微生物的培養(yǎng)技術(shù)和應(yīng)用

2026年高考一輪復(fù)習(xí)

01考情解碼·考點定標(biāo)智能導(dǎo)覽·極速定位02體系構(gòu)建·思維領(lǐng)航03考點突破·考向探究04真題感知·命題洞見考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點1

培養(yǎng)基知識點2無菌技術(shù)知識點3微生物的純培養(yǎng)考向一

培養(yǎng)基的成分、功能和應(yīng)用分析考向二

無菌技術(shù)考向三

微生物的純培養(yǎng)考點二微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)知識點1微生物的選擇培養(yǎng)——稀釋涂布平板法的操作步驟知識點2微生物的數(shù)量測定知識點3土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)知識點4分解纖維素的微生物的分離

考向一

微生物的選擇與培育考向二

微生物的分離與計數(shù)

05學(xué)以致用·能力提升長句作答類比較歸納類01考情解碼·考點定標(biāo)考情解碼·考點定標(biāo)考點要求考查形式近3年出現(xiàn)頻率微生物的培養(yǎng)技術(shù)簡答題選擇題2025.湖南.T52025.江蘇.T112025.黑吉遼·T42025.河北.T18

2024·湖南·T6

2024·黑吉遼·T19

2024·山東·T152024·浙江6月選考.T102023·全國乙·T37

2023·河北·T12

2023·重慶·T9

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)簡答題選擇題2025.黑吉遼·T42025.山東.T152024·貴州·T212024·江西·T172024·重慶·T132024·廣東·T21

2024·浙江6月選考·T11考情解碼·考點定標(biāo)考情分析從命題題型來看，參考2025年全國其他地區(qū)真題，微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用模塊可能會以選擇題和非選擇題的形式出現(xiàn)，且非選擇題的比重可能較大。選擇題可能會考查微生物的接種方法、培養(yǎng)基的制備等基礎(chǔ)知識，非選擇題則可能結(jié)合生產(chǎn)生活實際，考查微生物的選擇培養(yǎng)、計數(shù)等。從命題內(nèi)容上，預(yù)計會重點考查培養(yǎng)基的配方、無菌技術(shù)、微生物的純培養(yǎng)過程等，還可能涉及微生物的應(yīng)用，如利用微生物降解污染物等?？忌枰炀氄莆障嚓P(guān)實驗操作和原理，能夠運用所學(xué)知識解決實際問題。復(fù)習(xí)目標(biāo)1.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物是發(fā)酵工程的基礎(chǔ)。2.闡明在發(fā)酵工程中滅菌是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的基礎(chǔ)。3.闡明無菌技術(shù)是在操作過程中，保持無菌物品和無菌區(qū)域不被微生物污染的技術(shù)。4.舉例說明通過調(diào)整培養(yǎng)基的配方可有目的的培養(yǎng)某種微生物。5.概述平板劃線法和稀釋涂布平板法是實驗室中進行微生物分離和純化的常用方法。6.概述稀釋涂布平板法和顯微鏡計數(shù)法是測定微生物數(shù)量的常用方法。02體系構(gòu)建·思維領(lǐng)航體系構(gòu)建·思維領(lǐng)航無菌技術(shù)微生物的接種培養(yǎng)基培養(yǎng)基的種類

培養(yǎng)基營養(yǎng)成分消毒滅菌濕熱滅菌干熱滅菌灼燒滅菌平板劃線法微生物的培養(yǎng)紫外線消毒化學(xué)藥物消毒巴氏消毒煮沸消毒稀釋涂布平板法微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)稀釋涂布平板法的操作過程微生物的數(shù)量測定微生物的選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)基間接計數(shù)法—稀釋涂布平板法直接計數(shù)—計數(shù)板計數(shù)法氮源、碳源、水、無機鹽03考點突破·考向探究知識點1

培養(yǎng)基知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)

人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。1.定義：2.作用：用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。3、培養(yǎng)基的種類：培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基特點作用

培養(yǎng)基加凝固劑，如_____半固體培養(yǎng)基容器放倒不致流出，劇烈震動則破散觀察微生物的運動、分類鑒定

培養(yǎng)基不加凝固劑固體瓊脂液體微生物的分離與鑒定，活菌計數(shù)常用于工業(yè)生產(chǎn)、微生物的擴大培養(yǎng)知識點1

培養(yǎng)基知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)注：瓊脂僅作為凝固劑，不為微生物生長提供能量和碳源(按物理性質(zhì)分)知識點1

培養(yǎng)基知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基如含抗生素的培養(yǎng)基如不加氮源的培養(yǎng)基伊紅亞甲藍（大腸桿菌）酚紅（分解尿素菌）剛果紅（分解纖維素菌）加高濃度NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)基的種類(按用途分)選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基如含抗生素的培養(yǎng)基如不加氮源的培養(yǎng)基伊紅亞甲藍（大腸桿菌）酚紅（分解尿素菌）剛果紅（分解纖維素菌）加高濃度NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)基的種類(按用途分)知識點1

培養(yǎng)基知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)水、碳源、氮源、無機鹽①碳源無機碳源：有機碳源：②氮源NH4＋、NO3-、NH3等。牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等。CO2、CO32-、HCO3-。葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等。無機氮源：有機氮源：來源于動物，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)③無機鹽Zn、Cu、Mn、Co、Mo等大量元素：微量元素：Ca、K、Mg等牛肉膏、蛋白胨：（自養(yǎng)微生物）（異養(yǎng)微生物）（異養(yǎng)微生物）（自養(yǎng)微生物）④水成分：4、基本成分：知識點1

培養(yǎng)基知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)其他條件：pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣。如下表：微生物乳酸桿菌霉菌細菌厭氧微生物特殊需求添加______pH調(diào)至____pH調(diào)至____________________維生素酸性中性或弱堿性無氧組分含量

提供的主要營養(yǎng)牛肉膏

5g蛋白胨10gNaCl5g無機鹽H2O定容至1000mL水瓊脂20g凝固劑培養(yǎng)基的基本成分(主要營養(yǎng)物質(zhì))——4種碳源、氮源、磷酸鹽和維生素等碳源、氮源和維生素等知識點1

