丙型肝炎病毒標志物檢測與臨床應(yīng)用專家共識2025病毒性肝炎是全球重大公共衛(wèi)生問題。其中，丙型肝炎由丙型肝炎病毒 RNA病毒[1],易進化產(chǎn)生突變株，這種特性導(dǎo)致疫苗研發(fā)長期受阻[1,2,3,4]。此外，丙型肝炎存在隱匿性強、公眾對其認知不足、高危人群篩查率低和診斷率低等問題[5],這些問題給消除丙型肝炎帶來巨大挑戰(zhàn)。因此，應(yīng)加強丙型肝炎現(xiàn)、早診斷和早治療[4,5,6]。經(jīng)典的丙型肝炎病毒標志物包括血清學(xué)標志物如丙型肝炎病毒抗體(hepatitisCvirusantibody,H丙型肝炎病毒核心抗原(hepatitisCviruscoreantigen,HCVcAg),以及分子生物學(xué)標志物如丙型肝炎病毒核酸(hepatitisCHCVRNA)等。本共識旨在通過對HCV標志物的檢測和臨床應(yīng)用進行系本共識的編寫工作組由48位專家組成，成員涵蓋共識專家組及主要執(zhí)筆隊。依托扎實的檢驗醫(yī)學(xué)實踐經(jīng)驗，通過跨學(xué)科本共識的提出與形成過程如下：(1)7位執(zhí)筆專家結(jié)合臨床實踐，系統(tǒng)萬方數(shù)據(jù)服務(wù)知識平臺等數(shù)據(jù)庫，檢索截止時間為2025年4月。檢索關(guān)鍵詞包括“hepatitisCvirus”“HCVdiagnosis”“HCVdetection”“hepatitisCvirusantibody”“hepatitisCviruscoreantigen” 型肝炎病毒”“丙型肝炎抗體”“丙型肝炎核心抗原”“丙型肝炎核酸”“丙型肝炎診療”“丙型肝炎檢測”等。初步檢索結(jié)果由3名執(zhí)筆專家進行標題與摘要篩選，剔除與主題無關(guān)、重復(fù)發(fā)表或無法獲取全文的文獻；對剩余文獻進行全文閱讀，并依據(jù)以下標準納入檢測標志物的應(yīng)用；③文獻質(zhì)量較高且具有代礎(chǔ)上，結(jié)合專家組意見，完成證據(jù)總結(jié)并起草初稿。(2)通過線上與線下相結(jié)合的方式召開專家研討會，組織專家組成員對初稿進行集體修訂，并填寫專家評審意見表。執(zhí)筆專家根據(jù)反饋意見提煉出10條專家共識，形成修改稿。(3)再次通過線上線下結(jié)合的方式召開第二次專家研討會，專家組成員對修改稿進行進一步修訂并填寫共識內(nèi)容進行完善，形成共識審核稿，并提交專級，推薦等級分為1和2級(表1,基于GRADE共識的最終確定：專家組對共識審核稿進行最終提出修改意見。執(zhí)筆專家根據(jù)專家組意見進行成《丙型肝炎病毒標志物檢測與臨床應(yīng)用專家共識(2025年版)》,共包含10條共識。本共識適用于醫(yī)學(xué)實驗室(包括各類醫(yī)療機構(gòu)檢驗科、臨床實驗室、第三方醫(yī)學(xué)檢驗實驗室等)在開展丙型肝炎病毒標志物檢測時，可采用或參照一、HCV防治現(xiàn)狀與目標1.HCV感染現(xiàn)狀：丙型肝炎病毒感染形勢嚴峻。據(jù)2024年世界衛(wèi)生組織全球肝炎報告推算，全球有5000萬人感染HCV,在2022年新增的220萬例病毒性肝炎患者中，有近100萬例丙型肝炎患者，占新增病毒性肝炎人數(shù)的近45%[3]。2020年，我國HCV感染者約950萬例[1],由于丙型肝炎未納入常規(guī)體檢項目、篩查范圍有限、公眾對其認知不足，以及疾病的隱匿性[8,9],往往出現(xiàn)癥狀時已經(jīng)發(fā)展到慢性肝炎、肝硬化甚至肝癌，造成嚴重衛(wèi)生經(jīng)濟負擔(dān)[1,9,10]。2.HCV篩查與診療現(xiàn)狀：根據(jù)2024年世界衛(wèi)生組織全球肝炎報告，全球HCV診斷率為36%,治療率為20%[3]。