注射用伏立康唑包材相容性之金屬離子遷移研究目錄TOC\o"1-3"\h\u摘要 Abstract KeyWord 前言 1實(shí)驗(yàn)試劑與儀器 1.1實(shí)驗(yàn)試劑 1.2實(shí)驗(yàn)儀器 2實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果 2.1溶液配制 2.1.1對照品溶液制備 2.1.2樣品處理 2.2質(zhì)譜條件 2.2.1ICP-MS測定條件 2.2.2金屬元素 2.3線性實(shí)驗(yàn) 2.4儀器精密度試驗(yàn) 2.5檢測限與定量限 2.6回收率試驗(yàn) 2.7重復(fù)性試驗(yàn) 2.8樣品測定 2.9安全評估 3討論 結(jié)論 參考文獻(xiàn) 致謝 誠信聲明

錯誤!未找到引用源。。遷移實(shí)驗(yàn)考察包裝材料中各組分是否會遷移到制劑中，是否會導(dǎo)致制劑質(zhì)量改變。應(yīng)結(jié)合特定包裝容器的組分以及添加物質(zhì)的信息，對所含有的離子進(jìn)行定量檢查并進(jìn)行安全性評估，對于內(nèi)表面鍍膜的容器，應(yīng)對膜層材料的組分及其降解物的遷移同時(shí)進(jìn)行考察[10]。本課題所用注射用伏立康唑生產(chǎn)企業(yè)采用的是玻璃包裝容器（西林瓶）。為了改善藥用玻璃的性能，通常會在玻璃中添加不同的氧化物，如加入氧化鈉、氧化鉀、氧化鈣、氧化鋇、氧化鋅、三氧化二硼和氟化物可降低玻璃的熔化溫度；加入三氧化二鋁可以改進(jìn)玻璃的力學(xué)性能；加入鐵、錳、鈦、鈷等過渡金屬氧化物形成著色玻璃以產(chǎn)生遮光效果；加入氧化砷、氧化銻、氧化鈰等促進(jìn)玻璃澄清。上述玻璃中的金屬離子或陽離子團(tuán)均有可能從玻璃中遷移出來。A企業(yè)注射用伏立康唑西林瓶的材質(zhì)低硼硅。玻璃包裝容器中組分無機(jī)鹽，遷移入注射劑藥液的常見離子包括Si、Na、K、Li、Al、Ba、Ca、Mg、B、Fe、Zn、Mn、Cd、Ti、Co、Cr、Pb、As、Sb等。伏立康唑注射劑由于其生產(chǎn)工藝中需杜絕與金屬離子接觸，其藥物中存在的金屬離子，主要來自于包材的遷移[11]。本實(shí)驗(yàn)旨在以電感耦合等離子體質(zhì)譜法測定由玻璃包材遷移至注射用伏立康唑中的上述離子，分析包材中金屬離子遷移情況。電感耦合等離子體質(zhì)譜技術(shù)是以電感耦合等離子體（InductivelyCoupledPlasma）為離子源，以質(zhì)譜（MassSpectrometer）進(jìn)行檢測的元素和同位素分析技術(shù)，簡稱ICP-MS。ICP-MS具有靈敏度高、檢出限低、線性范圍寬、可檢測元素覆蓋范圍廣等特點(diǎn)，被公認(rèn)為是最強(qiáng)有力的痕量和超痕量多元素分析技術(shù)，已被廣泛應(yīng)用于地質(zhì)、環(huán)境、冶金、生物、醫(yī)學(xué)、藥品、食品安全等各個領(lǐng)域[11-18]。ICHQ3D元素雜質(zhì)指南，根據(jù)元素的毒性（PDE值）及其在藥品中出現(xiàn)的可能性，將元素可分為3類。元素砷（As）、鉻（Cd）、汞（Hg）和鉛（Pb）為第一類，是人體毒素，在藥品生產(chǎn)中禁用或限制使用，它們出現(xiàn)在藥品中通常是來自常見物料的使用，如礦物質(zhì)輔料。通常被認(rèn)為是給藥途徑依賴型的人體毒素為第二類，基于它們出現(xiàn)于藥品中的相對可能性，可進(jìn)一步分成2A和2B亞類。元素出現(xiàn)在藥品中的相對可能性較高為2A類，包括Co、Ni和V；元素豐度較低以及與其它物料潛在共生的可能性較低，其出現(xiàn)在藥品中的概率較低為2B類，包括Ag、Au、Ir、Os、Pd、Pt、Rh、Ru、Se與Tl。口服給藥途徑的毒性相對較低（高PDE值，通常>500μg·天-1）,但在吸入和注射給藥途徑中的風(fēng)險(xiǎn)評估中仍需考慮的為第三類，包括Ba、Cr、Cu、Li、Mo、Sb和Sn。綜合考慮，擬考察注射劑中表1中的金屬元素。圖1伏立康唑化學(xué)式Fig.1ChemicalstructureofVoriconazole表1金屬元素分級與PED值Tab.1MetalelementclassificationandPEDvalue元素名稱分級PED/μg.day-1Cd12Pb15As115Hg13Co2A5V2A10Ni2A20Li3250Zn31300Cr311001實(shí)驗(yàn)試劑與儀器1.1實(shí)驗(yàn)試劑氬氣（高純度99.999%）、氦氣（高純度99.999%）；硝酸（上海安普科學(xué)儀器有限公司，優(yōu)級純，批號UA440960）；金屬元素混合標(biāo)準(zhǔn)液（chemists，標(biāo)示值1000mg.L-1，批號30-031CR）；金屬元素Hg標(biāo)準(zhǔn)液（chemists，標(