培養(yǎng)基知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)1.為什么培養(yǎng)基需要氮源？是微生物合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)所必需的。2.培養(yǎng)微生物時，培養(yǎng)基中是否必須有碳源和氮源？不一定。例如，培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物時，一般不需要添加碳源，微生物可以利用空氣中的二氧化碳；培養(yǎng)固氮微生物時，一般不需要添加氮源，微生物可以利用空氣中的氮氣。根據(jù)碳/氮源的種類判斷微生物同化作用是自養(yǎng)還是異養(yǎng)a.異養(yǎng)型微生物的碳源為b.自養(yǎng)型微生物的碳源為含碳有機物含碳無機物知識點1

培養(yǎng)基知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)幾種微生物的營養(yǎng)和能量來源微生物碳源氮源能源藍細菌CO2光能硝化細菌CO2NH3NH3的氧化根瘤菌糖類等有機物N2有機物大腸桿菌糖類、蛋白質(zhì)等有機物蛋白質(zhì)等有機物自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物知識點2

無菌技術(shù)知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)1.目的：2.關(guān)鍵：3.方法：獲得

的微生物培養(yǎng)物。純凈防止

污染。雜菌消毒與滅菌項目消毒滅菌作用強度較為

的理化因素

的理化因素作用程度殺死物體表面或內(nèi)部_____微生物殺死物體內(nèi)外的

微生物芽孢和孢子一般不能殺滅能殺滅適用對象實驗操作的空間、操作者衣著和雙手微生物培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等溫和強烈一部分所有知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)4.消毒與滅菌的比較：類型適用范圍操作方法消毒滅菌較為溫和理化方法，殺死部分微生物(不包括芽孢、孢子)強烈的理化方法，殺死所有微生物(包括芽孢、孢子)煮沸消毒法日常生活用品100℃煮沸5～6min巴氏消毒法不耐高溫的液體62～65℃煮30min或80-90℃煮30s-1min化學(xué)藥劑生物活體、水源等擦拭等,如用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源紫外線紫外線照射30min灼燒滅菌接種的金屬工具、接種時用的試管口或瓶口等直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒干熱滅菌耐高溫、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金屬用具等物品放入干熱滅菌箱,160～170℃加熱2～3h濕熱滅菌培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿等,生產(chǎn)和實驗室常用高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi),100kPa,溫度121℃,15～30min接種室、接種箱，超凈工作臺知識點2

無菌技術(shù)知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)【教材隱性知識】教材隱性知識：源于選擇性必修3P10“相關(guān)信息”：生物消毒法是指利用生物或其_________除去環(huán)境中的部分微生物的方法。代謝物注意：消毒和滅菌的原理都是使微生物的蛋白質(zhì)變性，借此殺死微生物。但兩者的實質(zhì)不同。消毒的結(jié)果實際上是部分滅菌。知識點2

無菌技術(shù)注：使用后的培養(yǎng)基必須滅菌后才能丟棄，以免污染環(huán)境。知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點2

無菌技術(shù)芽

孢

和

孢

子孢子：細菌、原生動物、真菌和植物等產(chǎn)生的一種有繁殖作用的無性生殖細胞。能直接發(fā)育成新個體。芽孢：有些細菌在一定的條件下，細胞里面形成一個橢圓形的休眠體(不是繁殖體)，叫作芽孢。知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點2

無菌技術(shù)1.無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？2.請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請選擇合適的方法。(1)培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿(2)玻棒、試管、燒瓶和吸管(3)實驗操作者的雙手無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。(1)、(2)需要滅菌；(3)需要消毒。思考知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點3

微生物的純培養(yǎng)最常用的接種方法是______________和_______________。滅菌

分離

平板劃線法

稀釋涂布平板法

①培養(yǎng)物：②純培養(yǎng)物：接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體③純培養(yǎng)：獲得純培養(yǎng)物的過程1、培養(yǎng)物、純培養(yǎng)物、純培養(yǎng)的概念(2)菌落的概念由一個微生物細胞繁殖而來的肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體。配制培養(yǎng)基、________、接種、________和培養(yǎng)等。由單一個體繁殖所獲得的微生物群體概念：步驟：④接種方法：微生物在固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長，可以形成肉眼可見的菌落念珠菌霉菌酵母菌放線菌菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)區(qū)分依據(jù)：形狀、大小、光澤度、顏色、透明度等。知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點3

微生物的純培養(yǎng)知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點3

微生物的純培養(yǎng)2.酵母菌純培養(yǎng)的操作步驟配制培養(yǎng)基滅菌接種分離培養(yǎng)等倒平板平板劃線法稀釋涂布平板法知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點3

微生物的純培養(yǎng)15～20g瓊脂濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)法干熱滅菌滅菌前調(diào)pH倒平板2.酵母菌純培養(yǎng)的操作步驟：知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點3

微生物的純培養(yǎng)防止水分蒸發(fā)過快，防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基。倒平板注意事項：溫度：50℃左右冷凝后平板倒置操作：在酒精燈火焰附近酒精燈火焰灼燒滅菌知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點3

微生物的純培養(yǎng)2.酵母菌純培養(yǎng)的操作步驟：知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點3

微生物的純培養(yǎng)平板劃線法和稀釋涂布平板法恒溫培養(yǎng)箱28作對照，檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點3

微生物的純培養(yǎng)用圖中字母和箭頭表示平板劃線操作的正確步驟：

。d→b→f→a→e→c→h→g平板劃線法通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。經(jīng)過數(shù)次劃線后培養(yǎng)可以分離得到單菌落。知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點3

微生物的純培養(yǎng)灼燒時期目的取菌種前每次劃線前接種結(jié)束后殺死接種環(huán)上原有微生物。殺死上次劃線殘留菌種,使下次劃線菌種直接來自上次劃線末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。12345①接種環(huán)只蘸一次菌液平板劃線法在劃線時注意哪些問題？③劃線首尾不能相接④每次劃線前灼燒接種環(huán)，待冷卻后再開始畫線。②第二次及其后的劃線操作應(yīng)從上一次劃線的末端開始劃線知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點3

