北京市人民醫(yī)院組織芯片制作考核一、單選題（每題2分，共20題）1.組織芯片制作過程中，最常用的細胞固定方法是？A.甲醛固定B.乙醇固定C.冰凍固定D.戊二醛固定2.組織芯片中，芯片載玻片的材質(zhì)通常選擇？A.聚四氟乙烯（PTFE）膜B.聚丙烯（PP）膜C.聚碳酸酯（PC）膜D.硅膠板3.制備組織芯片時，組織塊的大小通?？刂圃?？A.1mm×1mmB.2mm×2mmC.3mm×3mmD.4mm×4mm4.組織芯片中，最常用的細胞接種方法是？A.人工滴加B.自動噴灑C.機器人接種D.微滴置換5.組織芯片制作過程中，組織塊的排列間距通常設(shè)置為？A.100μm×100μmB.200μm×200μmC.300μm×300μmD.400μm×400μm6.組織芯片中，最常用的細胞培養(yǎng)液是？A.FBS-freeDMEMB.FBS-containingRPMI-1640C.PBS緩沖液D.0.1%PBS-Tween207.組織芯片制作過程中，最常用的細胞傳代方法是？A.機械刮除B.化學(xué)消化C.聚焦離心D.沉淀收集8.組織芯片中，最常用的細胞凋亡檢測方法是？A.TUNEL染色B.PI染色C.FCM分析D.WesternBlot9.組織芯片制作過程中，最常用的細胞分化誘導(dǎo)劑是？A.地塞米松B.佛波酯C.雌激素D.甲狀腺素10.組織芯片中，最常用的細胞衰老檢測方法是？A.β-半乳糖苷酶染色B.MTT實驗C.ELISA檢測D.RT-PCR分析二、多選題（每題3分，共10題）1.組織芯片制作過程中，常用的組織處理方法包括？A.固定B.脫水C.石蠟包埋D.脫石蠟E.超薄切片2.組織芯片中，常用的細胞檢測方法包括？A.免疫組化（IHC）B.免疫熒光（IF）C.PCRD.原位雜交E.WesternBlot3.組織芯片制作過程中，常用的細胞培養(yǎng)條件包括？A.37℃恒溫B.5%CO?環(huán)境C.濕度95%D.1%O?環(huán)境E.10%FBS4.組織芯片中，常用的細胞凋亡檢測方法包括？A.TUNEL染色B.Caspase-3活性檢測C.DNAladder分析D.FCM分析E.MTT實驗5.組織芯片制作過程中，常用的組織保存方法包括？A.甲醛固定B.乙醇保存C.乙醛保存D.丙酮保存E.甘油保存6.組織芯片中，常用的細胞增殖檢測方法包括？A.MTT實驗B.EdU摻入C.BrdU檢測D.Ki-67染色E.FCM分析7.組織芯片制作過程中，常用的細胞固定方法包括？A.甲醛固定B.乙醇固定C.戊二醛固定D.丙酮固定E.多聚甲醛固定8.組織芯片中，常用的細胞分化檢測方法包括？A.免疫組化（IHC）B.RT-PCRC.WesternBlotD.細胞形態(tài)學(xué)觀察E.流式細胞術(shù)9.組織芯片制作過程中，常用的細胞培養(yǎng)液包括？A.DMEMB.RPMI-1640C.FBS-free培養(yǎng)基D.PBS緩沖液E.0.1%PBS-Tween2010.組織芯片中，常用的細胞衰老檢測方法包括？A.β-半乳糖苷酶染色B.SA-β-Gal染色C.MTT實驗D.流式細胞術(shù)E.WesternBlot三、判斷題（每題1分，共20題）1.組織芯片制作過程中，組織塊的大小越大，細胞接種效率越高。2.組織芯片中，最常用的細胞培養(yǎng)液是含10%FBS的RPMI-1640。3.組織芯片制作過程中，最常用的細胞固定方法是甲醛固定。4.組織芯片中，最常用的細胞檢測方法是免疫組化（IHC）。5.組織芯片制作過程中，最常用的組織處理方法是石蠟包埋。6.組織芯片中，最常用的細胞凋亡檢測方法是TUNEL染色。7.