飲用水微生物指標(biāo)檢測試題及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.我國《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB5749-2022）中規(guī)定，出廠水中總大腸菌群的限值為（）。A.≤10CFU/100mLB.≤3MPN/100mLC.不得檢出（MPN/100mL或CFU/100mL）D.≤100CFU/mL2.以下哪種微生物指標(biāo)被稱為“糞便污染的特異性指示菌”？（）A.菌落總數(shù)B.總大腸菌群C.耐熱大腸菌群D.金黃色葡萄球菌3.多管發(fā)酵法檢測總大腸菌群時(shí)，初發(fā)酵使用的培養(yǎng)基是（）。A.月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯（LST）B.伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB）C.EC肉湯D.營養(yǎng)瓊脂4.濾膜法檢測大腸菌群時(shí)，濾膜的孔徑應(yīng)為（）。A.0.22μmB.0.45μmC.0.80μmD.1.2μm5.檢測大腸埃希氏菌時(shí)，可通過觀察培養(yǎng)基中是否產(chǎn)生（）來確證。A.靛基質(zhì)（吲哚）B.硫化氫C.芽孢D.色素6.菌落總數(shù)檢測時(shí)，培養(yǎng)溫度和時(shí)間分別為（）。A.25±1℃，48hB.36±1℃，24hC.37±1℃，72hD.44.5±0.5℃，24h7.以下哪種情況會(huì)導(dǎo)致多管發(fā)酵法初發(fā)酵階段出現(xiàn)假陽性結(jié)果？（）A.水樣中含有余氯未中和B.培養(yǎng)基滅菌不徹底C.水樣稀釋倍數(shù)過高D.復(fù)發(fā)酵時(shí)未使用選擇性培養(yǎng)基8.酶底物法檢測大腸菌群時(shí)，若水樣中存在β-半乳糖苷酶，培養(yǎng)基會(huì)呈現(xiàn)（）。A.紅色B.黃色C.藍(lán)色D.熒光9.檢測耐熱大腸菌群時(shí)，培養(yǎng)溫度應(yīng)控制在（）。A.36±1℃B.44.5±0.5℃C.28±1℃D.55±1℃10.以下關(guān)于濾膜法的描述，錯(cuò)誤的是（）。A.適用于渾濁度高的水樣B.可直接計(jì)數(shù)菌落C.需使用無菌濾器和真空泵D.濾膜需在培養(yǎng)基表面進(jìn)行培養(yǎng)二、填空題（每空1分，共20分）1.生活飲用水微生物指標(biāo)主要包括______、______、______和______四類。2.多管發(fā)酵法檢測總大腸菌群的三個(gè)關(guān)鍵步驟是______、______和______。3.濾膜法檢測大腸菌群時(shí)，需將濾膜接種于______培養(yǎng)基，培養(yǎng)______小時(shí)后計(jì)數(shù)典型菌落。4.我國標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定，生活飲用水中大腸埃希氏菌的限值為______。5.菌落總數(shù)反映的是水樣中______在營養(yǎng)瓊脂上生長繁殖的總數(shù)，培養(yǎng)溫度為______。6.檢測前若水樣中含有余氯，需加入______進(jìn)行中和，避免抑制微生物生長。7.耐熱大腸菌群之所以能作為糞便污染的特異性指標(biāo)，是因?yàn)槠渲饕獊碓从赺_____，且能在______℃環(huán)境下生長。8.酶底物法通過檢測______和______兩種酶的活性，分別判斷總大腸菌群和大腸埃希氏菌的存在。9.多管發(fā)酵法中，初發(fā)酵的目的是______，復(fù)發(fā)酵的目的是______。