檢驗科血常規(guī)實驗操作規(guī)范流程演講人：日期:目錄/CONTENTS2樣本采集規(guī)范3樣本轉(zhuǎn)運與接收4實驗室檢測流程5質(zhì)量控制管理6報告審核與存檔1檢查前準(zhǔn)備檢查前準(zhǔn)備PART01患者信息核對與登記通過電子系統(tǒng)與紙質(zhì)單據(jù)核對患者姓名、性別、唯一標(biāo)識碼，確保信息一致且無遺漏，避免樣本混淆或誤檢風(fēng)險。身份信息雙重確認(rèn)詳細(xì)登記患者主訴、初步診斷及特殊病史（如凝血功能障礙、傳染病等），為后續(xù)結(jié)果解讀提供臨床背景支持。臨床指征記錄核查患者或家屬是否簽署檢驗知情同意書，尤其針對需特殊采血方式（如動脈采血）或高風(fēng)險項目。知情同意確認(rèn)010203采血管選擇與標(biāo)簽確認(rèn)抗凝劑匹配原則根據(jù)檢測項目選擇EDTA-K2（全血細(xì)胞計數(shù)）、枸櫞酸鈉（凝血功能）等專用采血管，嚴(yán)格遵循真空管填充量要求以保證抗凝比例準(zhǔn)確。標(biāo)簽即時打印與粘貼采用條碼系統(tǒng)生成唯一性標(biāo)簽，包含患者信息、檢驗項目及采樣時間，需在采血前完成粘貼并二次核對，防止脫落或信息錯位。避光與保存條件標(biāo)注對光敏感項目（如膽紅素）標(biāo)注避光要求，需冷藏的樣本明確標(biāo)識低溫運輸鏈條件。開機(jī)后運行高、中、低值質(zhì)控品，驗證血細(xì)胞分析儀的線性范圍、精密度及攜帶污染率，記錄質(zhì)控數(shù)據(jù)并比對允許偏差范圍。每日質(zhì)控流程執(zhí)行確認(rèn)溶血劑、稀釋液、鞘液等試劑余量充足且在有效期內(nèi)，檢查采樣針、混勻裝置無堵塞或磨損，避免交叉污染風(fēng)險。試劑與耗材狀態(tài)檢查維持實驗室溫度（20-25℃）、濕度（30-70%）恒定，定期校準(zhǔn)離心機(jī)轉(zhuǎn)速與定時功能，確保樣本處理條件標(biāo)準(zhǔn)化。環(huán)境參數(shù)監(jiān)控儀器設(shè)備預(yù)檢與校準(zhǔn)樣本采集規(guī)范PART02靜脈穿刺操作步驟穿刺部位選擇與消毒優(yōu)先選擇肘正中靜脈或貴要靜脈，用75%酒精棉球以穿刺點為中心螺旋式消毒，范圍直徑不小于5cm，避免重復(fù)擦拭。持針角度與進(jìn)針手法采血針與皮膚呈15-30°角進(jìn)針，見回血后降低角度再推進(jìn)1-2mm，固定針頭避免移位，確保血液流速穩(wěn)定。止血帶使用規(guī)范止血帶綁扎時間不超過1分鐘，松緊度以能插入一指為宜，避免溶血或血液成分濃縮。拔針后處理拔針后立即用無菌棉簽按壓穿刺點5-10分鐘，避免揉搓以防皮下血腫形成?？鼓齽┗靹蚴址ㄐ柙诓裳?0秒內(nèi)完成混勻操作，延遲可能導(dǎo)致部分凝血因子激活影響檢測結(jié)果?；靹驎r間控制高脂血或溶血樣本需標(biāo)記并單獨處理，混勻后靜置觀察是否有分層異常。特殊樣本處理試管傾斜45°緩慢旋轉(zhuǎn)混勻，確保抗凝劑與血液充分接觸，防止局部凝血或纖維蛋白析出。混勻角度與力度采血后立即輕柔顛倒混勻8-10次，避免劇烈震蕩導(dǎo)致血小板聚集或紅細(xì)胞破裂。EDTA抗凝管混勻方式發(fā)現(xiàn)樣本呈淡紅色或離心后血漿粉紅色，應(yīng)重新采集并排查采血器負(fù)壓過大或混勻過度等原因。