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文檔簡(jiǎn)介
ICS11.020
CCSC62
15
內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)
DB15/T2844.2—2022
邊境口岸病媒生物跨境聯(lián)合監(jiān)測(cè)及檢測(cè)技
術(shù)規(guī)程第2部分:鼠
Technicalregulationofcrossborderjointmonitoringanddetection
ofvectorsingroundcrossingpart2:Rodents
2022-12-08發(fā)布2023-01-08實(shí)施
內(nèi)蒙古自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布
DB15/T2844.2—2022
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定
起草。
本文件是DB15/T2844《邊境口岸鼠疫檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范》的第2部分。DB15/T2844已經(jīng)發(fā)布了
以下部分:
——第1部分:總則;
——第2部分:鼠;
——第3部分:蜱。
本文件由中華人民共和國(guó)呼和浩特海關(guān)提出并歸口。
本文件起草單位:呼和浩特國(guó)際旅行衛(wèi)生保健中心(呼和浩特海關(guān)口岸門診部)。
本文件主要起草人:靳木子、陳宇飛、劉佳琪、韓丹。
I
DB15/T2844.2—2022
邊境口岸病媒生物跨境聯(lián)合監(jiān)測(cè)及檢測(cè)技術(shù)規(guī)程
第2部分:鼠
1范圍
本文件規(guī)定了邊境口岸病媒生物鼠跨境聯(lián)合監(jiān)測(cè)及檢測(cè)技術(shù)的總體要求。
本文件適用于邊境口岸病媒生物鼠跨境聯(lián)合監(jiān)測(cè)及檢測(cè)的管理。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,
僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本
文件。
GB/T28940病媒生物感染病原體采樣規(guī)程鼠類
SN/T1188國(guó)境口岸鼠疫疫情監(jiān)測(cè)規(guī)程
SN/T1293國(guó)境口岸蜱類監(jiān)測(cè)規(guī)程
SN/T1339國(guó)境口岸螨類監(jiān)測(cè)規(guī)程
SN/T1487輸入性嚙齒類動(dòng)物攜帶鉤端螺旋體的檢測(cè)方法
SN/T1502國(guó)境口岸拉沙熱檢驗(yàn)規(guī)程
SN/T2616國(guó)境口岸鼠攜帶鼠疫桿菌和漢坦病毒快速檢測(cè)方法
SN/T4616國(guó)境口岸巴爾通體PCR檢測(cè)方法
WS279鼠疫診斷標(biāo)準(zhǔn)
3術(shù)語和定義
本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。
4總體要求
監(jiān)測(cè)時(shí)間
各口岸根據(jù)當(dāng)?shù)貧夂驐l件、鼠類活動(dòng)高峰和實(shí)際工作情況,確定當(dāng)?shù)乇O(jiān)測(cè)時(shí)間,原則上每月均需監(jiān)
測(cè),監(jiān)測(cè)周期、頻次和器具布放時(shí)間,一經(jīng)確定不應(yīng)更改,如遇特殊天氣可順延。
監(jiān)測(cè)范圍