微生物的純培養(yǎng)平板劃線法方法：原理：接種和分離對照組：實驗組：培養(yǎng)酵母菌未接種平板倒置培養(yǎng)接種平板倒置培養(yǎng)單個細胞聚集的菌種單個菌落連續(xù)劃線分散生長繁殖結(jié)果分析①在未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長。②在接種酵母菌的培養(yǎng)基上是否可觀察到菌落顏色、形狀、大小基本一致，并符合酵母菌菌落特點的單菌落。恒溫培養(yǎng)箱知識夯基

考向研析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點3

微生物的純培養(yǎng)(1)在未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長?如果有,說明了什么?實驗結(jié)果分析與評價在未接種的培養(yǎng)基表面應(yīng)該沒有菌落生長，如果有，說明培養(yǎng)基被雜菌污染或滅菌不徹底。可以在培養(yǎng)12h和24h后，觀察菌落的大小、形狀、顏色。培養(yǎng)24h后，菌落的大小、形狀是否發(fā)生變化，菌落顏色是否加深，光澤度是否增加，等等在接種酵母菌的培養(yǎng)基上可觀察到單菌落。如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合酵母菌菌落的特點（一般菌落表面光滑，多呈乳白色)，則說明純化酵母菌的操作成功；如果觀察到了不同形態(tài)的菌落，可能是接種的菌種不純或者無菌操作不規(guī)范等原因引起的。(2)在接種酵母菌的培養(yǎng)基上,你是否觀察到了單菌落?這些菌落的顏色、形狀和大小是否一致?如果你觀察到了不同形態(tài)的菌落,你能分析出可能是由哪些原因引起的嗎?(3)你是如何記錄實驗結(jié)果的?請與其他同學(xué)交流、互評。A需要調(diào)節(jié)PH值才能保證微生物正常生長需要添加碳源也可以用固體培養(yǎng)基

1.培養(yǎng)細菌、真菌的過程一般包括配制培養(yǎng)基、高溫滅菌冷卻、接種、恒溫培養(yǎng)等步驟。下列關(guān)于配制培養(yǎng)基的敘述，正確的是（）配制培養(yǎng)基是指將各種營養(yǎng)物質(zhì)按照一定的比例混合在一起，制成適合細菌、真菌生長的營養(yǎng)基質(zhì)，一般包括稱量、溶解、滅菌等步驟B.配制培養(yǎng)基只能用液體培養(yǎng)基，不能用固體培養(yǎng)基C.培養(yǎng)基中不需要添加碳源，因為細菌、真菌都能自己合成碳源D.配制培養(yǎng)基時不需要考慮pH值，細菌、真菌對pH值要求不高知識夯基考向研析考向1

培養(yǎng)基的成分、功能和應(yīng)用分析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)

2.（2020，浙江卷）下列關(guān)于微生物培養(yǎng)及利用的敘述，錯誤的是()A.利用尿素固體培養(yǎng)基可迅速殺死其他微生物，而保留利用尿素的微生物B.配制培養(yǎng)基時應(yīng)根據(jù)微生物的種類調(diào)整培養(yǎng)基的pHC.酵母菌不能直接利用糯米淀粉發(fā)酵得到糯米酒D.適宜濃度的酒精可使醋化醋桿菌活化A利用尿素固體培養(yǎng)基篩選尿素分解菌時，尿素固體培養(yǎng)基并不直接殺死其他微生物，而是其他微生物不能以尿素為氮源，無法在尿素固體培養(yǎng)基中存活知識夯基考向研析考向1

培養(yǎng)基的成分、功能和應(yīng)用分析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)

還要進行濕熱滅菌操作3.下表為某培養(yǎng)基的配方，下列敘述正確的是()成分牛肉膏葡萄糖伊紅—亞甲藍瓊脂蒸餾水含量適量注：伊紅—亞甲藍可用于檢測大腸桿菌，使菌落染成深紫色，帶金屬光澤。A瓊脂是凝固劑，不能為細菌提供碳源能生長多種微生物知識夯基考向研析考向1

培養(yǎng)基的成分、功能和應(yīng)用分析考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)4.2某同學(xué)將5個手指尖在貼有“洗手前”標(biāo)簽的固體培養(yǎng)基上輕輕按一下，然后用肥皂將該手洗干凈，再將5個手指尖在貼有“洗手后”標(biāo)簽的同種培養(yǎng)基上輕輕按一下。將這兩個培養(yǎng)皿放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，發(fā)現(xiàn)貼有“洗手后”標(biāo)簽的培養(yǎng)皿中菌落較少。下列相關(guān)敘述錯誤的是(

)A.這個實驗中需要進行滅菌處理的材料用具有培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基等B.“將手指尖在培養(yǎng)基上輕輕按一下”相當(dāng)于微生物培養(yǎng)中的接種C.從實驗結(jié)果來看，洗手后的操作不會污染培養(yǎng)基D.培養(yǎng)基中的氮元素是微生物合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)所必需的C不能說明不會污染培養(yǎng)基知識夯基考向研析考向2

無菌技術(shù)考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)5.（2022·湖北卷）滅菌、消毒、無菌操作是生物學(xué)實驗中常見的操作。下列敘述正確的是()A．動、植物細胞DNA的提取必須在無菌條件下進行B．微生物、動物細胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C．為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌D．可用濕熱滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌D動物細胞培養(yǎng)基中需添加一定量抗生素以防止污染，而微生物培養(yǎng)不能加動、植物細胞DNA的提取不需要在無菌條件下進行一般用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌，以防止雜菌污染知識夯基考向研析考向2

無菌技術(shù)考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)6.防止雜菌污染是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵。下列敘述錯誤的是()A．利用微生物能夠寄生于多種細菌體內(nèi)使細菌裂解，可實現(xiàn)生物消毒B．利用紫外線對超凈工作臺進行消毒前，噴灑消毒液可加強消毒效果C．利用干熱滅菌箱對培養(yǎng)基進行滅菌時，應(yīng)在160～170℃的熱空氣中維持1～2hD．利用酒精燈對金屬用具進行灼燒滅菌時，應(yīng)在酒精燈火焰充分燃燒層進行C應(yīng)用濕熱滅菌法（高壓蒸汽滅菌法）對培養(yǎng)基進行滅菌知識夯基考向研析考向2

