第第PAGE\MERGEFORMAT1頁(yè)共NUMPAGES\MERGEFORMAT1頁(yè)pcr生物安全培訓(xùn)試題及答案解析（含答案及解析）姓名：科室/部門(mén)/班級(jí)：得分：題型單選題多選題判斷題填空題簡(jiǎn)答題案例分析題總分得分

一、單選題（共20分）

1.在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)，以下哪種操作最有助于防止氣溶膠污染？

A.在加樣時(shí)使用移液器槍頭吸取和排放液體

B.在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)來(lái)回走動(dòng)傳遞含有模板DNA的試管

C.使用一次性手套，但重復(fù)使用同一副實(shí)驗(yàn)服

D.在超凈工作臺(tái)中完成所有加樣操作，但開(kāi)放蓋子時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

2.根據(jù)《生物安全實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》，哪個(gè)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室通常不需要設(shè)置生物安全柜？

A.P1級(jí)實(shí)驗(yàn)室

B.P2級(jí)實(shí)驗(yàn)室

C.P3級(jí)實(shí)驗(yàn)室

D.P4級(jí)實(shí)驗(yàn)室

3.PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，處理含有PCR產(chǎn)物的廢棄物時(shí)，以下做法錯(cuò)誤的是？

A.將PCR產(chǎn)物用65℃高溫加熱1小時(shí)滅活

B.將滅活后的產(chǎn)物直接倒入實(shí)驗(yàn)室的普通垃圾桶

C.將含有PCR產(chǎn)物的離心管先用10%次氯酸鈉浸泡30分鐘

D.將滅活后的產(chǎn)物用酒精浸泡后丟棄

4.在使用生物安全柜時(shí)，以下哪項(xiàng)操作可能導(dǎo)致氣流短路，增加交叉污染風(fēng)險(xiǎn)？

A.保持前窗和后窗關(guān)閉，僅打開(kāi)側(cè)窗

B.在工作區(qū)域內(nèi)放置過(guò)多物品，阻塞空氣流通

C.使用酒精擦拭工作臺(tái)面，但未等待酒精完全揮發(fā)

D.定期使用生物安全柜自檢功能，確保運(yùn)行正常

5.如果實(shí)驗(yàn)室發(fā)生疑似氣溶膠暴露事件，以下哪項(xiàng)應(yīng)急措施是優(yōu)先的？

A.立即離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室，前往休息區(qū)等待觀(guān)察

B.用大量清水沖洗暴露部位，并立即上報(bào)

C.穿上新的防護(hù)服，繼續(xù)完成手頭實(shí)驗(yàn)

D.使用消毒噴霧對(duì)暴露區(qū)域進(jìn)行消毒

6.在PCR反應(yīng)體系中，DMSO的主要作用是？

A.增強(qiáng)引物退火溫度

B.提高模板DNA的解旋效率

C.抑制非特異性擴(kuò)增

D.增加反應(yīng)體系的pH值

7.根據(jù)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489），以下哪項(xiàng)記錄不屬于實(shí)驗(yàn)室生物安全記錄范圍？

A.實(shí)驗(yàn)人員培訓(xùn)考核記錄

B.實(shí)驗(yàn)設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)記錄

C.廢棄物處理臺(tái)賬

D.實(shí)驗(yàn)室布局平面圖

8.在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)，使用加樣槍頭吸取不同試劑后，正確的做法是？

A.直接將槍頭插入下一個(gè)試劑管中混勻

B.用吸水紙擦拭槍頭外壁后繼續(xù)使用

C.使用一次性槍頭，避免交叉污染

D.將槍頭插入裝有DEPC水的容器中清洗后使用

9.PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)常用的消毒劑，其有效成分濃度通常應(yīng)達(dá)到多少？

A.0.1%-0.5%

B.1%-5%

C.10%-20%

D.50%-70%

10.如果PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)非特異性條帶，以下哪種措施最可能有效？

A.增加PCR循環(huán)次數(shù)

B.降低退火溫度

C.增加Mg2?濃度

D.優(yōu)化引物設(shè)計(jì)

11.在P3級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作時(shí)，以下哪項(xiàng)防護(hù)措施是必須的？

A.佩戴普通護(hù)目鏡

B.穿著標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)服

C.使用12號(hào)手術(shù)口罩

D.不需要佩戴手套

12.PCR實(shí)驗(yàn)室常用的消毒劑，對(duì)以下哪種微生物無(wú)效？

A.真菌

B.病毒

C.細(xì)菌芽孢

D.原蟲(chóng)包囊

13.在使用生物安全柜時(shí)，以下哪項(xiàng)操作可能導(dǎo)致內(nèi)腔污染？

A.定期使用70%酒精擦拭工作臺(tái)面

B.在工作區(qū)域內(nèi)使用移液器

C.將實(shí)驗(yàn)廢棄物直接放入內(nèi)腔中

D.保持紫外燈定期照射

14.PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，處理PCR產(chǎn)物時(shí)，以下哪種方法滅活效果最好且最常用？