中國疾病預(yù)防控制中心數(shù)據(jù)顯示，2024年我國丙型肝炎發(fā)病人數(shù)占病毒性肝炎的11.5%,而死亡人數(shù)占病毒性肝炎的88.9%[4]。這表明我國大量HCV感染者在早HCV感染不僅造成了沉重的家庭及社會負擔(dān)，同時感染者病毒血癥持續(xù)存在，成為持續(xù)傳播的重要傳染源。目前核心問題包括3個方面：(1)HCV感染具有臨床隱匿性，多數(shù)患者無明顯癥狀，易慢性化，常被稱為“沉默殺手”[1,3];(2)HCV診斷率低；(3)確診患者治療3.HCV防治任務(wù)及目標：世界衛(wèi)生組織在2024全球肝炎報告指出2030年防治目標擬實現(xiàn)HCV診斷率超過90%,治療率超過80%。我國消除丙型肝炎公共衛(wèi)生危害行動工作方案(2021—2030年)中也提出，全面落實丙型肝炎防治措施和保障措施，提高檢測發(fā)現(xiàn)率[6]。方案強調(diào)：(1)應(yīng)明確HCV感染高危人群并加強防控，強化醫(yī)療機構(gòu)內(nèi)感染防控，實施“應(yīng)檢盡檢”策略；(2)對大眾人群，推薦將HCV檢測納入常規(guī)體中國病毒性肝炎院內(nèi)篩查管理流程等[11,12,13]規(guī)定以下人群為高危人群，應(yīng)定期進行HCV篩查，做到應(yīng)檢盡檢：(1)有靜脈藥癮、鼻內(nèi)非法毒品使用史者；(2)有職業(yè)或其他原因(文身、穿耳孔、針灸等)所致的針刺傷史者；(3)有醫(yī)源性暴露史，包括手術(shù)、透析、不潔口腔診療操作、器官或組織移植者；(4)有高危性行為史，如多個性伴侶、染者血液直接接觸的皮膚黏膜受損者；(9)有輸血或應(yīng)用血液制品史者(特別是1993年前);(10)1996年前的供血漿者。此外，肝臟生物化學(xué)指標檢測不明原因異常者，如丙氨酸轉(zhuǎn)院患者尤其是1980年以前出生者，孕婦進行首次產(chǎn)前檢查時，需進行HCV篩查，對持續(xù)接觸高危感染因素的孕婦需進行HCV定期篩查[14];國家衛(wèi)生健康委辦公廳印發(fā)的224個病種臨床路徑(2019年版)中也指出，手術(shù)患者在術(shù)前需進行感染性疾病篩查，其中包含丙型接受化療的惡性腫瘤患者、造血干細胞移植者、析者，以及全身應(yīng)用糖皮質(zhì)激素等患者[17,18,19]。病毒再激活可導(dǎo)致免疫抑制治療中斷，從而延誤基礎(chǔ)疾病的治療[18]。因此，對免疫受損及先天性免疫缺陷人群也應(yīng)定期進行HCV篩查，做到應(yīng)檢盡胞的增殖和活性均顯著減弱，導(dǎo)致抗體免疫此外，其他大眾人群屬于愿檢盡檢范疇。建議在常規(guī)體檢中納入HCV檢測項目，鼓勵主動進行HCV檢測，以實現(xiàn)2030年消除丙型肝炎公共衛(wèi)共識1對高危人群、免疫受損及先天性免疫缺陷人群等應(yīng)定期進行HCV要有HCVAb、HCVcAg、HCVRNA。這3種檢測標志物在HCV感染后呈現(xiàn)不同的動態(tài)變化(圖1)。因此，在檢測時應(yīng)根據(jù)實際情況合理選擇檢測標志物。圖1HCV感染檢測標志物動態(tài)變化示意圖1.HCVAb:是人體免疫系統(tǒng)對HCV感染產(chǎn)生的反應(yīng)性抗體，感染后在體內(nèi)長期存在，既不能中和也不能消除入侵的HCV,因此HCVAb陽性只表明曾經(jīng)感染過HCV,不能直接判定為現(xiàn)癥感染，而且HCVAb檢測存在“窗口期”,通常感染70d后才可產(chǎn)生HCVAb,而對于部分免疫受損及先天性免疫缺陷人群，這一時間可能延長至1年，甚至存在不產(chǎn)生HCV大規(guī)模篩查工作，具有操作簡便，樣本穩(wěn)定，成本較低等特點，但無法檢出HCV早期感染，容易漏檢，并可能出現(xiàn)假陽性及灰區(qū)結(jié)果，不適用于早期檢測和免疫受損及先天性免疫缺陷需要補充其他檢測手段確認檢測結(jié)果是否準確[28,29]。