GB/T31270.1-XXXX

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件是GB/T31270《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則》的第1部分。GB/T31270已經(jīng)發(fā)布了以下

部分：

——第1部分：土壤代謝試驗；

——第2部分：水解試驗；

——第3部分：水中直接光解試驗；

——第4部分：土壤吸附/解吸試驗；

——第5部分：土壤淋溶試驗；

——第6部分：揮發(fā)性試驗；

——第7部分：生物富集試驗；

——第8部分：水-沉積物系統(tǒng)代謝試驗；

——第9部分：鳥類短期飼喂毒性試驗；

——第10部分：蜜蜂急性毒性試驗；

——第11部分：家蠶急性毒性試驗；

——第12部分：魚類急性毒性試驗；

——第13部分：溞類急性活動抑制試驗；

——第14部分：藻類生長抑制試驗；

——第15部分：蚯蚓急性毒性試驗；

——第16部分：土壤微生物毒性試驗；

——第17部分：天敵赤眼蜂急性毒性試驗；

——第18部分：天敵兩棲類急性毒性試驗；

——第19部分：非靶標植物影響試驗；

——第20部分：家畜短期飼喂毒性試驗；

——第21部分：大型甲殼類生物毒性試驗；

——第22部分：土壤表面光解試驗；

——第23部分：鳥類急性經(jīng)口毒性試驗。

本文件代替GB/T31270.1-2014《農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則第1部分：土壤降解試驗》，與GB/T

31270.1-2014相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動外，主要技術(shù)變化如下：

a)更改了標準名稱；

b)增加了規(guī)范性引用文件一章（見第2章）；

I

GB/T31270.1-XXXX

c)更改了術(shù)語和定義，刪除了土壤降解、降解半衰期、供試物、化學(xué)農(nóng)藥、原藥、制劑、有效成

分的定義，增加了主要代謝物、結(jié)合殘留、已提取殘留、未提取殘留、礦化的定義（見3.1、

3.2、3.3、3.4，2014版的2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7）；

d)更改了試驗條件（見第5章，2014版的4.2.3）；

e)增加了試驗所需試劑的要求（見第6.1）

f)更改了供試土壤性質(zhì)、采樣和儲存的要求（見6.2，2014版的4.1.1）；

g)更改了被試物的要求（見第8章，2014版的4.1.2）；

h)更改了被試物添加量、添加方法要求（見9.2，2014版的4.2.1、4.2.2、4.2.3）；

i)更改了采樣與檢測的要求（見9.3，2014版的4.2.2、4.2.3）；

j)增加了主要代謝物定性的要求（見10.2）；

k)修改了降解動力學(xué)評估的要求（見10.3，2014版的4.3）；

l)刪除了農(nóng)藥在土壤中的降解性等級劃分標準（2014版的附錄A）；

m)增加了培養(yǎng)裝置示意圖（見附錄A）；

n)增加了提取方法的合理性判定方法（見附錄B）；

o)增加了試驗報告中相關(guān)表格示例（見附錄C）。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任。

本文件由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出并歸口。

本文件起草單位：農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)藥檢定所。

本文件主要起草人：周艷明、單煒力、陳朗、馬曉東、吳文鑄、陳錦輝、劉永利、胡文巖、黃

磊。

本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：

——GB/T31270.1-2014；

——本次為第一次修訂。

II

GB/T31270.1-XXXX

化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則

第1部分：土壤代謝試驗

警示——使用本標準的人員應(yīng)有正規(guī)實驗室工作的實踐經(jīng)驗。本標準并未指出所有可能的安全問

題。使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國家有關(guān)法規(guī)規(guī)定的條件。

1范圍

本文件規(guī)定了化學(xué)農(nóng)藥土壤代謝試驗的試驗條件、試劑或材料、儀器設(shè)備、樣品、試驗步驟、試驗

數(shù)據(jù)處理、質(zhì)量控制以及試驗報告等的基本要求。

本文件適用于為化學(xué)農(nóng)藥登記而進行的土壤代謝試驗。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T32723土壤微生物生物量的測定底物誘導(dǎo)呼吸法