溶血樣本識別與處理發(fā)現(xiàn)樣本中有微小凝塊時，需評估凝塊比例，若超過樣本總量5%則需重新采集并檢查抗凝劑比例?？鼓蛔銘?yīng)對措施01020304若首次穿刺未成功，需更換新針頭并選擇對側(cè)肢體穿刺，避免同一部位反復(fù)嘗試造成組織損傷。穿刺失敗處理發(fā)生針刺傷后立即擠壓傷口周圍出血，用流動水沖洗15分鐘，并上報感染科進(jìn)行暴露風(fēng)險評估與預(yù)防用藥。職業(yè)暴露應(yīng)急流程異常情況應(yīng)急處理樣本轉(zhuǎn)運與接收PART03三層密封防護(hù)系統(tǒng)對于需低溫保存的樣本，轉(zhuǎn)運箱應(yīng)配備蓄冷劑和溫度監(jiān)測裝置，確保全程溫度維持在2-8℃范圍內(nèi)，避免樣本因溫度波動導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)或成分變化。溫控與穩(wěn)定性保障標(biāo)簽與信息完整性包裝外需清晰標(biāo)注樣本類型、患者唯一標(biāo)識碼及危險等級，同時附電子追蹤碼，實現(xiàn)轉(zhuǎn)運全程可追溯，避免混淆或信息丟失。樣本必須采用防漏、防刺穿、防破裂的專用容器，外層包裝需貼有生物危害標(biāo)識，確保運輸過程中無泄漏風(fēng)險。內(nèi)層容器與中層吸附材料需符合國際生物安全運輸標(biāo)準(zhǔn)。生物安全包裝要求時效性控制標(biāo)準(zhǔn)延遲樣本處理流程對超時送達(dá)的樣本，實驗室需執(zhí)行溶血、凝血指數(shù)檢測及顯微鏡鏡檢，確認(rèn)質(zhì)量達(dá)標(biāo)后方可上機(jī)，否則需聯(lián)系臨床重新采集并記錄偏差事件。跨機(jī)構(gòu)運輸協(xié)議委托第三方運輸時，需簽訂時效保障協(xié)議，規(guī)定運輸車輛配備GPS定位及溫控系統(tǒng)，最長運輸時間不超過4小時，超時樣本需重新評估有效性。院內(nèi)轉(zhuǎn)運時限從采集到實驗室接收的間隔不得超過30分鐘，急診樣本需優(yōu)先處理并啟動綠色通道，確保15分鐘內(nèi)完成交接。轉(zhuǎn)運人員需簽署時效確認(rèn)單，記錄各環(huán)節(jié)時間節(jié)點。樣本質(zhì)量驗收標(biāo)準(zhǔn)物理性狀檢測接收時需目測樣本是否溶血、脂血或凝塊，溶血指數(shù)需低于0.5吸光度單位，脂血樣本需離心后評估濁度，凝塊樣本直接拒收并標(biāo)注具體缺陷類型。信息一致性核查通過LIS系統(tǒng)比對申請單與樣本標(biāo)簽的姓名、住院號、檢測項目等關(guān)鍵信息，任何不一致需暫停處理并啟動差錯管理程序，包括雙人復(fù)核及臨床溝通確認(rèn)流程。容量與抗凝比例驗證成人靜脈血常規(guī)樣本量應(yīng)嚴(yán)格控制在2-3ml范圍內(nèi)，EDTA抗凝劑與血液體積比需為1.5mg/ml，容量不足或過量均需記錄并反饋至采集科室。實驗室檢測流程PART04每日開機(jī)后需執(zhí)行儀器自檢程序，并采用配套校準(zhǔn)品進(jìn)行光電校準(zhǔn)和流式細(xì)胞計數(shù)校準(zhǔn)，確保白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板檢測通道的線性誤差控制在±2%以內(nèi)。