藥企微生物和環(huán)境考試試題(附答案)一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共40分）1.以下哪種微生物是制藥潔凈區(qū)最常見的需氧革蘭氏陽性污染菌？A.大腸桿菌B.金黃色葡萄球菌C.銅綠假單胞菌D.黑曲霉2.非最終滅菌產(chǎn)品暴露環(huán)境的潔凈級(jí)別應(yīng)為：A.A級(jí)B.B級(jí)背景下的A級(jí)C.C級(jí)D.D級(jí)3.用于沉降菌監(jiān)測(cè)的胰酪大豆胨瓊脂（TSA）培養(yǎng)基，在使用前需在30-35℃預(yù)培養(yǎng)的時(shí)間是：A.12小時(shí)B.24小時(shí)C.48小時(shí)D.72小時(shí)4.潔凈區(qū)懸浮粒子監(jiān)測(cè)中，對(duì)于A級(jí)潔凈區(qū)，≥5.0μm粒子的最大允許數(shù)/立方米應(yīng)為：A.20B.100C.2000D.200005.以下哪種消毒方式屬于濕熱滅菌？A.環(huán)氧乙烷滅菌B.干熱滅菌（160℃，2小時(shí)）C.高壓蒸汽滅菌（121℃，15分鐘）D.紫外線消毒6.制藥企業(yè)環(huán)境監(jiān)測(cè)中，浮游菌采樣器的采樣流量通常要求不低于：A.20L/minB.50L/minC.100L/minD.200L/min7.潔凈區(qū)人員手消毒應(yīng)使用的消毒劑濃度，75%乙醇的作用時(shí)間至少為：A.15秒B.30秒C.1分鐘D.2分鐘8.以下哪項(xiàng)不屬于表面微生物監(jiān)測(cè)的采樣方法？A.接觸碟法（RODAC）B.棉簽擦拭法C.沉降菌法D.接觸板法9.制藥用水系統(tǒng)微生物監(jiān)測(cè)中，純化水的細(xì)菌內(nèi)毒素限值為：A.0.25EU/mLB.0.5EU/mLC.1.0EU/mLD.無要求（非注射用水）10.環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)趨勢(shì)分析的周期一般為：A.每月B.每季度C.每半年D.每年11.潔凈區(qū)更衣室的壓差梯度應(yīng)滿足：A.非潔凈區(qū)→氣鎖間→潔凈區(qū)，壓差遞增B.潔凈區(qū)→氣鎖間→非潔凈區(qū)，壓差遞減C.氣鎖間→潔凈區(qū)→非潔凈區(qū)，壓差遞增D.非潔凈區(qū)→潔凈區(qū)→氣鎖間，壓差遞減12.用于微生物檢測(cè)的培養(yǎng)箱，溫度波動(dòng)范圍應(yīng)控制在：A.±0.5℃B.±1℃C.±2℃D.±3℃13.以下哪種微生物是制藥環(huán)境中常見的霉菌？A.枯草芽孢桿菌B.白色念珠菌C.短小芽孢桿菌D.黃曲霉14.潔凈區(qū)墻面與地面的夾角應(yīng)設(shè)計(jì)為：A.直角B.銳角C.鈍角D.圓弧角（R≥30mm）15.環(huán)境監(jiān)測(cè)用培養(yǎng)基的有效期，開封后在2-8℃保存的最長時(shí)間為：A.7天B.14天C.30天D.60天16.以下哪項(xiàng)是A級(jí)潔凈區(qū)的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)項(xiàng)目？A.浮游菌B.沉降菌C.表面微生物D.以上均是17.設(shè)備清潔驗(yàn)證中，微生物殘留的可接受標(biāo)準(zhǔn)通常為：A.≤100CFU/25cm2B.≤50CFU/25cm2C.≤20CFU/25cm2D.≤10CFU/25cm218.潔凈區(qū)溫濕度控制范圍，A級(jí)/B級(jí)區(qū)的相對(duì)濕度一般不超過：A.60%B.65%C.70%D.75%19.環(huán)境監(jiān)測(cè)中，浮游菌采樣點(diǎn)的布置應(yīng)遵循：A.均勻分布原則B.關(guān)鍵區(qū)域加密原則C.隨機(jī)選擇原則D.設(shè)備遮擋區(qū)域優(yōu)先原則20.以下哪種情況不需要進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測(cè)偏差調(diào)查？A.沉降菌結(jié)果超出警戒限B.懸浮粒子結(jié)果達(dá)到行動(dòng)限C.培養(yǎng)基陽性對(duì)照未生長D.采樣人員未按SOP穿戴防護(hù)服二、多項(xiàng)選擇題（每題3分，共30分。每題至少有2個(gè)正確選項(xiàng)，錯(cuò)選、漏選均不得分）1.