biāo)示值1000mg.L-1，批號30-031CR）；內(nèi)標(biāo)Sc標(biāo)準(zhǔn)液（國家金屬及電子材料分析測試中心，標(biāo)示值1000mg.L-1，批號11542）；內(nèi)標(biāo)In標(biāo)準(zhǔn)液（國家金屬及電子材料分析測試中心，標(biāo)示值1000mg.L-1，批號08090458）；內(nèi)標(biāo)Re標(biāo)準(zhǔn)液（國家金屬及電子材料分析測試中心，標(biāo)示值1000mg.L-1，批號10960）；內(nèi)標(biāo)Rh標(biāo)準(zhǔn)液（國家金屬及電子材料分析測試中心，標(biāo)示值1000mg.L-1，批號10652）；內(nèi)標(biāo)Ge標(biāo)準(zhǔn)液（國家金屬及電子材料分析測試中心，標(biāo)示值1000mg.L-1，批號09010033）；注射用伏立康唑（A企業(yè)，批號16061319，規(guī)格100mg）；其余試劑為分析純，水為超純水。1.2實(shí)驗(yàn)儀器ICAPQICP-MS，美國賽默飛有限公司；MARS240/50CEM微波消解儀，美國培安公司；BHW-09C趕酸儀，甘肅博盛電子科技有限公司；Ariumpro超純水儀，賽多利斯公司。2實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果2.1溶液配制2.1.1對照品溶液制備（1）混合對照品溶液：精密吸取含As、Cd、Pb、Li、V、Cr、Co、Ni、Zn的混合標(biāo)準(zhǔn)液適量，加2%硝酸逐級稀釋成系列濃度：0.50、1.00、2.00、5.00、10.00、15.00、20.00、30.00ng·mL-1，即得混合對照品溶液。（2）Hg對照品溶液：精密吸取含Hg標(biāo)準(zhǔn)液適量，加2%硝酸逐級稀釋成系列濃度：0.20、0.50、0.80、1.00、2.00、5.00、8.00ng·mL-1，即得Hg對照品溶液。2.1.2樣品處理取注射用伏立康唑適量（相當(dāng)于伏立康唑0.1g），加濃硝酸4mL，浸泡過夜，再加雙氧水1mL；按下述條件進(jìn)行消解[19-21]：1600W，5min，120℃，保持25min；1600W，7min，160℃，保持20min；1600W，7min，185℃，保持20min；80℃趕酸2h，冷卻后轉(zhuǎn)移至15mL離心管中，屈臣氏水定容至10mL，移出5mL，再定容至10mL，作為供試品液。2.2質(zhì)譜條件2.2.1ICP-MS測定條件下述參數(shù)均為電感耦合等離子體質(zhì)譜儀初始設(shè)置數(shù)值表2-1ICP-MS測定條件Tab.2-1ICP-MSmeasurementconditions條件參數(shù)條件參數(shù)CCTEntryLens/V-70.02CCTFocusLens/V-6.6AngularDeflection/V-400AdditionalGasFlow20DeflectionEntryLens/V-35.01AdditionalGasFlow30ExtractionLens1Polarity/V0CCTBias/V-1.43ExtractionLens1Negative/V0CCTExitLens/V160.01ExtractionLens1Positive/V0FocusLens/V21SprayChamberTemperature/℃2.7D1Lens/V200.05PeristalticPumpSpeed/rpm40D2Lens/V-90.01CoolFlow/（L·min-1）14QuadEntryLens/V-20SamplingDepth/mm5PoleBias/V0.85續(xù)表?xiàng)l件參數(shù)條件參數(shù)PlasmaPower/V1550CCT1Flow/（L·min-1）0AuxilliaryFlow/（L·min-1）0.8CCT2Flow/（L·min-1）0NebulizerFlow/（L·min-1）1CCT1Shut-OffValve/V0TorchHorizontalPosition/mm-0.01CCT2Shut-OffValve/V0TorchVerticalPosition/mm0.55VirtualCCTMasstoDacFactor/V130ExtractionLens2/V-124VirtualCCTMasstoDacOffset/V0.01VirtualCCTMassMaximumDacLimitSet/V4095VirtualCCTMassparameterb0.652.2.2金屬元素表2-2測定的質(zhì)量數(shù)及模式Tab.2-2Measuredmassandmode元素質(zhì)量數(shù)模式Al27He（KED）As75He（KED）Cd111He（KED）Pb208He（KED）Ba137He（KED）Li7