ICS65.020.01

CCSB05

DB51

四川省地方標準

DB51/T3064—2023

中國大鯢野外種群及棲息地調(diào)查技術(shù)規(guī)程

2023-06-19發(fā)布2023-08-01實施

四川省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB51/T3064—2023

目次

前言................................................................................II

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術(shù)語和定義.........................................................................1

4調(diào)查內(nèi)容...........................................................................2

5調(diào)查方法...........................................................................2

6原始記錄...........................................................................4

7調(diào)查結(jié)果...........................................................................4

附錄A（資料性）大鯢野外種群調(diào)查記錄表..............................................5

附錄B（資料性）e-DNA監(jiān)測記錄表...................................................6

附錄C（資料性）中國大鯢野外問卷調(diào)查記錄表..........................................7

附錄D（資料性）中國大鯢主要形態(tài)學(xué)性狀記錄表........................................8

附錄E（資料性）中國大鯢野外棲息地調(diào)查記錄表........................................9

I

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前言

本文件按照GB/T1.1－2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起

草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。

本文件由四川省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出、歸口并解釋。

本文件起草單位：中國科學(xué)院成都生物研究所。

本文件主要起草人：趙天、江建平、王杰、謝鋒、李成、朱未、趙春霖。

本文件為首次發(fā)布。

II

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中國大鯢野外種群及棲息地調(diào)查技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了中國大鯢野外種群及棲息地的調(diào)查內(nèi)容、調(diào)查方法、原始記錄和調(diào)查結(jié)果等要求。

本文件適用于對四川省行政范圍內(nèi)中國大鯢野外種群及棲息地的調(diào)查和快速評估。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB50707河道整治設(shè)計規(guī)范

HJ710.8生物多樣性觀測技術(shù)導(dǎo)則淡水底棲大型無脊椎動物

HJ1167全國生態(tài)狀況調(diào)查評估技術(shù)規(guī)范-森林生態(tài)系統(tǒng)野外觀測

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

樣線調(diào)查法linetransects

按照統(tǒng)計學(xué)要求布設(shè)調(diào)查樣線，調(diào)查人員在調(diào)查樣線上行進，觀察并記錄樣線兩側(cè)中國大鯢的個體

數(shù)的調(diào)查方法。

3.2

網(wǎng)籠陷阱調(diào)查法traps

按照統(tǒng)計學(xué)要求布設(shè)網(wǎng)籠陷阱，根據(jù)網(wǎng)籠陷阱捕獲的個體數(shù)對中國大鯢野外種群進行調(diào)查的方法。