制藥潔凈區(qū)的微生物污染源包括：A.人員B.設(shè)備C.原輔料D.空調(diào)系統(tǒng)2.以下屬于濕熱滅菌驗(yàn)證參數(shù)的是：A.溫度B.時(shí)間C.F0值D.壓力3.環(huán)境監(jiān)測(cè)中，沉降菌采樣的注意事項(xiàng)包括：A.采樣皿暴露時(shí)間不超過4小時(shí)B.采樣點(diǎn)應(yīng)避開送風(fēng)口直吹C.采樣后需倒置培養(yǎng)D.采樣人員需在采樣點(diǎn)1米外4.潔凈區(qū)壓差監(jiān)控的要求包括：A.相鄰不同級(jí)別區(qū)域壓差≥10PaB.壓差表需定期校準(zhǔn)C.壓差異常時(shí)需立即調(diào)查D.非潔凈區(qū)與外界壓差≥5Pa5.微生物實(shí)驗(yàn)室的基本要求包括：A.與生產(chǎn)區(qū)有效隔離B.空氣潔凈度不低于D級(jí)C.配備生物安全柜D.有獨(dú)立的培養(yǎng)基配制區(qū)域6.以下哪些操作會(huì)導(dǎo)致潔凈區(qū)微生物污染風(fēng)險(xiǎn)增加？A.快速開關(guān)門B.人員頻繁走動(dòng)C.設(shè)備表面未及時(shí)清潔D.使用經(jīng)消毒的容器轉(zhuǎn)移物料7.環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)的趨勢(shì)分析應(yīng)包括：A.微生物種類的變化B.各采樣點(diǎn)數(shù)據(jù)的分布C.不同時(shí)間段的波動(dòng)D.與歷史數(shù)據(jù)的對(duì)比8.設(shè)備清潔驗(yàn)證的微生物指標(biāo)包括：A.需氧菌總數(shù)B.霉菌和酵母菌總數(shù)C.特定指示菌（如金黃色葡萄球菌）D.內(nèi)毒素9.潔凈區(qū)人員衛(wèi)生要求包括：A.進(jìn)入前需進(jìn)行手消毒B.不得佩戴首飾C.頭發(fā)需完全遮蓋D.工作服需每天清洗10.以下屬于環(huán)境監(jiān)測(cè)用儀器的是：A.激光粒子計(jì)數(shù)器B.浮游菌采樣器C.溫濕度監(jiān)測(cè)儀D.風(fēng)速儀三、判斷題（每題1分，共10分。正確填“√”，錯(cuò)誤填“×”）1.潔凈區(qū)A級(jí)區(qū)的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)應(yīng)在生產(chǎn)操作過程中進(jìn)行。（）2.紫外線消毒對(duì)芽孢的殺滅效果優(yōu)于對(duì)繁殖體。（）3.接觸碟法采樣時(shí)，需將接觸碟表面完全按壓在設(shè)備表面，確保無氣泡。（）4.純化水的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)為≤100CFU/mL，注射用水為≤10CFU/100mL。（）5.潔凈區(qū)空調(diào)系統(tǒng)的高效過濾器（HEPA）需每年更換1次。（）6.培養(yǎng)基的靈敏度檢查應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)菌株（如枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌）。（）7.環(huán)境監(jiān)測(cè)中，若某采樣點(diǎn)連續(xù)3次結(jié)果接近行動(dòng)限，需進(jìn)行根本原因分析。（）8.人員手消毒后，可直接接觸已清潔的設(shè)備表面。（）9.潔凈區(qū)墻面應(yīng)使用易清潔、耐化學(xué)腐蝕的材料（如不銹鋼、環(huán)氧樹脂）。（）10.微生物檢測(cè)用培養(yǎng)箱的溫度記錄應(yīng)至少保存至產(chǎn)品有效期后1年。（）四、簡(jiǎn)答題（每題6分，共30分）1.簡(jiǎn)述制藥潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測(cè)的主要指標(biāo)及對(duì)應(yīng)的潔凈級(jí)別（以中國GMP附錄為依據(jù)）。2.請(qǐng)說明浮游菌采樣與沉降菌采樣的區(qū)別（包括原理、采樣設(shè)備、適用場(chǎng)景）。3.列出3種常見的潔凈區(qū)消毒劑及其適用范圍，并說明交替使用消毒劑的目的。4.簡(jiǎn)述環(huán)境監(jiān)測(cè)偏差的處理流程（從發(fā)現(xiàn)偏差到關(guān)閉）。