非小細胞肺癌BRAFV600E突變免疫組織化學檢測中國專家共識2025我國肺癌發(fā)病率和死亡率高居首位，非小細1.5%～5.5%,BRAFV600E突變占BRAF突變的30%～50%。BRAF突變NSCLC患者預后差，但以達拉非尼與曲美替尼聯(lián)用為代表的靶向治案至關重要。目前推薦的BRAF突變檢測方法包括RT-PCR、Sanger測序和NGS,然而RT-PCR和NGS等分子檢測平臺在我國存在普及率低、中的廣泛應用。免疫組織化學(immunohistochemistry,IHC)可以在蛋白水平檢測BRAFV600E基因突變狀態(tài)，相比于RT-PCR和NGS等分等優(yōu)勢，國內(nèi)外多項研究結果顯示，使用BRAFIHC(VE1單克隆抗體)檢測與分子檢測對比，其靈敏度、特異性和一瘤種的指南、專家共識都推薦IHC可作為篩選BRAF靶向治療潛在獲益中國抗癌協(xié)會腫瘤病理專業(yè)委員會肺癌協(xié)作組及分子病理協(xié)作組結合文獻進展、國內(nèi)多中心研究結果、專家實踐經(jīng)終形成《非小細胞肺癌BRAFV600E突變免疫組織化學檢測中國專家共地篩選出潛在的BRAF靶向治療獲益人群。該共識從BRAFV600E突變讀標準以及質控標準等方面給出以下7條建議。分子檢測作為伴隨診斷可指導BRAFV600E突變轉移性NSCLC的靶向在獲益人群。一項中國研究顯示，達拉菲尼聯(lián)合曲美替尼治療BRAFV600E突變陽性NSCLC患者，ORR為75%,中位PFS和OS未達到。真實世界數(shù)據(jù)顯示，一線該聯(lián)合治療組的中位PFS為25個月，12個月和24個月的PFS率分別為67%和52%。NMPA批準達拉非尼聯(lián)合曲美替尼用于治療BRAFV600E突變的轉移性NSCLC,未同步批準伴隨診斷產(chǎn)品，但已有多個BRAF基因檢測NGS與RT-PCR產(chǎn)品獲NMPA批變與分子檢測一致性高。因此，NCCN皮膚黑色素瘤指南(2023)表示治療指導；NCCNNSCLC指南(2023)指出，IHC檢測BRAFV600E已有一些研究證據(jù)，但開展前需經(jīng)過廣泛的實胞肺癌BRAF突變診療專家共識》指出IHC可作為BRAF突變檢測的補基因檢測，優(yōu)先推薦多基因RT-PCR聯(lián)檢或NGS檢測，對于分子檢測受限或腫瘤細胞含量不足以開展RT-PCR或NGS檢測的病例建議使用IHC補充篩查BRAFV600E突變狀態(tài)，如有其他IHC檢測需求也可同步進行推薦將BRAFIHC加入肺腺癌IHC套餐中進行常規(guī)檢測，肺鱗狀細胞癌及其他NSCLC病例在同時有其他IHC檢測項目需求時可考慮加做BRAFIHC檢測。對于不可切除或晚期NSCLC患者，活檢組織或細胞學蠟塊可能是唯一的分子檢測樣本。對于需要多基因檢測的病例，推薦優(yōu)先選擇多基因RT-PCR聯(lián)檢或NGS。一項單中心研究顯示，在腫瘤細胞含量有限時，BRAFIHC檢測的靈敏度優(yōu)于PCR。因此，對于分子檢測受限或腫鑒于BRAFV600E突變與不良預后相關，建議所有經(jīng)手術切除并病理確推薦將BRAFIHC納入肺腺癌IHC檢測的標準套餐中。對于肺鱗狀細胞推薦使用VENTANAanti-BRAFV600E(VE1)抗體聯(lián)合OptiViewDABIHCDetectionKit進行BRAFIHC檢測，檢測平臺為VENTANA國內(nèi)外研究普遍使用組織學樣本進行BRAFIHC檢測與分子檢測一致性的研究，結果表明BRAFIHC(VE1抗體)檢測與分子檢測的一致性很高，靈敏度在90.5%至100.0%之間，特異性在95.2%至100.0%之間。目前國內(nèi)外尚無BRAFIHC伴隨診斷抗體獲批，已備案抗體中僅1個VE1抗體獲得了NMPA醫(yī)療器械備案(I類);另外有超過40個抗體完成了省級備案。目前國內(nèi)外已經(jīng)發(fā)表的一致性研究中，BRAF推薦NSCLC采用VENTANAanti-BRAFV600E(VE1)抗體進行BRAF特異性彌漫顆粒狀著色，無論著色強度和(或)及黏液著色)均為陰性結果。多項研究顯示，在NSCLC中，使用VE1抗體檢測的BRAFV600E突變通常表現(xiàn)為胞質中的彌漫顆粒狀著色，著色均應視為陽性。陽性細胞比例或著色強度的照組織與待檢組織切片撈至同一張玻片上運行，臨床批量檢測的情況下，式參與BRAFIHC結果報告前接受嚴格的判讀培訓；規(guī)范化報告，建議以避免假陰性結果；其次，檢測中要使用VE1抗體聯(lián)合OptiViewDABIHCDetectionKit試劑及VENTANABenchMark平臺，并設置對照組除以上7條共識建議外，《共識》對BRAFIHC檢測的其他注意事項IHC抗體如VE1能特異性識別V600E突變，與非V600E突變和野生型取樣。H&E:具有肺泡巨噬細胞的腫瘤細胞(箭頭)。VENTANAPD-L1(SP263)檢測：陽性肺泡巨噬細胞染色(箭頭)與相鄰的PD-L1陰性腫瘤細胞，染色百分比為0。判讀結果：PD-L1(SP2VENTANAPD-L1(SP263)檢測：具有5%細胞的腫瘤，以藍色勾勒出膜染色。腫瘤區(qū)域(由活的腫瘤和周圍的結締組織增生和炎癥組成)包含表達PD-L1的免疫細胞區(qū)域。判讀結果：PD-L1(SP263)TC=5%H&E:壞死區(qū)域(藍色箭頭)。VENTANAPD-L1(SP263)檢測：20%的腫瘤細胞表現(xiàn)出膜染色。注意從評分應排除壞死處(藍色箭頭)和著色的《非小細胞肺癌BRAFV600E突變免疫組織化學檢測中國專家共識》的發(fā)布有效填補了BRAFIHC