GB/T32726-2016土壤質(zhì)量-野外土壤描述

GB/T39228土壤微生物生物量的測定熏蒸提取法

LY/T1215森林土壤水分-物理性質(zhì)的測定

LY/T1225森林土壤顆粒組成（機械組成）的測定

LY/T1243森林土壤陽離子交換量的測定

NY/T1121.2土壤檢測第2部分：土壤pH的測定

NY/T1121.4土壤檢測第4部分：土壤容重的測定

NY/T1121.6土壤檢測第6部分：土壤有機質(zhì)的測定

NY/T3150農(nóng)藥登記環(huán)境降解動力學(xué)評估及計算指南

ISO11274土壤質(zhì)量持水能力的測定實驗室方法（Soilquality-Determinationofwater-retention

characteristic-Laboratorymethods）

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

1

GB/T31270.1-XXXX

主要代謝物majormetabolite

土壤代謝試驗中，在任何一次檢測時間點摩爾分數(shù)或放射性活度比例大于初始添加量10%的代謝

物。

結(jié)合殘留boundresidues

用不改變其化學(xué)結(jié)構(gòu)或土壤基質(zhì)結(jié)構(gòu)的方法不能提取出的殘留物。

已提取殘留extractedresidues

已從土壤中提取出的殘留物。

未提取殘留unextractedresidues

未從土壤中提取出的殘留物。

礦化mineralisation

有機物在好氧條件下完全降解為CO2和H2O或在厭氧條件下完全降解為CH4、CO2和H2O的過程。

14

本文件中，當(dāng)使用C標記的被試物時，礦化指被標記碳原子被氧化并釋放出CO2的過程。

4原理

將被試物添加至土壤中，在恒定的溫度和土壤含水量條件下避光培養(yǎng)，用適當(dāng)?shù)奈昭b置收集揮發(fā)

