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文檔簡介
2025年生命科學(xué)技術(shù)師職業(yè)資格考試《生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》備考題庫及答案解析單位所屬部門:________姓名:________考場(chǎng)號(hào):________考生號(hào):________一、選擇題1.在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)時(shí),以下哪一項(xiàng)不是必需的()A.模板DNAB.引物C.DNA聚合酶D.RNA聚合酶答案:D解析:PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是一種在體外擴(kuò)增特定DNA片段的技術(shù),其核心組件包括模板DNA、能夠特異性結(jié)合目標(biāo)序列的引物以及能夠合成新DNA鏈的DNA聚合酶。RNA聚合酶主要用于轉(zhuǎn)錄過程,將DNA模板轉(zhuǎn)錄成RNA,與PCR反應(yīng)無關(guān)。2.電泳技術(shù)中,凝膠電泳的主要原理是什么()A.離子交換B.沉淀反應(yīng)C.電場(chǎng)作用下的物質(zhì)遷移D.超濾作用答案:C解析:凝膠電泳是利用電場(chǎng)作用,使帶電物質(zhì)在凝膠基質(zhì)中按其電荷、大小和形狀進(jìn)行分離的技術(shù)。帶電物質(zhì)在電場(chǎng)中會(huì)向陽極或陰極移動(dòng),移動(dòng)速度受其電荷性質(zhì)、分子大小和凝膠孔徑的影響。3.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,無菌操作的主要目的是什么()A.提高細(xì)胞生長速度B.增加細(xì)胞數(shù)量C.防止微生物污染D.改善細(xì)胞形態(tài)答案:C解析:細(xì)胞培養(yǎng)要求在無菌環(huán)境中進(jìn)行,以防止外源微生物的污染。微生物污染會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,甚至使細(xì)胞培養(yǎng)物完全失效。無菌操作包括使用無菌工具、在超凈工作臺(tái)中操作、定期滅菌培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基等。4.以下哪種方法常用于檢測(cè)蛋白質(zhì)的濃度()A.紫外分光光度法B.薄層色譜法C.氣相色譜法D.離子交換色譜法答案:A解析:紫外分光光度法是檢測(cè)蛋白質(zhì)濃度的常用方法,因?yàn)榈鞍踪|(zhì)分子中含有酪氨酸和色氨酸等氨基酸,這些氨基酸在280nm波長處有強(qiáng)烈的吸收峰。通過測(cè)定蛋白質(zhì)溶液在280nm處的吸光度,可以計(jì)算出蛋白質(zhì)的濃度。5.在酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)中,酶標(biāo)板的作用是什么()A.固定抗體B.結(jié)合抗原C.顯色反應(yīng)D.洗滌溶液答案:A解析:在ELISA實(shí)驗(yàn)中,酶標(biāo)板用于固定抗體或抗原。通常,ELISA的第一步是將抗體包被在酶標(biāo)板的孔中,然后加入待測(cè)樣本,樣本中的抗原與包被的抗體結(jié)合。之后,通過洗滌去除未結(jié)合的樣本成分,最后加入酶標(biāo)二抗進(jìn)行顯色反應(yīng)。6.基因測(cè)序技術(shù)中,Sanger測(cè)序法的基本原理是什么()A.電泳分離B.化學(xué)降解C.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)D.加法測(cè)序答案:B解析:Sanger測(cè)序法(鏈終止法)的基本原理是利用帶有不同熒光標(biāo)記的脫氧核苷酸(dNTPs)的延伸反應(yīng)。在DNA合成過程中,當(dāng)DNA聚合酶延伸到模板鏈的終止子(如NGS)時(shí),延伸會(huì)停止。通過將帶有不同熒光標(biāo)記的終止子摻入到新合成的DNA鏈中,可以得到一系列不同長度的DNA片段。這些片段通過電泳分離,根據(jù)熒光信號(hào)可以確定每個(gè)片段的末端核苷酸,從而推知原始DNA序列。7.在微生物培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)皿的滅菌通常采用什么方法()A.干熱滅菌B.高壓蒸汽滅菌C.紫外線照射D.乙醇消毒答案:B解析:培養(yǎng)皿的滅菌通常采用高壓蒸汽滅菌法。高壓蒸汽滅菌法能夠有效殺滅細(xì)菌、真菌等微生物,確保培養(yǎng)皿在微生物培養(yǎng)過程中的無菌性。干熱滅菌主要用于耐熱物品的滅菌,紫外線照射主要用于表面消毒,乙醇消毒主要用于手部和工具的消毒,但效果不如高壓蒸汽滅菌。8.在蛋白質(zhì)純化過程中,離子交換色譜法的主要分離原理是什么()A.分子大小B.溶解度C.電荷性質(zhì)D.構(gòu)象答案:C解析:離子交換色譜法的主要分離原理是利用蛋白質(zhì)分子與離子交換樹脂之間的電荷相互作用。離子交換樹脂帶有固定電荷,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液通過樹脂時(shí),帶有相反電荷的蛋白質(zhì)會(huì)與樹脂結(jié)合。通過改變緩沖液的pH值或離子強(qiáng)度,可以調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)與樹脂之間的結(jié)合力,從而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的分離。9.在細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)中,常用的染色方法是()A.蘇木精染色B.TUNEL染色C.免疫熒光染色D.Giemsa染色答案:B解析:TUNEL(末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記)染色是檢測(cè)細(xì)胞凋亡常用的方法。細(xì)胞凋亡時(shí),DNA會(huì)發(fā)生斷裂,產(chǎn)生游離的3'羥基末端。