骨髓活檢細胞形態(tài)演講人：日期:目錄02正常細胞形態(tài)特征01概述與基礎03異常細胞形態(tài)識別04染色與顯微技術05量化評估標準06臨床應用與分析01概述與基礎定義與臨床意義骨髓活檢的定義骨髓活檢是一種通過特制穿刺針獲取骨髓組織樣本的病理學檢查技術，通常取材長度為0.5～1厘米的圓柱形組織塊，用于評估骨髓細胞形態(tài)、組織結構及纖維化程度。01診斷血液系統(tǒng)疾病骨髓活檢在診斷白血病、骨髓增生異常綜合征（MDS）、多發(fā)性骨髓瘤等血液系統(tǒng)惡性腫瘤中具有不可替代的作用，能夠提供骨髓細胞增生程度和異常克隆的直觀證據。評估骨髓纖維化通過活檢可明確骨髓纖維化的分級（如WHO標準），對原發(fā)性骨髓纖維化（PMF）和繼發(fā)性纖維化的鑒別診斷至關重要。監(jiān)測治療反應在化療或造血干細胞移植后，骨髓活檢能動態(tài)評估治療療效及骨髓恢復狀態(tài)，為臨床調整治療方案提供依據。020304活檢操作流程術前準備包括患者凝血功能評估、局部麻醉藥物選擇（如利多卡因）、體位固定（常取髂后上棘為穿刺點）及消毒鋪巾等無菌操作流程。穿刺技術使用Jamshidi針或同類活檢針以旋轉推進方式穿透骨皮質，獲取完整骨髓組織條，避免擠壓損傷導致人工假象。術后處理立即將標本置于固定液（如10%中性福爾馬林），同時按壓穿刺點5-10分鐘止血，并觀察患者有無出血或感染征象。并發(fā)癥管理需警惕局部血腫、感染或罕見的內臟損傷，對高風險患者（如血小板減少癥）可預先輸注血小板支持。樣本制備標準樣本需在24小時內完成10%中性福爾馬林固定，骨組織需經EDTA或甲酸脫鈣處理12-24小時，確保后續(xù)切片質量。固定與脫鈣采用石蠟包埋技術，切片厚度控制在3-4微米，需連續(xù)切片至少20張以滿足HE染色、免疫組化及特殊染色需求。包埋與切片常規(guī)HE染色用于評估細胞形態(tài)，輔以網狀纖維染色（如Gomori銀染）判斷纖維化程度，CD34/CD61等免疫組化標記巨核細胞分布。染色方案要求病理實驗室具備骨髓活檢專用切片設備，每批次染色需設陽性對照，并由血液病理專科醫(yī)師復核診斷結果。質量控制02正常細胞形態(tài)特征紅細胞譜系形態(tài)原始紅細胞胞體較大（12-20μm），胞核呈圓形或橢圓形，染色質細顆粒狀，核仁1-2個明顯；胞漿嗜堿性強，無顆粒，邊緣常呈不規(guī)則突起。早幼紅細胞胞體略縮?。?0-15μm），核染色質開始凝聚成塊狀，核仁消失；胞漿嗜堿性減弱，出現少量血紅蛋白而呈多染性（灰藍色）。中幼紅細胞胞體進一步縮?。?-12μm），核染色質凝集成車輪狀或龜背狀；胞漿因血紅蛋白增多呈嗜多色性（粉灰色），為紅細胞成熟過渡階段。晚幼紅細胞胞體接近成熟紅細胞大?。?-10μm），核固縮成致密黑紫色團塊（“炭核”）；胞漿呈均勻淡紅色，血紅蛋白充填完全。粒細胞譜系形態(tài)胞體增大（12-25μm），核偏位，染色質疏松，核仁可見；胞漿出現大量非特異性嗜天青顆粒（A顆粒），呈紫紅色粗大分布。早幼粒細胞

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胞體10-16μm，核凹陷呈馬蹄形或帶狀；胞漿充滿特異性顆粒，中性粒細胞顆粒細小淺粉色，嗜酸性顆粒粗大橘紅色。晚幼粒細胞胞體較大（10-20μm），核呈圓形或橢圓形，染色質纖細，核仁2-5個清晰；胞漿淡藍色，無顆粒，可見核周淡染區(qū)。原始粒細胞胞體10-18μm，核呈腎形或半圓形，染色質凝聚；胞漿出現特異性顆粒（中性、嗜酸或嗜堿性顆粒），根據顆粒類型可區(qū)分亞型。