2025年2月基因工程?？荚囶}含答案一、單選題（共30題，每題1分，共30分）1.題目：下列哪一種酶作用時需要引物？選項A:限制酶選項B:反轉錄酶選項C:DNA連接酶選項D:末端轉移酶2.題目：cDNA是指：選項A:在體外經反轉錄合成的與RNA互補的RNA選項B:在體外經反轉錄合成的與DNA互補的DNA選項C:在體外經反轉錄合成的與DNA互補的RNA選項D:在體外經轉錄合成的與DNA互補的RNA選項E:在體外經反轉錄合成的與RNA互補的DNA3.題目：最常用的篩選轉化細菌是否含重組質粒的方法是：選項A:免疫化學篩選選項B:分子雜交篩選選項C:抗藥性篩選選項D:營養(yǎng)互補篩選選項E:PCR篩選4.題目：經電泳分離后將蛋白質轉移到尼龍膜上的技術是：選項A:Eastern雜交選項B:斑點雜交選項C:Northern雜交選項D:菌落原位雜交5.題目：下列哪個不是Southern印跡的步驟：選項A:DNA與載體連接，選項B:用一個標記的探針與膜雜交選項C:用限制性核酸內切酶消化DNA選項D:DNA片段轉移至硝酸纖維膜上選項E:用凝膠電泳分離DNA片段6.題目：下列四個DNA片段中含有回文結構的是：選項A:GAAACTGGTCAAAG選項B:GAAACTGGAAACTG選項C:GAAACTGCTTTGAC選項D:GAAACTGCAGTTTC7.題目：經電泳分離后將RNA轉移到硝酸纖維素膜上的技術是：選項A:SouthernBlotting選項B:DotBlotting選項C:insituhybridization選項D:WesternBlotting選項E:NorthernBlotting8.題目：S1核酸酶的功能是：選項A:切割單鏈的RNA選項B:以上均正確選項C:切割雙鏈的DNA選項D:切割發(fā)夾環(huán)9.題目：同聚物加尾連接需要：選項A:Klenow大片段選項B:反轉錄酶選項C:TaqDNA聚合酶選項D:Klenow小片段選項E:末端核苷酸轉移酶10.題目：同一種質粒DNA，以三種不同形式存在，電泳時它們的遷移率是：選項A:SCDNA>OCDNA>LDNA選項B:LDNA>OCDNA>SCDNA選項C:SCDNA>LDNA>OCDNA選項D:OCDNA>SCDNA>LDNA11.題目：探針的種類包括：選項A:以上均是選項B:RNA探針選項C:基因組DNA探針選項D:cDNA探針選項E:寡核苷酸探針12.題目：下面哪一種不是產生星號活性的主要原因?選項A:甘油含量過高選項B:反應體系中含有有機溶劑選項C:含有非Mg2＋的二價陽離子選項D:酶切反應時酶濃度過低13.題目：用下列方法進行重組體的篩選，哪種方法說明外源基因進行了表達?選項A:Southem雜交選項B:Northern雜交選項C:Western雜交選項D:菌落原位雜交14.題目：人類基因組計劃的主要研究內容不包括：選項A:序列圖分析選項B:物理圖分析選項C:轉錄圖分析選項D:蛋白質功能分析選項E:遺傳圖分析15.題目：包涵體是一種：選項A:噬菌體或病毒DNA的體外包裝顆粒選項B:受體細胞中難溶于水的蛋白顆粒選項C:大腸桿菌的亞細胞結構選項D:外源基因表達產物的混合物16.題目：下列關于建立cDNA文庫的敘述哪項是錯誤的：選項A:將特定細胞的DNA用限制性核酸內切酶切割后，克隆到噬菌體或質粒中，選項B:從特定組織或細胞中提取mRNA選項C:用逆轉錄酶合成mRNA的對應單股DNA選項D:用DNA聚合酶，以單股DNA為模板合成雙鏈DNA17.題目：DNA的結構對轉化的影響很大，一般說來，轉化效率最高的是：選項A:開口的雙鏈環(huán)狀DNA選項B:完整的線性雙鏈DNA選項C:完整的環(huán)狀雙鏈DNA選項D:單鏈線性DNA18.題目：常用質粒有以下特征：選項A:插入片段的容量比λ噬菌體DNA大選項B:是線性雙鏈DNA選項C:含有抗生素抗性基因選項D:含有同一限制性核酸內切酶的多個切口19.