TUNEL技術(shù)利用末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶在DNA斷裂處添加熒光標(biāo)記的脫氧核苷酸,從而檢測(cè)到凋亡細(xì)胞。10.在基因工程中,限制性內(nèi)切酶的主要作用是什么()A.合成DNAB.連接DNA片段C.切割DNA分子D.轉(zhuǎn)錄RNA答案:C解析:限制性內(nèi)切酶是一類能夠識(shí)別并切割DNA分子特定位點(diǎn)的酶。它們?cè)诨蚬こ讨兄饕糜谇懈頓NA分子,以便進(jìn)行基因克隆、基因編輯等操作。DNA連接酶用于連接DNA片段,DNA聚合酶用于合成DNA,RNA聚合酶用于轉(zhuǎn)錄RNA。11.在進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡(WesternBlot)實(shí)驗(yàn)時(shí),將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜或PVDF膜后,下一步通常是什么()A.直接進(jìn)行抗體孵育B.用封閉液進(jìn)行封閉C.用高濃度鹽溶液進(jìn)行洗滌D.用甘油溶液進(jìn)行固定答案:B解析:蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜后,膜上的蛋白質(zhì)會(huì)暴露出非特異性結(jié)合位點(diǎn)。如果不進(jìn)行封閉處理,后續(xù)加入的一抗和二抗會(huì)非特異性地吸附到膜上,導(dǎo)致背景過高,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。封閉的目的是用非特異性結(jié)合物(如非免疫性蛋白或小分子化合物)占據(jù)膜上的非特異性位點(diǎn),防止一抗和二抗的非特異性結(jié)合,提高實(shí)驗(yàn)的特異性。12.在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞時(shí),為了提高分辨率,通常使用什么()A.綠色濾光片B.紫外光源C.油鏡D.藍(lán)色濾光片答案:C解析:光學(xué)顯微鏡的分辨率受到光的波長和物鏡數(shù)值孔徑的影響。根據(jù)公式分辨率=(λ/2)(n1),其中λ是光的波長,n是折射率。縮短光的波長和增大數(shù)值孔徑可以提高分辨率。油鏡是一種帶有油介質(zhì)的高數(shù)值孔徑物鏡,通常使用immersionoil(折射率約為1.515),可以顯著增大物鏡的數(shù)值孔徑,從而提高顯微鏡的分辨率,使其能夠觀察到更精細(xì)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。紫外光源雖然波長較短,但會(huì)對(duì)樣品和觀察者造成損害,且普通光學(xué)顯微鏡通常不配備紫外光源。13.在微生物分類中,革蘭氏染色法的主要目的是什么()A.計(jì)算微生物數(shù)量B.觀察微生物運(yùn)動(dòng)性C.區(qū)分不同種類的微生物D.檢測(cè)微生物對(duì)特定物質(zhì)的敏感性答案:C解析:革蘭氏染色法是一種重要的細(xì)菌分類學(xué)染色技術(shù),它可以將細(xì)菌分為兩大類:革蘭氏陽性菌(G+)和革蘭氏陰性菌(G)。這種區(qū)分基于細(xì)菌細(xì)胞壁的成分和結(jié)構(gòu)差異。G+菌細(xì)胞壁較厚,含有大量肽聚糖,能retainingcrystalviolet染色劑,呈現(xiàn)紫色;G菌細(xì)胞壁較薄,肽聚糖層少,外層有脂質(zhì)膜,不能retainingcrystalviolet染色劑,經(jīng)脫色后呈現(xiàn)紅色或粉色。這種染色特性有助于初步識(shí)別和分類細(xì)菌。14.在RNA提取過程中,通常使用什么試劑來裂解細(xì)胞并抑制RNA酶活性()A.氯仿異戊醇混合液B.異硫氰酸胍C.無水乙醇D.氫氧化鈉答案:B解析:RNA提取過程中,需要有效地裂解細(xì)胞,釋放RNA,同時(shí)要防止RNA酶(存在于細(xì)胞和環(huán)境中,對(duì)RNA具有降解作用)對(duì)RNA的降解。異硫氰酸胍是一種強(qiáng)力的蛋白質(zhì)變性劑,可以破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),使蛋白質(zhì)變性失活,從而保護(hù)RNA不被RNA酶降解。氯仿異戊醇混合液主要用于DNA提取中的有機(jī)抽提步驟,無水乙醇用于RNA沉淀,氫氧化鈉是強(qiáng)堿,會(huì)水解RNA結(jié)構(gòu),不適合用于RNA提取。15.在基因芯片(DNAMicroarray)實(shí)驗(yàn)中,通常將什么固定在芯片上()A.RNA分子B.蛋白質(zhì)分子C.DNA探針D.抗體分子答案:C解析:基因芯片技術(shù)是一種高通量檢測(cè)基因表達(dá)或基因序列的技術(shù)。其基本原理是將大量特定的DNA探針(通常是與目標(biāo)基因互補(bǔ)的短DNA片段)固定在固相支持物(如玻璃片或硅片)上,形成一個(gè)微陣列。當(dāng)待測(cè)樣本(如cDNA或RNA)與芯片上的探針雜交時(shí),可以通過檢測(cè)雜交信號(hào)的強(qiáng)度來判斷目標(biāo)基因的表達(dá)水平或存在情況。16.在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中,維持培養(yǎng)液的pH值通常在什么范圍()A.6.07.0B.7.27.4C.8.09.0D.5.06.0答案:B解析:動(dòng)物細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí),其生長和代謝活動(dòng)對(duì)培養(yǎng)液的pH值非常敏感。大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞最適宜的生長pH范圍在7.2到7.4之間。如果pH值過高或過低,都會(huì)影響細(xì)胞的酶活性、物質(zhì)運(yùn)輸和代謝過程,甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡。因此,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,需要通過使用緩沖液和定期監(jiān)測(cè)來維持培養(yǎng)液的pH值在此范圍內(nèi)。