無菌技術(shù)考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)D7.下列關(guān)于“酵母菌的純培養(yǎng)”實驗的敘述，錯誤的是(

)A.馬鈴薯搗爛后的濾液中含有酵母菌生長所需的多種營養(yǎng)成分B.接種環(huán)滅菌時，頂端的環(huán)和環(huán)后的部分柄均需通過火焰灼燒C.平板劃線時，接種環(huán)應(yīng)在固體培養(yǎng)基表面輕輕地連續(xù)劃線D.完成平板劃線后，應(yīng)將平板立刻倒置培養(yǎng)以免污染培養(yǎng)基完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，再將平板倒置培養(yǎng)知識夯基考向研析考向3

微生物的純培養(yǎng)考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)8.物質(zhì)A是一種難降解的有機物，細菌X體內(nèi)存在可降解A的酶?？蒲腥藛T欲從淤泥中分離得到細菌X，相關(guān)敘述正確的是（）需對配制好的培養(yǎng)基進行濕熱滅菌用于分離X的培養(yǎng)基蛋添加葡萄糖作為碳源細菌X的純化與計數(shù)可使用平板劃線法培養(yǎng)后某平板無菌落生長，則原因不可能是樣品稀釋倍數(shù)過大A只能以物質(zhì)A為唯一的碳源平板劃線法不能用于計數(shù)樣品稀釋倍數(shù)過大是可能的原因知識夯基考向研析考向3

微生物的純培養(yǎng)考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)9.分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面繁殖形成的肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體，稱為菌落。由單個微生物在固體培養(yǎng)基表面繁殖形成的單菌落就是純培養(yǎng)物，獲取純培養(yǎng)物的常用方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。下列有關(guān)這兩種方法的說法，錯誤的是(

)A.這兩種方法的關(guān)鍵都是要防止雜菌污染以保證獲得培養(yǎng)物的純度B.這兩種方法均需同時將接種的平板和未接種的平板倒置進行培養(yǎng)C.接種環(huán)和涂布器均需要在火焰上灼燒，且涂布器灼燒前需用酒精引燃D.用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目時，所獲得的數(shù)據(jù)往往比實際值大D當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，故用稀釋涂布平板法進行微生物的計數(shù)時，所獲得的數(shù)據(jù)往往比實際值小。知識夯基考向研析考向3

微生物的純培養(yǎng)考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)

B

知識夯基考向研析考向3

微生物的純培養(yǎng)考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)11.(2024·湖南卷)微生物平板劃線和培養(yǎng)的

具體操作如圖所示，下列操作正確的是(

)DA.①②⑤⑥ B.③④⑥⑦C.①②⑦⑧ D.①③④⑤②中拔出棉塞后應(yīng)握住棉塞上部；⑥中劃線時不能將培養(yǎng)皿的皿蓋完全拿開，應(yīng)只打開一條縫隙；⑦中劃線時第5次的劃線不能與第1次的劃線相連；⑧中平板應(yīng)倒置培養(yǎng)知識夯基考向研析考向3

微生物的純培養(yǎng)考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)12.(2020·江蘇卷)為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是(

)BA.倒平板后需間歇晃動，以保證表面平整B.圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C.該實驗結(jié)果因單菌落太多，不能達到菌種純化的目的D.菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色無需間歇晃動存在單菌落，能達到菌種純化的目的剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物，但不能和纖維素水解后的纖維二糖和葡萄糖等形成紅色復(fù)合物，因此菌落周圍的纖維素被降解后，不能被剛果紅染成紅色知識夯基考向研析考向3

微生物的純培養(yǎng)考點一

微生物的培養(yǎng)技術(shù)知識點1

微生物的選擇培養(yǎng)--稀釋涂布平板法的操作步驟知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

人為提供有利于目的菌生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度和pH等），同時抑制或阻止其他微生物的生長。

在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。實驗室中微生物篩選的原理：選擇培養(yǎng)基的概念：加入青霉素的培養(yǎng)基不加氮源的無氮培養(yǎng)基不加含碳有機物的無碳培養(yǎng)基分離自養(yǎng)型微生物分離固氮菌分離酵母菌、霉菌等真菌分離金黃色葡萄球菌分離能消除石油污染的微生物加高濃度食鹽石油是唯一碳源1.選擇培養(yǎng)基項目選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基原理用途舉例圖示加入不影響甚至促進目標(biāo)微生物生長，而抑制或阻止其他種類微生物生長的化學(xué)物質(zhì)加入某種指示劑或化學(xué)藥品(不影響微生物正常生長)，使微生物的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中的特定指示劑或化學(xué)藥品發(fā)生反應(yīng)培養(yǎng)、分離出目標(biāo)微生物鑒別目標(biāo)微生物培養(yǎng)酵母菌和霉菌時，可在培養(yǎng)基中加入青霉素，抑制細菌的生長；利用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基來培養(yǎng)可分解尿素的細菌可用伊紅亞甲藍培養(yǎng)基鑒定飲用水或乳制品中是否含有大腸桿菌(若有，則菌落呈深紫色，并有金屬光澤知識點1

微生物的選擇培養(yǎng)--稀釋涂布平板法的操作步驟知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

2.選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的比較怎樣選擇出抗氨芐青霉素能力的細菌?培養(yǎng)基中加氨芐青霉素具有氨芐青霉素抗性的菌落沒有氨芐青霉素抗性的細菌培養(yǎng)基應(yīng)有菌落沒有氨芐青霉素抗性的細菌被淘汰怎么證明一個選擇培養(yǎng)基具有選擇性呢？知識點1

微生物的選擇培養(yǎng)--稀釋涂布平板法的操作步驟知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

