2025年pcr上崗考試題及答案

一、單項選擇題（每題2分，共10題）1.PCR技術(shù)的中文全稱是（）A.聚合酶鏈式反應(yīng)B.核酸雜交反應(yīng)C.基因測序反應(yīng)D.蛋白質(zhì)印跡反應(yīng)2.Taq酶的特點是（）A.耐高溫B.耐低溫C.催化DNA合成D.催化RNA合成3.PCR反應(yīng)體系中不包含以下哪種成分（）A.引物B.dNTPC.模板DNAD.限制性內(nèi)切酶4.引物設(shè)計時，其長度一般為（）A.5-10bpB.15-30bpC.30-50bpD.50-100bp5.PCR反應(yīng)的變性溫度一般為（）A.55℃B.72℃C.94-98℃D.4℃6.延伸溫度通常設(shè)定為（）A.55℃B.72℃C.94℃D.60℃7.以下哪種疾病不能用PCR技術(shù)檢測（）A.新冠病毒感染B.艾滋病C.高血壓D.禽流感8.進行PCR實驗時，防止污染的關(guān)鍵是（）A.戴手套B.用新的移液器槍頭C.分區(qū)操作D.以上都是9.模板DNA的濃度過高可能導(dǎo)致（）A.非特異性擴增B.擴增效率提高C.引物二聚體減少D.無影響10.PCR技術(shù)的發(fā)明人是（）A.克里克B.沃森C.穆利斯D.桑格二、多項選擇題（每題2分，共10題）1.PCR技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域包括（）A.疾病診斷B.基因克隆C.法醫(yī)鑒定D.植物育種2.影響PCR反應(yīng)的因素有（）A.引物質(zhì)量B.Taq酶活性C.模板純度D.Mg2?濃度3.以下屬于PCR反應(yīng)基本步驟的有（）A.變性B.退火C.延伸D.顯色4.引物設(shè)計的原則包括（）A.避免引物二聚體B.上下游引物Tm值相近C.長度適宜D.堿基分布均勻5.PCR實驗所需的儀器有（）A.移液器B.離心機C.熒光定量PCR儀D.恒溫培養(yǎng)箱6.熒光定量PCR的優(yōu)點有（）A.定量準確B.靈敏度高C.可實時監(jiān)測D.操作簡單7.模板DNA可以來源于（）A.血液B.組織C.痰液D.糞便8.防止PCR污染的措施有（）A.實驗室分區(qū)B.定期清潔儀器C.規(guī)范操作D.使用一次性耗材9.以下哪些是PCR技術(shù)衍生的技術(shù)（）A.RT-PCRB.qPCRC.ddPCRD.Southernblot10.進行PCR實驗時，對實驗環(huán)境的要求有（）A.清潔B.干燥C.無核酸污染D.溫度恒定三、判斷題（每題2分，共10題）1.PCR反應(yīng)中引物可以無限延長。（）2.Taq酶具有3'-5'外切酶活性。（）3.熒光定量PCR能檢測基因表達量的變化。（）4.引物的Tm值越高越好。（）5.只要模板DNA存在，PCR就能擴增出目標(biāo)片段。（）6.實驗室環(huán)境對PCR實驗結(jié)果無影響。（）7.非特異性擴增的原因只有引物設(shè)計不合理。（）8.可以用PCR技術(shù)擴增RNA。（）9.PCR產(chǎn)物可以直接用于測序。（）10.進行PCR實驗不需要防護措施。（）四、簡答題（每題5分，共4題）1.簡述PCR技術(shù)的基本原理。答：PCR技術(shù)以模板DNA為基礎(chǔ)，在引物、dNTP、Taq酶等作用下，經(jīng)高溫變性使雙鏈DNA解開，低溫退火讓引物與模板結(jié)合，適溫延伸由Taq酶催化合成新的DNA鏈，多次循環(huán)實現(xiàn)特定DNA片段的大量擴增。2.簡要說明引物設(shè)計的要點。答：引物長度15-30bp為宜，堿基分布均勻；避免引物二聚體形成；上下游引物Tm值相近，一般在55-65℃；引物3'端避免錯配和連續(xù)相同堿基，且不能與模板有過長互補序列。3.列舉三種PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用。答：一是用于病原體檢測，如新冠病毒等；二是進行基因診斷，輔助遺傳性疾病診斷；三是腫瘤相關(guān)基因檢測，輔助腫瘤診斷、分型及預(yù)后評估。4.如何防止PCR實驗中的污染？答：實驗室分區(qū)，如試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)等；規(guī)范操作，戴手套、口罩，避免交叉污染；定期清潔儀器；使用一次性耗材；實驗前后對環(huán)境進行清潔消毒。五、討論題（每題5分，共4題）1.討論PCR技術(shù)在精準醫(yī)療中的作用和意義。答：PCR技術(shù)可精準檢測病原體，利于疾病早期診斷和精準用藥。還能對腫瘤相關(guān)基因精準分型，指導(dǎo)個性化治療方案制定，提高治療效果，實現(xiàn)精準醫(yī)療，改善患者預(yù)后。2.談?wù)劅晒舛縋CR與普通PCR的區(qū)別及優(yōu)勢。答：區(qū)別在于熒光定量PCR能實時監(jiān)測擴增產(chǎn)物量，普通PCR只能終點檢測。優(yōu)勢是可準確對核酸定量，靈敏度高，能更精確分析基因表達水平變化，適用于微量核酸檢測與定量分析。3.若PCR擴增結(jié)果不理想，可能有哪些原因及解決方法？答：原因可能是引物設(shè)計不佳、模板質(zhì)量差、Taq酶活性低、反應(yīng)條件不合適等。解決方法有重新設(shè)計引物，優(yōu)化模板提取方法，更換Taq酶，調(diào)整變性、退火、延伸溫度和時間等反應(yīng)條件。4.討論PCR技術(shù)在未來生物領(lǐng)域可能的發(fā)展方向。答：未來可能在檢測速度上進一步提升，實現(xiàn)快速診斷。靈敏度會更高，檢測極微量核酸。與其他技術(shù)如基因編輯結(jié)合更緊密，推動基因治療等發(fā)展，還可能開發(fā)出更便捷、低成本的便攜式設(shè)備。答案一、單項選擇題1.A2.A3.D4.B5.C6.B7.C8.D9.A10.C二、多項選擇題1.ABCD2.ABCD