3.3

環(huán)境DNA（e-DNA）調(diào)查法environmentalDNAsurvey

按照標準方法采集中國大鯢棲息地水樣，經(jīng)抽濾后分離e-DNA，采用中國大鯢特異性引物的PCR進

行擴增，測序分析環(huán)境中中國大鯢的存在與否和數(shù)量的調(diào)查方法。

3.4

棲息地habitat

中國大鯢棲息的野外環(huán)境條件。

注：主要由生物和非生物環(huán)境因子構(gòu)成，涵蓋了從水體到陸地的主要環(huán)境因子。

4調(diào)查內(nèi)容

4.1中國大鯢的種群數(shù)量

包括采用樣線調(diào)查法和網(wǎng)籠陷阱調(diào)查法分別調(diào)查到的中國大鯢成體、亞成體、幼體和卵的數(shù)量。

1

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4.2中國大鯢的主要形態(tài)學(xué)性狀

包括性別、全長、體重、尾長、頭長、后肢及后足長、尾寬、眼間距、前肢及前足長、尾高、頭寬、

鼻間距、眼徑、健康狀況、是否存在外部傷口、是否存在微生物感染、是否有體外寄生蟲等。

4.3中國大鯢棲息地的e-DNA分析記錄

包括監(jiān)測位點、采集時間、DNA提取結(jié)果、PCR分析檢測結(jié)果等。

4.4中國大鯢棲息地的主要環(huán)境因子

包括經(jīng)緯度、海拔、河岸土地利用類型、氣溫、空氣濕度、河床類型、河流底質(zhì)、河寬、水深、水

體流速、水體濁度、水溫、總磷、總氮、氨氮、總硬度、溶解氧、總堿度、水體pH、電導(dǎo)率、植被類

型與蓋度、餌料生物等。

4.5中國大鯢及其棲息地的受脅因素

包括道路建設(shè)、砂石采挖、涉水工程建設(shè)、農(nóng)牧漁業(yè)活動、污染類型、污染強度、外來物種等。

5調(diào)查方法

5.1樣線設(shè)置方法

5.1.1河道選擇方法

在開展調(diào)查的縣市，應(yīng)通過與當(dāng)?shù)氐恼块T（如漁政，林業(yè)站，保護區(qū)等）聯(lián)系，也可采用訪問

或文獻調(diào)查的方式，篩選2-3條有中國大鯢潛在分布的河流進行實地考察。

5.1.2樣線布設(shè)方法

在每條河流的上、中、下游分別設(shè)置1條樣線，累計1km。大型河流（長度大于5km，河寬大于5m）

的樣線設(shè)置應(yīng)為長500m~1000m，寬離岸2m，小型河流（長度小于5km，河寬小于5m）的樣線設(shè)置

應(yīng)為長200m~500m，寬為整條河流的寬度。調(diào)查應(yīng)選擇降雨少且水位低的時期以及流速緩慢的河段，

每條河流連續(xù)調(diào)查三天。

5.1.3測量取樣點選擇

在調(diào)查開始前，應(yīng)在距起點0.5km處設(shè)置好安放器材及進行測量和棉簽采樣的工作點。在每一條樣

線的起點，填好野外實地調(diào)查記錄表。

5.2野外種群調(diào)查方法

5.2.1樣線調(diào)查法

應(yīng)在天黑后進行。調(diào)查開始后，3個~4個調(diào)查者并排沿著河流由下游至上游方向，通過聚光照明

涉水行進。涉水應(yīng)選擇離岸0.5m、水深小于1m且透明度高的河道。調(diào)查人員應(yīng)佩戴手套，用手抄網(wǎng)

捕捉見到的大鯢個體。相關(guān)調(diào)查結(jié)果參照附錄A進行填寫。

5.2.2網(wǎng)籠陷阱調(diào)查法

水溫低于22°C時，在較深且/或透明度較低的水體采用網(wǎng)籠陷阱調(diào)查法，該方法尤其適用于調(diào)查

大鯢種群密度較低的地區(qū)。網(wǎng)籠陷阱調(diào)查法布置的密度為每條樣線3個~5個網(wǎng)籠，放網(wǎng)時間為每日黃

2

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昏，收網(wǎng)時間為次日早上6點。誘餌可選擇雞腸，豬肝、沙丁魚等。網(wǎng)籠陷阱調(diào)查法不宜在大鯢的繁殖

