全新的非流式CD4細胞絕對計數(shù)

上海匯中細胞生物科技有限公司CD4+T淋巴細胞HIV病毒靶細胞，免疫系統(tǒng)樞紐HIV感染病程發(fā)展036912123456789101112

周年初期病毒感染02505007501000CD4細胞絕對值

(cells/μl)臨床潛伏期病毒載量

(copies/ml)AIDS(機會性感染）~HIV病毒載量每年上升0.1log10

10

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流式細胞儀上海匯中細胞生物科技有限公司CDC美國CDC實驗室向我們提出：在我們的特異性細胞分離平臺上，可否開發(fā)出低價、便捷的CD4細胞檢測方法?特異細胞細胞表面抗原固相載體玻片抗體

免疫結合反應反應原理普通光學顯微鏡CD4抗體+全血淋洗CD4細胞CD4抗原其他細胞CD4細胞染色單核細胞單核細胞單核細胞CD4細胞CD4抗原特異結合反應顯微鏡記數(shù)包被載玻片細胞化學染色CD4細胞檢測試劑盒單凹表面包被有CD4單克隆抗體的載玻片顯微鏡下CD4細胞和單核細胞臨床考核

該方法在上海傳染病醫(yī)院、北京協(xié)和醫(yī)院、北京佑安醫(yī)院、上海中山醫(yī)院、美國CDC（疾病預防控制中心）和日本大分大學艾滋病診療中心共進行1300多例臨床考核，與流式細胞法相關性達到0.95，并經(jīng)中國藥品與生物制品檢定所抽樣檢測，所用試劑盒全部符合質(zhì)量標準。操作者間重復性檢測流式法670操作者A640604632672664ave=647cv=3.879%636680680636632操作者B692680744708668ave=677cv=4.547%640664660646676T檢驗:F(5.132)<F0.05(8.28),P>0.05不同操作者之間無差異批次間重復性檢測流式法901試劑盒896920892916872AVE=899,CV=2.166%流式法295試劑盒308292324296300AVE=304,CV=4.161%1.四種結果的相關系數(shù)均大于0.952.本試劑盒相關性優(yōu)于三種儀器之間的相關性1.四種結果的平均檢測誤差均小于50個/μl2.本試劑盒檢測誤差小于三種儀器之間的檢測誤差質(zhì)控方法流式細胞法為金標準法，且有相應質(zhì)控品。同一血樣檢測結果與流式細胞法的相關性考核客觀可行。流式細胞儀光學顯微鏡成本低&就地操作技術特點一紅細胞融解全血vsCD4技術特點二流動的細胞固定的細胞vs物理記錄，永久存檔技術特點三微量采血流式細胞法的1/400，可用手指末梢血。100μL0.25μL技術特點四技術特點五培訓簡單、無維護技術特點六無冷藏要求室溫保存冰箱保存手工方法的技術局限一定的勞動強度（5分/片）。操作者失誤（特別是讀片計數(shù)）。專業(yè)讀片可由專業(yè)讀片人員進行計數(shù)。新藥證書編號（國藥證字S20060027）美國CDC交流泰國世界艾滋病大會南非衛(wèi)生機構培訓研發(fā)中心可一次同時檢測CD3、CD4、CD8等多種特異性細胞數(shù)量CD3CD4CD8下一代產(chǎn)品謝謝！CD4細胞計數(shù)玻片細胞計數(shù)刻度板CD4細胞非CD4細胞熒光標記CD4單克隆抗體流式細胞原理《CD4檢測技術回顧》HIV論壇CD4工作組工作報告第二屆世界艾滋病大會泰國曼谷2004年7月檢測技術國家操作方式工作原理FACScount美國自動簡易流式Guava美國自動簡易流式CyFlow德國自動簡易流式PointCARE美國自動簡易流式Dynabeads挪威人工磁珠收集Cytospheres美國人工微珠結合本試劑盒中國人工包被玻片固定FCMSlideCytosphereDynabeadsCommentdetctionmethodindirectdirectdirectdirectrequirementFCM&hemomicroscopemicroscopemicroscopeRBClysisyesnoyesyeskeyoftheaccuracyantibodyCD4CD4CD4&CD14CD4&CD14keyofthecostsamplevolume100uL0.25ul100uL125uLpoint-of-carenopossiblenonocorrelation10.96(n=216)－－initialinvestment40,000-80,000$nonenone600-800$keyfordevelopingcountryprice15$/test1.8$/test10$/test6$/testpreparationtime40min40min15min50mindetectiontime2min5－8min5min5minstain&countwithin12hanytimewithin12himmediatelyflexiblerecordnonecellchipnonenonerecheckable2005年7月，“CD4細胞玻片計數(shù)檢測法”通過了上海市醫(yī)學會組織的“新技術臨床準入專家評審”，獲得上海市衛(wèi)生局臨床準入批文，并進入醫(yī)保收費，至今已開展了包括體檢、亞健康檢查、腫瘤輔助檢查等在內(nèi)的100