ICS13300

CCSA.80

中華人民共和國國家標準

GB/T21786—2025

代替GB/T21786—2008

化學品細菌回復突變試驗方法

Chemicals—Testmethodofbacterialreversemutation

2025-08-29發(fā)布2025-12-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標準化管理委員會

GB/T21786—2025

前言

本文件按照標準化工作導則第部分標準化文件的結構和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件代替化學品細菌回復突變試驗方法與相

GB/T21786—2008《》,GB/T21786—2008

比除結構調整和編輯性改動外主要技術變化如下

,,:

更改了細菌的內容見年版的

a)“”(5.1.1.4,20084.1.1.4);

更改了染毒劑量的內容見年版的

b)“”(5.2.2.1,20084.2.2.1);

更改了對照的內容見年版的

c)“”(5.2.3.3,20084.2.3.3);

更改了試驗步驟的內容見年版的

d)“”(5.3.1、5.3.2,20084.3.1.1、4.3.1.2)。

請注意本文件的某些內容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任

。。

本文件由全國危險化學品管理標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC251)。

本文件起草單位中國疾病預防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所中國疾病預防控制中心環(huán)境與健

:、

康相關產(chǎn)品安全所平頂山市慧鑫源生物科技有限公司

、。

本文件主要起草人沈美麗戴宇飛段化偉陳圓圓鄧富昌石瑩張少平劉帥石東東

:、、、、、、、、。

本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為

:

年首次發(fā)布為

———2008GB/T21786—2008;

本次為第一次修訂

———。

Ⅰ

GB/T21786—2025

引言

細菌回復突變試驗是利用營養(yǎng)缺陷型的鼠傷寒沙門氏菌Salmonellatyphimurium和大腸桿菌

()

Escherichiacoli菌株來檢測基因突變突變涉及的一個或多個堿基對的置換插入或缺失本

(),DNA、。

試驗的原理是檢測受試物導致試驗菌株因回復突變進而恢復合成必需氨基酸的能力發(fā)生回復突變的

。

細菌能在缺乏特定必需氨基酸的條件下生長而親代菌株則不能生長故可根據(jù)菌落形成數(shù)量判斷受

,,,

試物是否為致突變物

。

基因突變是導致眾多遺傳性疾病的關鍵因素且有充分證據(jù)表明體細胞癌基因和抑癌基因的突變

,,

與人類和實驗動物的腫瘤形成有關細菌回復突變試驗具有快速經(jīng)濟和操作相對簡便等優(yōu)點試驗

。、。

菌株還具有某些特征使其對突變檢測更加敏感例如回復突變位點存在響應性序列細菌對大

,,DNA,

分子物質的通透性增強以及修復系統(tǒng)缺陷或易錯修復過程增強試驗菌株的特異性可為

,DNADNA。

遺傳毒物誘發(fā)的突變類型提供有價值的研究信息現(xiàn)已構建了包含多種化學結構物質的細菌回復突變

。

試驗結果的數(shù)據(jù)庫可從中獲取相關資料同時還為不同理化性質的化學品建立了完善的測試方

,。,

法包括揮發(fā)性化合物

,。

細菌回復突變試驗采用的是原核細胞其在吸收代謝染色體結構和修復過程等方面與哺

,、、DNA

乳動物細胞存在顯著差異本試驗屬于體外試驗可加入外源性代謝活化系統(tǒng)但外源性代謝活化系統(tǒng)

。,,

不能完全模擬體內代謝條件因此本試驗結果不能為受試物對哺乳動物的致突變和致癌能力提供直

。,

接證據(jù)

。

細菌回復突變試驗可用于遺傳毒性的初步篩選尤其適用于檢測受試物誘發(fā)的點突變大量研究

,。

數(shù)據(jù)表明許多在本試驗中呈陽性的化學品在其他試驗中也顯示出致突變性但也有一些致突變劑在本

,,

試驗中未能檢出這種局限性可能與檢測終點的特殊性質代謝活化的差異或生物利用度的差異有關

。、。

另外提高本試驗靈敏度的因素可能會高估受試物的致突變活性

,。

細菌回復突變試驗不適用于評估某些類別的化學品例如具有較強殺菌作用的化合物如某些抗生

,(

素和特異性干擾哺乳動物細胞復制系統(tǒng)的化合物如某些拓撲異構酶抑制劑和某些核苷類似物對

)()。

這些受試物哺乳動物細胞致突變試驗可能更適用

,。

雖然許多在本試驗中呈陽性的化合物都是哺乳動物的致癌物但其相關性并不是絕對的而是與化

,,

學品的類別有關有一些致癌物通過非遺傳毒性機制或試驗菌株缺乏的機制誘發(fā)癌癥所以不能在本

。,

試驗中檢出

。

Ⅱ

GB/T21786—2025

化學品細菌回復突變試驗方法

1范圍

本文件給出了細菌回復突變試驗方法的試驗基本原則規(guī)定了試驗方法試驗數(shù)據(jù)和報告

,、。

本文件適用于檢測化學品有殺菌作用的除外的致突變性

()。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒有規(guī)范性引用文件

。

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件

。

31

.

回復突變試驗reversemutationtest

以營養(yǎng)缺陷型的突變體菌株為指示生物進行基因突變檢測的體外試驗

,。

注常用的菌株有組氨酸營養(yǎng)缺陷型鼠傷寒沙門氏菌Salmonellatyphimurium和色氨酸營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌

:()

Escherichiacoli

()。

4試驗基本原則

41細菌懸液分別在加入和不加入外源性代謝活化系統(tǒng)的條件下與受試物混勻在平板摻入法

.,。

中將上述混合物與頂層瓊脂充分混勻再迅速傾入底層瓊脂平板上在預培養(yǎng)法中先將細菌懸液與

,,。,

受試物混合進行預培養(yǎng)然后與頂層瓊脂充分混勻再迅速傾入底層瓊脂平板上上述平板培養(yǎng)

,,。2d~3d

后計數(shù)回變菌落數(shù)并與溶劑對照組的自發(fā)回變菌落數(shù)進行比較

,,。

42細菌回復突變試驗有多種操作方法其中最常用的是平板摻入法預培養(yǎng)法波動法和懸浮培養(yǎng)

.,、、

法此外還有用于檢測氣體或蒸氣的改良方法

。,。

43本文件所描述的主要是平板摻入法和預培養(yǎng)法這兩種方法在加入和不加入代謝活化系統(tǒng)的條

.。

件下都能進行有些化學品宜使用預培養(yǎng)法包括短鏈脂肪族亞硝胺二價金屬醛類偶氮染料和重氮

。