A.高壓蒸汽滅菌

B.乙醇沉淀

C.紫外線(xiàn)照射

D.甲醛處理

15.根據(jù)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》，哪個(gè)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室需要制定應(yīng)急預(yù)案？

A.所有實(shí)驗(yàn)室

B.P1和P2級(jí)實(shí)驗(yàn)室

C.P3和P4級(jí)實(shí)驗(yàn)室

D.僅P4級(jí)實(shí)驗(yàn)室

16.在PCR實(shí)驗(yàn)中，引物二聚體過(guò)多的原因可能是？

A.引物濃度過(guò)高

B.退火溫度過(guò)低

C.模板DNA濃度過(guò)高

D.Mg2?濃度過(guò)低

17.如果實(shí)驗(yàn)室發(fā)生銳器傷，以下哪項(xiàng)處理步驟是錯(cuò)誤的？

A.立即用肥皂水沖洗傷口

B.用力擠壓傷口，排出血液

C.用酒精消毒傷口

D.立即上報(bào)并尋求醫(yī)療幫助

18.在PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，以下哪種行為最容易導(dǎo)致氣溶膠污染？

A.使用移液器槍頭吸取液體

B.直接傾倒液體

C.使用渦旋混合器振蕩樣品

D.使用離心機(jī)分離樣品

19.PCR實(shí)驗(yàn)常用的陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)包含什么？

A.純水

B.已知陽(yáng)性的模板DNA

C.試劑空白

D.無(wú)菌培養(yǎng)基

20.在使用生物安全柜時(shí)，以下哪項(xiàng)操作會(huì)導(dǎo)致空氣外泄？

A.保持工作區(qū)域整潔，避免物品阻塞

B.正確佩戴手套，避免接觸內(nèi)壁

C.在工作區(qū)域內(nèi)快速移動(dòng)物品

D.定期檢查安全柜的風(fēng)速和照明

二、多選題（共15分，多選、錯(cuò)選均不得分）

21.PCR實(shí)驗(yàn)室常用的消毒劑包括哪些？

A.75%乙醇

B.0.5%次氯酸鈉

C.10%甲醛

D.0.1%吡咯烷酮碘

22.在PCR實(shí)驗(yàn)中，影響擴(kuò)增效率的因素有哪些？

A.引物設(shè)計(jì)

B.DNA聚合酶種類(lèi)

C.循環(huán)次數(shù)

D.實(shí)驗(yàn)室溫度

23.根據(jù)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489），實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立哪些管理制度？

A.實(shí)驗(yàn)人員健康管理制度

B.設(shè)備使用維護(hù)制度

C.廢棄物處理制度

D.微生物實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程

24.在使用生物安全柜時(shí)，以下哪些行為會(huì)增加污染風(fēng)險(xiǎn)？

A.在工作區(qū)域內(nèi)飲食或吸煙

B.使用一次性手套，但未及時(shí)更換

C.保持工作臺(tái)面干燥清潔

D.在工作區(qū)域內(nèi)放置個(gè)人物品

25.PCR實(shí)驗(yàn)室常用的防護(hù)設(shè)備包括哪些？

A.生物安全柜

B.防護(hù)服

C.護(hù)目鏡

D.12號(hào)手術(shù)口罩

26.在PCR實(shí)驗(yàn)中，非特異性擴(kuò)增的原因可能包括哪些？

A.引物設(shè)計(jì)不合理

B.退火溫度過(guò)高

C.模板DNA質(zhì)量差

D.循環(huán)次數(shù)過(guò)多

27.實(shí)驗(yàn)室生物安全事件報(bào)告應(yīng)包括哪些內(nèi)容？

A.事件發(fā)生時(shí)間地點(diǎn)

B.涉及的病原微生物種類(lèi)

C.事件后果及處理措施

D.事件責(zé)任人

28.PCR實(shí)驗(yàn)室常用的個(gè)人防護(hù)用品包括哪些？

A.防護(hù)服

B.防護(hù)眼鏡

C.一次性手套

D.帽子

29.在使用生物安全柜時(shí)，以下哪些操作是正確的？

A.定期進(jìn)行功能檢查

B.保持工作區(qū)域整潔

C.在工作區(qū)域內(nèi)快速移動(dòng)物品

D.使用消毒劑擦拭工作臺(tái)面

30.PCR實(shí)驗(yàn)室常用的廢棄物包括哪些？

A.含有病原微生物的培養(yǎng)基

B.離心管

C.防護(hù)服

D.一次性手套

三、判斷題（共10分，每題0.5分）

31.在PCR實(shí)驗(yàn)中，使用加樣槍頭吸取不同試劑后，應(yīng)立即廢棄槍頭，避免交叉污染。（）

32.PCR實(shí)驗(yàn)室常用的消毒劑濃度越高越好。（）

33.P3級(jí)實(shí)驗(yàn)室必須配備生物安全柜。（）

34.在PCR實(shí)驗(yàn)中，引物二聚體是正常產(chǎn)物，無(wú)需關(guān)注。（）

35.PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，含有PCR產(chǎn)物的離心管可以直接丟棄。（）