題目：在分子生物學上“重組DNA技術”又稱為：選項A:蛋白質工程選項B:細胞工程選項C:發(fā)酵工程選項D:酶工程選項E:分子克隆技術20.題目：同一種質粒DNA，以三種不同形式存在，電流時它們的遷移率是：選項A:LDNA>OCDNA>SCDNA選項B:SCDNA>LDNA>OCDNA選項C:SCDNA>OCDNA>LDNA選項D:OCDNA>SCDNA>LDNA21.題目：在基因工程中，DNA重組體是指：選項A:不同來源的兩段DNA單鏈的復性選項B:目的基因與載體的連接物選項C:兩個不同的結構基因形成的連接物選項D:不同來源的DNA分子的連接物22.題目：為了使人類有經濟價值的基因在大腸桿菌中高效表達，有時可以采用同步克隆表達受體菌tRNA基因的方法，其機理是：選項A:穩(wěn)定mRNA在核糖體上的定位選項B:啟動mRNA的翻譯選項C:糾正受體菌密碼子的偏愛性選項D:增強基因的轉錄23.題目：用于轉染哺乳類細胞的常用載體是：選項A:逆轉錄病毒RNA選項B:結構基因選項C:噬菌體選項D:質粒選項E:乳糖操縱子24.題目：下列哪種克隆載體對外源DNA的容載量最大?選項A:酵母人工染色體(YAC)選項B:質粒選項C:λ噬菌體選項D:黏粒25.題目：在利用lacZ失活的顯色反應篩選法中，IPTG的作用是：選項A:作為顯色反應的指示劑選項B:誘導宿主的ω肽合成選項C:作為酶的作用底物選項D:誘導宿主的α肽合成26.題目：一般的限制性核酸內切酶II作用的特點不包括：選項A:DNA兩鏈的切點常在同一位點選項B:酶切后產生的DNA片段多半具有粘性末端選項C:DNA兩鏈的切點常不在同一位點選項D:在對稱序列處切開DNA選項E:酶辨認的堿基一般為4-6個27.題目：蛋白質的合成方向為：選項A:N端→C端選項B:以上都不對選項C:從C端→N端選項D:定點雙向進行28.題目：質粒DNA和外源DNA各用兩種限制性內切酶切開，經連接轉化后獲得重組子，下列各組重組子中有可能含有兩種相反基因極性的是：選項A:ApaI/ClaI選項B:HindIII/KpnI選項C:BamHI/BglII選項D:BclI/SmaI29.題目：基因組代表一個細胞或生物的：選項A:整套遺傳信息選項B:可轉錄基因選項C:非轉錄基因選項D:可表達基因選項E:部分遺傳信息30.題目：常用的標記物沒有：選項A:熒光素選項B:生物素選項C:放射性核素選項D:NTP選項E:地高辛二、判斷題（共40題，每題1分，共40分）1.題目：CsCl-EB密度梯度離心法純化SCDNA原理是根據(jù)EB可以較多地插入到SCDNA中，因而沉降速度較快。選項A:正確選項B:錯誤2.題目：包涵體是一種噬菌體或病毒DNA的體外包裝顆粒。選項A:正確選項B:錯誤3.題目：同一種限制性內切酶切割靶DNA，得到的片段兩個末端都是相同的。選項A:正確選項B:錯誤4.題目：已知某一限制性核酸內切酶在一環(huán)狀DNA上有3個切點，因此，用此酶切割該環(huán)狀DNA可以得到3個片段。選項A:正確選項B:錯誤5.題目：穿梭質粒載體是能夠在兩種以上不同宿主細胞中復制的質粒，所用復制起點不同。選項A:正確選項B:錯誤6.題目：cDNA克隆較之基因組克隆最重要的優(yōu)點是它們含有一個基因的完整序列。選項A:正確選項B:錯誤7.題目：限制性圖譜與限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)圖譜的最顯著的區(qū)別在于前者是一個物理圖譜，而后者是一個連鎖圖。選項A:正確選項B:錯誤8.題目：用人工合成的含有所需堿基變化的寡聚核苷酸，可以將特殊突變引入克隆基因。選項A:正確選項B:錯誤9.題目：在各種核酸分子雜交反應中，SouthernBlotting用于檢測RNA、NorthernBlotting用于檢測DNA、WesternBlotting和EasternBlotting均是用于檢測蛋白質。