三、判斷題（每題2分，共20分）1.總大腸菌群包括所有好氧或兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌，因此能完全代表糞便污染程度。（）2.濾膜法檢測時(shí)，若水樣渾濁度高，需先離心或稀釋后再過濾，否則會(huì)堵塞濾膜。（）3.菌落總數(shù)越高，說明水樣中致病菌越多，直接威脅人體健康。（）4.檢測大腸埃希氏菌時(shí)，可通過在EC肉湯中44.5℃培養(yǎng)后觀察產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況進(jìn)行初步判斷。（）5.多管發(fā)酵法中，MPN值（最可能數(shù)）是通過統(tǒng)計(jì)陽性管數(shù)查MPN表獲得的，與稀釋倍數(shù)無關(guān)。（）6.酶底物法可同時(shí)檢測總大腸菌群和大腸埃希氏菌，且無需進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。（）7.檢測前未對(duì)玻璃器皿進(jìn)行高壓滅菌，會(huì)導(dǎo)致菌落總數(shù)檢測結(jié)果偏低。（）8.耐熱大腸菌群在44.5℃下無法生長，因此需在36℃培養(yǎng)。（）9.水樣采集后應(yīng)在4小時(shí)內(nèi)送檢，若無法及時(shí)檢測，需冷藏保存但不超過24小時(shí)。（）10.伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB）是一種選擇性培養(yǎng)基，可抑制革蘭氏陽性菌生長，促進(jìn)大腸菌群顯色。（）四、簡答題（每題8分，共32分）1.簡述多管發(fā)酵法與濾膜法檢測大腸菌群的主要區(qū)別及各自適用場景。2.為什么耐熱大腸菌群比總大腸菌群更適合作為糞便污染的指示菌？3.菌落總數(shù)檢測的意義是什么？其結(jié)果超標(biāo)可能反映哪些問題？4.簡述酶底物法檢測大腸菌群的原理及優(yōu)勢。五、綜合分析題（8分）某水廠出廠水檢測中，多管發(fā)酵法初發(fā)酵階段出現(xiàn)多管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，但復(fù)發(fā)酵階段僅有部分管陽性，最終MPN值高于標(biāo)準(zhǔn)限值。請(qǐng)分析可能的原因，并提出改進(jìn)檢測的建議。---答案一、單項(xiàng)選擇題1.C（GB5749-2022規(guī)定總大腸菌群不得檢出）2.C（耐熱大腸菌群主要來源于溫血?jiǎng)游锛S便，特異性更高）3.A（初發(fā)酵使用LST肉湯，抑制革蘭氏陽性菌）4.B（0.45μm濾膜可截留大腸菌群）5.A（大腸埃希氏菌可分解色氨酸產(chǎn)生吲哚）6.B（36±1℃培養(yǎng)24h是菌落總數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)條件）7.B（培養(yǎng)基滅菌不徹底會(huì)引入雜菌，導(dǎo)致假陽性）8.D（β-半乳糖苷酶分解底物產(chǎn)生熒光）9.B（耐熱大腸菌群需在44.5±0.5℃培養(yǎng)）10.A（濾膜法不適用于渾濁度高的水樣，易堵塞濾膜）二、填空題1.總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希氏菌、菌落總數(shù)2.初發(fā)酵、復(fù)發(fā)酵、確證試驗(yàn)3.mFC（或月桂基硫酸鹽瓊脂）、24-484.不得檢出（MPN/100mL或CFU/100mL）5.需氧和兼性厭氧細(xì)菌、36±1℃6.硫代硫酸鈉7.溫血?jiǎng)游锛S便、44.58.