應(yīng)該設(shè)置基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基）或完全培養(yǎng)基作為對照，若基礎(chǔ)培養(yǎng)基或完全培養(yǎng)基中生長的菌落數(shù)菌多于該選擇培養(yǎng)基，則該選擇培養(yǎng)基具有選擇性。基礎(chǔ)培養(yǎng)基怎么證明一個選擇培養(yǎng)基具有選擇性呢？如果讓你配制一種培養(yǎng)基，將土壤稀釋液中能分解尿素的細菌分離出來，培養(yǎng)基的配方該如何設(shè)計？選擇培養(yǎng)基知識點1

微生物的選擇培養(yǎng)--稀釋涂布平板法的操作步驟知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

如果想知道1g土壤中有多少能分解尿素的細菌，還需對土壤菌液進行稀釋及科學(xué)的微生物數(shù)量測定方法---稀釋涂布平板法。90mL無菌水2鏟取土樣，將樣品裝入紙袋中。將10g土樣加入盛有90mL無菌水的錐形瓶，充分搖勻13取1mL上清液加入盛有9mL無菌水的試管中1×101×102知識點1

微生物的選擇培養(yǎng)--稀釋涂布平板法的操作步驟知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

1mL1mL1mL1mL1mL3取1mL上清液加入盛有9mL無菌水的試管中，依次等比稀釋。1×1021×1031×1041×1051×1061×107知識點1

微生物的選擇培養(yǎng)--稀釋涂布平板法的操作步驟知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

1×107知識點1

微生物的選擇培養(yǎng)--稀釋涂布平板法的操作步驟知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后,將平板倒置,放入30~37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1~2d。在涂有合適濃度菌液的平板上就可以觀察到分離的單菌落培養(yǎng)：7知識點1

微生物的選擇培養(yǎng)--稀釋涂布平板法的操作步驟知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

主要方法稀釋涂布平板法平板劃線法主要步驟接種工具菌體獲取能否用于計數(shù)共同點系列梯度稀釋操作和涂布平板操作接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線涂布器接種環(huán)從適宜稀釋度的平板上的菌落中挑取菌體在具有顯著的菌落特征的區(qū)域挑取菌體可以計數(shù)，但是操作復(fù)雜，需涂布多個平板不能計數(shù)使培養(yǎng)基上形成由單個細菌細胞繁殖而來的子細胞群體——菌落稀釋涂布平板法和平板劃線法的比較知識點1

微生物的選擇培養(yǎng)--稀釋涂布平板法的操作步驟知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

稀釋涂布平板計數(shù)法——間接計數(shù)法（1）原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠

時，培養(yǎng)基表面生長的一個

，來源于

中的一個

。通過計數(shù)平板上的

數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少

。高菌落樣品稀釋液活菌菌落活菌樣品的稀釋度將直接影響平板上的菌落數(shù)目知識點2

微生物的數(shù)量測定知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

（2）計數(shù)原則：選擇菌落數(shù)為30~300的平板計數(shù)。同一稀釋度下，應(yīng)至少對3個平板進行重復(fù)計數(shù)，然后求出平均值統(tǒng)計的菌落往往比活菌的實際數(shù)目低統(tǒng)計的結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)。恰當(dāng)?shù)南♂尪?、涂布是否均勻是成功統(tǒng)計菌落數(shù)目的關(guān)鍵。原因：當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。知識點2

微生物的數(shù)量測定知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

稀釋涂布平板計數(shù)法——間接計數(shù)法快速、直觀顯微鏡直接計數(shù)法——直接計數(shù)法兩者計數(shù)原理相同原理：利用細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下觀察、計數(shù)。優(yōu)點：缺點：

不能區(qū)分死菌與活菌對細菌等較小的細胞進行觀察和計數(shù)常用于相對較大的酵母菌細胞、霉菌孢子等的計數(shù)思考:為了避免上述缺點，我們該如何做？可以染色（如使用臺盼藍，死細胞會被染成藍色）后再進行顯微鏡計數(shù)。知識點2

微生物的數(shù)量測定知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

項目直接計數(shù)法間接計數(shù)法原理利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌主要用具顯微鏡、細菌計數(shù)板培養(yǎng)基計數(shù)數(shù)據(jù)菌體本身培養(yǎng)基上菌落數(shù)優(yōu)點計數(shù)方便、操作簡單計數(shù)的是活菌缺點死菌、活菌都計算在內(nèi)操作較復(fù)雜，有一定誤差計算公式每毫升原液含菌數(shù)=每小格平均菌體數(shù)×400×10000×稀釋倍數(shù)每毫升原液含菌數(shù)=培養(yǎng)基上平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)÷涂布液體積比較稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)法知識點2

微生物的數(shù)量測定尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中一種重要的氮肥。尿素施入土壤后，會被土壤中的某些細菌分解成NH3，再被轉(zhuǎn)化為NO3-、NH4+等被植物吸收。而這些細菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成脲酶，脲酶催化尿素分解產(chǎn)生NH3，NH3可以作為細菌生長的氮源。討論：1.如果讓你配制一種培養(yǎng)基，將土壤稀釋液中能分解尿素的細菌分離出來，培養(yǎng)

基的配方該如何設(shè)計？設(shè)計一種選擇培養(yǎng)基，以尿素作為唯一氮源。(細菌生長的氮源)尿素NH3脲酶尿素分解菌尿素2.該培養(yǎng)基與普通培養(yǎng)基有哪些共同點和不同點？

除以尿素作為唯一氮源外，該培養(yǎng)基的其他營養(yǎng)成分與普通培養(yǎng)基基本相同。知識點3

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

實驗原理①士壤中的細菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成脲酶；②配制以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，能夠在該培養(yǎng)基中生長的細菌就是能分解尿素的細菌葡萄糖10.0g尿素1.0gKH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g瓊脂15.0g蒸餾水1000ml①制備選擇培養(yǎng)基（尿素為唯一氮源）提供無機鹽；調(diào)節(jié)pH②制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)基的制備知識點3

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)細菌宜在酸堿度接近中性的潮濕土壤中生長，絕大部分分布在距地表3~8cm的土壤層。鏟去表層土3cm左右，取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中。①土壤取樣