He（KED）Al27He（KED）V51He（KED）Cr52He（KED）Fe57He（KED）Co59He（KED）Ni60He（KED）Zn66He（KED）Hg202He（KED）Sc(內(nèi)標(biāo))45He（KED）In(內(nèi)標(biāo))115He（KED）Re(內(nèi)標(biāo))186He（KED）Rh(內(nèi)標(biāo))103He（KED）Ge(內(nèi)標(biāo))73He（KED）2.3線性實(shí)驗(yàn)取“2.1.1”項(xiàng)下混合對照品及Hg對照品溶液進(jìn)樣，按“2.2”ICP-MS條件測定，以各元素濃度為橫坐標(biāo)（ng·mL-1），相應(yīng)儀器響應(yīng)（CPS）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見表2-3。表2-3各元素線性擬合曲線方程Tab.2-3Linearfittingcurveequationforeachelement元素標(biāo)準(zhǔn)曲線方程R2Asf(x)=1590.6575x+46.81170.9968Cdf(x)=7445.3608x+17.07300.9962Pbf(x)=122642.2818x+5885.70890.9955Lif(x)=178.6475x0.9862Vf(x)=9734.2733x+60.72470.9937Crf(x)=15189.3911x+2096.02190.9926Cof(x)=27585.5700x+122.10720.9931Nif(x)=7351.2223x+1901.37790.9925Znf(x)=3660.3774x+1783.15440.9970Hgf(x)=17747.5495x+159.77310.9868結(jié)果顯示，本方法在As、Cd、Pb、Li、V、Cr、Co、Ni、Zn元素濃度為0.50～30.00ng·mL-1時(shí)，線性關(guān)系均良好；在Hg元素濃度為0.20～8.00ng·mL-1時(shí)，線性關(guān)系均良好。2.4儀器精密度試驗(yàn)取B、Al、Ca、As、Cd、Pb、Mg、Ba各元素20ng·mL-1的對照品溶液，按“2.2”ICP-MS條件測定6次，結(jié)果見表2-4。結(jié)果顯示，B、Al、Ca、As、Cd、Pb、Mg、Ba元素6次測定結(jié)果RSD均小于15%，儀器精密度良好。表2-4各元素精密度Tab.2-4Precisiontestofeachelement編號7Li51VCrAsCdPbNiZnCoHg135732823414425886018530033921023471489901077345517013551082355328235544260060255298584197863714895610763455187035515033563282355442551611803044722046451148826107925551781355200435802823454425796363230178822297101488961076345518013550085357128235744252161753291150212980714888010783455169435508863578282340442551623762912202069641148916107694551784355108均值±SD/%3570±10282349±8442565±2961564±1321297926±55662092766±84761148911±57107743±116551771±66355111±64RSD/%5.256.257.258.259.2510.2511.2512.2513.2514.252.5檢測限與定量限取樣品測定項(xiàng)下同法操作的空白溶液照6份，按“2.2”ICP-MS條件測定，取3倍測量響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差除以標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率，即得該方法的方法檢出限，取10倍測量響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差除以標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率，即得該方法的定量限結(jié)果見表2-5。表2-5檢出限與定量限試驗(yàn)結(jié)果（ng·mL-1）Tab.2-5Detectionlimitandlimitofquantitationtestresults（ng·mL-1）元素AsCdPbHgCoVNiLiSbZnCr檢出限0.010.0070.100.0000.10定量限0.030.020.330.100.500.500.500.500.500.500.502.6回收率試驗(yàn)精密稱取A企業(yè)注射劑六份(約0.1g/份)，依次加入混合對照品溶液100μL，Hg標(biāo)液20μL，濃硝酸4mL，浸泡過夜后，按“2.1.2”樣品處理方法處理，作為回收率實(shí)驗(yàn)樣品溶液，以2%HNO3作為空白溶液，按“2.2”ICP-MS條件測定。