組織芯片制作過程中，最常用的細胞培養(yǎng)條件是37℃恒溫、5%CO?環(huán)境。8.組織芯片中，最常用的細胞增殖檢測方法是MTT實驗。9.組織芯片制作過程中，最常用的細胞分化誘導(dǎo)劑是地塞米松。10.組織芯片中，最常用的細胞衰老檢測方法是β-半乳糖苷酶染色。11.組織芯片制作過程中，最常用的細胞傳代方法是機械刮除。12.組織芯片中，最常用的細胞凋亡檢測方法是PI染色。13.組織芯片制作過程中，最常用的細胞培養(yǎng)液是FBS-freeDMEM。14.組織芯片中，最常用的細胞分化檢測方法是RT-PCR。15.組織芯片制作過程中，最常用的細胞固定方法是乙醇固定。16.組織芯片中，最常用的細胞增殖檢測方法是EdU摻入。17.組織芯片制作過程中，最常用的組織保存方法是乙醛保存。18.組織芯片中，最常用的細胞衰老檢測方法是SA-β-Gal染色。19.組織芯片制作過程中，最常用的細胞接種方法是人工滴加。20.組織芯片中，最常用的細胞檢測方法是WesternBlot。四、簡答題（每題5分，共4題）1.簡述組織芯片制作過程中，組織塊的制備和排列步驟。2.簡述組織芯片中，細胞培養(yǎng)和檢測的基本流程。3.簡述組織芯片制作過程中，常用的細胞固定方法及其優(yōu)缺點。4.簡述組織芯片中，常用的細胞凋亡檢測方法及其原理。五、論述題（每題10分，共2題）1.論述組織芯片在腫瘤研究中的應(yīng)用及其優(yōu)勢。2.論述組織芯片制作過程中，常見的質(zhì)量控制方法及其重要性。答案與解析一、單選題答案與解析1.A-解析：甲醛是組織芯片制作中最常用的細胞固定方法，能較好地保存細胞形態(tài)和抗原性。2.B-解析：聚丙烯（PP）膜是組織芯片中最常用的載玻片材質(zhì)，具有良好的生物相容性和穩(wěn)定性。3.B-解析：2mm×2mm的組織塊大小最適合芯片制作，既能保證細胞接種密度，又便于觀察。4.C-解析：機器人接種是組織芯片制作中最常用的細胞接種方法，精度高、效率高。5.B-解析：200μm×200μm的組織排列間距最常用，既能保證細胞間距，又便于實驗操作。6.B-解析：FBS-containingRPMI-1640是組織芯片中常用的細胞培養(yǎng)液，能提供豐富的生長因子。7.A-解析：機械刮除是組織芯片制作中最常用的細胞傳代方法，操作簡便、損傷小。8.A-解析：TUNEL染色是組織芯片中常用的細胞凋亡檢測方法，特異性高、靈敏度高。9.A-解析：地塞米松是組織芯片中常用的細胞分化誘導(dǎo)劑，能促進細胞向特定方向分化。10.A-解析：β-半乳糖苷酶染色是組織芯片中常用的細胞衰老檢測方法，特異性強、操作簡便。二、多選題答案與解析1.A,B,C,D,E-解析：組織芯片制作過程中，常用的組織處理方法包括固定、脫水、石蠟包埋、脫石蠟和超薄切片。2.A,B,C,D,E-解析：組織芯片中，常用的細胞檢測方法包括免疫組化（IHC）、免疫熒光（IF）、PCR、原位雜交和WesternBlot。3.A,B,C-解析：組織芯片制作過程中，常用的細胞培養(yǎng)條件包括37℃恒溫、5%CO?環(huán)境和濕度95%。4.A,B,C,D-解析：組織芯片中，常用的細胞凋亡檢測方法包括TUNEL染色、Caspase-3活性檢測、DNAladder分析和FCM分析。5.A,B,C,D,E-解析：組織芯片制作過程中，常用的組織保存方法包括甲醛固定、乙醇保存、乙醛保存、丙酮保存和甘油保存。6.A,B,C,D,E-解析：組織芯片中，常用的細胞增殖檢測方法包括MTT實驗、EdU摻入、BrdU檢測、Ki-67染色和FCM分析。7.A,B,C,D,E-解析：組織芯片制作過程中，常用的細胞固定方法包括甲醛固定、乙醇固定、戊二醛固定、丙酮固定和多聚甲醛固定。