性產(chǎn)物。定期取樣檢測土壤和吸收裝置中的母體及代謝物，明確礦化率、結(jié)合殘留和質(zhì)量平衡回收率，

確定主要代謝物、計算母體和主要代謝物的50%降解時間（DT50）和90%降解時間（DT90）。

5試驗條件

溫度和光照

整個試驗周期內(nèi)，土壤應(yīng)在黑暗、恒溫條件下培養(yǎng)，試驗溫度宜為20℃±2℃。如需按NY/T3150

計算被試物在20℃和10℃下降解速率的倍數(shù)（Q10），可用同種土壤在10℃±2℃下開展平行試驗。

土壤含水量

5.2.1對于好氧培養(yǎng)條件下的代謝試驗，土壤含水量應(yīng)保持在土壤最大持水量的40%~60%或土壤

44

水勢為1×10Pa~3.3×10Pa（pF2~pF2.5）。土壤含水量應(yīng)以克水每千克干土（g水/kg干土）表示。應(yīng)定

期（如每2周）測定培養(yǎng)瓶的質(zhì)量并補水，補水時宜使用滅菌水。補水時應(yīng)注意避免被試物和代謝物的

揮發(fā)或光解。

5.2.2對于厭氧培養(yǎng)條件、水稻土培養(yǎng)條件和水稻土厭氧培養(yǎng)條件下的代謝試驗，應(yīng)保持土壤表面有

水層。

2

GB/T31270.1-XXXX

培養(yǎng)條件

5.3.1好氧培養(yǎng)條件

使用氣體流動式培養(yǎng)裝置時，應(yīng)連續(xù)或間隙通入空氣。使用二氧化碳測定培養(yǎng)裝置時，通過擴散維

持好氧條件。

5.3.2厭氧培養(yǎng)條件

添加被試物后，先在好氧培養(yǎng)條件下培養(yǎng)30d或1個好氧DT50（取較短值），然后加水至土壤表

面有1cm~3cm水層并通入惰性氣體（如N2或Ar）。

5.3.3滅菌好氧培養(yǎng)條件

將土壤和被試物滅菌，并按5.3.1或5.3.4的條件培養(yǎng)。

5.3.4水稻土培養(yǎng)條件

保持土壤表面有1cm~5cm的水層，宜為5cm，培養(yǎng)系統(tǒng)應(yīng)與空氣聯(lián)通。

5.3.5水稻土厭氧培養(yǎng)條件

保持土壤表面有1cm~2cm水層，宜為1cm，并通入惰性氣體（如N2或Ar）。

5.3.6培養(yǎng)條件的選擇

除進行好氧培養(yǎng)條件和厭氧培養(yǎng)條件的試驗外，根據(jù)農(nóng)藥使用方法、環(huán)境風(fēng)險評估需要和委托方要

求，可進行額外試驗：

a)進行滅菌好氧培養(yǎng)條件試驗以獲得被試物的非生物代謝信息；

b)進行水稻土培養(yǎng)條件試驗以獲得被試物在水稻田土壤中的代謝信息；

c)進行水稻土厭氧培養(yǎng)條件試驗以獲得被試物在水稻田厭氧層土壤中的代謝信息，其DT50可用于

優(yōu)化對水生生態(tài)系統(tǒng)的風(fēng)險評估。

6試劑或材料

試劑

除另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。

6.1.1氫氧化鈉（NaOH，CAS號：1310-73-2），2mol/L或其他合適的堿液，如氫氧化鉀（KOH，CAS

號：1310-58-3）、2-羥基乙胺[HO(CH2)2NH2，CAS號：141-43-5]。

6.1.2硫酸（H2SO4，CAS號：7664-93-9），0.05mol/L。

6.1.3乙二醇[(CH2OH)2，CAS號：107-21-1]。

6.1.4堿石灰[氫氧化鈣（Ca(OH)2）與氫氧化鈉（NaOH）或氫氧化鉀（KOH）的混合物，CAS號：

8006-28-8]。

6.1.5閃爍液。

供試土壤

3

GB/T31270.1-XXXX

6.2.1土壤的選擇

應(yīng)選擇能代表農(nóng)藥使用區(qū)域的土壤。使用多種土壤時，土壤的有機碳含量、pH、粘粒含量和微生物

量應(yīng)有一定差異。土壤的理化性質(zhì)宜滿足以下要求：

a)土壤質(zhì)地為砂質(zhì)壤土、粉壤土、壤土或壤質(zhì)砂土；

b)土壤pH為5.0~8.0；

c)土壤有機碳含量為0.5%~2.5%；

d)土壤微生物生物量>土壤總有機碳的1%。

6.2.2土壤的采集

6.2.2.1土壤采集地4年內(nèi)不應(yīng)使用過被試物或與被試物結(jié)構(gòu)類似的農(nóng)藥。

6.2.2.2應(yīng)按GB/T32726-2016附錄C采集A發(fā)生層（或采集表層20cm）土壤。除水稻土外，應(yīng)避免

采集以下土壤：

a)處于干旱、冰凍條件的土壤或被水覆蓋的土壤；

b)剛剛結(jié)束30d以上長期干旱、冰凍或淹水的土壤。