選項A:正確選項B:錯誤10.題目：PCR既能用于擴增天然存在的基因序列，又能重新設計天然基因序列的兩個末端。因此，任意兩個天然存在的基因序列都能快速有效地擴增，且能拼接在一起。選項A:正確選項B:錯誤11.題目：cDNA文庫和基因組文庫相比最大的優(yōu)點是它們含有一個基因的完整序列。選項A:正確選項B:錯誤12.題目：密碼的偏愛性是指不同種屬的生物對簡并密碼具有不同的使用頻率。選項A:正確選項B:錯誤13.題目：用限制性內切核酸酶HaeⅢ分別切割載體DNA和供體DNA后，可用E．ColiDNA連接酶進行連接。選項A:正確選項B:錯誤14.題目：有一些來源不同的限制性核酸內切酶識別的核苷酸靶序列也不同，但產生相同的粘性末端，這類酶稱為同尾酶。選項A:正確選項B:錯誤15.題目：低豐度的mRNA不僅拷貝數(shù)少，而且種類也少。選項A:正確選項B:錯誤16.題目：在自然界中發(fā)現(xiàn)的質粒都是DNA質粒，至今尚未發(fā)現(xiàn)RNA質粒。選項A:正確選項B:錯誤17.題目：限制性內切酶在DNA識別/切割位點的結構能影響酶切效率。一般來說，完全切割質?；虿《綝NA，要比切割線狀DNA需要更多的酶，最高需要20倍。選項A:正確選項B:錯誤18.題目：基因工程中使用的限制性內切核酸酶不僅有內切核酸酶活性，而且有甲基化酶活性。選項A:正確選項B:錯誤19.題目：如果細菌的某種表型特征在UV處理下喪失后不再恢復，這種表型有可能是質粒賦予的。選項A:正確選項B:錯誤20.題目：有些來源不同限制性核酸內切酶識別同樣的核苷酸靶序列，這類酶稱為同尾酶。選項A:正確選項B:錯誤21.題目：人工感受態(tài)和自然感受態(tài)的細胞都能吸收線性和環(huán)狀單鏈DNA。選項A:正確選項B:錯誤22.題目：以RNA為模板，用反轉錄酶可同時產生單鏈和雙鏈cDNA，雙鏈DNA是由自身引物引導合成，但這種自身引物引導的合成效率遠低于外加寡核苷酸引物引導的合成。選項A:正確選項B:錯誤23.題目：克隆載體就是用于表達外源基因而設計的載體。選項A:正確選項B:錯誤24.題目：大量制備克隆基因編碼蛋白產物的常用方法是進行體外轉錄和表達。選項A:正確選項B:錯誤25.題目：具有EcoRⅡ末端的外源片段只能以一個方向插入到EcoRⅡ末端的載體中。選項A:正確選項B:錯誤26.題目：線性DNA片段被導入哺乳動物細胞后，在細胞內酶的作用下，很快相互連接成重復的DNA大片段，并能在隨機位點整合到染色體中。選項A:正確選項B:錯誤27.題目：如果限制性內切酶的識別位點位于DNA分子末端，那么接近末端的程度也影響切割，如HpaⅡ和MboI要求識別序列之前至少有一個堿基對存在才能切割。選項A:正確選項B:錯誤28.題目：轉導就是指噬菌體及其重組子導入受體細胞的過程。選項A:正確選項B:錯誤29.題目：重組體就是摻入或導入外源DNA后獲得了新遺傳標志的細菌細胞或其他受體細胞。選項A:正確選項B:錯誤30.題目：通過差示雜交后制備cDNA文庫使克隆那些只在特定分化細胞中表達基因的機率大為提高。選項A:正確選項B:錯誤31.題目：根據(jù)某一感興趣蛋白質的序列、抗原性以及配基結合性質制備探針，可從DNA文庫中篩選到相應的基因。選項A:正確選項B:錯誤32.題目：T7噬菌體啟動子既能由T7噬菌體的RNA聚合酶識別并啟動轉錄又能用大腸桿菌的RNA聚合酶啟動轉錄。選項A:正確選項B:錯誤33.題目：外源基因（或DNA片段）插入到某一基因內的位點后，這個基因不再有任何功能。選項A:正確選項B:錯誤34.題目：在染色體步移中，可通過DNA測序知道已到達所感興趣的基因。選項A:正確選項B:錯誤35.題目：酚法和堿法分離質粒DNA都要用溶菌酶破壁，但堿法用的溶菌酶的濃度要高。