取土樣時用的鐵鏟和取樣袋在使用前都需要滅菌。操作完成后，一定要洗手。步驟：公園里、街道旁、花盆中城市：農(nóng)田里、菜園里農(nóng)村：知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

知識點3

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)測細菌數(shù)：一般用104、105、106稀釋液。測放線菌：一般用103、104、105稀釋液。測真菌數(shù)：一般用102、103、104稀釋液。不同微生物在土壤中含量不同，分離不同的微生物采用不同的稀釋度，以保證獲得菌落數(shù)在30～300之間適于計數(shù)的平板。在初次實驗中，對于稀釋的范圍沒有把握，怎樣做才能保證從中選擇出菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)？選用稀釋范圍更大的稀釋液進行平板培養(yǎng)知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

知識點3

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)

將10g土樣加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。取1mL上清液加入盛有9mL無菌水的試管中，依次等比稀釋。1×101mL1mL1mL1mL1mL1mL1×1021×1031×1041×1051×1061×1079mL無菌水90mL無菌水10g②樣品的稀釋知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

知識點3

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)步驟：(1)每個濃度設(shè)置了

個平板，3個平板是選擇培養(yǎng)基（

實驗），1個平板為

培養(yǎng)基（條件對照：驗證選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用）；(2)另外，整個實驗還要設(shè)置

個空白

對照平板：未接種的__________________________培養(yǎng)基，以驗證培養(yǎng)基

中是否有雜菌污染。4重復(fù)牛肉膏蛋白胨2

選擇培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白胨③樣品的稀釋與涂布平板知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

知識點3

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)步驟：設(shè)置對照：判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用以驗證培養(yǎng)基中是否含有雜菌通用型培養(yǎng)基上所有菌種都生長選擇培養(yǎng)基上部分菌種才能生長不涂布稀釋液的選擇培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

知識點3

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)步驟：④培養(yǎng)與觀察恒溫培養(yǎng)箱待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后，將平板倒置，放入30-37℃的恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)1-2d。知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

知識點3

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)步驟：內(nèi)容現(xiàn)象結(jié)論有無雜菌污染的判斷對照的培養(yǎng)皿中無菌落生長未被雜菌污染培養(yǎng)基中菌落數(shù)偏高被雜菌污染菌落形態(tài)多樣，菌落數(shù)偏高培養(yǎng)基中混入其他雜菌選擇培養(yǎng)基的篩選作用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目大于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目選擇培養(yǎng)基具有篩選作用樣品的稀釋操作得到3個或3個以上菌落數(shù)目在30~300的平板操作成功重復(fù)組的結(jié)果若選取同一土樣，統(tǒng)計結(jié)果應(yīng)接近知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

知識點3

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)總結(jié)1.結(jié)合對照組，分析培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出一些菌落。如果沒有接種的培養(yǎng)基上沒有菌落生長，說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染。如果接種后的完全培養(yǎng)基上的菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)，說明選擇培養(yǎng)基篩選出了一些尿素分解菌。2.你是否獲得了某一稀釋度下菌落數(shù)為30-300的平板？在這一稀釋度下，是否至少有2個平板的菌落數(shù)接近？如果得到了兩個或多個菌落數(shù)為30-300的平板，說明稀釋度合適，操作比較成功，能夠進行菌落的計數(shù)。知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

知識點3

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)思考3.你統(tǒng)計的每克土樣中能分解尿素的細菌的菌落數(shù)是多少？與其他同學(xué)統(tǒng)計的結(jié)果接近嗎？如果差異很大，可能是什么原因引起的？如果是用同一土樣進行的操作，數(shù)據(jù)應(yīng)該比較接近。如果差異很大，就需要從操作是否規(guī)范、培養(yǎng)基配制是否合理等方面查找原因。4.得到的菌落一定是分解尿素的細菌嗎？不一定，還需要進一步的鑒定如自生固氮菌或利用（分解尿素的）細菌的代謝物進行生長繁殖的微生物知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

知識點3

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)思考知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

知識點3

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)進一步探究在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑。培養(yǎng)某種細菌后，如果PH升高，指示劑將變紅，說明該細菌能夠分解尿素。原理：脲酶催化尿素分解成氨→培養(yǎng)基堿性增強→酚紅變紅酚紅培養(yǎng)基——鑒定分解尿素的細菌脲酶CO（NH2）2+H2O CO2+2NH3知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

知識點4

分解纖維素的微生物的分離分離方法與原理方法：鑒定原理：利用富含纖維素的選擇培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)以纖維素為唯一碳源，加入剛果紅染料纖維素剛果紅紅色復(fù)合物培養(yǎng)基成分：纖維素酶紅色消失現(xiàn)透明圈纖維素分解菌紅色環(huán)帶直徑與菌落直徑比值越大，說明分解能力越強。知識夯基

考向研析考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

知識點4

分解纖維素的微生物的分離土壤取樣→富含纖維素的環(huán)境→制備系列稀釋液→篩選產(chǎn)生透明圈的菌落梯度稀釋富集培養(yǎng)涂布平板挑選→以纖維素為唯一碳源，增加目的菌濃度（選擇培養(yǎng)基）→將樣品涂布到含剛果紅的培養(yǎng)基上（鑒別培養(yǎng)基）1.(2023·廣東卷)研究者擬從堆肥中取樣并篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌。根據(jù)堆肥溫度變化曲線(如圖)和選擇培養(yǎng)基篩選原理來判斷，下列最可能篩選到目標(biāo)菌的條件組合是(

)DA.A點時取樣、尿素氮源培養(yǎng)基B.B點時取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基C.B點時取樣、蛋白胨氮源培養(yǎng)基D.C點時取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基研究目的是篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌，因此目標(biāo)菌具有既耐高溫，又能夠高效降解角蛋白的功能，所以在C點時取樣，并且用角蛋白氮源培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)知識夯基考向研析考向1

微生物的選擇與培育考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

A2.野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長，氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長，下圖為純化某氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖，①②③④代表培養(yǎng)基，A、B、C表示操作步驟，D、E為菌落。下列敘述錯誤的是(