6.2.2.3應(yīng)記錄采集地的地理位置、植被、農(nóng)藥和肥料使用情況及其他污染情況。

6.2.3土壤的運輸與處理

6.2.3.1土壤樣品在運輸過程中應(yīng)盡量保持土壤含水量不發(fā)生變化，并置于黑暗通風(fēng)處?？墒褂镁垡蚁?/p>

袋儲存，但袋口不宜系緊。

6.2.3.2土壤采集后應(yīng)盡快處理。先去除較大的動植物殘體和石塊，然后過2mm篩。過篩前不應(yīng)過分干

燥或碾壓土壤。

6.2.4土壤的保存

宜使用新鮮土壤開展試驗，必須保存時，應(yīng)采用以下保存方式：

a)將土壤儲存于溫室中，并種植草或苜蓿；

b)將已處理過的土壤置于4℃±2℃條件下保存，最長可保存3個月。

6.2.5土壤性質(zhì)的測定

至少應(yīng)測定以下項目：

a)土壤質(zhì)地，按LY/T1225測定；

b)pH值，按NY/T1121.2測定；

c)陽離子交換量，按LY/T1243測定；

d)總有機碳，按NY/T1121.6測定；

e)土壤容重，按NY/T1121.4測定；

f)持水能力或最大持水量；持水能力按ISO11274測定，最大持水量按LY/T1215測定；

g)土壤微生物生物量：按GB/T39228測定。

4

GB/T31270.1-XXXX

7儀器設(shè)備

7.1氣體流動式培養(yǎng)裝置的示例見附錄A的圖A.1，二氧化碳測定培養(yǎng)裝置的示例見附錄A的圖A.2。

7.2氣相色譜儀、高效液相色譜儀、質(zhì)譜儀、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、核磁

共振儀等定性定量分析儀器。

7.3液體閃爍計數(shù)儀。

7.4氧化燃燒儀。

7.5離心機。

7.6振蕩器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀等提取、濃縮設(shè)備。

8樣品

被試物

8.1.1應(yīng)使用同位素標記的被試物，宜使用14C標記。標記的位置應(yīng)在化合物的最穩(wěn)定部分。對含有

一個環(huán)狀結(jié)構(gòu)的化合物，標記位點應(yīng)選擇在該環(huán)狀結(jié)構(gòu)；對含有多個環(huán)狀結(jié)構(gòu)的化合物，應(yīng)在化合物不

同環(huán)狀位置分別標記、分別開展試驗。

8.1.2對含有空間異構(gòu)體的農(nóng)藥，同位素標記物的異構(gòu)體比例應(yīng)與農(nóng)藥一致。農(nóng)藥有效成分為多個化

學(xué)結(jié)構(gòu)的，宜分別標記、分別開展試驗。

8.1.3僅測定降解速率時，可使用同位素標記的被試物，也可使用非標記的被試物。

8.1.4使用同位素標記的被試物時，其放射化學(xué)純度應(yīng)≥95%；使用非標記的被試物時，其純度應(yīng)≥95%。

8.1.5試驗開始前，應(yīng)了解被試物的以下信息：

a)水中溶解度；

b)有機溶劑中的溶解度；

c)飽和蒸氣壓；

d)正辛醇/水分配系數(shù)；

e)在黑暗條件下的化學(xué)穩(wěn)定性（水解）；

f)解離常數(shù)（對于易質(zhì)子化或去質(zhì)子化的被試物）；

g)土壤微生物毒性（如有）；

h)被試物及其代謝物的定性和定量分析方法（包括提取和凈化方法）。

對照物

農(nóng)藥母體和代謝物的標準物質(zhì)，不需同位素標記。

9試驗步驟

土壤預(yù)培養(yǎng)

試驗開始前，土壤應(yīng)先進行預(yù)培養(yǎng)，每個培養(yǎng)瓶中添加50g~200g土壤（以干重計）。預(yù)培養(yǎng)期間

5

GB/T31270.1-XXXX

溫度和土壤含水量應(yīng)與試驗要求一致。預(yù)培養(yǎng)期間應(yīng)去除發(fā)芽的種子。預(yù)培養(yǎng)時間為2d~28d，對于水

稻土培養(yǎng)條件和水稻土厭氧培養(yǎng)條件，預(yù)培養(yǎng)時間應(yīng)>2周。土壤保存與預(yù)培養(yǎng)的總時間不應(yīng)超過土壤

保存期限。

9.2被試物添加

9.2.1被試物添加方法

9.2.1.1將被試物溶于水中，必要時可使用少量丙酮或其他有機溶劑助溶。有機溶劑的加入量不應(yīng)顯著影

響土壤微生物的活性，不應(yīng)使用三氯甲烷、二氯甲烷及其他鹵代溶劑等對微生物具有抑制作用的溶劑。

也可將被試物與石英砂或少量風(fēng)干滅菌的土壤混勻后加至試驗土壤中，如使用有機溶劑溶解被試物，應(yīng)