自動化分析儀操作程序儀器啟動與校準(zhǔn)嚴(yán)格遵循“雙盲”編號規(guī)則加載樣本，每批次檢測需插入高、中、低三個濃度質(zhì)控品，若質(zhì)控結(jié)果超出Westgard規(guī)則預(yù)設(shè)范圍，需立即暫停檢測并排查原因。樣本加載與質(zhì)量控制系統(tǒng)自動生成散點圖和直方圖，操作人員需結(jié)合紅細(xì)胞分布寬度（RDW）、血小板體積分布寬度（PDW）等參數(shù)復(fù)核異常報警（如碎片紅細(xì)胞、血小板聚集等），并在LIS系統(tǒng)中標(biāo)注復(fù)檢建議。數(shù)據(jù)審核與異常標(biāo)記當(dāng)血紅蛋白（HGB）與紅細(xì)胞壓積（HCT）比值異常、白細(xì)胞分類（DIFF）散點圖出現(xiàn)未成熟粒細(xì)胞區(qū)域聚集，或血小板計數(shù)（PLT）與紅細(xì)胞計數(shù)（RBC）比值倒置時，必須啟動人工復(fù)檢。人工復(fù)檢觸發(fā)條件儀器報警閾值觸發(fā)若檢測結(jié)果與患者病史（如貧血、感染等）嚴(yán)重不符，或連續(xù)兩次檢測結(jié)果波動超過生物學(xué)變異允許范圍（如白細(xì)胞計數(shù)差異＞30%），需進(jìn)行顯微鏡復(fù)檢。臨床指征關(guān)聯(lián)性復(fù)核對溶血、脂血、冷凝集樣本，需采用預(yù)稀釋、37℃溫浴或替代方法（如氰化高鐵血紅蛋白法）重新檢測，并在報告中注明干擾因素及處理方式。特殊樣本處理123血涂片制備與染色推片技術(shù)規(guī)范取10μL抗凝全血于載玻片一端，以30°夾角勻速推片形成頭體尾分明的血膜，厚度以紅細(xì)胞單層排列區(qū)域占50%為佳，避免過厚導(dǎo)致的細(xì)胞重疊或過薄引起的分布不均。瑞氏-吉姆薩染色流程血膜經(jīng)甲醇固定后，滴加瑞氏染液染色，緩沖液（pH6.4-6.8）沖洗分化，吉姆薩染液復(fù)染，最終鏡檢要求中性粒細(xì)胞胞漿顆粒清晰、紅細(xì)胞中央淡染區(qū)明顯。鏡檢分級標(biāo)準(zhǔn)按國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會（ICSH）指南，至少計數(shù)100個白細(xì)胞進(jìn)行人工分類，發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞（如原始細(xì)胞、異型淋巴細(xì)胞）需擴(kuò)大計數(shù)至200個，并記錄形態(tài)學(xué)特征（如中毒顆粒、杜勒小體等）。質(zhì)量控制管理PART05室內(nèi)質(zhì)控執(zhí)行要點數(shù)據(jù)記錄與分析使用L-J質(zhì)控圖記錄每日結(jié)果，定期計算均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)（CV），評估檢測系統(tǒng)精密度。每月匯總數(shù)據(jù)并形成報告，存檔備查。質(zhì)控頻次與規(guī)則每批次檢測至少運行兩個濃度水平質(zhì)控品（正常值與異常值），采用Westgard多規(guī)則（如1??、1??、R??等）判斷是否在控。連續(xù)監(jiān)測失控趨勢需記錄并分析原因。