5.設(shè)備清潔驗(yàn)證中，微生物殘留的可接受標(biāo)準(zhǔn)如何制定？需考慮哪些因素？五、案例分析題（每題15分，共30分）案例1：某藥企在進(jìn)行注射劑車間B級(jí)潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測(cè)時(shí)，發(fā)現(xiàn)某關(guān)鍵操作點(diǎn)的沉降菌結(jié)果為15CFU/皿（警戒限為5CFU/皿，行動(dòng)限為10CFU/皿）。請(qǐng)分析可能的原因，并提出糾正與預(yù)防措施（CAPA）。案例2：某企業(yè)在對(duì)C級(jí)潔凈區(qū)空調(diào)系統(tǒng)進(jìn)行維護(hù)后，次日環(huán)境監(jiān)測(cè)顯示懸浮粒子（≥5.0μm）結(jié)果為3500個(gè)/m3（C級(jí)動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn)為≤2000個(gè)/m3）。經(jīng)檢查，高效過濾器外觀無破損，壓差表顯示正常。請(qǐng)分析可能的根本原因，并說明后續(xù)調(diào)查步驟。參考答案一、單項(xiàng)選擇題1.B2.B3.C4.A5.C6.C7.B8.C9.D10.B11.A12.B13.D14.D15.B16.D17.B18.A19.B20.C二、多項(xiàng)選擇題1.ABCD2.ABC3.ABCD4.ABC5.ACD6.ABC7.ABCD8.ABC9.ABC10.ABCD三、判斷題1.√2.×3.√4.×（注射用水為≤10CFU/100mL錯(cuò)誤，應(yīng)為≤10CFU/100mL是無菌檢查用，注射用水微生物限度為≤10CFU/100mL）5.×（更換周期需根據(jù)驗(yàn)證結(jié)果確定）6.√7.√8.×（需戴無菌手套）9.√10.√四、簡(jiǎn)答題1.主要指標(biāo)及對(duì)應(yīng)潔凈級(jí)別（中國GMP附錄）：-懸浮粒子：A級(jí)（靜態(tài)/動(dòng)態(tài)：≥0.5μm≤3520個(gè)/m3，≥5.0μm≤20個(gè)/m3）；B級(jí)（靜態(tài)：同A級(jí)，動(dòng)態(tài)：≥0.5μm≤352000個(gè)/m3，≥5.0μm≤2900個(gè)/m3）；C級(jí)（靜態(tài)：≥0.5μm≤3520000個(gè)/m3，≥5.0μm≤29000個(gè)/m3；動(dòng)態(tài)：≥0.5μm≤3520000個(gè)/m3，≥5.0μm≤29000個(gè)/m3）；D級(jí)（靜態(tài)：≥0.5μm≤35200000個(gè)/m3，≥5.0μm≤290000個(gè)/m3；動(dòng)態(tài)未明確，需符合工藝要求）。-浮游菌：A級(jí)≤1CFU/m3；B級(jí)≤10CFU/m3；C級(jí)≤100CFU/m3；D級(jí)≤500CFU/m3。-沉降菌（90mm培養(yǎng)皿，暴露4小時(shí)）：A級(jí)≤1CFU/皿；B級(jí)≤5CFU/皿；C級(jí)≤50CFU/皿；D級(jí)≤100CFU/皿。-表面微生物（接觸碟法）：A級(jí)≤1CFU/25cm2；B級(jí)≤5CFU/25cm2；C級(jí)≤25CFU/25cm2；D級(jí)≤50CFU/25cm2（或按企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)）。2.浮游菌與沉降菌采樣區(qū)別：-原理：浮游菌通過采樣器主動(dòng)抽取空氣，將微生物捕獲到培養(yǎng)基；沉降菌利用重力作用使空氣中的微生物自然沉降到培養(yǎng)基表面。-采樣設(shè)備：浮游菌使用浮游菌采樣器（如安德森采樣器、狹縫式采樣器）；沉降菌使用普通培養(yǎng)皿。-適用場(chǎng)景：浮游菌適用于動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，尤其是關(guān)鍵操作區(qū)（如A級(jí)區(qū)）；沉降菌適用于靜態(tài)或動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，操作簡(jiǎn)便，常用于日常監(jiān)控。3.常見消毒劑及適用范圍：-75%乙醇：適用于設(shè)備表面、人員手消毒（快速揮發(fā)，無殘留）。