待有機溶劑揮發(fā)后再將混有被試物的石英砂或土壤添加至試驗土壤中。

9.2.1.2添加被試物后，用不銹鋼鏟攪拌或搖動培養(yǎng)瓶使被試物與土壤混勻。

9.2.1.3水稻土培養(yǎng)條件的試驗，被試物應(yīng)添加至水層，并應(yīng)在添加被試物后將水相與土壤一起攪拌混

合。水稻土厭氧培養(yǎng)條件的試驗，被試物用注射器均勻添加至土層，不應(yīng)攪拌。

9.2.1.4從添加過被試物的土壤中取出1小部分（如1g）用于分析以確定被試物在土壤中分布的均一性。

9.2.1.5使用二氧化碳測定培養(yǎng)裝置、被試物用有機溶劑助溶后添加的，添加被試物后應(yīng)輕輕搖動培養(yǎng)

瓶，并在瓶口通過柔和的氣流以使溶劑揮發(fā)。

9.2.2被試物添加量

按公式（1）計算被試物在土壤中的添加濃度Csoil，單位為毫克每千克（mg/kg）。當(dāng)公式（1）計

算出的濃度不足以鑒別主要代謝物時，可適當(dāng)提高被試物添加量，但應(yīng)避免影響土壤微生物的活性。

?

?=·····················································(1)

?????×?×100

式中：

A——農(nóng)藥的推薦用量，單位為克每公頃（g/hm2）；

L——土層厚度，單位為厘米（cm）。當(dāng)農(nóng)藥施用方法為葉面噴霧或土壤噴霧時，L=2.5cm；當(dāng)農(nóng)

藥施用方法為種子處理、溝施、穴施時，L根據(jù)實際施藥深度確定；

d——土壤容重，單位為克每立方厘米（g/cm3），默認值為1g/cm3；

100——單位換算系數(shù)。

9.2.4對照組

9.2.4.1對于好氧培養(yǎng)條件的試驗，應(yīng)同時設(shè)置未加被試物的空白對照，與處理組在相同條件下培養(yǎng)，

用于測定土壤微生物生物量。土壤微生物生物量宜按GB/T39228測定，也可按GB/T32723測定。

9.2.4.2被試物用有機溶劑助溶后添加的，還應(yīng)設(shè)置添加相同量有機溶劑但不添加被試物的溶劑對照，

用于測定土壤微生物生物量。

9.3采樣與檢測

6

GB/T31270.1-XXXX

9.3.1在合適的時間間隔取2個培養(yǎng)瓶，用不同極性的有機溶劑多次提取檢測土壤中的被試物和代謝物。

除0d外，至少還應(yīng)測定5次。應(yīng)根據(jù)被試物的降解和代謝物的生成和降解情況確定采樣時間間隔，例

如0d、1d、3d、7d、14d、21d、30d、60d、90d等。

9.3.2應(yīng)按頻率測定每個培養(yǎng)裝置的吸收液或吸附劑中的揮發(fā)性產(chǎn)物：

a)試驗開始后的第1個月，每7d測定1次；

b)試驗開始后第2個月至試驗結(jié)束前，每14d測定1次；

c)試驗結(jié)束時測定。

9.3.3當(dāng)使用14C標記被試物時，每次采樣均應(yīng)氧化燃燒后測定未提取殘留以計算質(zhì)量平衡回收率。

9.3.4厭氧培養(yǎng)條件、水稻土培養(yǎng)條件和水稻土厭氧培養(yǎng)條件，可將土壤和水相合并測定，也可過濾或

離心后再分別提取測定。

9.3.5當(dāng)未提取殘留>初始添加放射性活度的10%時，應(yīng)按附錄B確定提取方法的合理性。

9.3.6對含有空間異構(gòu)體的被試物，應(yīng)確定試驗期間母體及代謝物的異構(gòu)體比例變化情況。

9.3.7試驗開始、每次取樣、試驗結(jié)束時測定pH、溶解氧含量。對于厭氧培養(yǎng)條件、水稻土培養(yǎng)條件和

水稻土厭氧培養(yǎng)條件的代謝試驗，還應(yīng)測定氧化還原電位。

9.4試驗周期

滿足以下條件之一時，可結(jié)束試驗：

a)當(dāng)試驗?zāi)康膬H為獲得降解速率時，被試物降解率≥90%且礦化率≥5%；

b)當(dāng)試驗?zāi)康臑楂@得代謝途徑時，母體降解率≥90%、礦化率≥5%，且已明確主要代謝物的生成和

降解；

c)試驗已經(jīng)持續(xù)120d。但為明確被試物的降解和主要代謝物的生成及降解，可延長試驗周期（如

延長至6個月或1年），同時應(yīng)在試驗報告中提供試驗期間和試驗結(jié)束時土壤微生物生物量的檢測數(shù)

