2025年免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)范性考核卷答案及解析一、單項(xiàng)選題1.免疫熒光技術(shù)中，用于封阻非特異性結(jié)合的試劑是（）A.山羊血清B.牛血清白蛋白C.明膠D.甘氨酸2.ELISA實(shí)驗(yàn)中，酶標(biāo)板的清洗步驟錯(cuò)誤的是（）A.使用洗滌液B.每次清洗后甩干C.洗滌次數(shù)為3-4次D.清洗時(shí)無(wú)需控制洗滌液體積3.WesternBlotting實(shí)驗(yàn)中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至PVDF膜后，首次封閉使用的試劑是（）A.5%脫脂奶粉B.3%BSAC.1%SDSD.0.1%Tween-204.免疫組化實(shí)驗(yàn)中，用于顯示抗原的酶是（）A.過(guò)氧化物酶B.葡萄糖氧化酶C.堿性磷酸酶D.脫氧核糖核酸酶5.流式細(xì)胞術(shù)中進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)記時(shí)，常用的熒光標(biāo)記物是（）A.FITCB.PEC.APCD.allofabove6.免疫印跡實(shí)驗(yàn)中，用于分離蛋白質(zhì)的凝膠是（）A.聚丙烯酰胺凝膠B.瓊脂糖凝膠C.凝脂酸凝膠D.蛋白質(zhì)凝膠7.逆轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn)中，用于合成cDNA的酶是（）A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.腺苷酸脫氨酶D.逆轉(zhuǎn)錄酶8.免疫磁珠分離技術(shù)中，用于標(biāo)記磁珠的抗體是（）A.一抗B.二抗C.同型抗體D.載體抗體9.細(xì)胞因子ELISA檢測(cè)中，常用的捕獲抗體是（）A.直接捕獲抗體B.間接捕獲抗體C.雙抗體夾心法抗體D.競(jìng)爭(zhēng)性抗體10.免疫沉淀實(shí)驗(yàn)中，用于純化抗原的試劑是（）A.抗體B.蛋白A/G磁珠C.乙醇D.鹽酸二、多項(xiàng)選題1.WesternBlotting實(shí)驗(yàn)中，影響結(jié)果的因素包括（）A.蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移效率B.抗體濃度C.化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度D.電泳條件2.免疫熒光技術(shù)中，常用的熒光標(biāo)記抗體包括（）A.FITC標(biāo)記抗體B.PE標(biāo)記抗體C.APC標(biāo)記抗體D.Cy5標(biāo)記抗體3.流式細(xì)胞術(shù)中進(jìn)行細(xì)胞分選時(shí)，需要考慮的因素包括（）A.細(xì)胞表面標(biāo)記B.細(xì)胞濃度C.分選通道D.分選緩沖液4.ELISA實(shí)驗(yàn)中，常用的酶標(biāo)記物包括（）A.HRPB.APC.堿性磷酸酶D.葡萄糖氧化酶5.免疫組化實(shí)驗(yàn)中，影響結(jié)果的因素包括（）A.抗體濃度B.溫度C.孵育時(shí)間D.清洗步驟6.免疫磁珠分離技術(shù)中，常用的應(yīng)用包括（）A.細(xì)胞分選B.抗原純化C.細(xì)胞培養(yǎng)D.免疫檢測(cè)7.逆轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn)中，影響結(jié)果的因素包括（）A.引物設(shè)計(jì)B.RNA質(zhì)量C.逆轉(zhuǎn)錄酶活性D.PCR循環(huán)數(shù)8.免疫沉淀實(shí)驗(yàn)中，常用的應(yīng)用包括（）A.蛋白質(zhì)純化B.蛋白質(zhì)鑒定C.蛋白質(zhì)相互作用研究D.蛋白質(zhì)表達(dá)調(diào)控9.細(xì)胞因子ELISA檢測(cè)中，常用的檢測(cè)方法包括（）A.直接法B.間接法C.雙抗體夾心法D.競(jìng)爭(zhēng)法10.免疫熒光技術(shù)中，影響結(jié)果的因素包括（）A.熒光標(biāo)記抗體濃度B.封閉條件C.熒光顯微鏡質(zhì)量D.孵育溫度三、填空題1.免疫熒光技術(shù)中，用于封阻非特異性結(jié)合的試劑是__________。2.ELISA實(shí)驗(yàn)中，酶標(biāo)板的清洗步驟需要使用__________。3.WesternBlotting實(shí)驗(yàn)中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至PVDF膜后，首次封閉使用的試劑是__________。4.免疫組化實(shí)驗(yàn)中，用于顯示抗原的酶是__________。5.流式細(xì)胞術(shù)中進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)記時(shí)，常用的熒光標(biāo)記物是__________。6.免疫印跡實(shí)驗(yàn)中，用于分離蛋白質(zhì)的凝膠是__________。7.逆轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn)中，用于合成cDNA的酶是__________。8.免疫磁珠分離技術(shù)中，用于標(biāo)記磁珠的抗體是__________。9.細(xì)胞因子ELISA檢測(cè)中，常用的捕獲抗體是__________。10.免疫沉淀實(shí)驗(yàn)中，用于純化抗原的試劑是__________。四、判斷題（√/×）1.免疫熒光技術(shù)中，熒光標(biāo)記抗體可以直接用于細(xì)胞染色。2.ELISA實(shí)驗(yàn)中，酶標(biāo)板的清洗次數(shù)越多越好。3.WesternBlotting實(shí)驗(yàn)中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移效率越高越好。