)A.圖中①②④為基本培養(yǎng)基，③為完全培養(yǎng)基B.A操作的目的是提高突變頻率，增加突變株的數(shù)量C.B的正確操作是用涂布器把菌液均勻地涂布在②表面D.經(jīng)C過程原位影印及培養(yǎng)后，可從④中挑取D進行純化培養(yǎng)知識夯基考向研析考向1

微生物的選擇與培育考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

菌落①的透明圈范圍大，而且菌落小，說明菌落①降解纖維素能力強，因此菌落①是需要篩選和分離的目標(biāo)菌株3.研究人員篩選和分離纖維素分解菌，在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩選到有透明圈的菌落，所形成的菌落如圖所示。相關(guān)說法錯誤的是()DA.纖維素基本單位是葡萄糖B.透明圈的形成是由于纖維素被分解后剛果紅不能與纖維素結(jié)合形成紅色復(fù)合物C.透明圈可能是分解剛果紅的菌種形成的，為確定得到的是纖維素分解菌還需進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶實驗D.菌落②的中心區(qū)域最大，纖維素分解菌含量多，是需要篩選和分離的目標(biāo)菌株知識夯基考向研析考向1

微生物的選擇與培育考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

4.廚房中的廚余垃圾多為濕垃圾，濕垃圾處理的有效方法之一是用微生物對其進行降解。如圖表示篩選高效降解淀粉菌種的過程。下列有關(guān)敘述錯誤的是(

)DA.配制培養(yǎng)基后需進行滅菌處理，常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法B.菌落①與菌落②周圍產(chǎn)生了透明圈，說明菌落①與菌落②能產(chǎn)生淀粉酶C.培養(yǎng)基上的一個菌落可能來源于樣品稀釋液中的一個甚至幾個活菌D.初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，需要用顯微鏡觀察菌體的形態(tài)特征菌落肉眼可見知識夯基考向研析考向1

微生物的選擇與培育考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

5.(2024·重慶卷)養(yǎng)殖場糞便是農(nóng)家肥的重要來源，其中某些微生物可使氨氮化合物轉(zhuǎn)化為尿素進而產(chǎn)生NH3，影響畜禽健康。為篩選糞便中能利用氨氮化合物且減少NH3產(chǎn)生的微生物。興趣小組按圖進行實驗獲得目的菌株，正確的是(

)CA.①通常在等比稀釋后用平板劃線法獲取單個菌落B.②挑取在2種培養(yǎng)基上均能生長的用于后續(xù)的實驗C.③可通過添加脲酶并檢測活性，篩選得到甲、乙D.糞便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的減少平板劃線法無需稀釋②篩選不能在尿素唯一氮源培養(yǎng)基上生長，而能在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌株用于后續(xù)的實驗菌株乙比甲更有利于NH3的減少知識夯基考向研析考向2

微生物的分離與計數(shù)

考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

A6.北京冬奧會食堂讓各國運動健兒愛上中國味道，其餐余垃圾在垃圾集中點采用生化＋霧化＋膜過濾技術(shù)處理后，可以達到無二次污染的標(biāo)準(zhǔn)。為篩選對抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物，提高“生化”處理的效率，研究人員將餐余垃圾機械化處理后加入裝有無菌水的錐形瓶中制備餐余垃圾浸出液，然后進行如圖所示操作，下列說法錯誤的是(

)A.餐余垃圾浸出液在接種前通常需要進行高壓蒸汽滅菌處理B.可用稀釋涂布平板法將餐余垃圾浸出液接種在X培養(yǎng)基上C.X培養(yǎng)基含有淀粉和抗生素，Y培養(yǎng)基是不含瓊脂的液體培養(yǎng)基D.圖中高效降解淀粉的微生物是⑤，可根據(jù)菌落特征初步判斷微生物類型知識夯基考向研析考向2

微生物的分離與計數(shù)

考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

計數(shù)結(jié)果較真實值低7.尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，經(jīng)土壤中的細菌分解后才能被植物利用。某生物興趣小組開展了“土壤中分解尿素的細菌分離與計數(shù)”的實驗，具體操作流程如圖所示。某同學(xué)接種了3個培養(yǎng)基平板，一段時間后3個平板中分別長出了54個、46個、50個菌落。下列相關(guān)敘述錯誤的是()D知識夯基考向研析考向2

微生物的分離與計數(shù)

考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

8.(2024·浙江6月)脲酶催化尿素水解，產(chǎn)生的氨可作為細菌的氮源。脲酶被去除鎳后失去活性。下列敘述錯誤的是()A.鎳是組成脲酶的重要元素B.鎳能提高尿素水解反應(yīng)的活化能C.產(chǎn)脲酶細菌可在以NH4Cl為唯一氮源的培養(yǎng)基生長繁殖D.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可用于篩選產(chǎn)脲酶細菌B脲酶催化尿素水解的機理為降低化學(xué)反應(yīng)所需的活化能，鎳作為脲酶的重要組成元素，應(yīng)該與降低尿素水解反應(yīng)的活化能有關(guān)知識夯基考向研析考向2

微生物的分離與計數(shù)

考點二

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

04真題感知·命題洞見1.（2025，安徽，節(jié)選）稻瘟病是一種真菌病害，水稻葉片某些內(nèi)生放線菌對該致病菌有抑制作用?？蒲行〗M分離篩選出內(nèi)生放線菌，并開展了相關(guān)研究。回答下列問題。（1）采集有病斑的水稻葉片，經(jīng)表面消毒、研磨處理，制備研磨液。此后，采用______________（填方法）將研磨液接種于不同的選擇培養(yǎng)基，分別置于不同溫度下培養(yǎng)，目的是______________________________________。(1)稀釋涂布平板法