17.在進(jìn)行酶活性測(cè)定時(shí),通常使用什么來表示酶促反應(yīng)速率()A.底物濃度B.產(chǎn)物生成量隨時(shí)間的變化率C.酶濃度D.pH值答案:B解析:酶活性是指酶催化特定化學(xué)反應(yīng)的效率。在酶活性測(cè)定中,通常通過測(cè)量單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物生成量或底物消耗量的變化來表示酶促反應(yīng)速率。酶活性越高,表示酶催化反應(yīng)的速度越快,單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物生成的量就越多。底物濃度、酶濃度和pH值是影響酶活性的因素,但不是用來表示酶促反應(yīng)速率的本身。18.在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))實(shí)驗(yàn)中,用于延伸新DNA鏈的酶是什么()A.DNA連接酶B.DNA聚合酶C.限制性內(nèi)切酶D.RNA聚合酶答案:B解析:PCR技術(shù)是利用DNA聚合酶在體外擴(kuò)增特定DNA片段的方法。在PCR的延伸階段,DNA聚合酶以模板DNA為模板,以dNTPs(脫氧核糖核苷酸三磷酸)為原料,在引物(特異性結(jié)合在模板DNA上的短DNA片段)的指引下,合成新的DNA鏈。因此,DNA聚合酶是PCR反應(yīng)中必不可少的酶。19.在制備瓊脂糖凝膠電泳時(shí),常用的瓊脂糖濃度范圍是多少()A.0.5%1.0%B.1.0%2.0%C.2.0%3.0%D.3.0%4.0%答案:B解析:瓊脂糖凝膠電泳是分離核酸片段的常用方法。瓊脂糖的濃度決定了凝膠的孔徑大小,從而影響核酸片段的遷移速度。一般而言,較低濃度的瓊脂糖凝膠(約1.0%2.0%)適用于分離較大片段的核酸(如幾千bp到十幾kb),而較高濃度的瓊脂糖凝膠(如2.0%3.0%或更高)適用于分離較小片段的核酸。因此,1.0%2.0%是制備瓊脂糖凝膠電泳時(shí)常用的濃度范圍。20.在流式細(xì)胞術(shù)(FlowCytometry)中,用于測(cè)量細(xì)胞大小的參數(shù)是什么()A.激光散射光強(qiáng)度(FSC)B.激光散射光角度(SSC)C.熒光強(qiáng)度D.細(xì)胞通透性答案:A解析:流式細(xì)胞術(shù)通過測(cè)量細(xì)胞流經(jīng)激光束時(shí)產(chǎn)生的散射光和熒光信號(hào)來分析細(xì)胞的各種特性。其中,前向散射光(ForwardScatter,FSC)主要反映了細(xì)胞的大小和顆粒性。細(xì)胞越大,散射光強(qiáng)度越大,因此FSC信號(hào)強(qiáng)度可以用來反映細(xì)胞的大小。側(cè)向散射光(SideScatter,SSC)主要反映了細(xì)胞內(nèi)部顆粒的復(fù)雜性和細(xì)胞質(zhì)的復(fù)雜性。熒光強(qiáng)度則反映了細(xì)胞所表達(dá)或攝取的熒光標(biāo)記分子的數(shù)量。二、多選題1.下列哪些是影響酶活性的因素()A.溫度B.pH值C.底物濃度D.酶濃度E.抑制劑答案:ABE解析:酶活性受到多種因素的影響。溫度會(huì)影響酶與底物的碰撞頻率和酶促反應(yīng)的速率,但過高或過低的溫度都會(huì)使酶變性失活。pH值會(huì)影響酶分子和底物的電荷狀態(tài),從而影響酶的構(gòu)象和活性位點(diǎn)與底物的結(jié)合。底物濃度會(huì)影響反應(yīng)速率,遵循米氏方程的動(dòng)力學(xué)關(guān)系。抑制劑通過非共價(jià)鍵與酶或底物結(jié)合,降低酶的活性。酶濃度直接影響反應(yīng)速率。而反應(yīng)體系中的緩沖液種類和濃度雖然間接影響pH,但題目問的是影響因素本身,pH是其中一個(gè)直接因素。因此,溫度、pH值和抑制劑都是直接影響酶活性的因素。2.在蛋白質(zhì)印跡(WesternBlot)實(shí)驗(yàn)中,通常包括哪些關(guān)鍵步驟()A.蛋白質(zhì)樣品的制備與變性B.蛋白質(zhì)樣品的SDSPAGE電泳分離C.蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)膜D.一抗和二抗的孵育E.熒光或化學(xué)發(fā)光檢測(cè)答案:ABCDE解析:WesternBlot是一種用于檢測(cè)特定蛋白質(zhì)的技術(shù),其流程包括多個(gè)關(guān)鍵步驟。首先需要制備蛋白質(zhì)樣品并進(jìn)行變性處理,以使蛋白質(zhì)線性化并易于電泳分離(A)。然后,將蛋白質(zhì)樣品通過SDSPAGE(十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳)進(jìn)行分離,根據(jù)蛋白質(zhì)分子量的大小進(jìn)行區(qū)分(B)。將電泳分離后的蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物(如硝酸纖維素膜或PVDF膜)上,這個(gè)過程稱為轉(zhuǎn)膜(C),目的是將蛋白質(zhì)固定在膜上,便于后續(xù)的抗體結(jié)合。接下來,用特異性的一抗(能與目標(biāo)蛋白結(jié)合的抗體)進(jìn)行孵育,使一抗與目標(biāo)蛋白結(jié)合(D)。然后,清洗膜以去除未結(jié)合的一抗,再使用帶有標(biāo)記(如酶或熒光染料)的二抗進(jìn)行孵育,二抗能與結(jié)合在一抗上的目標(biāo)蛋白結(jié)合(D)。最后,通過洗脫或顯色反應(yīng)(E),檢測(cè)目標(biāo)蛋白的位置和相對(duì)含量。因此,所有選項(xiàng)都是WesternBlot實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵步驟。3.下列哪些屬于微生物常用的培養(yǎng)方法()A.平板培養(yǎng)B.斜面培養(yǎng)C.液體培養(yǎng)D.理論培養(yǎng)E.固體培養(yǎng)答案:ABC解析:微生物培養(yǎng)是指提供適宜的營養(yǎng)基質(zhì)和環(huán)境條件,使微生物生長繁殖的技術(shù)。根據(jù)培養(yǎng)物的物理狀態(tài),常用的培養(yǎng)方法主要有三種。