ICS65.020.20CCSB3154代替DB54/T0086-2015IDB54/T0086—2023前言 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4脫毒組培苗生產(chǎn) 5原原種的生產(chǎn) 6原種生產(chǎn) 附錄A（規(guī)范性）MS培養(yǎng)基貯備液的成分表 附錄B（規(guī)范性）馬鈴薯常見病蟲害及防治技術(shù) 7DB54/T0086—2023本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件代替DB54/T0086-2015《脫毒馬鈴薯種薯生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》，與DB54/T0086-2015相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動外，主要技術(shù)變化如下：——修改了原標(biāo)準(zhǔn)中的“培養(yǎng)條件”內(nèi)容（見4.2.4）?！薷牧嗽瓨?biāo)準(zhǔn)中的“接種”內(nèi)容（見4.3.2）。——修改了原標(biāo)準(zhǔn)中的“煉苗”內(nèi)容（見5.2.1）。——修改了原標(biāo)準(zhǔn)中的“移栽”內(nèi)容（見5.2.1）。——修改了原標(biāo)準(zhǔn)中的“單行起壟種植”內(nèi)容（見6.3.1）?！薷牧嗽瓨?biāo)準(zhǔn)中的“中耕培土”內(nèi)容（見6.4.2）?！薷牧嗽瓨?biāo)準(zhǔn)中的“包裝”內(nèi)容（見5.4.2）?！薷牧嗽瓨?biāo)準(zhǔn)中的“貯存”內(nèi)容（見5.4.3）?！薷牧嗽瓨?biāo)準(zhǔn)中的“瓊脂用量”內(nèi)容（見附錄A）。本文件由西藏農(nóng)牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)委員會提出。本文件由西藏農(nóng)牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)委員會歸口。本文件起草單位：西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院蔬菜研究所本文件主要起草人：許娟妮、曾鈺婷、祁馳恒、尼瑪卓嘎、李淑萍、黃鵬程本規(guī)程歷次版本發(fā)布情況：DB54/T0086-2015DB54/T0086—20231脫毒馬鈴薯種薯生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程本文本規(guī)定了馬鈴薯脫毒苗的培育、繁育、種薯的生產(chǎn)、擴繁栽培和各級脫毒種薯的檢驗、收獲、貯藏的生產(chǎn)技術(shù)操作規(guī)程。本文本適用于脫毒馬鈴薯種薯生產(chǎn)。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB181332012馬鈴薯脫毒種薯GB/T31001有關(guān)量、單位和符號的一般原則GB7331馬鈴薯種薯產(chǎn)地檢疫規(guī)程NY/T1606-2008馬鈴薯種薯生產(chǎn)技術(shù)操作規(guī)程DB54/T0028馬鈴薯生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1脫毒組培苗脫毒苗是應(yīng)用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的，經(jīng)檢測確認不帶馬鈴薯卷葉病毒、馬鈴薯Y病毒、馬鈴薯X病毒、馬鈴薯A病毒、馬鈴薯M病毒或馬鈴薯S病毒等和馬鈴薯紡錘塊莖類病毒的再生試管苗，經(jīng)過組織培養(yǎng)方法大量擴繁的且不帶上述病毒和類病毒用于生產(chǎn)原種的試管苗。3.2試管薯脫毒苗經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)，直接在試管（瓶）內(nèi)結(jié)的小薯。