2.HCVcAg:是HCV病毒顆粒的結(jié)構(gòu)早期及整個感染過程中被檢測到。HCVcAg的出現(xiàn)時間早于HCVAb,出及免疫受損及先天性免疫缺陷人群的HCV檢測。HCVcAg穩(wěn)定性高、免疫缺陷導(dǎo)致的漏檢風(fēng)險，適合廣泛應(yīng)用[25,31,32,33,34],然而慢性HCV感染者體內(nèi)易形成抗原抗體免疫復(fù)合物，在一定程度上影響治療過程中的療效評價[1,23,35,36]。量可用于病毒載量基線檢測、基因分型、治療效[35],如治療前可采用敏感檢測方法對血清或血漿中的HCVRNA運輸和保存的工作流程[33]。(二)常用檢測方法HCV免疫學(xué)檢測主要有夾心法和間接法。夾心法可HCVRNA檢測原理主要基于熒光定量PCR、轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)擴增技術(shù)等，兩者結(jié)果具有一致性。HCVRNA定量主要基于熒光定量PCR技術(shù)，其通過檢測熒光探針降解后產(chǎn)生的熒光信號對HCVRNA進行定量。轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)擴增技術(shù)利用逆轉(zhuǎn)錄酶和RNA聚合酶對目的基因進行恒溫擴增，具有特異性強、靈敏度高、檢測用時短、無須使用專門的熱循環(huán)儀等特點[29,此外，快速檢測技術(shù)也在HCV檢測中得到應(yīng)用，基于膠體金法的血清學(xué)快速檢測可在30min內(nèi)通過肉眼判讀結(jié)果，適用于基層醫(yī)療機構(gòu)及資源有限地區(qū)[1,36,37],但檢測結(jié)果易受環(huán)境因素、人為操作及試劑盒自身特性影響。基于聚合酶鏈式反應(yīng)的HCVRNA即時檢測屬于期長和無法區(qū)分現(xiàn)癥和/或既往感染的局限性；HCVcA不受免疫狀態(tài)影響，是一個現(xiàn)癥感染指標，但慢性HCV感染者體內(nèi)易形對實驗室設(shè)備、空間及操作技術(shù)要求較高。實際擇適配檢測方案(A1)。共識3夾心法靈敏度特異性均優(yōu)于間接法，條件允許時HCV免疫學(xué)檢測推薦使用夾心法；HCVRNA檢測方法主要有熒光定量PCR和轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)擴增技術(shù)等，應(yīng)根據(jù)實際情況選擇合適的HCVRNA檢測方法(A2)。目前，HCV已鑒定出6個主要基因型(1~6型),每個基因型又可細分為不同亞型。我國以1b和2a型為主要流行亞型，其中1b型最為常見，丙型肝炎防治指南(2022年版)[1]指出，雖然泛基因治療方案可減少治療前檢測和治療過程中的監(jiān)測，但該方案并非適用于所有HCV基因型，對一些未經(jīng)臨床試驗或已有臨床試驗未獲得90%以上持續(xù)性病毒應(yīng)答率(sustainedvirologicalresponse,SVR)的基因亞型和特殊感染者可能并不適用泛基因治療方案。此外不同HCV基因型對同一泛基因治療方案的SVR不同，HCV基因型的鑒定有助于了解影響治療應(yīng)答率的病及特殊人群(如腎損傷患者),仍推薦使用基因型特異性方案。