分離不同條件下生長的內(nèi)生放線菌

真題感知·命題洞見（1）從含有多種微生物的研磨液中分離出單一菌落，并接種到選擇培養(yǎng)基中常用的接種方法是稀釋涂布平板法。使用選擇培養(yǎng)基和不同的溫度條件，目的是為了抑制其他雜菌的生長，分離不同條件下生長的內(nèi)生放線菌。2.（2025·湖南）采集果園土壤進行微生物分離或計數(shù)。下列敘述正確的是（）A.稀釋涂布平板法和平板劃線法都能用于尿素分解菌的分離和計數(shù)B.完成平板劃線后，培養(yǎng)時需增加一個未接種的平板作為對照C.土壤中分離得到的醋酸菌能在無氧條件下將葡萄糖分離成乙酸D.用于篩選尿素分解菌的培養(yǎng)基含有蛋白胨、尿素和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)B真題感知·命題洞見稀釋涂布平板法可通過菌落數(shù)進行計數(shù)，而平板劃線法僅用于分離純化菌種，無法計數(shù)，A錯誤；醋酸菌為嚴格好氧菌，其代謝需氧氣，無氧條件下無法將葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙酸，C錯誤；篩選尿素分解菌的培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，若含蛋白胨（含其他氮源），則無法篩選目標(biāo)菌，D錯誤。3.（2025·山東）深海淤泥中含有某種能降解纖維素的細菌。探究不同壓強下，該細菌在以纖維素或淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基上的生長情況。其他條件相同且適宜，實驗處理及結(jié)果如表所示。下列說法正確的是（

）A.可用平板劃線法對該菌計數(shù)B.制備培養(yǎng)基的過程中，應(yīng)先倒平板再進行高壓蒸汽滅菌組別壓強纖維素淀粉菌落①常壓-+-②常壓+--③高壓-+-④高壓+-+D真題感知·命題洞見注：

“+”表示有；“一”表示無C.由②④組可知，在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上，該菌可在常壓下生長D.由③④組可知，高壓下該菌不能在以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基上生長A、平板劃線法是用來分離和純化微生物，獲得單個菌落的技術(shù)，其主要目的是分離而不是計數(shù)。用于活菌計數(shù)的方法通常是稀釋涂布平板法，A錯誤；B、制備固體培養(yǎng)基（瓊脂平板）的正確流程是：先將培養(yǎng)基成分溶解、調(diào)整pH值后，分裝到三角瓶中，然后進行高壓蒸汽滅菌。待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，再在無菌條件下（如超凈工作臺）倒入無菌的培養(yǎng)皿中（即“倒平板”），B錯誤；C、組②為常壓+纖維素，結(jié)果無菌落，而組④為高壓+纖維素，結(jié)果是有菌落。

這個對比恰好說明，在以纖維素為碳源的條件下，該菌不能在常壓下生長，而能在高壓下生長，C錯誤；D、③④組形成了一個對照實驗，變量是碳源。實驗結(jié)果表明，在高壓條件下，該細菌可以利用纖維素生長（組④），但不能利用淀粉生長（組③），D正確。4.(2025·江蘇)從種植草莓的土壤中分離致病菌，簡易流程如下：制備土壤懸液、分離、純化、鑒定。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．制備的培養(yǎng)基可用紫外線照射進行滅菌B．將土樣加入無菌水混勻，梯度稀釋后取懸液加入平板并涂布C．連續(xù)劃線時，接上次劃線的起始端開始劃線D．鑒定后的致病菌，可接種在斜面培養(yǎng)基上，并在室溫下長期保存B真題感知·命題洞見A、制備的培養(yǎng)基需用高壓蒸汽滅菌法滅菌，紫外線僅用于表面或空氣消毒，無法滅菌，A錯誤；

B、將土樣加入無菌水制成懸液，經(jīng)梯度稀釋后，取各稀釋度菌液涂布于培養(yǎng)基表面，分離并計數(shù)，B正確；

C、連續(xù)劃線時，每次應(yīng)從上次劃線的末端開始，以逐步稀釋菌體，若從起始端開始無法有效分離單菌落，C錯誤；D、斜面培養(yǎng)基保存菌種需置于4℃短期保存，長期保存應(yīng)使用甘油管藏法（-20℃），室溫下無法長期保存，D錯誤。5.(2025·河北)隱甲藻是一種好氧的異養(yǎng)真核微藻。多在海水中腐爛的植物葉片上生長繁殖，是工業(yè)生產(chǎn)DHA（一種功能性脂肪酸）的藻類之一、從海洋中篩選獲得的高產(chǎn)油脂隱甲藻，可用于DHA的發(fā)酵生產(chǎn)。下列敘述正確的是（

）A．隱甲藻可從腐爛的葉片獲得生長必需的碳源B．采集海水中腐爛的葉片，濕熱滅菌后接種到固體培養(yǎng)基，以獲得隱甲藻C．選擇培養(yǎng)基中可加入抑制細菌生長的抗生素，以減少雜菌生長D．適當(dāng)提高發(fā)酵時的通氣量和攪拌速率均可增加溶氧量，以提高DHA產(chǎn)量ACD真題感知·命題洞見A、根據(jù)題目信息“隱甲藻是一種好氧的異養(yǎng)真核微藻，多在海水中腐爛的植物葉片上生長繁殖”可知，隱甲藻可從腐爛的葉片獲得生長必需的碳源，A正確；B、采集海水中腐爛的葉片進行濕熱滅菌后，會殺死所有的微生物，此時接種到固體培養(yǎng)基上無法獲得隱甲藻，B錯誤；C、根據(jù)題目信息可知，隱甲藻為真核生物，抗生素可通過抑制細菌細胞壁合成或影響代謝過程來抑制細菌生長，不會影響真核生物的生命活動，因此在篩選或培養(yǎng)隱甲藻時，加入抗生素可有效抑制細菌雜菌，提高隱甲藻的純度和生長效率，C正確；D、根據(jù)題目信息可知，隱甲藻為好氧生物，因此利用隱甲藻進行DHA發(fā)酵生產(chǎn)時，適當(dāng)提高發(fā)酵時的通氣量和攪拌速率均可增加溶氧量，以提高DHA產(chǎn)量，D正確。05學(xué)以致用·能力提升(1)(選擇性必修3P10)培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括

等。(2)(選擇性必修3P10)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是

，無菌技術(shù)除了用來

外，還能

。(3)(選擇性必修3P12)菌落是指_______________