3.3MS培養(yǎng)基MS是人名MurashigeandSkoog的縮寫，MS培養(yǎng)基是目前使用最普遍的培養(yǎng)基，它能夠保證組織生長所需的礦質(zhì)營養(yǎng)還能加速愈傷組織的生長，多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為基本培養(yǎng)基。3.4脫毒種薯從繁殖脫毒苗開始，經(jīng)逐代繁殖增加種薯數(shù)量的種薯生產(chǎn)體系生產(chǎn)出來的各級種薯。脫毒種薯分為原原種、原種、生產(chǎn)用種薯。3.4.1原原種DB54/T0086—20232用育種家種子、脫毒組培苗或試管薯在防蟲網(wǎng)等隔離條件下生產(chǎn)，經(jīng)質(zhì)量檢測符合GB18133的，用于原種生產(chǎn)的種薯。3.4.2原種用用原原種做種薯、在良好隔離條件下生產(chǎn)的符合GB18133質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的種薯。3.4.3生產(chǎn)用種用原種做種薯，在隔離條件下生產(chǎn)出的符合一級種薯標(biāo)準(zhǔn)的種薯。3.5隔離栽培在與病蟲害隔離的防蟲網(wǎng)下進行的栽培方式。3.6擴繁栽培1克以上脫毒原原種直接種入大田，采取調(diào)節(jié)播種期、噴藥防蟲、剔除病、雜株等綜合保護措施，生產(chǎn)脫毒原種的種植方式。4脫毒組培苗生產(chǎn)4.1脫毒組培苗的培育4.1.1選材選用生產(chǎn)上主栽的優(yōu)良品種塊莖的休眠芽或剛出土幼苗的莖尖、或田間成株上的葉芽做莖尖剝離材料。4.1.2培養(yǎng)基的制備按附錄A的配制每1000毫升的MS培養(yǎng)基中加入GA3(0.2mg)；6-BA（0.1mgNAA（0.01mg）,分裝入瓶。4.1.3滅菌在0.15Mpa/cm2壓力下對培養(yǎng)基、操作工具等滅菌30min。4.1.4莖尖剝離接種將材料放入紗布袋，先用自來水沖洗30min后放入75%酒精中?5s，再用0.1%升汞消毒5-10min，取出用無菌水沖洗3次，用滅菌濾紙吸干材料表面水分，然后在無菌條件操作，用解剖鏡下、手術(shù)刀等工具輕、準(zhǔn)、快的剝?nèi)ビ兹~，切取帶1-2個葉原基的生長點，迅速接入裝有莖尖分化培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，每瓶放一個生長點，注明品種、接種日期等。4.1.5培養(yǎng)條件日溫25℃,夜溫15℃,光照時數(shù)12h/d，光照強度2000lx-3000lx條件下培養(yǎng)25d左右。4.1.6病毒檢測脫毒苗送國家法定質(zhì)檢部門與標(biāo)準(zhǔn)檢測中心檢測認定。用于檢測的數(shù)量不低于總數(shù)的10%，如果脫毒苗沒有檢測出馬鈴薯卷葉病毒、馬鈴薯Y病毒、馬鈴薯X病毒、馬鈴薯A病毒、馬鈴薯M病毒或馬鈴薯S病毒等和馬鈴薯紡錘塊莖類病毒，則進行組培苗生產(chǎn)，不合格的脫毒苗不得用于組培快繁。4.2脫毒組培苗擴繁4.2.1脫毒組培苗來源DB54/T0086—20233經(jīng)病毒檢測，去除所含上述病毒的組培苗。4.2.2培養(yǎng)基用MS培養(yǎng)基。滅菌同4.1.3。4.2.3快繁將脫毒苗剪切1厘米左右，帶一葉一芽的莖段接種在繼代培養(yǎng)基上，每瓶培養(yǎng)基上接種8個莖段。待莖段長成10cm左右的小苗，進行轉(zhuǎn)接。4.2.4培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度20℃±2℃,光照時數(shù)10h/d，光照強度2500lx條件下培養(yǎng)一個月。4.3脫毒組培苗的保存4.3.1培養(yǎng)基MS+B9（10mg/l）+甘露醇（40mg/l）+瓊脂（700mg/l）+白糖（3000mg/l）。滅菌同4.1.34.3.2接種選繼代培養(yǎng)中生長健壯的組培苗，進行莖段扦插切段，每瓶接種20個。4.3.3培養(yǎng)置弱光（1000lx）和較低的溫度（5℃-10℃)下培養(yǎng)。