選項A:正確選項B:錯誤36.題目：pBR322可以用于粘性末端連接、平末端連接和同聚物接尾法連接，無論用哪種方法連接，都可以用同一種酶回收外源片段。選項A:正確選項B:錯誤37.題目：溫度敏感突變型是非常有用的，在這些突變型中，可以通過對溫度的改變控制這些突變體中異常表型的出現(xiàn)。選項A:正確選項B:錯誤38.題目：穿梭載體是指能夠在兩種以上的不同宿主細胞中復制的質粒，所用復制起始點不同。選項A:正確選項B:錯誤39.題目：促紅細胞生長素基因能在大腸桿菌中表達，也可以用大腸桿菌的基因工程菌生產人的促紅細胞生長素。選項A:正確選項B:錯誤40.題目：Bal31核酸酶活性依賴Ca2+，在反應混合物中加入EDTA可抑制它的活性。選項A:正確選項B:錯誤答案與解析一、單選題答案1.正確答案：【B】詳解：反轉錄酶以RNA為模板合成DNA時需要引物，此引物通常是一段RNA序列。限制酶識別特定序列并切割DNA，不需要引物；末端轉移酶是在DNA末端添加核苷酸，不需要引物；DNA連接酶連接DNA片段，不需要引物。2.正確答案：【E】詳解：反轉錄是以RNA為模板合成DNA的過程，cDNA就是在體外經反轉錄合成的與RNA互補的DNA。B選項與DNA互補合成的DNA錯誤；C選項轉錄合成的是RNA且與DNA互補錯誤；D選項合成的是DNA不是RNA錯誤；E選項與DNA互補錯誤。3.正確答案：【C】詳解：最常用的篩選轉化細菌是否含重組質粒的方法是抗藥性篩選。一般構建重組質粒時會帶有某種抗生素抗性基因，將重組質粒導入細菌后，在含有該抗生素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，能生長的細菌就可能含有重組質粒，以此來篩選出含重組質粒的細菌。營養(yǎng)互補篩選一般用于特定營養(yǎng)缺陷型菌株等情況；免疫化學篩選常用于檢測蛋白質表達等；PCR篩選和分子雜交篩選也可用于檢測，但不是最常用的篩選含重組質粒細菌的方法。4.正確答案：【A】5.正確答案：【A】詳解：Southern印跡的主要步驟包括：用限制性核酸內切酶消化DNA；用凝膠電泳分離DNA片段；將DNA片段轉移至硝酸纖維膜上；用一個標記的探針與膜雜交等。而DNA與載體連接是基因克隆等過程中的步驟，不是Southern印跡的步驟。6.正確答案：【D】詳解：選項D中，DNA片段為>GAAACTGCAGTTTC，從中間向兩邊看，堿基序列呈對稱分布，即ACTG與CAGT互補，符合回文結構的特點。而選項A、B、C中的序列都不具備這樣的對稱互補特征。7.正確答案：【E】詳解：NorthernBlotting是將經電泳分離后的RNA轉移到硝酸纖維素膜或尼龍膜上的技術，用于檢測特定RNA分子的表達情況等。SouthernBlotting是用于DNA的相關技術；WesternBlotting是用于蛋白質的技術；DotBlotting是一種簡單的將核酸或蛋白質直接點在膜上進行檢測的方法；insituhybridization是原位雜交技術，用于在細胞或組織水平檢測核酸。8.正確答案：【B】詳解：S1核酸酶是一種從米曲霉中分離出來的核酸酶，它可以特異性地降解單鏈DNA或RNA，對雙鏈DNA或RNA不起作用。它能切割雙鏈DNA中的單鏈區(qū)、發(fā)夾環(huán)等單鏈結構。所以它能切割雙鏈的DNA、單鏈的RNA、發(fā)夾環(huán)等，以上均正確。9.正確答案：【E】詳解：同聚物加尾連接是利用末端核苷酸轉移酶在載體和目的基因兩端加上polyA或polyT等同聚物尾巴，然后利用堿基互補配對原則進行連接。其他選項的酶不用于同聚物加尾連接。10.正確答案：【C】詳解：超螺旋DNA（SCDNA）由于其緊密的結構，在電場中移動速度最快；線性DNA（LDNA）次之；開環(huán)DNA（OCDNA）結構較為松散，遷移速度最慢。11.