季節(jié)使用。相關(guān)調(diào)查結(jié)果參照附錄A進行填寫。

5.2.3環(huán)境DNA（e-DNA）調(diào)查法

該方法應(yīng)在白天進行。在樣線中水深大于1m，流速小于1m/s且有大石塊分布的點取e-DNA水樣，

取樣點設(shè)置為每條樣線3個。采用清潔劑清洗并用采樣點河水潤洗過的容器（4L~5L塑料瓶）取水體

表面以下2cm~5cm的水樣4L。采樣人員應(yīng)佩戴手套，且每次采樣應(yīng)更換手套。每個點取兩瓶水樣，

用孔徑為0.45μm的硝酸纖維濾紙（或玻璃纖維濾紙）在真空抽濾機過濾（玻璃設(shè)備應(yīng)提前高溫滅菌處

理），濾膜保存在95%無水乙醇中用作后續(xù)分析（必要時可以更換濾膜，但所有濾膜均應(yīng)保存在95%無

水乙醇中）。相關(guān)調(diào)查結(jié)果參照附錄B進行填寫。

5.2.4問卷調(diào)查法

在每個村向至少10名當(dāng)?shù)厝肆私忾L期以來大鯢種群數(shù)量的變動以及棲息地受脅情況，參照附錄C填

寫。

5.3形態(tài)學(xué)性狀測量方法

5.3.1形態(tài)學(xué)測量方法

對采集到的個體編號，采用軟尺和游標卡尺測量其11個外部形態(tài)學(xué)性狀（如圖1所示），采用便攜

式鉤秤測量其體重。觀察判斷個體性別、健康狀況、是否存在外部傷口、是否存在微生物感染、是否有

外部寄生蟲等，并參照附錄D填寫。測量人員均需佩戴一次性橡膠手套，并在每次測量前更換。

圖1中國大鯢形態(tài)學(xué)測量示意圖

5.3.2PIT電子標記方法

PIT電子標簽統(tǒng)一打在大鯢左前肢腋下，用于個體識別和長期跟蹤監(jiān)測。

5.3.3遺傳背景樣品取樣方法

采用無菌棉簽采集口腔粘液或體表粘液，其次可采用剪尾低損傷取樣。樣品采集后用95%的乙醇

保存并對應(yīng)編號，帶回實驗室進行遺傳背景分析。樣品采集完成后，將大鯢原地放歸。

5.4棲息地調(diào)查方法

5.4.1調(diào)查時間

3

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棲息地調(diào)查在白天進行。在調(diào)查河流的1km樣線測量9個點的棲息地微生境環(huán)境因子（上、中、下

游各3個點）。

5.4.2環(huán)境因子測量方法

經(jīng)緯度和海拔用GPS測定；河床類型參考GB50707分類；河寬和水深結(jié)合人為估算、卷尺和激光

測量的方法；底質(zhì)分類參照HJ710.8的規(guī)定；水體流速采用流速計進行測量；森林類型參照HJ1167進

行劃分；河岸土地利用類型分為四種（即河岸兩側(cè)無耕作土壤，營養(yǎng)豐富；河岸一側(cè)無耕作土壤，另一

側(cè)為耕作土壤；河岸兩側(cè)耕作土壤；河岸兩側(cè)為耕作廢棄的裸露的風(fēng)化土壤層，營養(yǎng)物質(zhì)很少）；餌料

生物按其豐富程度分級為高、中、低三個等級；水質(zhì)指標（水溫、濁度、電導(dǎo)率、pH、溶解氧、總硬

度、總堿度、總氮、總磷、氨氮等）采用便攜式水質(zhì)儀直接測量或現(xiàn)場采樣送檢的方式測定。相關(guān)數(shù)據(jù)