-0.1%新潔爾滅（苯扎溴銨）：適用于墻面、地面等非不銹鋼表面（對(duì)革蘭氏陽性菌有效）。-3%過氧化氫：適用于難清潔區(qū)域或需殺芽孢的場(chǎng)景（如無菌隔離器）。交替使用目的：防止微生物對(duì)單一消毒劑產(chǎn)生耐藥性，確保消毒效果的持續(xù)性。4.環(huán)境監(jiān)測(cè)偏差處理流程：-發(fā)現(xiàn)偏差：記錄時(shí)間、地點(diǎn)、監(jiān)測(cè)指標(biāo)、結(jié)果及超標(biāo)倍數(shù)。-初步調(diào)查：確認(rèn)采樣方法、設(shè)備、培養(yǎng)基是否合規(guī)，排除人為操作誤差（如采樣時(shí)間不足、培養(yǎng)條件錯(cuò)誤）。-根本原因分析：通過5Why法或魚骨圖分析，可能原因包括人員操作不規(guī)范、清潔消毒不到位、空調(diào)系統(tǒng)異常、設(shè)備泄漏等。-糾正措施：立即對(duì)超標(biāo)區(qū)域進(jìn)行額外清潔消毒，必要時(shí)暫停生產(chǎn)，對(duì)受影響批次進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。-預(yù)防措施：修訂SOP（如增加采樣頻率、加強(qiáng)人員培訓(xùn)），對(duì)相關(guān)系統(tǒng)（如空調(diào)、清潔流程）進(jìn)行再驗(yàn)證。-關(guān)閉：完成CAPA并驗(yàn)證有效，偏差報(bào)告經(jīng)質(zhì)量部門批準(zhǔn)后關(guān)閉。5.微生物殘留可接受標(biāo)準(zhǔn)制定及考慮因素：-制定依據(jù)：參考行業(yè)指南（如PDATR29）、產(chǎn)品特性（如無菌要求、給藥途徑）、設(shè)備表面積、清潔方法。-考慮因素：①產(chǎn)品微生物限度標(biāo)準(zhǔn)（如無菌產(chǎn)品需更嚴(yán)格）；②設(shè)備材質(zhì)與結(jié)構(gòu)（難清潔部位需降低標(biāo)準(zhǔn)）；③清潔工藝的有效性（如最終淋洗水的微生物水平）；④生產(chǎn)批次間隔（連續(xù)生產(chǎn)需更嚴(yán)格）；⑤歷史數(shù)據(jù)（如以往清潔驗(yàn)證的結(jié)果）。五、案例分析題案例1分析：可能原因：-人員操作：采樣時(shí)人員未規(guī)范穿戴，或在采樣點(diǎn)附近走動(dòng)產(chǎn)生氣流擾動(dòng)；-清潔消毒：該操作點(diǎn)清潔不徹底（如設(shè)備縫隙殘留培養(yǎng)基），或消毒劑失效（如乙醇揮發(fā)導(dǎo)致濃度降低）；-空調(diào)系統(tǒng)：局部送風(fēng)異常（如高效過濾器泄漏），導(dǎo)致微生物無法有效排出；-物料污染：操作過程中使用的原輔料或容器未經(jīng)過有效滅菌。CAPA措施：-立即對(duì)該區(qū)域進(jìn)行表面清潔（使用75%乙醇+0.1%新潔爾滅交替消毒），并重新采樣驗(yàn)證；-檢查人員培訓(xùn)記錄，針對(duì)潔凈區(qū)行為規(guī)范（如減少走動(dòng)、避免手直接接觸表面）進(jìn)行再培訓(xùn)；-對(duì)空調(diào)系統(tǒng)進(jìn)行檢漏測(cè)試（如PAO測(cè)試），確認(rèn)高效過濾器完整性；-延長該點(diǎn)的監(jiān)測(cè)頻率（從每周1次改為每天1次），連續(xù)監(jiān)測(cè)2周，觀察趨勢(shì)；-對(duì)受影響批次的產(chǎn)品進(jìn)行無菌檢查，評(píng)估微生物污染風(fēng)險(xiǎn)，必要時(shí)隔離或返工。案例2分析：可能根本原因：-空調(diào)系統(tǒng)維護(hù)后未充分自凈：維護(hù)過程中打開回風(fēng)管道，導(dǎo)致外界塵埃進(jìn)入系統(tǒng)，自凈時(shí)間不足（C級(jí)區(qū)自凈時(shí)間通常需30分鐘以上）；-人員維護(hù)操作污染：維護(hù)人員未穿戴潔凈服，帶入顆粒物；-新風(fēng)量不足：維護(hù)后風(fēng)門調(diào)節(jié)不當(dāng)，新風(fēng)比降低，導(dǎo)致室內(nèi)顆粒物無法有效置換；-設(shè)備或物料帶入：維護(hù)后未清潔工具，殘留的金屬碎屑或灰塵進(jìn)入潔凈區(qū)。后續(xù)調(diào)查步驟