據(jù)。

10試驗數(shù)據(jù)處理

每次采樣檢測的被試物、代謝物、未提取殘留的量可用添加放射性活度的比例（%AR）表示也可

用mg/kg干土表示，揮發(fā)性物質(zhì)以%AR表示。每次采樣均應(yīng)計算質(zhì)量平衡回收率，以%AR表示。

主要代謝物均應(yīng)定性。

應(yīng)按NY/T3150評估被試物的降解動力學(xué)并計算被試物及其主要代謝物的DT50、DT90。

11質(zhì)量控制

分析方法的回收率

7

GB/T31270.1-XXXX

被試物加入土壤后應(yīng)立即提取檢測至少2個土壤樣品，以驗證分析方法的重現(xiàn)性和被試物添加的

一致性。使用同位素標記的被試物時，質(zhì)量平衡回收率應(yīng)為90%~110%；使用非標記被試物時，分析方

法回收率應(yīng)為70%~110%。

分析方法的重現(xiàn)性

通過重復(fù)測定培養(yǎng)足夠時間的土壤提取物的方式驗證被試物和代謝物定量分析方法的重現(xiàn)性。

分析方法的靈敏度

被試物及其代謝物分析方法的檢出限（LOD）應(yīng)≤0.01mg/kg干土或1%AR。

12試驗報告

試驗報告至少應(yīng)包括以下內(nèi)容：

a)被試物：

1)通用名、化學(xué)名、化學(xué)文摘登錄號（CAS號）、結(jié)構(gòu)式（對于放射性標記的被試物，應(yīng)指出

標記位置）及相關(guān)的理化性質(zhì)；

2)純度；

3)放射化學(xué)純度和比活度。

b)對照物：

用于對代謝產(chǎn)物進行表征或鑒別的對照物的化學(xué)名和結(jié)構(gòu)式。

c)試驗用土壤：

1)確切的采集地點；

2)采集時間和采集方法；

3)土壤性質(zhì)，如pH、有機碳含量、質(zhì)地、陽離子交換量、容重、持水能力和微生物生物量等，

示例見附錄C的表C.1；

4)儲存時間和儲存條件。

d)試驗條件：

1)試驗時間；

2)被試物添加量；

3)所用溶劑及添加被試物的方法；

4)土壤的初始質(zhì)量及每次采樣檢測的質(zhì)量；

5)培養(yǎng)裝置；

6)空氣流速（對于氣體流動式培養(yǎng)裝置）；

7)試驗溫度；

8)土壤水分含量；

9)試驗開始、試驗期間、試驗結(jié)束時的土壤微生物生物量（對于好氧培養(yǎng)條件）；

8

GB/T31270.1-XXXX

10)試驗開始、試驗期間、試驗結(jié)束時的pH、溶解氧、氧化還原電位（對于厭氧培養(yǎng)條件、水

稻土培養(yǎng)條件和水稻土厭氧培養(yǎng)條件）；

11)提取方法；

12)土壤和吸收劑中被試物及其代謝物的定性定量方法；

13)處理組和對照組的數(shù)量；

e)試驗結(jié)果：

14)分析方法的重現(xiàn)性及靈敏度；

15)分析方法的回收率；

16)分別以%AR和mg/kg干土表示試驗結(jié)果的表格，示例見附錄C表C.2；

17)質(zhì)量平衡回收率，示例見附錄C表C.3；

18)土壤中未提取殘留的表征；

19)CO2及其他揮發(fā)性化合物的量；

20)土壤中被試物及其代謝物的濃度-時間圖；

21)被試物及其代謝物的降解動力學(xué)相關(guān)參數(shù)、DT50和DT90；

22)代謝途徑；

23)原始數(shù)據(jù)（典型譜圖、降解動力學(xué)評估過程、代謝物的定性方法）。

9

GB/T31270.1-XXXX