平板培養(yǎng)是將微生物接種在固體培養(yǎng)基(如瓊脂固體化的培養(yǎng)基)上,形成單個(gè)菌落,適用于菌種分離、計(jì)數(shù)和鑒定等(A)。斜面培養(yǎng)是將微生物接種在傾斜的固體培養(yǎng)基上,形成一條連續(xù)的菌苔,適用于菌種的保藏和少量接種(B)。液體培養(yǎng)是將微生物接種在液體培養(yǎng)基中,微生物在液體中均勻分散生長,適用于大規(guī)模生產(chǎn)代謝產(chǎn)物或研究微生物生理代謝(C)。理論培養(yǎng)和固體培養(yǎng)不是微生物培養(yǎng)的實(shí)際操作方法。因此,平板培養(yǎng)、斜面培養(yǎng)和液體培養(yǎng)是微生物常用的培養(yǎng)方法。4.在分子克隆中,構(gòu)建基因表達(dá)載體通常需要包含哪些元件()A.目的基因B.啟動(dòng)子C.標(biāo)記基因D.多克隆位點(diǎn)E.終止子答案:ABCDE解析:基因表達(dá)載體是用于在宿主細(xì)胞中表達(dá)外源基因的載體分子,通常是質(zhì)粒。一個(gè)功能完善的基因表達(dá)載體通常需要包含以下元件:首先,需要插入外源的目的基因(A),這是要表達(dá)的基因。其次,需要包含一個(gè)啟動(dòng)子(B),它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn),控制基因的轉(zhuǎn)錄起始。接著,通常包含一個(gè)標(biāo)記基因(C),如抗性基因(如氨芐青霉素抗性基因),用于篩選成功導(dǎo)入了表達(dá)載體的宿主細(xì)胞。多克隆位點(diǎn)(MultipleCloningSite,MCS)或稱克隆位點(diǎn),是一段含有多個(gè)限制性內(nèi)切酶識(shí)別和切割位點(diǎn)的序列,位于啟動(dòng)子和標(biāo)記基因之間,方便目的基因的插入(D)。最后,需要包含一個(gè)終止子(E),它是轉(zhuǎn)錄終止信號(hào),確?;蜣D(zhuǎn)錄的準(zhǔn)確終止。這些元件協(xié)同工作,確保目的基因能夠在宿主細(xì)胞中被正確轉(zhuǎn)錄和翻譯。5.下列哪些是常用的蛋白質(zhì)純化方法()A.離子交換色譜B.凝膠過濾色譜C.凝膠電泳D.抗體親和層析E.差示沉降答案:ABDE解析:蛋白質(zhì)純化是從混合物中分離和提純特定蛋白質(zhì)的過程,常用的純化方法基于蛋白質(zhì)的不同物理或化學(xué)性質(zhì)。離子交換色譜(A)利用蛋白質(zhì)與離子交換樹脂之間的電荷相互作用進(jìn)行分離。凝膠過濾色譜(B)又稱大小排阻色譜,利用蛋白質(zhì)分子大小不同來分離蛋白質(zhì)。抗體親和層析(D)利用蛋白質(zhì)與特異性抗體之間的結(jié)合進(jìn)行分離,常用于純化抗體或表達(dá)宿主細(xì)胞蛋白。差示沉降(E)利用不同蛋白質(zhì)在特定鹽濃度下的溶解度差異進(jìn)行沉淀分離。凝膠電泳(C)主要用于蛋白質(zhì)的分離、鑒定和檢測(cè),而不是用于大規(guī)模的蛋白質(zhì)純化。因此,離子交換色譜、凝膠過濾色譜、抗體親和層析和差示沉降是常用的蛋白質(zhì)純化方法。6.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,保證細(xì)胞培養(yǎng)無菌的重要性體現(xiàn)在哪些方面()A.防止雜菌污染影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果B.保證細(xì)胞的正常生長和傳代C.避免細(xì)胞產(chǎn)生毒性代謝物D.確保細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品的安全性E.節(jié)約培養(yǎng)基和血清等成本答案:ABCD解析:在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,保證無菌環(huán)境至關(guān)重要。首先,雜菌污染會(huì)與細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)營養(yǎng)物質(zhì),產(chǎn)生毒性代謝物,分泌酶類分解細(xì)胞,甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡,嚴(yán)重影響甚至破壞實(shí)驗(yàn)結(jié)果(A,C)。其次,污染會(huì)干擾細(xì)胞的正常生長和代謝,導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)異常,難以進(jìn)行正常的傳代和實(shí)驗(yàn)操作(B)。對(duì)于需要用于生產(chǎn)細(xì)胞治療產(chǎn)品、疫苗或其他生物制品的應(yīng)用,無菌保證是確保產(chǎn)品安全性和有效性的基本要求,防止患者感染(D)。雖然無菌操作會(huì)增加某些成本(如使用一次性耗材),但其主要目的并非節(jié)約成本,而是保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和產(chǎn)品的安全性。因此,防止雜菌污染、保證細(xì)胞正常生長傳代、避免產(chǎn)生毒性代謝物以及確保培養(yǎng)產(chǎn)品安全性都是保證細(xì)胞培養(yǎng)無菌的重要體現(xiàn)。7.DNA測(cè)序技術(shù)經(jīng)歷了哪些主要發(fā)展階段()A.化學(xué)降解法B.鏈終止法(Sanger法)C.熒光檢測(cè)法D.大規(guī)模平行測(cè)序法(如下一代測(cè)序)E.毛細(xì)管電泳法答案:ABD解析:DNA測(cè)序技術(shù)的發(fā)展經(jīng)歷了多個(gè)階段。早期主要是化學(xué)降解法,通過化學(xué)方法逐步降解DNA鏈,并根據(jù)降解產(chǎn)物推斷序列(A)。1977年,Sanger等人發(fā)明了鏈終止法(B),通過摻入帶有不同熒光標(biāo)記的鏈終止核苷酸,合成一系列不同長度的DNA片段,然后通過凝膠電泳分離,根據(jù)熒光信號(hào)讀取序列。隨著技術(shù)的發(fā)展,引入了熒光標(biāo)記和自動(dòng)測(cè)序儀,形成了熒光檢測(cè)法(C),提高了測(cè)序效率和準(zhǔn)確性,通常與Sanger法結(jié)合使用。