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學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精實驗-—血紅蛋白的提取與分離課后練習(xí)(1)1.用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時,相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)()
A.路程較長,移動速度較慢
B.路程較長,移動速度較快
C.路程較短,移動速度較慢
D.路程較短,移動速度較快2.紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白,我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進(jìn)行實驗,來提取和分離血紅蛋白。下列對血紅蛋白提取和分離的敘述,錯誤的是()
A.血紅蛋白提取和分離一般按照樣品處理→粗提取→純化→純度鑒定處理
B.純化過程中要用生理鹽水充分溶脹凝膠來配制凝膠懸浮液
C.粗分離時透析的目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)
D.可經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定3.將經(jīng)處理破裂后的紅細(xì)胞混合液以2000r/min的速度離心10min后,離心管中的溶液分為四層,從上到下的順序依次是()
A.血紅蛋白、甲苯層、脂溶性物質(zhì)層、沉淀層
B.甲苯層、沉淀層、血紅蛋白、脂溶性物質(zhì)層
C.脂溶性物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、沉淀層
D.甲苯層、脂溶性物質(zhì)層、血紅蛋白、沉淀層4.蛋白質(zhì)的分離與提純技術(shù)是蛋白質(zhì)研究的重要技術(shù),下列有關(guān)敘述不正確的()
A.根據(jù)蛋白質(zhì)分子不能通過半透膜的特性,可將樣品中各種不同的蛋白質(zhì)分離
B.根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小,可通過電泳分離蛋白質(zhì)
C.根據(jù)蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小,可通過凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)
D.根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同,可通過離心沉降法分離蛋白質(zhì)5.人們用雞的紅細(xì)胞提取DNA,用人的紅細(xì)胞提取血紅蛋白的原因是()
A.雞的紅細(xì)胞無血紅蛋白,人的紅細(xì)胞有血紅蛋白
B.雞的紅細(xì)胞有線粒體,人的紅細(xì)胞無線粒體
C.雞的紅細(xì)胞有細(xì)胞核,人的紅細(xì)胞無細(xì)胞核
D.雞的紅細(xì)胞有氧呼吸,人的紅細(xì)胞無氧呼吸6.下列操作正確的是()
A.分離紅細(xì)胞時采用低速長時間離心
B.紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白只需要加入蒸餾水就可
C.分離血紅蛋白溶液是低速短時間離心
D.透析時要用20mmol/L的磷酸緩沖液,透析12h7.在蛋白質(zhì)的提取和分離中,下列對樣品處理過程的分析正確的是()
A.洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無機(jī)鹽
B.洗滌時離心速度過小,時間過短,白細(xì)胞等會沉淀,達(dá)不到分離的結(jié)果
C.洗滌過程選用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0。1%的NaCl溶液(生理鹽水)
D.血紅蛋白溶液離心后分為四層,第四層為暗紅色沉淀物8.下列關(guān)于DNA和血紅蛋白的提取與分離實驗的敘述中,不正確的有()
A.提取動物細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)可以采用蒸餾水漲破細(xì)胞的方法
B.采用不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA的方法可去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)
C.蛋白質(zhì)純化過程中采用透析法可去除溶液中的小分子雜質(zhì)
D.血紅蛋白只能采用凝膠色譜法純化,DNA則可采用電泳、鹽析等方法純化9.透析法將蛋白質(zhì)和其他小分子物質(zhì)分離的原理是利用蛋白質(zhì)分子的()
A.水溶性
B.不能透過半透膜的特性
C.膠體性
D.帶電性10.關(guān)于蛋白質(zhì)提取的敘述中,不正確的是()
A.分離與純化蛋白質(zhì)之前首先要用適當(dāng)?shù)姆椒ㄊ沟鞍踪|(zhì)釋放出來
B.抽提時要依據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性選擇不同的溶劑
C.蛋白質(zhì)的粗提取物離心可除去一些小分子雜質(zhì)
D.蛋白質(zhì)的粗制品可能是多種蛋白質(zhì)的混合物參考答案:1.答案:D解析:在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道,當(dāng)相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時,相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長,移動速度較慢;而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動,路程較短,移動速度較快。2.答案:B解析:凝膠應(yīng)用蒸餾水充分溶脹來配制凝膠懸浮液,所以B錯誤。3.答案:D解析:混合液經(jīng)離心后,按密度大小排列,在離心管中從上到下的順序依次是:第1層為無色透明的甲苯層;第2層為白色薄層固體,是脂溶性物質(zhì)沉淀層;第3層為紅色透明液體,這是血紅蛋白的水溶液;第4層為暗紅色沉淀物,主要是紅細(xì)胞破碎物沉淀。4.答案:A解析:根據(jù)蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小,可通過離心沉降法分離蛋白質(zhì),根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小,可通過電泳分離蛋白質(zhì).5.答案:C。解析:雞(鳥類)的紅細(xì)胞具有完整的細(xì)胞核,含有核DNA,便于進(jìn)行DNA的提取;人的成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核,結(jié)構(gòu)簡單,血紅蛋白含量豐富,便于提取血紅蛋白。6.答案:D解析:分離紅細(xì)胞時,采用低速短時間離心,如500r/min離心2min;分離血紅蛋白溶液時,離心時間較長,以2000r/min離心10min.釋放血紅蛋白時,加入蒸餾水和40%體積的甲苯;透析時用物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液,以除去相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)7.答案:D8.答案:D解析:將動物細(xì)胞放在蒸餾水中,由于滲透吸水,可使細(xì)胞膜破裂,從而釋放出細(xì)胞中的蛋白質(zhì)和DNA,因此A選項正確。DNA在2mol/L的NaCl溶液中的溶解度最大,而蛋白質(zhì)在該濃度的NaCl溶液中部分發(fā)生鹽析;DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最小,而蛋白質(zhì)在該濃度的NaCl溶液中溶解,所以B選項正確。蛋白質(zhì)純化過程中利用小分子雜質(zhì)能通過透析袋,而大分子蛋白質(zhì)不能通過透析袋的特點(diǎn),從而對蛋白質(zhì)進(jìn)行粗純化,所以C選項正確。血紅蛋白除可用凝膠色譜法進(jìn)行純化外,也可用電泳法進(jìn)行純化,所以D選項錯誤.9.答案:B解析:透析法將蛋白質(zhì)和其他小分子物質(zhì)分離的原理是利用蛋白質(zhì)分子的不能透過半透膜的特性10.答案:C解析:試題分析:分離純化蛋白質(zhì)之前要先讓細(xì)胞中的蛋白質(zhì)釋放出來,故A正確;提取蛋白質(zhì)時,
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