計(jì)算回收率，結(jié)果見表2-6。結(jié)果顯示：當(dāng)As、Cd、Pb、Li、V、Cr、Co、Ni、Zn元素加入量為10.00、15.00、20.00ng·mL-1時(shí)，方法的回收率好，準(zhǔn)確度高。表2-6A企業(yè)注射劑中金屬離子回收率Tab.2-7RecoveryrateofmetalionsincompanyA編號LiVCrCoNiZnAsCdPbHg1120.14108.14112.10103.30100.72102.2695.7894.60111.3895.002124.24120.94131.58119.10118.70102.14107.42105.28122.7497.003122.86112.06120.06111.38112.20103.74105.20101.02115.88104.004102.60115.26118.52108.16105.0678.5494.1695.84111.12100.005113.14100.78115.7097.56100.56214.8289.1283.7899.30106.006109.54106.72112.72103.44104.06136.7690.4691.32104.6497.00均值±SD/%115.42±8.48110.65±7.05118.45±7.15107.16±7.51106.88±7.17123.04±48.6597.02±7.6295.31±7.51110.84±8.2399.83±4.36RSD/%7.356.376.047.016.7139.547.857.877.434.362.7重復(fù)性試驗(yàn)取A企業(yè)生產(chǎn)的注射劑，按“2.1.2”樣品處理方法處理，作為重復(fù)性實(shí)驗(yàn)樣品溶液，以2%HNO3作為空白溶液，按“2.2”ICP-MS條件測定。計(jì)算回收率，結(jié)果見表2-7。結(jié)果顯示6份供試液中As、Cd、Pb元素遷移量均較低，所有元素的結(jié)果基本能重現(xiàn)。試驗(yàn)證明：該測定方法重現(xiàn)性良好。上述試驗(yàn)證明，該測定方法線性良好、準(zhǔn)確度高、重復(fù)性好、重現(xiàn)性好，可用于As、Cd、Pb、Li、V、Cr、Co、Ni、Zn、Hg元素的測定。表2-7A企業(yè)重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果（ng·瓶-1）Tab.2-7RepeatabilitytestresultsincompanyA（ng·瓶-1）編號LiVCrCoNiAsPb1--0.260.260.080.170.010.0120.010.020.290.020.250.03--30.050.061.480.040.660.020.0040.060.00--0.010.070.020.0150.030.030.400.010.170.010.016--0.010.760.010.170.01-0.02續(xù)表編號LiVCrCoNiAsPb均值±SD/%0.02±0.030.06±0.100.52±0.550.03±0.030.25±0.210.02±0.010.00±0.01RSD/%5.256.257.258.259.2511.2513.252.8樣品測定取A企業(yè)所生產(chǎn)的注射用伏立康唑，按“2.1.2”項(xiàng)下樣品處理方法處理，得樣品供試溶液；取“2.1.1”項(xiàng)下對照品溶液及樣品供試品溶液，以2%硝酸為空白，以Sc、In、Re、Rh、Ge為內(nèi)標(biāo)，按“2.2”項(xiàng)下ICP-MS條件測定。計(jì)算得樣品中各元素的含量（ng·瓶-1），見表2-8。表2-8國產(chǎn)注射用伏立康唑中各金屬元素含量（ng·瓶-1）Tab.2-8ThecontentofelementofvoriconazoleforinjectionincompanyA（ng·瓶-1）生產(chǎn)企業(yè)批號LiVCrCoNiZnAsPbHgA企業(yè)16061319--0.010.410.020.271.030.02--0.01160202190.030.030.370.030.472.390.01--0.01160616190.020.060.600.020.422.290.01--0.012.9安全評估注射用伏立康唑中各金屬元素含量，折算為該藥每天的可攝入量，根據(jù)該藥品說明書，按照成年人75kg計(jì)算，每日給藥2次，每次4mg·kg-1，即每日最大用量600mg；注射用伏立康唑中各元素的每日攝入量與ICH-Q3D元素雜質(zhì)指導(dǎo)原則中常用金屬元素的每日允許攝入量中規(guī)定的PDE進(jìn)行比較，見表10。