近年來,隨著生物信息學(xué)和微加工技術(shù)的發(fā)展,出現(xiàn)了大規(guī)模平行測(cè)序技術(shù),也稱為下一代測(cè)序(NextGenerationSequencing,NGS),能夠同時(shí)測(cè)序數(shù)百萬甚至數(shù)十億條短片段DNA序列(D),徹底改變了基因組學(xué)的研究格局。毛細(xì)管電泳法(E)主要用于分離和檢測(cè)小分子物質(zhì),包括測(cè)序反應(yīng)產(chǎn)生的片段,但它本身不是測(cè)序方法的類型。因此,化學(xué)降解法、鏈終止法和大規(guī)模平行測(cè)序法是DNA測(cè)序技術(shù)的主要發(fā)展階段。8.在RNA提取過程中,為防止RNA降解,通常采取哪些措施()A.使用RNA酶抑制劑B.加熱樣品C.采用低溫操作D.使用無RNA酶的試劑和耗材E.快速完成操作答案:ACDE解析:RNA分子比DNA分子更容易被降解,主要是由于環(huán)境中廣泛存在RNA酶(Ribonuclease)。為了有效提取高質(zhì)量的RNA,必須采取措施防止RNA降解。首先,必須使用RNA酶抑制劑(如RNaseOut或熱穩(wěn)定的RNase抑制劑)來滅活或抑制樣品和環(huán)境中的RNA酶活性(A)。其次,操作過程中應(yīng)盡量采用低溫條件(如使用冰浴、低溫離心機(jī)等),因?yàn)榈蜏乜梢越档蚏NA酶的活性(C)。所有用于RNA提取的試劑、耗材(如離心管、吸頭、移液器等)都必須經(jīng)過嚴(yán)格的無RNA酶處理或使用無RNA酶產(chǎn)品(D)。此外,整個(gè)RNA提取過程應(yīng)快速、熟練地進(jìn)行,減少RNA暴露在空氣中的時(shí)間(E)。加熱樣品(B)會(huì)破壞RNA的結(jié)構(gòu),并可能使RNA變性,不利于提取,反而會(huì)加速降解,因此是錯(cuò)誤的做法。因此,使用RNA酶抑制劑、采用低溫操作、使用無RNA酶試劑耗材和快速完成操作都是為了防止RNA降解而采取的重要措施。9.下列哪些是常用的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路()A.促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路B.磷脂酰肌醇信號(hào)通路C.神經(jīng)遞質(zhì)受體信號(hào)通路D.細(xì)胞周期調(diào)控通路E.離子通道信號(hào)通路答案:ABCE解析:細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是細(xì)胞接收、傳遞和響應(yīng)內(nèi)外環(huán)境信號(hào)的分子機(jī)制網(wǎng)絡(luò)。常用的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路包括:促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路(A),廣泛參與細(xì)胞增殖、分化、凋亡等過程;磷脂酰肌醇信號(hào)通路(B),由細(xì)胞膜上的磷脂酰肌醇代謝引發(fā),涉及多種細(xì)胞功能;神經(jīng)遞質(zhì)受體信號(hào)通路(C),神經(jīng)遞質(zhì)與受體結(jié)合后激活的信號(hào)傳遞過程;細(xì)胞周期調(diào)控通路(D),控制細(xì)胞從間期進(jìn)入分裂期的過程;離子通道信號(hào)通路(E),離子通道的開閉導(dǎo)致細(xì)胞膜電位變化,傳遞信號(hào)。這五項(xiàng)都屬于細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的范疇,但題目要求選出常用的,這四條都是生物學(xué)研究和教學(xué)中非常重要且常用的經(jīng)典信號(hào)通路。因此,ABCE是正確答案。10.在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞時(shí),為了觀察到更精細(xì)的結(jié)構(gòu),可以采取哪些措施()A.使用油鏡B.增加光源亮度C.使用高數(shù)值孔徑物鏡D.使用紫外光源E.提高顯微鏡的放大倍數(shù)答案:AC解析:光學(xué)顯微鏡的分辨率(即能分辨的兩個(gè)點(diǎn)之間的最小距離)受到光的波長和物鏡數(shù)值孔徑(NA)的限制,分辨率大約與(λ/2)(n1)成正比,其中λ是光的波長,n是物鏡與蓋玻片之間的折射率。要提高分辨率,即觀察到更精細(xì)的結(jié)構(gòu),可以采取以下措施:使用油鏡(A),油鏡的數(shù)值孔徑遠(yuǎn)高于干鏡,通常使用油(折射率約為1.515)填充物鏡與蓋玻片之間,大大增加了有效數(shù)值孔徑,從而顯著提高分辨率。使用高數(shù)值孔徑(高NA)物鏡(C),數(shù)值孔徑越高,分辨率越高。增加光源亮度(B)主要影響對(duì)比度,對(duì)分辨率影響不大。使用紫外光源(D)雖然波長更短,可以提高分辨率,但普通光學(xué)顯微鏡通常不使用紫外光源,且紫外光對(duì)樣品和觀察者有害。提高顯微鏡的放大倍數(shù)(E)只是放大了圖像,并不能提高分辨率,如果物鏡分辨率不足,高倍率只會(huì)使模糊的圖像變得更模糊。因此,使用油鏡和使用高數(shù)值孔徑物鏡是提高光學(xué)顯微鏡分辨率以觀察更精細(xì)結(jié)構(gòu)的主要措施。11.下列哪些屬于影響酶活性的因素()A.溫度B.pH值C.底物濃度D.酶濃度E.抑制劑答案:ABE解析:酶活性受到多種因素的影響。溫度會(huì)影響酶與底物的碰撞頻率和酶促反應(yīng)的速率,但過高或過低的溫度都會(huì)使酶變性失活。pH值會(huì)影響酶分子和底物的電荷狀態(tài),從而影響酶的構(gòu)象和活性位點(diǎn)與底物的結(jié)合。底物濃度會(huì)影響反應(yīng)速率,遵循米氏方程的動(dòng)力學(xué)關(guān)系。抑制劑通過非共價(jià)鍵與酶或底物結(jié)合,降低酶的活性。酶濃度直接影響反應(yīng)速率。而反應(yīng)體系中的緩沖液種類和濃度雖然間接影響pH,但題目問的是影響因素本身,pH是其中一個(gè)直接因素。因此,溫度、pH值和抑制劑都是直接影響酶活性的因素。12.在蛋白質(zhì)印跡(WesternBlot)實(shí)驗(yàn)中,通常包括哪些關(guān)鍵步驟()A.蛋白質(zhì)樣品的制備與變性B.蛋白質(zhì)樣品的SDSPAGE電泳分離C.蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)膜D.一抗和二抗的孵育E.熒光或化學(xué)發(fā)光檢測(cè)答案:ABCDE解析:WesternBlot是一種用于檢測(cè)特定蛋白質(zhì)的技術(shù),其流程包括多個(gè)關(guān)鍵步驟。首先需要制備蛋白質(zhì)樣品并進(jìn)行變性處理,以使蛋白質(zhì)線性化并易于電泳分離(A)。然后,將蛋白質(zhì)樣品通過SDSPAGE(十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳)進(jìn)行分離,根據(jù)蛋白質(zhì)分子量的大小進(jìn)行區(qū)分(B)。將電泳分離后的蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物(如硝酸纖維素膜或PVDF膜)上,這個(gè)過程稱為轉(zhuǎn)膜(C),目的是將蛋白質(zhì)固定在膜上,便于后續(xù)的抗體結(jié)合。接下來,用特異性的一抗(能與目標(biāo)蛋白結(jié)合的抗體)進(jìn)行孵育,使一抗與目標(biāo)蛋白結(jié)合(D)。然后,清洗膜以去除未結(jié)合的一抗,再使用帶有標(biāo)記(如酶或熒光染料)的二抗進(jìn)行孵育,二抗能與結(jié)合在一抗上的目標(biāo)蛋白結(jié)合(D)。最后,通過洗脫或顯色反應(yīng)(E),檢測(cè)目標(biāo)蛋白的位置和相對(duì)含量。因此,所有選項(xiàng)都是WesternBlot實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵步驟。13.下列哪些屬于微生物常用的培養(yǎng)方法()A.平板培養(yǎng)B.斜面培養(yǎng)C.液體培養(yǎng)D.理論培養(yǎng)E.固體培養(yǎng)答案:ABC解析:微生物培養(yǎng)是指提供適宜的營養(yǎng)基質(zhì)和環(huán)境條件,使微生物生長繁殖的技術(shù)。根據(jù)培養(yǎng)物的物理狀態(tài),常用的培養(yǎng)方法主要有三種。平板培養(yǎng)是將微生物接種在固體培養(yǎng)基(如瓊脂固體化的培養(yǎng)基)上,形成單個(gè)菌落,適用于菌種分離、計(jì)數(shù)和鑒定等(A)。斜面培養(yǎng)是將微生物接種在傾斜的固體培養(yǎng)基上,形成一條連續(xù)的菌苔,適用于菌種的保藏和少量接種(B)。液體培養(yǎng)是將微生物接種在液體培養(yǎng)基中,微生物在液體中均勻分散生長,適用于大規(guī)模生產(chǎn)代謝產(chǎn)物或研究微生物生理代謝(C)。理論培養(yǎng)和固體培養(yǎng)不是微生物培養(yǎng)的實(shí)際操作方法。因此,平板培養(yǎng)、斜面培養(yǎng)和液體培養(yǎng)是微生物常用的培養(yǎng)方法。14.在分子克隆中,構(gòu)建基因表達(dá)載體通常需要包含哪些元件()A.目的基因B.啟動(dòng)子C.標(biāo)記基因D.多克隆位點(diǎn)E.終止子答案:ABCDE解析:基因表達(dá)載體是用于在宿主細(xì)胞中表達(dá)外源基因的載體分子,通常是質(zhì)粒。一個(gè)功能完善的基因表達(dá)載體通常需要包含以下元件:首先,需要插入外源的目的基因(A),這是要表達(dá)的基因。其次,需要包含一個(gè)啟動(dòng)子(B),它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn),控制基因的轉(zhuǎn)錄起始。接著,通常包含一個(gè)標(biāo)記基因(C),如抗性基因(如氨芐青霉素抗性基因),用于篩選成功導(dǎo)入了表達(dá)載體的宿主細(xì)胞。多克隆位點(diǎn)(MultipleCloningSite,MCS)或稱克隆位點(diǎn),是一段含有多個(gè)限制性內(nèi)切酶識(shí)別和切割位點(diǎn)的序列,位于啟動(dòng)子和標(biāo)記基因之間,方便目的基因的插入(D)。最后,需要包含一個(gè)終止子(E),它是轉(zhuǎn)錄終止信號(hào),確?;蜣D(zhuǎn)錄的準(zhǔn)確終止。這些元件協(xié)同工作,確保目的基因能夠在宿主細(xì)胞中被正確轉(zhuǎn)錄和翻譯。15.下列哪些是常用的蛋白質(zhì)純化方法()A.離子交換色譜B.凝膠過濾色譜C.凝膠電泳D.抗體親和層析E.差示沉降答案:ABDE解析:蛋白質(zhì)純化是從混合物中分離和提純特定蛋白質(zhì)的過程,常用的純化方法基于蛋白質(zhì)的不同物理或化學(xué)性質(zhì)。離子交換色譜(A)利用蛋白質(zhì)與離子交換樹脂之間的電荷相互作用進(jìn)行分離。凝膠過濾色譜(B)又稱大小排阻色譜,利用蛋白質(zhì)分子大小不同來分離蛋白質(zhì)。抗體親和層析(D)利用蛋白質(zhì)與特異性抗體之間的結(jié)合進(jìn)行分離,常用于純化抗體或表達(dá)宿主細(xì)胞蛋白。差示沉降(E)利用不同蛋白質(zhì)在特定鹽濃度下的溶解度差異進(jìn)行沉淀分離。凝膠電泳(C)主要用于蛋白質(zhì)的分離、鑒定和檢測(cè),而不是用于大規(guī)模的蛋白質(zhì)純化。因此,離子交換色譜、凝膠過濾色譜、抗體親和層析和差示沉降是常用的蛋白質(zhì)純化方法。16.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,保證細(xì)胞培養(yǎng)無菌的重要性體現(xiàn)在哪些方面()A.防止雜菌污染影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果B.保證細(xì)胞的正常生長和傳代C.避免細(xì)胞產(chǎn)生毒性代謝物D.確保細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品的安全性E.節(jié)約培養(yǎng)基和血清等成本答案:ABCD解析:在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,保證無菌環(huán)境至關(guān)重要。首先,雜菌污染會(huì)與細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)營養(yǎng)物質(zhì),產(chǎn)生毒性代謝物,分泌酶類分解細(xì)胞,甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡,嚴(yán)重影響甚至破壞實(shí)驗(yàn)結(jié)果(A,C)。