參照附錄E填寫。

5.4.3人類干擾程度記錄方法

對調(diào)查點的道路建設(shè)、砂石采挖、涉水工程建設(shè)、農(nóng)牧漁業(yè)活動、污染、外來物種等影響程度分級

（強、中、弱、無），并參照附錄E填寫。

6原始記錄

6.1范圍和載體

原始記錄應(yīng)包括野外記錄和實驗室記錄兩部分。

野外記錄包括調(diào)查記錄表、照片、視頻、原始圖件等。調(diào)查記錄表應(yīng)涵蓋人工記錄的數(shù)據(jù)和GPS、

溫濕度計、便攜式水質(zhì)分析儀等的自動記錄數(shù)據(jù)。照片、視頻應(yīng)為數(shù)字載體的自動記錄。

6.2保存

原始記錄應(yīng)永久保存以備查閱。電子記錄應(yīng)備份保存。

7調(diào)查結(jié)果

調(diào)查結(jié)果應(yīng)提交大鯢野外種群調(diào)查表、e-DNA監(jiān)測記錄表、中國大鯢野外問卷調(diào)查記錄表、中國

大鯢主要形態(tài)學(xué)性狀記錄表和中國大鯢野外棲息地調(diào)查記錄表，以及調(diào)查過程中所拍攝的物種照、工作

照、棲息地照片等影像材料。

中國大鯢野外種群及棲息地調(diào)查的報告應(yīng)對調(diào)查方法、種群數(shù)量（密度）、分布、棲息地狀況、受

威脅因素等進行詳細敘述。同時還應(yīng)對調(diào)查到的每一尾中國大鯢的形態(tài)學(xué)性狀和遺傳背景分別進行測量

和分析。

4

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AA

附錄A

（資料性）

大鯢野外種群調(diào)查記錄表

表A.1給出了中國大鯢野外種群調(diào)查記錄的參考樣表。

表A.1大鯢野外種群調(diào)查記錄表

樣線：地點：調(diào)查日期：年月日

開始時間：時分結(jié)束時間：時分

起點經(jīng)緯度：海拔：

終點經(jīng)緯度：海拔：

觀測者：記錄者：

樣線長：樣線寬：天氣：

個體數(shù)量

編號中文名調(diào)查方法備注

成體亞成體幼體卵

5

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BB

附錄B

（資料性）

e-DNA監(jiān)測記錄表

表B.1給出了中國大鯢野外種群的e-DNA監(jiān)測記錄的參考樣表。

表B.1e-DNA監(jiān)測記錄表

監(jiān)測樣地：樣方編號：觀測者：

海拔：經(jīng)度：緯度：風(fēng)力：平靜/微風(fēng)/中/強

天氣：氣溫：濕度：

日期：起始時間：結(jié)束時間：

是水樣

否

序位監(jiān)

點測

號號到DNA提取PCR分析

采集時間采集編號生境結(jié)論

大結(jié)果檢測結(jié)果

鯢

注：DNA提取結(jié)果和PCR檢測結(jié)果都以陰性和陽性表示。

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附錄C

（資料性）

中國大鯢野外問卷調(diào)查記錄表

表C.1給出了中國大鯢野外種群的問卷調(diào)查記錄的參考樣表。

C.1中國大鯢野外問卷調(diào)查記錄表

編省市/村時受受訪受訪人受訪人受訪野生大最后一最后一是否食用大是否大鯢放放歸是否養(yǎng)殖是否大鯢

號縣間訪人性年齡居住時人職鯢目擊次目擊次目擊食用鯢時間存在歸數(shù)量大鯢存在大鯢垂釣野外

人別間業(yè)/聽說/聽說/聽說野生及頻次放歸及頻次來源養(yǎng)殖來源及垂種群

次數(shù)時間地點大鯢大鯢大鯢釣方數(shù)量

式變動

大鯢野外種群數(shù)量大鯢野外種對大鯢保護大鯢保護的棲息地變化情況棲息地變化原因非法捕魚情況是否存在抓捕大鯢現(xiàn)象其他

變動的時間及原因群受脅因素的態(tài)度益處

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附錄D

（資料性）

中國大鯢主要形態(tài)學(xué)性狀記錄表

表D.1給出了中國大鯢主要形態(tài)學(xué)性狀記錄的參考樣表。

D.1中國大鯢主要形態(tài)學(xué)性狀記錄表

日期

時間

記錄人

樣線

樣點

編號經(jīng)度

緯度海拔

幼體/亞成體/成體性別

健康狀況是否存在外部傷口

是否存在細菌或病毒感染是否有寄生蟲

全長(cm)體重(g)

頭長(mm)眼間距(mm)

頭寬(mm)鼻間距(mm)

尾長(mm)后肢全長(mm)

尾寬(mm)前壁及手長(mm)

尾高(mm)眼徑(mm)

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附錄E

（資料性）

中國大鯢野外棲息地調(diào)查記錄表

表E.1給出了中國大鯢野外棲息地調(diào)查記錄的參考樣表。

E.1中國大鯢野外棲息地調(diào)查記錄表

日期

時間

記錄人

樣線

樣點

經(jīng)緯度河岸土地利用類型

海拔（m）