A

A

附錄A

（資料性）

培養(yǎng)裝置示意圖

A.1氣體流動式培養(yǎng)裝置（見圖A.1）

空氣

或N213

56789

24

1——針型閥；

2——水；

3——0.2μm濾膜（僅在滅菌培養(yǎng)條件下使用）；

4——土壤培養(yǎng)瓶（僅在厭氧或水稻土或水稻土厭氧條件下保持土壤表面有水層）；

5——乙二醇用于收集揮發(fā)性有機物；

6——硫酸用于收集堿性揮發(fā)物；

7——氫氧化鈉用于收集CO2及其他酸性揮發(fā)物；

8——氫氧化鈉用于收集CO2及其他酸性揮發(fā)物；

9——流量計。

圖A.1氣體流動培養(yǎng)裝置示意圖

A.2二氧化碳測定培養(yǎng)裝置（見圖A.2）

10

GB/T31270.1-XXXX

1

2

3

1——堿石灰用于吸收二氧化碳；

2——油處理過的玻璃棉或聚氨酯泡沫用于吸收揮發(fā)性有機物；

3——土壤及被試物。

圖A.2二氧化碳測定培養(yǎng)裝置

11

GB/T31270.1-XXXX

B

B

附錄B

（規(guī)范性）

提取方法的合理性判定

B.1試驗期間每種土壤均應(yīng)嘗試用多種極性和非極性溶劑提取，應(yīng)開展預(yù)試驗中確定合理的提取方法。

提取離子化合物時，提取劑體系中應(yīng)包括極性溶劑；提取中性有機化合物時，提取劑體系中應(yīng)包括非極

性溶劑；混用多種溶劑，包括弱酸或弱堿，可提高提取效率。

B.2提取過程不應(yīng)改變被試物及其代謝物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。

B.3當(dāng)未提取殘留>10%AR時，提取劑體系中應(yīng)包括對母體溶解性最好的溶劑，并從以下3個介電常數(shù)

范圍內(nèi)至少各選擇一種溶劑：

a)介電常數(shù)為18~80的極性溶劑，如水、甲酸、甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、乙腈、二甲基亞砜

等，也可將水與乙腈等溶劑以一定比例混合使用；

b)介電常數(shù)為6.0~9.1的極性溶劑，如乙酸、乙酸乙酯、四氫呋喃、二氯甲烷等；

c)介電常數(shù)為1.9~4.8的非極性溶劑，如正己烷、苯、甲苯、1,4-二氧六環(huán)，三氯甲烷、乙醚等。

B.4選擇提取劑時還應(yīng)注意介電常數(shù)以外的其他因素，例如在溶劑中較難溶解的化合物可通過形成乳狀

液的方式提取。當(dāng)被試物在酸性或堿性條件下性質(zhì)有差異時，可調(diào)節(jié)提取劑的pH使回收率最大。

B.5為提高對代謝物的提取效率，可在試驗后期使用額外的提取劑體系。如結(jié)果表明新提取劑體系的提

取效率顯著高于原提取劑體系，應(yīng)重新開展試驗或以新提取劑體系重新提取前期土壤樣品。

B.6以下情況判定提取方法不合理：

a)0d時回收率較低；

b)同1采樣時間檢測結(jié)果重復(fù)性較差；

c)試驗期間未提取殘留出現(xiàn)減少的趨勢；

d)未提取殘留>10%AR，且未按B.3選擇合理的提取劑體系。

12

GB/T31270.1-XXXX

C

C

附錄C

（資料性）

試驗報告中相關(guān)表格（示例）

C.1土壤理化性質(zhì)

試驗報告中可按表C.1提供土壤的理化性質(zhì)數(shù)據(jù)。

表C.1土壤理化性質(zhì)數(shù)據(jù)