其次,污染會(huì)干擾細(xì)胞的正常生長和代謝,導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)異常,難以進(jìn)行正常的傳代和實(shí)驗(yàn)操作(B)。對(duì)于需要用于生產(chǎn)細(xì)胞治療產(chǎn)品、疫苗或其他生物制品的應(yīng)用,無菌保證是確保產(chǎn)品安全性和有效性的基本要求,防止患者感染(D)。雖然無菌操作會(huì)增加某些成本,如使用一次性耗材,但其主要目的并非節(jié)約成本,而是保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和產(chǎn)品的安全性。因此,防止雜菌污染、保證細(xì)胞正常生長傳代、避免產(chǎn)生毒性代謝物以及確保培養(yǎng)產(chǎn)品安全性都是保證細(xì)胞培養(yǎng)無菌的重要體現(xiàn)。17.DNA測(cè)序技術(shù)經(jīng)歷了哪些主要發(fā)展階段()A.化學(xué)降解法B.鏈終止法(Sanger法)C.熒光檢測(cè)法D.大規(guī)模平行測(cè)序法(如下一代測(cè)序)E.毛細(xì)管電泳法答案:ABD解析:DNA測(cè)序技術(shù)的發(fā)展經(jīng)歷了多個(gè)階段。早期主要是化學(xué)降解法,通過化學(xué)方法逐步降解DNA鏈,并根據(jù)降解產(chǎn)物推斷序列(A)。1977年,Sanger等人發(fā)明了鏈終止法(B),通過摻入帶有不同熒光標(biāo)記的鏈終止核苷酸,合成一系列不同長度的DNA片段,然后通過凝膠電泳分離,根據(jù)熒光信號(hào)讀取序列。隨著技術(shù)的發(fā)展,引入了熒光標(biāo)記和自動(dòng)測(cè)序儀,形成了熒光檢測(cè)法(C),提高了測(cè)序效率和準(zhǔn)確性,通常與Sanger法結(jié)合使用。近年來,隨著生物信息學(xué)和微加工技術(shù)的發(fā)展,出現(xiàn)了大規(guī)模平行測(cè)序技術(shù),也稱為下一代測(cè)序(NextGenerationSequencing,NGS),能夠同時(shí)測(cè)序數(shù)百萬甚至數(shù)十億條短片段DNA序列(D),徹底改變了基因組學(xué)的研究格局。毛細(xì)管電泳法(E)主要用于分離和檢測(cè)小分子物質(zhì),包括測(cè)序反應(yīng)產(chǎn)生的片段,但它本身不是測(cè)序方法的類型。因此,化學(xué)降解法、鏈終止法和大規(guī)模平行測(cè)序法是DNA測(cè)序技術(shù)的主要發(fā)展階段。18.在RNA提取過程中,為防止RNA降解,通常采取哪些措施()A.使用RNA酶抑制劑B.加熱樣品C.采用低溫操作D.使用無RNA酶的試劑和耗材E.快速完成操作答案:ACDE解析:RNA分子比DNA分子更容易被降解,主要是由于環(huán)境中廣泛存在RNA酶(Ribonuclease)。為了有效提取高質(zhì)量的RNA,必須采取措施防止RNA降解。首先,必須使用RNA酶抑制劑(如RNaseOut或熱穩(wěn)定的RNase抑制劑)來滅活或抑制樣品和環(huán)境中的RNA酶活性(A)。其次,操作過程中應(yīng)盡量采用低溫條件(如使用冰浴、低溫離心機(jī)等),因?yàn)榈蜏乜梢越档蚏NA酶的活性(C)。所有用于RNA提取的試劑、耗材(如離心管、吸頭、移液器等)都必須經(jīng)過嚴(yán)格的無RNA酶處理或使用無RNA酶產(chǎn)品(D)。此外,整個(gè)RNA提取過程應(yīng)快速、熟練地進(jìn)行,減少RNA暴露在空氣中的時(shí)間(E)。加熱樣品(B)會(huì)破壞RNA的結(jié)構(gòu),并可能使RNA變性,不利于提取,反而會(huì)加速降解,因此是錯(cuò)誤的做法。因此,使用RNA酶抑制劑、采用低溫操作、使用無RNA酶試劑耗材和快速完成操作都是為了防止RNA降解而采取的重要措施。19.下列哪些是常用的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路()A.促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路B.磷脂酰肌醇信號(hào)通路C.神經(jīng)遞質(zhì)受體信號(hào)通路D.細(xì)胞周期調(diào)控通路E.離子通道信號(hào)通路答案:ABCE解析:細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是細(xì)胞接收、傳遞和響應(yīng)內(nèi)外環(huán)境信號(hào)的分子機(jī)制網(wǎng)絡(luò)。常用的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路包括:促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路(A),廣泛參與細(xì)胞增殖、分化、凋亡等過程;磷脂酰肌醇信號(hào)通路(B),由細(xì)胞膜上的磷脂酰肌醇代謝引發(fā),涉及多種細(xì)胞功能;神經(jīng)遞質(zhì)受體信號(hào)通路(C),神經(jīng)遞質(zhì)與受體結(jié)合后激活的信號(hào)傳遞過程;細(xì)胞周期調(diào)控通路(D),控制細(xì)胞從間期進(jìn)入分裂期的過程;離子通道信號(hào)通路(E),離子通道的開閉導(dǎo)致細(xì)胞膜電位變化,傳遞信號(hào)。這五項(xiàng)都屬于細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的范疇,但題目要求選出常用的,這四條都是生物學(xué)研究和教學(xué)中非常重要且常用的經(jīng)典信號(hào)通路。因此,ABCE是正確答案。20.在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞時(shí),為了觀察到更精細(xì)的結(jié)構(gòu),可以采取哪些措施()A.使用油鏡B.增加光源亮度C.使用高數(shù)值孔徑物鏡D.使用紫外光源E.