HCV基分型的分子流行病學(xué)研究可從分子水平闡明疾病傳播關(guān)系及其流行趨勢，有助于采取針對性的防治策略和措施，對HCV流行病學(xué)調(diào)查有重要意基因分型檢測方法主要有特異性探針雜交法和管理局注冊，在臨床上需進行HCV基因型檢測時，可選擇使用已獲批的商品化HCV基因分型檢測試劑盒并按說明書要求操作?；蛐蛄蟹ㄊ氰b定HCV基因型的金標準，該方法通過對NS5B、Core和E1區(qū)的片段進行擴增測序，分析序列的系統(tǒng)進化距離判斷基因型[36]。共識4應(yīng)根據(jù)HCV感染基因型、治療和預(yù)后情況，并結(jié)合患者自身情況選擇適宜的治療方法，丙型肝炎確診后，建議酌輔助臨床治療方案的制定(A2)。關(guān)于HCV檢測過程中的樣本采集保存和運輸要求在此做簡要介紹，詳細要求可參考丙型肝炎病毒實驗室檢測技術(shù)規(guī)范(2023年修訂版)[36]。型(如靜脈血、末梢全血或干血斑等),并適時預(yù)處理。抗凝靜脈血進行離心即可得到血漿。需注意的是，HCVRNA檢測的血漿樣本應(yīng)使用含乙2.樣本接收、保存和運輸：樣本接收前應(yīng)確保樣本質(zhì)量合格并核對息。如進行血清學(xué)檢測，靜脈血樣本采集后建議在6h內(nèi)完成血清或血漿分離及送檢；如進行HCVRNA檢測，樣本建議在4h內(nèi)完成血漿分離及送檢。分離后的血清或血漿如在1周內(nèi)進行HCVAb及HCVcAg檢測或在72h內(nèi)進行HCVRNA檢測時，可在2~8℃下保存；超過2周或長運輸全血時若短時間可送達(如10min左右),可在室溫下運送；若長途運輸或環(huán)境溫度較高時，需在2~10℃的冷藏條件下運送；不建議使用-65℃及其以下溫度制備的固定冰點材料或干冰，液直接接觸。運輸凍存的血清或血漿樣本時需使用制備溫度不高于-18℃的冰點材料或干冰在冰凍條件下運送[36]。共識5進行HCVcAg、HCVAb檢測時應(yīng)及時送檢，在6h內(nèi)完成血清境下轉(zhuǎn)運保存樣本或重新采集樣本(B2)。共識6進行HCVRNA檢測時，應(yīng)及時送檢，建議在4h內(nèi)送若無法滿足條件，可先進行血漿分離并在低用血液RNA保存管存放樣本，或重新采集樣本(B2)HCV的3種檢測標志物各有優(yōu)勢與局限。研究證實，HCVcAg水平與在HIV合并感染及抗病毒治療人群中保持穩(wěn)定[35,43,44,45,46,47,48],HCVcAg可代替HCVRN生組織在2024年全球肝炎報告中也指出HCVcAg可作為確認性檢測指標并將HCVAb與HCVcAg聯(lián)合檢測納入丙型肝炎篩查體系[3]。此外研究數(shù)據(jù)表明，雙標志物聯(lián)用(分別使用單檢試劑盒檢測)較單一使用單檢試劑盒分別檢測可避免競爭抑制導(dǎo)致的抗原檢測靈敏度降和分層檢測策略，總結(jié)出3種檢測流程，即HCVAb初篩檢測流程(圖2)、HCVAb和HCVcAg初篩檢測流程(圖3)、膠體金法HCVAb檢風(fēng)險[22,23,24,25,26,27],適用于資源有限且低感染風(fēng)及時發(fā)現(xiàn)早期感染，縮短檢測時間，適用于大多數(shù)[22,25,28,29,程使用膠體金檢測試劑進行快速檢測，結(jié)果依賴假陽性的可能性較大，適用于基礎(chǔ)醫(yī)療機構(gòu)及應(yīng)急現(xiàn)場篩查[1,36,37]。各級醫(yī)療機構(gòu)可根據(jù)情況合理選擇以上檢測流程。圖2HCVAb共識7HCVAb初篩檢測流程僅使用HCVAb進行初步檢測，若HCVAb陽性，則進行HCVRNA或HCVcAg檢測，適用于資源有限且低感染風(fēng)險的場景，早期感染、免疫受損及先天性免疫缺陷人群存在漏檢的風(fēng)險 共識8HCVAb和HCVcAg初篩檢測流程使用HCVAb檢測聯(lián)合HCVcAg檢測進行初步檢測，可降低早期感染、免疫受損及先天性免