土壤1土壤2土壤3土壤4

土壤質(zhì)地

砂粒（2.0mm~0.05mm）含量，%

粉粒（0.05mm~0.002mm）含量，%

粘粒（<0.002mm）含量，%

pH值及測定方法

有機碳含量及測定方法，%

陽離子交換量

pF2和pF2.5時的土壤含水量或土壤最大持

水量

容重（g/cm3）

試驗開始時土壤微生物生物量

試驗期間土壤微生物生物量

試驗結(jié)束時土壤微生物生物量

C.2試驗結(jié)果

試驗報告中可按表C.2提供以%AR表示的試驗結(jié)果。

表C.2[被試物]在[土壤類型]的代謝試驗結(jié)果（以%AR表示）

采樣間隔，d0

重復(fù)121212121212

母體

代謝物1

代謝物2

其他

總已提取殘留

未提取殘留

CO2

揮發(fā)性有機物

質(zhì)量平衡回收率

注：[]中的內(nèi)容應(yīng)替換為試驗中實際使用的被試物和土壤。

C.3質(zhì)量平衡回收率

試驗報告中可按表C.3提供質(zhì)量平衡回收率的數(shù)據(jù)。

表C.3[被試物]在[土壤類型]中的質(zhì)量平衡回收率

采樣間隔（d）0

重復(fù)121212121212

揮發(fā)CO2

物揮發(fā)性有機物

合計

土壤第一次提取

中已第二次提取

提取第三次提取

殘留第四次提取

總已提取殘留

13

GB/T31270.1-XXXX

未提取殘留

質(zhì)量平衡回收率

注：[]中的內(nèi)容應(yīng)替換為試驗中實際使用的被試物和土壤。

14

GB/T31270.1-XXXX

參考文獻

[1]OECD（2002）.GuidelinefortheTestingofChemicalsNo.307AerobicandAnaerobic

TransformationinSoil

[2]USEPA（2012）.GuidanceforReviewingEnvironmentalFateStudies

[3]USEPA（2014）.GuidanceforAddressingUnextractedPesticideResiduesinLaboratoryStudies

__________________________

_______

15

ICS65.100

CCSB13

GB

中華人民共和國國家標準

GB/T31270.1—XXXX

代替GB/T31270.1-2014

化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則

第1部分:土壤代謝試驗

Testguidelinesonenvironmentalsafetyassessmentforchemicalpesticides-Part1:

Soilmetabolismtest

（征求意見稿）

在提交反饋意見時，請將您知道的相關(guān)專利連同支持性文件一并附上。

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實施

GB/T31270.1-XXXX

化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則

第1部分：土壤代謝試驗

警示——使用本標準的人員應(yīng)有正規(guī)實驗室工作的實踐經(jīng)驗。本標準并未指出所有可能的安全問

題。使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國家有關(guān)法規(guī)規(guī)定的條件。

1范圍

本文件規(guī)定了化學(xué)農(nóng)藥土壤代謝試驗的試驗條件、試劑或材料、儀器設(shè)備、樣品、試驗步驟、試驗

數(shù)據(jù)處理、質(zhì)量控制以及試驗報告等的基本要求。

本文件適用于為化學(xué)農(nóng)藥登記而進行的土壤代謝試驗。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T32723土壤微生物生物量的測定底物誘導(dǎo)呼吸法

GB/T32726-2016土壤質(zhì)量-野外土壤描述

GB/T39228土壤微生物生物量的測定熏蒸提取法

LY/T1215森林土壤水分-物理性質(zhì)的測定

LY/T1225森林土壤顆粒組成（機械組成）的測定

LY/T1243森林土壤陽離子交換量的測定

NY/T1121.2土壤檢測第2部分：土壤pH的測定

NY/T1121.4土壤檢測第4部分：土壤容重的測定

NY/T1121.6土壤檢測第6部分：土壤有機質(zhì)的測定

NY/T3150農(nóng)藥登記環(huán)境降解動力學(xué)評估及計算指南

ISO11274土壤質(zhì)量持水能力的測定實驗室方法（Soilquality-Determinationofwater-retention

characteristic-Laboratorymethods）

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。