3.答案：√解析：蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)即氨基酸排列順序。4.答案：√解析：DNA復(fù)制是半保留復(fù)制。5.答案：√解析：細(xì)胞凋亡是程序性死亡。6.答案：√解析：免疫反應(yīng)分為特異性和非特異性。7.答案：√解析：酶活性中心與底物結(jié)合并催化反應(yīng)。8.答案：√解析：凝膠電泳可根據(jù)大小和電荷分離分子。9.答案：×解析：也有無(wú)血清培養(yǎng)基。10.答案：×解析：不能簡(jiǎn)單比較誰(shuí)更易被抗生素殺死。五、簡(jiǎn)答題（答案）1.答：原理：通過(guò)結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，革蘭氏陽(yáng)性菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時(shí)，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會(huì)出現(xiàn)縫隙，因此能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出，因此通過(guò)乙醇脫色后仍呈無(wú)色，再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。步驟：涂片、干燥、固定、結(jié)晶紫初染1min、水洗、碘液媒染1min、水洗、95%乙醇脫色0.5min、水洗、沙黃復(fù)染1min、水洗、干燥、鏡檢。2.答：原理：以擬擴(kuò)增的DNA分子為模板，以一對(duì)分別與模板互補(bǔ)的寡核苷酸片段為引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留復(fù)制的機(jī)制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合成，不斷重復(fù)這一過(guò)程，使目的DNA片段得到擴(kuò)增。應(yīng)用：基因克隆、DNA測(cè)序、基因突變檢測(cè)、病原體檢測(cè)等。六、案例