中幼粒細胞巨核細胞形態(tài)原始巨核細胞幼巨核細胞顆粒型巨核細胞產板型巨核細胞胞體巨大（20-30μm），核呈圓形或分葉狀，染色質粗網狀，核仁明顯；胞漿少且嗜堿性，邊緣不規(guī)則，無顆粒。胞體增大（30-50μm），核開始分葉或折疊呈多形性；胞漿增多，出現少量嗜天青顆粒，開始具備血小板生成潛力。胞體達50-100μm，核分葉多且相互重疊；胞漿豐富，充滿密集紫紅色顆粒，邊緣可見血小板脫落現象。胞體最大（100μm以上），核分葉固縮；胞漿內顆粒聚集成簇，邊緣大量血小板釋放，最終僅剩裸核或殘余胞漿。03異常細胞形態(tài)識別白血病相關變化原始細胞比例異常增高急性白血病患者骨髓中原始細胞比例常超過20%，形態(tài)表現為核質比增大、核染色質疏松、核仁明顯，部分病例可見Auer小體（如AML-M3）。病態(tài)造血特征慢性粒細胞白血?。–ML）可見粒細胞各階段增生伴核左移，嗜堿性粒細胞增多；ALL患者淋巴系原始細胞呈均一性增生，胞漿稀少且無顆粒。特殊遺傳學標志如AML-M2的t(8;21)易位、APL的PML-RARA融合基因，可通過細胞形態(tài)結合免疫分型輔助診斷。骨髓增生異常形態(tài)紅系病態(tài)造血表現為巨幼樣變、核碎裂或多核紅細胞，常見于MDS-RS（環(huán)形鐵粒幼細胞增多型），伴胞漿空泡或血紅蛋白充盈不足。巨核系異常可見小巨核細胞（微巨核）或核分葉異常（如單圓核巨核細胞），骨髓活檢中可發(fā)現ALIP（幼稚前體細胞異常定位）。粒系發(fā)育異常粒細胞顆粒減少或無顆粒（假性Pelger-Huet畸形），核分葉過少或過多，原始細胞比例雖未達白血病標準但持續(xù)存在。感染或炎癥特征反應性粒細胞增生細菌感染時可見中性粒細胞增多伴中毒顆粒、空泡變性及D?hle小體，骨髓增生程度活躍但無克隆性異常。噬血現象肉芽腫性病變病毒感染（如EBV）或自身免疫性疾病可誘發(fā)噬血細胞綜合征，骨髓中巨噬細胞吞噬紅細胞、粒細胞或血小板。結核或真菌感染時，骨髓活檢可見上皮樣細胞聚集形成肉芽腫，需結合抗酸染色或培養(yǎng)明確病原體。12304染色與顯微技術常規(guī)染色方法吉姆薩染色（Giemsastain）通過酸性染料與堿性染料復合作用，使骨髓細胞核呈現紫紅色，胞漿呈藍色，可清晰區(qū)分粒細胞、紅細胞及巨核細胞系列各階段細胞形態(tài)特征，是評估造血細胞增生程度和異常細胞浸潤的基礎方法。鐵染色（普魯士藍反應）通過亞鐵氰化鉀與三價鐵離子反應形成藍色沉淀，用于評估骨髓儲鐵狀態(tài)，診斷缺鐵性貧血或鐵粒幼細胞貧血，同時可觀察環(huán)形鐵粒幼細胞這一病態(tài)造血特征。瑞氏染色（Wrightstain）利用甲醇固定細胞后，伊紅與亞甲藍復合染色，突出顯示中性粒細胞顆粒、嗜酸性粒細胞特異性顆粒及血小板形態(tài)，尤其適用于鑒別急性白血病中的原始細胞類型。用于髓系白血病診斷，陽性顆粒出現于粒細胞和單核細胞系，可區(qū)分急性髓系白血?。ˋML）與急性淋巴細胞白血?。ˋLL），靈敏度達90%以上。特殊染色應用過氧化物酶染色（MPO）α-醋酸萘酯酶在單核細胞中呈強陽性且可被氟化鈉抑制，而粒細胞系僅弱陽性，是鑒別急性單核細胞白血?。∕5型）的關鍵技術。非特異性酯酶染色（NSE+NaF抑制試驗）顯示骨髓纖維化程度，網狀纖維增生程度分級（MF-0至MF-3）對原發(fā)性骨髓纖維化分期及繼發(fā)性纖維化鑒別具有重要病理學意義。網硬蛋白染色（Gomori銀染）低倍鏡系統(tǒng)掃描在1000倍油鏡下分類計數500個有核細胞，重點觀察各系細胞成熟障礙現象（如巨幼樣變、Pelger-Huet畸形）、病態(tài)造血特征（微巨核細胞、環(huán)形鐵粒幼細胞）及異常細胞浸潤（淋巴瘤細胞、癌細胞）。