4.免疫組化實(shí)驗(yàn)中，抗體孵育溫度越高越好。5.流式細(xì)胞術(shù)中進(jìn)行細(xì)胞分選時(shí)，分選通道的寬度會(huì)影響分選效果。6.免疫磁珠分離技術(shù)中，磁珠可以重復(fù)使用。7.逆轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn)中，RNA質(zhì)量越高，PCR擴(kuò)增效果越好。8.免疫沉淀實(shí)驗(yàn)中，抗體濃度越高越好。9.細(xì)胞因子ELISA檢測(cè)中，雙抗體夾心法是常用的檢測(cè)方法。10.免疫熒光技術(shù)中，熒光顯微鏡的放大倍數(shù)越高越好。五、簡(jiǎn)答題1.簡(jiǎn)述WesternBlotting實(shí)驗(yàn)的基本步驟。2.流式細(xì)胞術(shù)中進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)記時(shí)，需要注意哪些問(wèn)題？六、論述題1.比較ELISA和WesternBlotting在免疫檢測(cè)中的優(yōu)缺點(diǎn)。2.分析免疫磁珠分離技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用前景。試卷答案一、單項(xiàng)選題（答案）1.A解析：免疫熒光技術(shù)中，用于封阻非特異性結(jié)合的試劑是山羊血清。2.D解析：ELISA實(shí)驗(yàn)中，清洗時(shí)需要控制洗滌液體積，過(guò)多或過(guò)少都會(huì)影響結(jié)果。3.A解析：WesternBlotting實(shí)驗(yàn)中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至PVDF膜后，首次封閉使用的試劑是5%脫脂奶粉。4.A解析：免疫組化實(shí)驗(yàn)中，用于顯示抗原的酶是過(guò)氧化物酶。5.D解析：流式細(xì)胞術(shù)中進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)記時(shí)，常用的熒光標(biāo)記物包括FITC、PE、APC等。6.A解析：免疫印跡實(shí)驗(yàn)中，用于分離蛋白質(zhì)的凝膠是聚丙烯酰胺凝膠。7.D解析：逆轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn)中，用于合成cDNA的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶。8.A解析：免疫磁珠分離技術(shù)中，用于標(biāo)記磁珠的抗體是一抗。9.A解析：細(xì)胞因子ELISA檢測(cè)中，常用的捕獲抗體是直接捕獲抗體。10.B解析：免疫沉淀實(shí)驗(yàn)中，用于純化抗原的試劑是蛋白A/G磁珠。二、多項(xiàng)選題（答案）1.A,B,C,D解析：WesternBlotting實(shí)驗(yàn)中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移效率、抗體濃度、化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度和電泳條件都會(huì)影響結(jié)果。2.A,B,C,D解析：免疫熒光技術(shù)中，常用的熒光標(biāo)記抗體包括FITC、PE、APC和Cy5。3.A,B,C,D解析：流式細(xì)胞術(shù)中進(jìn)行細(xì)胞分選時(shí)，需要考慮細(xì)胞表面標(biāo)記、細(xì)胞濃度、分選通道和分選緩沖液等因素。4.A,B,C解析：ELISA實(shí)驗(yàn)中，常用的酶標(biāo)記物包括HRP、AP和堿性磷酸酶。5.A,B,C,D解析：免疫組化實(shí)驗(yàn)中，抗體濃度、溫度、孵育時(shí)間和清洗步驟都會(huì)影響結(jié)果。6.A,B,D解析：免疫磁珠分離技術(shù)中，常用的應(yīng)用包括細(xì)胞分選、抗原純化和免疫檢測(cè)。7.A,B,C,D解析：逆轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn)中，引物設(shè)計(jì)、RNA質(zhì)量、逆轉(zhuǎn)錄酶活性和PCR循環(huán)數(shù)都會(huì)影響結(jié)果。8.A,B,C解析：免疫沉淀實(shí)驗(yàn)中，常用的應(yīng)用包括蛋白質(zhì)純化、蛋白質(zhì)鑒定和蛋白質(zhì)相互作用研究。9.A,B,C,D解析：細(xì)胞因子ELISA檢測(cè)中，常用的檢測(cè)方法包括直接法、間接法、雙抗體夾心法和競(jìng)爭(zhēng)法。10.A,B,C,D解析：免疫熒光技術(shù)中，熒光標(biāo)記抗體濃度、封閉條件、熒光顯微鏡質(zhì)量和孵育溫度都會(huì)影響結(jié)果。三、填空題（答案）1.山羊血清2.洗滌液3.5%脫脂奶粉4.過(guò)氧化物酶5.FITC、PE、APC、Cy56.聚丙烯酰胺凝膠7.逆轉(zhuǎn)錄酶8.一抗9.直接捕獲抗體10.蛋白A/G磁珠四、判斷題（答案）1.√2.×3.√4.×5.√6.√7.√8.×9.√10.×五、簡(jiǎn)答題（答案）1.WesternBlotting實(shí)驗(yàn)的基本步驟包括：蛋白質(zhì)樣品的制備、SDS電泳分離蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至膜、封閉、抗體孵育、化學(xué)發(fā)光檢測(cè)。2.流式細(xì)胞術(shù)中進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)記時(shí)，需要注意抗體濃度、孵育溫度、孵育時(shí)間和清洗步驟，以確保標(biāo)記效果。六、論述題（答案）1.ELISA和WesternBlotting在免疫檢測(cè)中的優(yōu)缺點(diǎn)：ELISA操作簡(jiǎn)單、快速、靈敏度較高，適用于大量樣品的檢測(cè)；但特異性相對(duì)較低