依據(jù)邊境口岸內(nèi)監(jiān)測(cè)區(qū)域及其生態(tài)環(huán)境制定監(jiān)測(cè)范圍,監(jiān)測(cè)范圍盡可能的覆蓋整個(gè)口岸區(qū)域。
監(jiān)測(cè)內(nèi)容
監(jiān)測(cè)內(nèi)容包括以下幾方面:
——口岸鼠類的地理分布;
1
DB15/T2844.2—2022
——口岸鼠類的種類組成;
——口岸鼠類季節(jié)消長(zhǎng)監(jiān)測(cè);
——口岸鼠類攜帶病原體檢測(cè);
——生境因素觀測(cè)分析:地理、海拔、地貌、植被、天氣、氣溫等。
監(jiān)測(cè)數(shù)量
所捕獲的鼠應(yīng)來自口岸邊境地區(qū),所需數(shù)量每個(gè)口岸全年在100只以上,需明確記錄并儲(chǔ)存其體表
寄生物。所有樣本需詳細(xì)做好記錄,隨樣本一同送檢。
個(gè)人防護(hù)
著白(淺)色防護(hù)服(連體)、白色長(zhǎng)筒防蚤襪、長(zhǎng)筒膠靴、無粉手套、口罩、眼罩、驅(qū)避劑等。
5監(jiān)測(cè)方法
夾夜法
建議統(tǒng)一選用質(zhì)量可靠穩(wěn)定的中型鋼板夾和鼠籠,以各地便于獲得的材料為誘餌長(zhǎng)期使用,晚放晨
收。室內(nèi)沿墻基放置,鼠夾與墻基垂直平放,踏板端緊靠墻基,并布放于隱蔽處。小于15m2房間放置1
夾,15m2房間放置2夾,大于15m2的房間,按每15m2為一間折算標(biāo)準(zhǔn)間數(shù),放夾數(shù)量依此類推。室外
布放在鼠類出沒的地方,按5m~10m布1夾,直線布放,行距約20m,日落前放置。次日晨檢查記錄捕
獲鼠的數(shù)量,并送實(shí)驗(yàn)室鑒定(見附錄A)。每次監(jiān)測(cè)有效夾數(shù)不少于300夾,誘餌以各口岸的實(shí)際情況
確定。鼠夾法鼠密度參考控制標(biāo)準(zhǔn)為小于1%。其中,鼠密度等于捕鼠總數(shù)除以有效夾數(shù)后乘以100%。
鼠籠法
每次監(jiān)測(cè)不少于50籠,鼠籠與墻基垂直平放,鼠籠開口朝向墻面,晚放晨收,鼠籠法鼠密度參考控
制標(biāo)準(zhǔn)為小于0.5%。其中,鼠密度等于捕鼠總數(shù)除以有效籠數(shù)后乘以100%。
鼠體寄生生物監(jiān)測(cè)
5.3.1鼠體寄生蚤類
同鼠類調(diào)查同時(shí)進(jìn)行,將捕獲鼠及器械放入白布袋,扎緊袋口,置于密閉容器內(nèi),用氯仿或乙醚麻
醉處理。處理后的鼠體放在白瓷盤上,用梳子或刷子撿蚤,以濕毛筆沾起放入75%酒精中,每只鼠檢獲
的蚤類放入同一試管內(nèi),做好唯一性標(biāo)識(shí),在解剖鏡下進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)方法按照SN/T1188執(zhí)行。
5.3.2鼠體寄生蜱類
同類鼠調(diào)查同時(shí)進(jìn)行,檢蜱方法同蚤類。計(jì)數(shù)方法按照SN/T1293執(zhí)行。
5.3.3鼠體寄生螨
同鼠類調(diào)查同時(shí)進(jìn)行,檢螨方法同蚤類。見附錄B、C。計(jì)數(shù)方法按照SN/T1339執(zhí)行。
6樣本保存、運(yùn)輸及處置
活鼠
2
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將捕獲的活鼠連同鼠籠(鼠夾)裝入有捆扎袋的鼠袋內(nèi),扎緊袋口,嚴(yán)防跳蚤逃逸,填寫口岸鼠類
監(jiān)測(cè)記錄表,標(biāo)記好捕獲方法、時(shí)間、地點(diǎn)、狀態(tài)(活體、死亡、是否腐敗等),由專車雙人送檢,運(yùn)
輸時(shí)需具有生物安全轉(zhuǎn)運(yùn)證書;監(jiān)測(cè)與檢測(cè)過程中產(chǎn)生的廢棄物按照相應(yīng)的處理要求進(jìn)行處理。