油鏡細胞形態(tài)學分析巨核細胞評估需在低倍鏡下統(tǒng)計全片巨核細胞數量（正常3-5個/低倍視野），同時觀察其分布模式（簇狀增生提示原發(fā)性血小板增多癥）及形態(tài)異常（微小巨核細胞見于MDS）。首先在100倍視野下評估骨髓組織整體結構，包括造血組織與脂肪細胞比例（正常成人約為1:1）、骨小梁形態(tài)及是否存在局灶性病變（如轉移癌巢或肉芽腫）。顯微觀察要點05量化評估標準細胞計數規(guī)范通過高倍鏡視野（HPF）計數至少500個有核細胞，區(qū)分造血細胞與非造血細胞比例，計算骨髓增生程度（如增生極度活躍、明顯活躍等）。有核細胞總數評估粒紅比例（M巨核細胞定量分析E）測定：精確統(tǒng)計粒細胞系與紅細胞系前體細胞數量，正常參考范圍為2:1~4:1，比例異?？赡芴崾矩氀?、白血病或骨髓纖維化等疾病。每低倍鏡視野（LPF）下正常骨髓應含3~5個巨核細胞，數量異常增多或減少需結合形態(tài)學判斷是否與血小板減少癥或骨髓增殖性腫瘤相關。形態(tài)分類系統(tǒng)FAB分型與WHO整合非造血細胞成分評估病態(tài)造血特征識別采用法國-美國-英國（FAB）協作組標準對原始細胞進行形態(tài)學分類（如M0-M7），并結合世界衛(wèi)生組織（WHO）的分子遺傳學標準提高分型準確性。包括粒細胞核分葉異常（如Pelger-Hu?t畸形）、紅細胞巨幼樣變、微小巨核細胞等，用于骨髓增生異常綜合征（MDS）的診斷分級。如纖維組織、轉移癌細胞或淋巴瘤細胞浸潤的形態(tài)學特征，需通過特殊染色（如網狀纖維染色）輔助鑒別。診斷報告框架結構化描述模板報告需涵蓋骨髓增生程度、細胞成分比例、病態(tài)造血現象、異常細胞浸潤及纖維化分級（如MF-0至MF-3），確保臨床醫(yī)生快速獲取關鍵信息。整合實驗室數據結合外周血涂片、流式細胞術及分子檢測結果，形成多參數診斷意見，例如“符合急性髓系白血病伴NPM1突變”的整合性結論。分級與預后提示根據IPSS-R（修訂版國際預后評分系統(tǒng)）等工具對MDS患者進行風險分層，或標注治療反應評估標準（如ELN遺傳學風險分組）。06臨床應用與分析疾病診斷價值血液系統(tǒng)疾病確診骨髓活檢可明確診斷白血病、骨髓增生異常綜合征（MDS）、多發(fā)性骨髓瘤等惡性血液病，通過觀察骨髓組織中的細胞形態(tài)、分布及纖維化程度，區(qū)分疾病亞型。01骨髓纖維化評估活檢能直接檢測網狀纖維和膠原纖維的增生程度，為原發(fā)性骨髓纖維化（PMF）或繼發(fā)性纖維化提供病理學依據，彌補骨髓穿刺涂片的局限性。轉移癌檢測對于實體瘤骨髓轉移（如乳腺癌、前列腺癌），活檢可發(fā)現骨髓腔內的腫瘤細胞巢或間質浸潤，敏感性高于細胞學檢查。感染性疾病鑒別通過組織病理學觀察肉芽腫、病原體包涵體等特征，輔助診斷結核、真菌感染或寄生蟲性骨髓炎。020304治療響應監(jiān)測動態(tài)活檢可評估治療后殘余白血病細胞比例、骨髓增生程度恢復情況，尤其適用于急性白血病微小殘留?。∕RD）的監(jiān)測?；熜Чu價移植后活檢能判斷供體細胞植入狀態(tài)、檢測骨髓基質重建情況，早期發(fā)現移植物抗宿主?。℅VHD）的纖維化改變。檢查骨髓組織中的免疫細胞浸潤模式，識別免疫檢查點抑制劑引發(fā)的骨髓造血抑制或炎癥反應。造血干細胞移植評估針對JAK2抑制劑治療骨髓增殖性腫瘤（MPN）的患者，活檢可量化纖維化逆轉程度，指導療程調整。靶向治療反應追蹤01020403免疫治療并發(fā)癥監(jiān)測預后評估指南結合活檢組織的熒光原位雜交（FISH）檢測，復雜核型異常（如-7/del7q）預示MDS向急性白血病轉化風險增高。細胞遺傳學異常整合