提高顯微鏡的放大倍數(shù)答案:AC解析:光學(xué)顯微鏡的分辨率(即能分辨的兩個(gè)點(diǎn)之間的最小距離)受到光的波長和物鏡數(shù)值孔徑(NA)的限制,分辨率大約與(λ/2)(n1)成正比,其中λ是光的波長,n是物鏡與蓋玻片之間的折射率。要提高分辨率,即觀察到更精細(xì)的結(jié)構(gòu),可以采取以下措施:使用油鏡(A),油鏡的數(shù)值孔徑遠(yuǎn)高于干鏡,通常使用油(折射率約為1.515)填充物鏡與蓋玻片之間,大大增加了有效數(shù)值孔徑,從而顯著提高分辨率。使用高數(shù)值孔徑(高NA)物鏡(C),數(shù)值孔徑越高,分辨率越高。增加光源亮度(B)主要影響對(duì)比度,對(duì)分辨率影響不大。使用紫外光源(D)雖然波長更短,可以提高分辨率,但普通光學(xué)顯微鏡通常不使用紫外光源,且紫外光對(duì)樣品和觀察者有害。提高顯微鏡的放大倍數(shù)(E)只是放大了圖像,并不能提高分辨率,如果物鏡分辨率不足,高倍率只會(huì)使模糊的圖像變得更模糊。因此,使用油鏡和使用高數(shù)值孔徑物鏡是提高光學(xué)顯微鏡分辨率以觀察更精細(xì)結(jié)構(gòu)的主要措施。三、判斷題1.限制性內(nèi)切酶能夠識(shí)別并切割DNA特定的RecognitionSequence,這個(gè)序列通常位于基因內(nèi)部。()答案:錯(cuò)誤解析:限制性內(nèi)切酶確實(shí)能夠識(shí)別并切割DNA特定的RecognitionSequence,但這個(gè)序列并非總是位于基因內(nèi)部。有些限制性內(nèi)切酶識(shí)別的序列可能位于基因的啟動(dòng)子區(qū)域、增強(qiáng)子區(qū)域、內(nèi)含子區(qū)域或基因的末端。只要該序列符合該酶的識(shí)別位點(diǎn),無論其位于基因的哪個(gè)區(qū)域,該酶都能識(shí)別并切割。因此,說這個(gè)序列一定位于基因內(nèi)部是不準(zhǔn)確的。2.在蛋白質(zhì)印跡(WesternBlot)實(shí)驗(yàn)中,蛋白質(zhì)樣品需要經(jīng)過SDSPAGE電泳分離,其分離原理是蛋白質(zhì)的分子量大小不同。()答案:正確解析:SDSPAGE(十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳)是WesternBlot實(shí)驗(yàn)中蛋白質(zhì)分離的關(guān)鍵步驟。SDSPAGE利用帶負(fù)電荷的SDS使蛋白質(zhì)變性并帶負(fù)電,然后在電場(chǎng)作用下,蛋白質(zhì)分子根據(jù)其分子量大小不同進(jìn)行分離。分子量較小的蛋白質(zhì)遷移速度較快,而分子量較大的蛋白質(zhì)遷移速度較慢。因此,通過SDSPAGE可以按分子量大小分離蛋白質(zhì)。3.細(xì)胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基中的葡萄糖是細(xì)胞增殖的主要能源物質(zhì)。()答案:錯(cuò)誤解析:在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基中的葡萄糖雖然是細(xì)胞可以利用的能源物質(zhì)之一,但通常不是主要能源物質(zhì)。細(xì)胞在體外培養(yǎng)更依賴葡萄糖以外的其他能源,如氨基酸、脂質(zhì)等。此外,葡萄糖的濃度也需要控制,過高或過低的濃度都可能影響細(xì)胞生長。因此,說葡萄糖是主要能源物質(zhì)是不全面的。4.離子交換色譜法是一種基于蛋白質(zhì)電荷性質(zhì)進(jìn)行分離的色譜技術(shù)。()答案:正確解析:離子交換色譜法是利用蛋白質(zhì)分子與離子交換樹脂之間的電荷相互作用進(jìn)行分離的技術(shù)。蛋白質(zhì)分子帶有電荷,當(dāng)它們通過帶有相反電荷的離子交換樹脂時(shí),會(huì)與樹脂結(jié)合。通過改變緩沖液的pH值或離子強(qiáng)度,可以調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)與樹脂的結(jié)合和洗脫,從而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的分離。因此,基于蛋白質(zhì)的電荷性質(zhì)是其主要分離原理。5.紫外分光光度法可以用來測(cè)定蛋白質(zhì)的濃度,因?yàn)榈鞍踪|(zhì)在280nm波長處有強(qiáng)烈的吸收峰。()答案:正確解析:紫外分光光度法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度是基于蛋白質(zhì)分子中含有酪氨酸和色氨酸等氨基酸,這些氨基酸在280nm波長處有強(qiáng)烈的紫外吸收。通過測(cè)定蛋白質(zhì)溶液在280nm處的吸光度,可以根據(jù)蛋白質(zhì)分子中色氨酸和酪氨酸的含量推算出蛋白質(zhì)的濃度。這是蛋白質(zhì)定量分析中常用的方法。6.實(shí)驗(yàn)室中使用移液槍時(shí),為了提高精度,應(yīng)緩慢釋放移液器按鈕。()答案:正確解析:使用移液槍進(jìn)行精確移取液體時(shí),緩慢釋放移液器按鈕可以減少液體滴加速度,從而提高移取體積的準(zhǔn)確性??焖籴尫虐粹o會(huì)導(dǎo)致液體飛濺或體積不準(zhǔn)確。因此,緩慢釋放按鈕是保證移液精度的關(guān)鍵操作之一。7.在ELISA實(shí)驗(yàn)中,酶標(biāo)板需要經(jīng)過嚴(yán)格的無RNA酶處理,以防止RNA污染樣本。()答案:錯(cuò)誤解析:ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn))主要檢測(cè)樣本中的抗原或抗體,其檢測(cè)對(duì)象是蛋白質(zhì)。RNA是核酸,不是ELISA檢測(cè)的對(duì)象。雖然RNA酶可能污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境,但ELISA本身不涉及RNA。因此,ELISA實(shí)驗(yàn)中的酶標(biāo)板主要需要經(jīng)過無蛋白處理,防止非特異性結(jié)合,而不是無RNA酶處理。8.細(xì)胞凋亡是一種程序性細(xì)胞死亡,通常對(duì)機(jī)體有利。(
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