死鼠
將捕獲的死鼠從鼠夾上取下,單只裝入有捆扎袋的鼠袋內(nèi),扎緊袋口,嚴(yán)防跳蚤逃逸,填寫口岸鼠
類監(jiān)測(cè)記錄表,標(biāo)記好捕獲方法、時(shí)間、地點(diǎn)、狀態(tài)(活體、死亡、是否腐敗等),由專車雙人送檢,
運(yùn)輸時(shí)需具有生物安全轉(zhuǎn)運(yùn)證書;監(jiān)測(cè)與檢測(cè)過程中產(chǎn)生的廢棄物按照相應(yīng)的處理要求進(jìn)行處理。
7鑒定與檢測(cè)
生物安全要求
保證實(shí)驗(yàn)流程無菌操作,使用已消毒或一次性無菌器材,血液和組織樣本保存在無菌容器內(nèi)。作好
個(gè)人生物安全防護(hù),如穿防蚤隔離衣、鞋、膠手套、N95口罩等,整個(gè)解剖過程應(yīng)在生物安全柜(二級(jí))
或生物安全解刨臺(tái)(二級(jí))中進(jìn)行做到防叮咬、防刺傷、防氣溶膠傳播等。
鑒定
鼠類鑒定按照《中國(guó)口岸常見醫(yī)學(xué)媒介生物鑒定圖譜》要求進(jìn)行,并填寫附表。
活鼠樣本的檢測(cè)
7.3.1外觀檢測(cè)
需檢測(cè)鼠體體重(g)、體長(zhǎng)(mm)、尾長(zhǎng)(mm)、耳高(mm)、后足長(zhǎng)(mm)、性別(♀♂)、鑒定鼠種,
填寫完整鼠類鑒定檢測(cè)記錄表。采血和臟器前,應(yīng)先梳檢鼠體寄生蟲,采用乙醚或者氯仿麻醉致死后采
集,每只鼠每種寄生蟲單獨(dú)保存。
7.3.2血清樣本采集
大鼠可采用股靜脈或股動(dòng)脈采血,小鼠可采用眼眶動(dòng)脈采血或尾靜脈采血,按照GB/T28940的規(guī)
定,采血后做好編號(hào)登記,先置放室溫1h,然后3000轉(zhuǎn)/min離心15min,取上清液后滅活。
7.3.3組織采集
按皮下、腹腔、胸腔的順序解剖,采取膀胱、肝、脾、肺和心臟等,需要時(shí)也可取腦,各臟器采集
時(shí)應(yīng)更換無菌剪、鑷。每種臟器存放在單獨(dú)無菌容器中,封口后編號(hào)和登記。
7.3.4鼠體寄生蟲采集
應(yīng)在活鼠經(jīng)過乙醚或者氯仿麻醉致死后采集,將鼠袋倒入白(淺)色的深搪瓷盆內(nèi),慢慢翻開隨翻
隨撿,放進(jìn)指形管中;然后一只手用大鑷子夾持鼠體,另一手用梳子梳鼠體蚤、螨、蜱,由鼠頭部往后
梳,再由尾部向前梳,特別要注意頸部、腋窩和股骨內(nèi)側(cè)。將刷出的鼠體外寄生蟲蚤、螨、蜱,用毛筆
沾75%酒精或鑷子分類撿入指形管(內(nèi)裝75%酒精),做好標(biāo)記;
死鼠樣本的檢測(cè)
7.4.1外觀檢測(cè)
3
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同7.3.1,并登記為死鼠。
7.4.2血液采集
對(duì)死鼠采血可采用血紙條方式,應(yīng)做好鼠體消毒,并做好編號(hào)登記、滅活。
7.4.3組織采集
同7.3.3;若鼠尸殘缺不全或腐敗時(shí),盡量取可取的臟器,也可采取股骨髓檢查。每個(gè)臟器存放在
單獨(dú)無菌容器中,封口后編號(hào)和登記。
樣本保存
用于細(xì)菌、病毒分離和檢測(cè)的組織樣本可直接-80℃冷凍保存,也可用干冰或液氮罐中保存。
用于血凝檢測(cè)的血清樣本,對(duì)于24h內(nèi)不能立即檢測(cè)的樣本,一周內(nèi)可保存在-20℃冰箱中低溫保
存,一周內(nèi)無法檢測(cè)的樣本應(yīng)保存于-70℃及以下的冰箱冷凍保存。
鼠體寄生蟲樣本,可用75%酒精保存,-80℃或液氮保存?zhèn)錂z。
8鼠類攜帶病原體檢測(cè)
生物安全要求