注射用伏立康唑中各有害金屬元素的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于允許量，可安全使用。表2-9金屬元素分級與PED值及樣品中最大含量（μg·day-1）Tab.2-9MetalelementclassificationandPEDvalueandmaximumcontentinthesample元素名稱PED/μg·day-1樣品中最大含量/μg·day-1Cd2未檢出Pb50.51As154.17Hg30.39Co50.24V100.78Ni205.13Li2501.20Zn13008.85Cr110010.323討論注射劑樣品中的金屬離子可直接測定，也可經(jīng)過消解后測定，本課題最終選擇消解后測定，可排除較多有機(jī)物的干擾，專屬性更強(qiáng)，測定結(jié)果可靠；本實(shí)驗(yàn)處理樣品采用的是酸消解法，趕酸會影響金屬Hg的回收率，因此控制趕酸的時(shí)間是關(guān)鍵，通過預(yù)實(shí)驗(yàn)，本課題趕酸時(shí)間為2h較合理。在樣品的測定過程中，不僅有混合標(biāo)準(zhǔn)品作為對照品，還在樣品中加入了內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)液，這樣有效的消除了儀器的干擾，使測定結(jié)果更加準(zhǔn)確。結(jié)論本文建立了測定注射用伏立康唑西林瓶中金屬離子遷移的ICP-MS，并進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證，專屬性強(qiáng)、靈敏度高，能有效實(shí)現(xiàn)As、Cd、Pb、Li、V、Cr、Co、Ni、Zn、Hg金屬離子的檢出。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，A企業(yè)國產(chǎn)注射用伏立康唑西林瓶中的金屬離子（As、Cd、Pb、Li、V、Cr、Co、Ni、Zn、Hg）無明顯遷移。參考文獻(xiàn)[1]PearsonMM,RogersPD,ClearyJD,etal.Voriconazole:ANewTriazoleAntifungalAgent[J].AnnalsofPharmacotherapy,2003,37(3):420-432.[2]HowardA,HoffmanJ,ShethA.ClinicalApplicationofVoriconazoleConcentrationsintheTreatmentofInvasiveAspergillosis[J].AnnalsofPharmacotherapy,2008,42(12):1859-1864.[3]LeonartLP,ToninFS,FerreiraVL,etal.Anetworkmeta-analysisofprimaryprophylaxisforinvasivefungalinfectioninhaematologicalpatients[J].JournalofClinicalPharmacyandTherapeutics,2017.42(5):530.[4]劉萍,邊強(qiáng).抗真菌藥伏立康唑[J].中國醫(yī)院用藥評價(jià)與分析,2002(06):365.[5]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:二部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社.2015:372-375.[6]馬玉楠,馬磊,蔣煜.藥品與包裝材料相容性研究相關(guān)指導(dǎo)原則解讀－試驗(yàn)結(jié)果的評估[J].中國新藥雜志,2014,23(08):940-943.[7]張文輝.新型復(fù)方氨基酸注射液的內(nèi)包材相容性研究[D].北京化工大學(xué),2016[8]國家食品藥品監(jiān)督管理局.化學(xué)藥品與彈性體密封件相容性研究技術(shù)指導(dǎo)原則[EB/OL](2016-12-28)[20181210].[9]國家食品藥品監(jiān)督管理局.國食藥監(jiān)注[2012]267號.化學(xué)藥品注射劑與塑料包裝材料相容性研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）[EB/OL].(2012-09-07)[2018-12-10].http://samr.cfda.gov.cn/WS01/CL0844/75197.html.[10]國家食品藥品監(jiān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