正確答案：【A】詳解：探針的種類包括基因組DNA探針、cDNA探針、寡核苷酸探針、RNA探針等，所以以上選項均正確，答案為E。12.正確答案：【D】詳解：星號活性是指在非理想的反應條件下，限制酶切割產生的非特異性條帶。甘油含量過高、反應體系中含有有機溶劑、含有非Mg2＋的二價陽離子等都可能導致星號活性，而酶切反應時酶濃度過低主要影響酶切效率，一般不會直接導致星號活性。13.正確答案：【C】詳解：Southern雜交用于檢測重組體中是否含有外源基因，不能說明外源基因是否表達；Northern雜交用于檢測RNA，可判斷外源基因轉錄情況，但不能直接說明表達；Western雜交用于檢測蛋白質，若能檢測到相應蛋白質，說明外源基因進行了表達；菌落原位雜交用于篩選含有特定DNA序列的菌落，不能說明外源基因表達。所以答案選C。14.正確答案：【D】詳解：人類基因組計劃的主要內容包括遺傳圖分析、物理圖分析、轉錄圖分析和序列圖分析。蛋白質功能分析不屬于人類基因組計劃的主要研究內容。15.正確答案：【B】詳解：包涵體是外源基因在原核細胞中表達時，常形成的一種由蛋白質組成的、具有一定空間構象的不溶性聚合體，難溶于水，所以答案選A。16.正確答案：【A】詳解：建立cDNA文庫是從特定組織或細胞中提取mRNA（A選項正確），然后用逆轉錄酶合成mRNA的對應單股DNA（C選項正確），再用DNA聚合酶以單股DNA為模板合成雙鏈DNA（D選項正確），而不是將特定細胞的DNA用限制性核酸內切酶切割后克隆到噬菌體或質粒中，B選項錯誤。17.正確答案：【B】18.正確答案：【C】詳解：常用質粒是環(huán)狀雙鏈DNA，A錯誤；λ噬菌體DNA插入片段容量比質粒大，B錯誤；質粒通常含有抗生素抗性基因，可用于篩選含重組質粒的細胞，C正確；質粒一般含有單一限制性核酸內切酶的切口，D錯誤。19.正確答案：【E】詳解：重組DNA技術是指將一種生物體（供體）的基因與載體在體外進行拼接重組，然后轉入另一種生物體（受體）內，使之按照人們的意愿穩(wěn)定遺傳并表達出新產物或新性狀的DNA體外操作程序，也稱為分子克隆技術。酶工程主要是利用酶的催化作用進行物質轉化等；蛋白質工程是對蛋白質進行改造；細胞工程是細胞水平的操作；發(fā)酵工程主要是利用微生物發(fā)酵生產產品等，均與重組DNA技術不同。20.正確答案：【B】21.正確答案：【B】詳解：DNA重組體是指目的基因與載體的連接物?；蚬こ讨?，將目的基因與載體連接，構建成重組DNA分子，這個重組的DNA分子就是DNA重組體。不同來源的兩段DNA單鏈復性不一定形成有功能的重組體；不同來源的DNA分子簡單連接不一定是符合基因工程要求的重組體；兩個不同結構基因隨意連接也不一定是有意義的DNA重組體，只有目的基因與載體正確連接形成的才是用于基因工程操作的DNA重組體。22.正確答案：【C】詳解：在大腸桿菌中，其對密碼子存在偏愛性，這可能導致某些人類基因在其中表達時出現(xiàn)問題。同步克隆表達受體菌tRNA基因，可以補充受體菌中某些稀有tRNA，糾正受體菌密碼子的偏愛性，從而使人類有經濟價值的基因在大腸桿菌中高效表達。A選項增強基因轉錄不是該方法的主要機理；C選項啟動mRNA翻譯不是其目的；D選項穩(wěn)定mRNA在核糖體上的定位也不是采用該方法的原因。23.正確答案：【A】詳解：逆轉錄病毒RNA作為載體可高效地將外源基因導入哺乳類細胞，是用于轉染哺乳類細胞的常用載體之一。質粒也可用于轉染，但不是最常用的；噬菌體主要用于細菌等微生物的基因操作；結構基因是編碼蛋白質或RNA的基因，不是載體；乳糖操縱子是原核生物基因表達調控的一種機制，并非轉染載體。24.正確答案：【A】詳解：酵母人工染色體（YAC）是一種能夠克隆長達幾百kb的外源DNA片段的克隆載體，其對外源DNA的容載量在這些選項中是最大的。質粒一般容載量較??；黏粒的容載量比