病原體檢測(cè)應(yīng)在衛(wèi)生部《人間傳染病的病原微生物名錄》規(guī)定的相應(yīng)等級(jí)的生物安全實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行,
實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)經(jīng)過相關(guān)培訓(xùn),熟知實(shí)驗(yàn)室管理制度、生物安全要求、技術(shù)操作規(guī)程等,需兩人以上同時(shí)開
展實(shí)驗(yàn)工作,填寫完整鼠類鑒定檢測(cè)記錄表。
檢測(cè)要求
8.2.1檢測(cè)病原體種類
鼠疫耶爾森氏菌、漢坦病毒、巴爾通體、鉤端螺旋體、博卡病毒、拉沙熱病毒及新發(fā)、未知病原體
的檢測(cè)。
8.2.2檢測(cè)方法
8.2.2.1鼠疫耶爾森氏菌
鼠疫耶爾森氏菌培養(yǎng)按照WS279的規(guī)定執(zhí)行;
鼠疫耶爾森氏菌血清學(xué)檢測(cè)按照WS279的規(guī)定執(zhí)行;
鼠疫耶爾森氏菌膠體金法檢測(cè)按照WS279的規(guī)定執(zhí)行;
鼠疫耶爾森氏菌核酸檢測(cè)按照WS279的規(guī)定執(zhí)行。
8.2.2.2漢坦病毒
漢坦病毒酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)雙抗原夾心法按照SN/T2616的規(guī)定執(zhí)行;
漢坦病毒核酸檢測(cè)按照SN/T2616的規(guī)定執(zhí)行;
8.2.2.3巴爾通體
巴爾通體核酸檢測(cè)按照SN/T4616的規(guī)定執(zhí)行;
8.2.2.4鉤端螺旋體
4
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鉤端螺旋體核酸檢測(cè)按照SN/T1487的規(guī)定執(zhí)行;
8.2.2.5博卡病毒
博卡病毒核酸檢測(cè)按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》的規(guī)定執(zhí)行;
8.2.2.6拉沙熱病毒
拉沙熱病毒核酸檢測(cè)按國(guó)境口岸拉沙熱檢驗(yàn)規(guī)程按照SN/T1502的規(guī)定執(zhí)行;
8.2.2.7新發(fā)、未知病原體
按照《人間傳染的病原微生物生物名錄》的要求,提取核酸,進(jìn)行全基因組測(cè)序,尋找未知病原。
9統(tǒng)計(jì)
根據(jù)監(jiān)測(cè)及檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析統(tǒng)計(jì),計(jì)算種群構(gòu)成比例、密度,統(tǒng)計(jì)傳染病檢出率及占比情況。見
附錄D、E、F、G。
10報(bào)告
報(bào)告內(nèi)容
根據(jù)監(jiān)測(cè)結(jié)果分析情況,寫出口岸監(jiān)測(cè)總結(jié)報(bào)告,內(nèi)容包括:口岸地區(qū)自然生境概況,地理、氣候、
生境種類;口岸鼠類監(jiān)測(cè)情況;口岸內(nèi)主要鼠類種群類型及種群分布;口岸鼠體攜帶寄生蟲分類;口岸
鼠類攜帶病原體檢測(cè)結(jié)果;新種或新紀(jì)錄來源分析、新種形態(tài)描述;通過對(duì)口岸病媒生物監(jiān)測(cè)情況,進(jìn)
行傳染病傳播風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,指出口岸鼠類防治的重點(diǎn)部位和薄弱環(huán)節(jié),提出口岸鼠類防治的綜合措施。
報(bào)告上報(bào)
檢測(cè)結(jié)果按照上機(jī)主管部門要求及時(shí)上報(bào)。