5原原種的生產(chǎn)5.1隔離網(wǎng)室的建立5.1.1環(huán)境條件選擇四周無高大的建筑物、水源、電源、交通便利，通風(fēng)透光的地方建網(wǎng)室。5.1.2建設(shè)要求隔離網(wǎng)室用熱渡鋅管作支撐，網(wǎng)室內(nèi)地表及網(wǎng)室四周內(nèi)，應(yīng)建成水泥地面，網(wǎng)室周圍范圍內(nèi)不能有其他可能成為馬鈴薯病蟲害侵染源或可能成為蚜蟲寄主的植物。嚴防網(wǎng)室內(nèi)地表積水和網(wǎng)室外水流入。用于隔離的網(wǎng)紗孔徑要達到60目-80目。5.2播前準(zhǔn)備5.2.1煉苗將長到8片葉子，苗齡30d左右的組培苗打開瓶蓋。煉苗3d-5d天。5.2.2基質(zhì)市場上購買的馬鈴薯專用育苗基質(zhì)。5.2.3移栽將試管苗根上的培養(yǎng)基清洗干凈，每窩定株2棵，行距10cm，株距10cm。5.3播種5.3.1拱棚蓋膜試管苗移栽完后，輕細均勻灑水，使基質(zhì)充分飽和吸水，及時拱棚蓋膜，拱棚內(nèi)相對濕度保持在95%。5.3.2施肥從小苗生根成活后及時去掉拱棚，根據(jù)苗情噴施0.2%N:P:K=2:1:3的營養(yǎng)液3次。5.3.3澆水勤澆、細澆、少澆，保持基質(zhì)濕潤，持水量在50%，收獲前一周停止?jié)菜?.3.4病蟲害防治馬鈴薯原原種病蟲害防治對象和方法按DB54/T0028執(zhí)行。DB54/T0086—202345.4收獲、包裝、貯存5.4.1收獲根據(jù)莖葉三分之二變黃為成熟期，收獲時避免機械損傷和品種混雜，收獲攤晾5d，剔除爛薯、病薯、傷薯及雜物。5.4.2包裝包裝采用尼龍網(wǎng)袋包裝，按大小分級包裝，做好標(biāo)記，雙標(biāo)簽，袋內(nèi)袋外各一個，裝袋不超過網(wǎng)袋容積的三分之二。5.4.3貯存根據(jù)當(dāng)?shù)貧夂?，種薯生產(chǎn)量、收獲期，設(shè)備條件等，將種薯置于低溫室內(nèi)避光貯藏。在溫度3℃-5℃,相對濕度90%的條件下貯藏。6原種生產(chǎn)6.1選地自然隔離條件良好，100m內(nèi)無茄科作物種植，前茬為非茄科作物，土壤疏松，肥力中等，排灌方便的砂壤土。6.2種薯準(zhǔn)備選用通過休眠、芽眼壯的原原種做種薯，播前2個月，將在專用貯藏庫內(nèi)貯藏的原原種取出，剔除爛薯、病薯后，置于25℃,有散射光的室內(nèi)，讓其自然通過休眠發(fā)芽，促芽變綠，大的種薯可按GB7331切塊執(zhí)行。6.3播種6.3.1單行起壟種植人工開溝，施肥、點薯、覆土連續(xù)作業(yè)，播種深度10cm-13cm。行距70cm，株距20cm。1g-20g薯種植密度為5000-6000株/畝，20g以上薯種植密度為4000-5000株/畝。6.3.2底肥腐熟農(nóng)家肥1500kg/畝。6.3.3播種期每年4月底5月初播種。6.4田間管理6.4.1追肥齊苗后及時追施尿素5kg/畝。6.4.2中耕培土齊苗后第一次中耕鋤草進行。7-8片葉子時第二次中耕，培土成低壟，現(xiàn)蕾期第三次中耕、培土成高壟,壟高為30cm-40cm。中耕要淺,劃破土皮,拔除雜草,避免切斷匍匐莖。6.4.3澆水根據(jù)墑情選擇澆水，收獲前一周停止?jié)菜?.4.4去雜除劣現(xiàn)蕾至盛花期，及時拔除混雜植株，包括地下塊莖。6.4.5病蟲害防治病蟲害防治具體內(nèi)容按照DB54∕T0028標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。6.4.6收獲、包裝、貯存DB54/T0086—2023按原原種生產(chǎn)的收獲、貯存及包裝有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。DB54/T0086—20236（規(guī)范性）MS培養(yǎng)基貯備液的成分表55555注：在配置大量元素貯備液時，最后加氯化鈣,在配置鐵鹽貯備液時，分別溶解硫酸亞鐵和乙二胺四乙酸二鈉，溶解時候要一邊加熱一邊攪拌，待兩種溶液都溶解后再混合在一起，最后用蒸餾水定容DB54/T0086—2023（規(guī)范性）馬鈴薯