質(zhì)控品選擇與保存選用與檢測系統(tǒng)匹配的質(zhì)控品，嚴(yán)格遵循保存條件（如避光、低溫等），確保質(zhì)控品穩(wěn)定性。每日檢測前需充分混勻，避免分層或沉淀影響結(jié)果準(zhǔn)確性。樣本接收與處理收到室間質(zhì)評樣本后，核對樣本信息完整性，按常規(guī)檢測流程操作，禁止特殊處理或重復(fù)檢測。檢測結(jié)果需在截止日期前提交至質(zhì)評機(jī)構(gòu)。室間質(zhì)評參與規(guī)范結(jié)果分析與改進(jìn)收到評價報告后，比對同組實驗室結(jié)果，識別偏差項目。若結(jié)果不合格，需啟動糾正措施（如校準(zhǔn)儀器、更換試劑、人員培訓(xùn)等），并提交整改報告。持續(xù)參與要求每年至少參加兩次國家級或國際級室間質(zhì)評，覆蓋全部檢測項目。未通過項目需在后續(xù)質(zhì)評中重點監(jiān)控，確保能力驗證持續(xù)性。失控結(jié)果處理流程初步排查立即暫停相關(guān)項目檢測，復(fù)測質(zhì)控品確認(rèn)失控狀態(tài)。檢查試劑有效期、儀器狀態(tài)（如光源、電壓）、環(huán)境條件（如溫度、濕度）及操作步驟是否合規(guī)。糾正措施若為試劑或校準(zhǔn)問題，更換新批次試劑并重新校準(zhǔn)；若儀器故障，聯(lián)系工程師維修后執(zhí)行性能驗證。必要時使用備用設(shè)備完成緊急檢測。記錄與報告詳細(xì)記錄失控現(xiàn)象、排查步驟及處理結(jié)果，填寫《失控報告單》提交科室負(fù)責(zé)人。對受影響的患者樣本進(jìn)行追溯和復(fù)測，確保結(jié)果可靠性。報告審核與存檔PART0601一級復(fù)核（常規(guī)復(fù)核）針對檢測結(jié)果在正常參考范圍內(nèi)的樣本，由初級檢驗人員完成基礎(chǔ)數(shù)據(jù)核對，確保儀器傳輸數(shù)據(jù)與報告一致，無邏輯矛盾或技術(shù)干擾因素。二級復(fù)核（異常值復(fù)核）對超出參考范圍的檢測結(jié)果，需由資深檢驗師進(jìn)行二次確認(rèn)，結(jié)合患者歷史數(shù)據(jù)、臨床診斷信息及標(biāo)本狀態(tài)（如溶血、脂血）綜合評估，必要時重新檢測。三級復(fù)核（疑難復(fù)核）涉及結(jié)果與臨床不符或存在技術(shù)爭議時，由科室專家團(tuán)隊聯(lián)合分析，排查儀器校準(zhǔn)、試劑干擾或操作誤差等因素，并形成書面復(fù)核記錄。結(jié)果復(fù)核分級標(biāo)準(zhǔn)0203危急值報告制度即時通報流程發(fā)現(xiàn)危急值后，檢驗人員需立即電話通知臨床科室，記錄接聽人姓名、時間及反饋內(nèi)容，并在LIS系統(tǒng)中標(biāo)注“已通報”，同步發(fā)送電子報告。危急值定義與清單明確血常規(guī)中血紅蛋白、白細(xì)胞計數(shù)、血小板計數(shù)等項目的危急閾值，制定標(biāo)準(zhǔn)化清單，確保檢驗人員快速識別并啟動報告流程。雙人核對機(jī)制危急值結(jié)果需由兩名持證檢驗人員共同審核簽字，確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性，避免誤報或漏報導(dǎo)致的臨床風(fēng)險。電子數(shù)據(jù)存儲規(guī)