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A
A
附錄A
(資料性)
口岸鼠類監(jiān)測(cè)現(xiàn)場(chǎng)記錄表
口岸鼠類監(jiān)測(cè)現(xiàn)場(chǎng)記錄表見表A.1。
表A.1口岸鼠類監(jiān)測(cè)現(xiàn)場(chǎng)記錄表
監(jiān)測(cè)方法:監(jiān)測(cè)時(shí)間:年月日—年月日
編號(hào)生境類型監(jiān)測(cè)用器械數(shù)有效器械數(shù)捕獲總數(shù)(只)鼠密度
天氣:風(fēng)速:m/s溫度:℃濕度:%海拔高度米
監(jiān)測(cè)單位:監(jiān)測(cè)人:填報(bào)日期:年月日
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B
B
附錄B
(資料性)
鼠類鑒定檢測(cè)記錄表
鼠類鑒定檢測(cè)記錄表見表B.1。
表B.1鼠類鑒定檢測(cè)記錄表
采集時(shí)間:采集地點(diǎn):
編生種性年齡體體耳右體表寄生蟲病原體檢測(cè)如檢測(cè)
號(hào)境類別重長(zhǎng)高后數(shù)量結(jié)果為
gcmcm足陽性,
成幼長(zhǎng)蜱蚤螨鼠疫漢坦伯氏巴爾應(yīng)注明
cm菌病毒疏螺通體檢測(cè)方
旋體法
7
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C
C
附錄C
(資料性)
新記錄種、新種登記表
新記錄種、新種登記表見表C.1。
表C.1新記錄種、新種登記表
生境及地點(diǎn)日期種名采集方法數(shù)量采集人鑒定人復(fù)核人
科屬種拉丁文
名稱
天氣:風(fēng)速:m/s溫度:℃濕度:%海拔高度米
監(jiān)測(cè)單位:填報(bào)人:填報(bào)日期:年月日
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D
D
附錄D
(資料性)
國(guó)境口岸媒介生物攜帶病原體檢測(cè)結(jié)果
國(guó)境口岸媒介生物攜帶病原體檢測(cè)結(jié)果見表D.1。
表D.1國(guó)境口岸媒介生物攜帶病原體檢測(cè)結(jié)果
媒介類型檢測(cè)項(xiàng)目檢測(cè)方法樣本總量/陽性數(shù)陽性率(%)樣品來源
合計(jì)
監(jiān)測(cè)單位:填報(bào)人:填報(bào)日期:年月日
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E
E
附錄E
(資料性)
國(guó)境口岸鼠類監(jiān)測(cè)及體表寄生蚤調(diào)查結(jié)果
國(guó)境口岸鼠類監(jiān)測(cè)及體表寄生蚤調(diào)查結(jié)果見表E.1。
表E.1國(guó)境口岸鼠類監(jiān)測(cè)及體表寄生蚤調(diào)查結(jié)果
地點(diǎn)布夾數(shù)(次)鼠(只)蚤(匹)蜱(只)
監(jiān)測(cè)單位:填報(bào)人:填報(bào)日期:年月日
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F
F
附錄F
(規(guī)范性)
國(guó)境口岸鼠類、蚤類及蜱類種群構(gòu)成
國(guó)境口岸鼠類、蚤類及蜱類種群構(gòu)成見表F.1。
表F.1國(guó)境口岸鼠類、蚤類及蜱類種群構(gòu)成
鼠種類捕獲數(shù)構(gòu)成比(%)蚤種類捕獲數(shù)構(gòu)成比(%)蜱種類捕獲數(shù)構(gòu)成比(%)
(只)(只)(只)
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