2025年內(nèi)分泌系統(tǒng)實(shí)踐操作試卷_第1頁
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2025年內(nèi)分泌系統(tǒng)實(shí)踐操作試卷考試時間:______分鐘總分:______分姓名:______一、簡述采集血清樣本進(jìn)行內(nèi)分泌激素檢測時,從采集到分離血清過程中需要注意的關(guān)鍵環(huán)節(jié)及原因。二、某患者因“乏力、怕冷、體重增加”就診,醫(yī)生懷疑甲狀腺功能減退。你負(fù)責(zé)檢測其血清游離甲狀腺素(FT4)和游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3),選擇的是化學(xué)發(fā)光免疫分析法。請簡述該方法的原理,并說明在操作過程中,為確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確,需要重點(diǎn)檢查或控制哪些儀器性能參數(shù)及試劑指標(biāo)。三、某患者因“多飲、多尿、體重下降”就診,醫(yī)生懷疑糖尿病。你使用葡萄糖氧化酶法測定其空腹靜脈血血糖濃度為28.0mmol/L。請根據(jù)此結(jié)果,簡要分析可能的臨床意義,并說明在檢測過程中,為避免因標(biāo)本問題導(dǎo)致結(jié)果假性增高,需要注意排除哪些情況。四、在進(jìn)行胰島素釋放試驗(yàn)(IRT)時,除了需要準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)化的試劑和校準(zhǔn)品外,操作本身還有哪些關(guān)鍵要求?請至少列出三項(xiàng)。五、一位護(hù)士在采集患者血樣時,不慎將少量空氣注入抗凝管中。如果該樣本用于檢測全血細(xì)胞計(jì)數(shù)(CBC)或某些需要測定細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)濃度的項(xiàng)目,可能會產(chǎn)生什么影響?請分別說明。六、實(shí)驗(yàn)室收到一份疑似庫欣綜合征的病例樣本,醫(yī)生要求檢測24小時尿游離皮質(zhì)醇(UFC)。請簡述UFC測定的原理(無需詳述具體方法),并說明在樣本接收、處理和保存過程中,哪些因素可能影響UFC的檢測結(jié)果?七、在進(jìn)行促甲狀腺激素(TSH)放免測定時,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳,可能的原因有哪些?請至少列舉兩種。八、某患者因“月經(jīng)不調(diào)”就診,醫(yī)生懷疑多囊卵巢綜合征(PCOS),建議檢測血清睪酮水平。你選擇使用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測。請簡述該方法的基本原理,并說明在操作過程中,如何判斷儀器是否處于良好的工作狀態(tài)?九、解釋“鉤狀效應(yīng)”現(xiàn)象,并說明在檢測極低或極高濃度的內(nèi)分泌激素時,如何采取措施以盡量避免或減輕鉤狀效應(yīng)的影響?十、某實(shí)驗(yàn)室正在使用全自動生化分析儀檢測血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),發(fā)現(xiàn)某患者樣本的ALT結(jié)果顯著高于儀器給出的參考范圍。除了考慮可能存在肝功能損傷外,從實(shí)驗(yàn)操作角度分析,還可能由哪些因素導(dǎo)致結(jié)果假性升高?請至少列出三種。試卷答案一、答:關(guān)鍵環(huán)節(jié)包括:①采集后立即使用合適的分離管(含促凝劑);②避免劇烈振蕩標(biāo)本管;③室溫下靜置足夠時間(通常15-30分鐘)使血液完全凝固;④使用合適的離心機(jī)及離心參數(shù)(轉(zhuǎn)速/時間),確保血清與血細(xì)胞充分分離;⑤分離后及時吸取上清血清,避免吸到管底沉淀或脂肪層;⑥蓋緊管蓋,防止血清蒸發(fā)或污染。原因:上述環(huán)節(jié)旨在保證血液凝固完全、血細(xì)胞破壞最小化、減少脂血/溶血干擾、保證血清標(biāo)本的純凈度和穩(wěn)定性,從而獲得準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。二、答:化學(xué)發(fā)光免疫分析法(CLIA)原理:利用酶標(biāo)記的抗體/抗原與樣本中的待測激素結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,加入底物后,酶催化底物發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng),發(fā)光強(qiáng)度與樣本中待測激素濃度成正比,通過檢測發(fā)光信號強(qiáng)度定量激素。