8.A,B,C,D,E-解析：組織芯片中，常用的細胞分化檢測方法包括免疫組化（IHC）、RT-PCR、WesternBlot、細胞形態(tài)學(xué)觀察和流式細胞術(shù)。9.A,B,C-解析：組織芯片制作過程中，常用的細胞培養(yǎng)液包括DMEM、RPMI-1640和FBS-free培養(yǎng)基。10.A,B,C,D,E-解析：組織芯片中，常用的細胞衰老檢測方法包括β-半乳糖苷酶染色、SA-β-Gal染色、MTT實驗、流式細胞術(shù)和WesternBlot。三、判斷題答案與解析1.×-解析：組織塊過大反而會影響細胞接種效率，通常2mm×2mm最合適。2.√-解析：FBS-containingRPMI-1640是組織芯片中常用的細胞培養(yǎng)液，能提供豐富的生長因子。3.√-解析：甲醛是組織芯片制作中最常用的細胞固定方法，能較好地保存細胞形態(tài)和抗原性。4.√-解析：免疫組化（IHC）是組織芯片中常用的細胞檢測方法，特異性高、操作簡便。5.√-解析：石蠟包埋是組織芯片制作中常用的組織處理方法，能較好地固定組織結(jié)構(gòu)。6.√-解析：TUNEL染色是組織芯片中常用的細胞凋亡檢測方法，特異性高、靈敏度高。7.√-解析：37℃恒溫、5%CO?環(huán)境是組織芯片中常用的細胞培養(yǎng)條件，能保證細胞生長。8.√-解析：MTT實驗是組織芯片中常用的細胞增殖檢測方法，操作簡便、結(jié)果直觀。9.√-解析：地塞米松是組織芯片中常用的細胞分化誘導(dǎo)劑，能促進細胞向特定方向分化。10.√-解析：β-半乳糖苷酶染色是組織芯片中常用的細胞衰老檢測方法，特異性強、操作簡便。11.√-解析：機械刮除是組織芯片制作中最常用的細胞傳代方法，操作簡便、損傷小。12.×-解析：PI染色主要用于細胞周期分析，而非凋亡檢測。13.×-解析：FBS-freeDMEM適用于無血清培養(yǎng)，但組織芯片中常用含F(xiàn)BS的培養(yǎng)基。14.√-解析：RT-PCR是組織芯片中常用的細胞分化檢測方法，靈敏度高、特異性強。15.×-解析：乙醇固定適用于短期保存，甲醛固定更常用。16.√-解析：EdU摻入是組織芯片中常用的細胞增殖檢測方法，靈敏度高、操作簡便。17.×-解析：乙醛固定適用于長期保存，但甲醛固定更常用。18.√-解析：SA-β-Gal染色是組織芯片中常用的細胞衰老檢測方法，特異性強、操作簡便。19.×-解析：機器人接種是組織芯片制作中最常用的細胞接種方法，精度高、效率高。20.√-解析：WesternBlot是組織芯片中常用的細胞檢測方法，能檢測蛋白表達水平。四、簡答題答案與解析1.組織塊的制備和排列步驟-解析：組織塊制備包括取材、固定、脫水、石蠟包埋和切片；排列步驟包括將組織塊粘貼在載玻片上，按預(yù)定間距排列，確保組織塊間距均勻，最后進行包埋和切片。2.細胞培養(yǎng)和檢測的基本流程-解析：細胞培養(yǎng)包括接種細胞、調(diào)節(jié)培養(yǎng)條件（溫度、CO?、濕度等），檢測包括免疫組化、免疫熒光、PCR等，需確保細胞狀態(tài)良好，實驗操作規(guī)范。3.常用的細胞固定方法及其優(yōu)缺點-解析：甲醛固定優(yōu)點是效果好，缺點是可能影響抗原性；乙醇固定優(yōu)點是操作簡便，缺點是固定效果較差；戊二醛固定優(yōu)點是固定效果好，缺點是毒性較大。4.常用的細胞凋亡檢測方法及其原理-解析：TUNEL染色原理是檢測細胞DNA斷裂，凋亡細胞DNA出現(xiàn)缺口；Caspase-3活性檢測原理是檢測凋亡蛋白酶活性；DNAl