β-半乳糖苷酶、β-葡萄糖醛酸酶9.初步篩選可能存在的大腸菌群、確認(rèn)初發(fā)酵陽性管是否為大腸菌群三、判斷題1.×（總大腸菌群可能來源于環(huán)境，不能完全代表糞便污染）2.√（渾濁水樣需預(yù)處理，避免堵塞濾膜影響結(jié)果）3.×（菌落總數(shù)反映微生物總量，與致病菌無直接對(duì)應(yīng)關(guān)系）4.√（EC肉湯44.5℃培養(yǎng)產(chǎn)酸產(chǎn)氣可初步判斷耐熱大腸菌群）5.×（MPN值需結(jié)合稀釋倍數(shù)和陽性管數(shù)共同計(jì)算）6.√（酶底物法通過酶活性直接判斷，無需復(fù)發(fā)酵）7.×（未滅菌會(huì)引入雜菌，導(dǎo)致結(jié)果偏高）8.×（耐熱大腸菌群的定義是能在44.5℃生長的大腸菌群）9.√（水樣需盡快檢測，冷藏保存不超過24小時(shí)）10.√（EMB中的伊紅和美藍(lán)可抑制革蘭氏陽性菌，大腸菌群形成帶金屬光澤的菌落）四、簡答題1.主要區(qū)別及適用場景：多管發(fā)酵法通過系列稀釋和產(chǎn)酸產(chǎn)氣現(xiàn)象判斷MPN值，操作步驟多（初發(fā)酵、復(fù)發(fā)酵、確證），耗時(shí)3-4天，適用于渾濁、含雜菌較多的水樣（如水源水）；濾膜法通過濾膜截留微生物并直接培養(yǎng)計(jì)數(shù)，操作簡單、耗時(shí)短（24-48小時(shí)），適用于低濁度、清潔水樣（如出廠水、管網(wǎng)水），但對(duì)渾濁水樣需預(yù)處理。2.耐熱大腸菌群的優(yōu)勢：總大腸菌群包括環(huán)境中的腐生菌（如土壤、植物表面），而耐熱大腸菌群（如大腸埃希氏菌）主要來源于溫血?jiǎng)游铮òㄈ祟悾┑募S便，且能在44.5℃下生長（與人體腸道溫度接近）。因此，耐熱大腸菌群的檢出更直接提示水樣受到近期糞便污染，特異性和指示意義更強(qiáng)。3.菌落總數(shù)的意義及超標(biāo)問題：意義：反映水樣中需氧和兼性厭氧細(xì)菌的總量，是評(píng)價(jià)水清潔程度和消毒效果的重要指標(biāo)。超標(biāo)可能反映：①水源水受污染；②水處理工藝（如消毒）失效；③輸配水管網(wǎng)二次污染（如管道老化、生物膜滋生）；④采樣或檢測過程中操作不規(guī)范（如容器未滅菌）。4.酶底物法原理及優(yōu)勢：原理：利用大腸菌群特有的β-半乳糖苷酶（總大腸菌群）和大腸埃希氏菌特有的β-葡萄糖醛酸酶，分別與培養(yǎng)基中的特異性底物（如4-甲基傘形酮-β-D-半乳糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖醛酸苷）反應(yīng)，產(chǎn)生熒光（總大腸菌群）或顯色（大腸埃希氏菌）。優(yōu)勢：①快速（24小時(shí)出結(jié)果）；②定量準(zhǔn)確（可直接計(jì)數(shù)）；③操作簡便（無需多步發(fā)酵）；④適用于批量檢測（如應(yīng)急監(jiān)測）。五、綜合分析題可能原因：①初發(fā)酵階段培養(yǎng)基選擇性不足，導(dǎo)致非大腸菌群的雜菌（如產(chǎn)氣腸桿菌）產(chǎn)酸產(chǎn)氣，出現(xiàn)假陽性；②水樣中存在抑菌物質(zhì)（如余氯未完全中和），抑制部分大腸菌群在復(fù)發(fā)酵階段生長；③復(fù)發(fā)酵培養(yǎng)基（如EC肉湯）質(zhì)量不佳（如pH值偏差、營養(yǎng)成分不足），影響微生物增殖；④操作誤差（如移液不準(zhǔn)確、培養(yǎng)溫度波動(dòng)）導(dǎo)致復(fù)發(fā)酵結(jié)果不準(zhǔn)確。改進(jìn)建議：①加強(qiáng)初發(fā)酵培養(yǎng)基的選擇性（如調(diào)整LST肉湯中膽