為確保結(jié)果準(zhǔn)確,需重點(diǎn)檢查/控制:①儀器光源強(qiáng)度和穩(wěn)定性;②化學(xué)發(fā)光檢測單元的靈敏度;③背景信號抑制能力;④溫控系統(tǒng)(反應(yīng)孵育和檢測溫度)的準(zhǔn)確性;⑤定標(biāo)曲線的線性范圍和擬合度(R2值);⑥校準(zhǔn)品的批間差在允許范圍內(nèi);⑦試劑的效期、濃度和穩(wěn)定性。三、答:28.0mmol/L的空腹血糖濃度顯著高于正常參考范圍,提示患者可能患有糖尿?。ㄈ?型或2型糖尿?。┗蛱幱谔悄虿⊥Y酸中毒等急性并發(fā)癥期??赡艿呐R床意義還包括應(yīng)激狀態(tài)下的血糖升高、某些內(nèi)分泌疾?。ㄈ鐜煨谰C合征、肢端肥大癥)等。檢測過程中需注意排除導(dǎo)致結(jié)果假性增高的因素,如:①標(biāo)本采集不當(dāng)(如采血時間過晚、未空腹、采血過程中肌肉活動);②標(biāo)本處理不當(dāng)(如室溫放置時間過長導(dǎo)致血糖降解、溶血);③試劑或校準(zhǔn)品問題(如過期、批間差過大);④儀器故障;⑤患者服用影響血糖的藥物(如糖皮質(zhì)激素、噻嗪類利尿劑)。四、答:IRT操作的關(guān)鍵要求包括:①嚴(yán)格控制樣本處理和加樣時間,確保各時間點(diǎn)樣本處理時間一致;②保證所有試劑(促胰液素等刺激劑)和樣本在檢測前達(dá)到統(tǒng)一的體溫(通常37℃);③確保加樣準(zhǔn)確無誤,特別是樣本和刺激劑的體積;④嚴(yán)格控制樣本和試劑的用量,確保在各自檢測通道內(nèi)的濃度在有效范圍內(nèi);⑤防止樣本間交叉污染。五、答:空氣注入抗凝管可能產(chǎn)生的影響:①用于CBC檢測:空氣進(jìn)入血液可能形成微氣泡,干擾血細(xì)胞計(jì)數(shù)和體積測定,導(dǎo)致紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白量、紅細(xì)胞壓積等結(jié)果偏低,白細(xì)胞形態(tài)可能異常;②用于測定細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)濃度(如細(xì)胞內(nèi)游離鈣):空氣可能影響細(xì)胞膜的完整性,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)外漏,使得測得的細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)濃度結(jié)果假性增高。六、答:UFC測定原理簡述:收集24小時尿液,測定尿液中游離皮質(zhì)醇的含量,通常采用放免法或化學(xué)發(fā)光法。影響因素包括:①樣本收集:漏尿、污染或收集時間不足/過長都會影響尿量,進(jìn)而影響結(jié)果濃度;②樣本處理:未充分混勻尿液可能導(dǎo)致沉淀物干擾測定;未正確分裝或保存(如冷藏)可能導(dǎo)致皮質(zhì)醇降解或被細(xì)菌代謝;③標(biāo)化:未按體重或體表面積標(biāo)化UFC結(jié)果,無法準(zhǔn)確比較不同個體或同一個體不同時期的差異。七、答:TSH放免測定標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳的可能原因:①試劑/標(biāo)記抗體/抗體抗體反應(yīng)不完全或存在干擾物質(zhì);②標(biāo)準(zhǔn)品或樣本稀釋過程中出現(xiàn)誤差(如倍比稀釋錯誤);③儀器問題(如光電倍增管靈敏度不穩(wěn)定、基線漂移);④封板膜或反應(yīng)管不潔或存在氣泡影響結(jié)合;⑤加樣過程存在誤差或交叉污染。八、答:電化學(xué)發(fā)光免疫分析法(ECLIA)原理簡述:利用酶標(biāo)記的抗體/抗原與樣本中的待測激素結(jié)合,加入底物(如酶促反應(yīng)產(chǎn)生電子供體),在電場作用下發(fā)生電化學(xué)發(fā)光反應(yīng),通過檢測emittedelectrons的強(qiáng)度定量激素。判斷儀器狀態(tài)良好:①檢查儀器自檢是否通過;②確認(rèn)并校準(zhǔn)電極(如pH、溫度);③檢查并確認(rèn)光源和探測器功能正常;④使用質(zhì)控品,其結(jié)果在允許范圍內(nèi);⑤測定校準(zhǔn)品,確保校準(zhǔn)曲線線性良好(R2值達(dá)標(biāo));⑥觀察樣本加樣過程是否順暢,無堵塞。九、答:鉤狀效應(yīng):當(dāng)樣本中待測分析物濃度極高時,由于結(jié)合位點(diǎn)飽和,導(dǎo)致結(jié)合反應(yīng)不再成正比,使得測定結(jié)果反而低于實(shí)際濃度,呈現(xiàn)“S”型曲線,類似鉤狀。避免/減輕方法:①適當(dāng)稀釋樣本后重新檢測;②選擇更靈敏的檢測方法或儀器;③采用兩步法或預(yù)孵育法減少高濃度分析物對結(jié)合位點(diǎn)的競爭。十、答:可能導(dǎo)致ALT結(jié)果假性升高的因素:①標(biāo)本溶血:紅細(xì)胞中的AL

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