36.使用生物安全柜時(shí)，應(yīng)保持工作區(qū)域整潔，避免物品阻塞氣流。（）

37.PCR實(shí)驗(yàn)室常用的陽(yáng)性對(duì)照是為了檢測(cè)試劑是否有效。（）

38.在使用生物安全柜時(shí)，應(yīng)正確佩戴手套，避免接觸內(nèi)壁。（）

39.PCR實(shí)驗(yàn)室常用的消毒劑對(duì)細(xì)菌芽孢無(wú)效。（）

40.實(shí)驗(yàn)室發(fā)生銳器傷時(shí)，應(yīng)立即用酒精消毒傷口。（）

四、填空題（共10空，每空1分，共10分）

41.PCR實(shí)驗(yàn)室常用的消毒劑有效成分通常為_(kāi)_____。

42.根據(jù)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》，P3級(jí)實(shí)驗(yàn)室屬于______級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室。

43.PCR實(shí)驗(yàn)室常用的陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)包含______。

44.在使用生物安全柜時(shí)，應(yīng)保持工作區(qū)域整潔，避免物品阻塞______。

45.PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，含有PCR產(chǎn)物的離心管應(yīng)先用______滅活。

46.實(shí)驗(yàn)室發(fā)生銳器傷時(shí)，應(yīng)立即用______沖洗傷口。

47.PCR實(shí)驗(yàn)常用的引物二聚體是指______。

48.根據(jù)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489），實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立______制度。

49.在使用生物安全柜時(shí)，應(yīng)保持______和______的清潔。

50.PCR實(shí)驗(yàn)室常用的廢棄物應(yīng)分類(lèi)收集，其中含有病原微生物的培養(yǎng)基屬于______類(lèi)廢棄物。

五、簡(jiǎn)答題（共30分，每題6分）

51.簡(jiǎn)述PCR實(shí)驗(yàn)室常用的消毒劑種類(lèi)及其作用原理。

52.簡(jiǎn)述PCR實(shí)驗(yàn)室常用的個(gè)人防護(hù)用品及其使用注意事項(xiàng)。

53.簡(jiǎn)述PCR實(shí)驗(yàn)室常用的陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照的作用。

54.簡(jiǎn)述使用生物安全柜時(shí)的正確操作步驟及注意事項(xiàng)。

55.簡(jiǎn)述PCR實(shí)驗(yàn)室廢棄物分類(lèi)收集的原則及方法。

六、案例分析題（共25分）

案例背景：某PCR實(shí)驗(yàn)室工作人員在處理一批樣品時(shí)，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)空氣中彌漫著疑似氨水的氣味，隨后部分工作人員出現(xiàn)咳嗽、流淚等癥狀。經(jīng)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室的通風(fēng)系統(tǒng)長(zhǎng)時(shí)間未進(jìn)行維護(hù)，導(dǎo)致室內(nèi)空氣質(zhì)量下降，且部分工作人員未按規(guī)定佩戴防護(hù)眼鏡。

問(wèn)題：

1.分析該事件發(fā)生的原因。（10分）

2.提出針對(duì)該事件的應(yīng)急處理措施。（10分）

3.提出預(yù)防類(lèi)似事件再次發(fā)生的措施。（5分）

參考答案及解析

一、單選題（共20分）

1.D

解析：在超凈工作臺(tái)中完成所有加樣操作可以避免氣溶膠污染，但開(kāi)放蓋子時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致空氣外泄，增加污染風(fēng)險(xiǎn)。A選項(xiàng)操作不當(dāng)，B選項(xiàng)增加污染風(fēng)險(xiǎn)，C選項(xiàng)防護(hù)不足，D選項(xiàng)描述正確。

2.A

解析：根據(jù)《生物安全實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》，P1級(jí)實(shí)驗(yàn)室通常不需要設(shè)置生物安全柜，因?yàn)槠涮幚淼娘L(fēng)險(xiǎn)最低。B、C、D選項(xiàng)均需要設(shè)置生物安全柜。

3.B

解析：含有PCR產(chǎn)物的廢棄物應(yīng)經(jīng)過(guò)滅活處理后再丟棄，直接倒入普通垃圾桶可能導(dǎo)致環(huán)境污染和交叉污染。A、C、D選項(xiàng)均為正確處理方法。

4.B

解析：在生物安全柜工作區(qū)域內(nèi)放置過(guò)多物品會(huì)阻塞空氣流通，導(dǎo)致氣流短路，增加交叉污染風(fēng)險(xiǎn)。A選項(xiàng)操作正確，C選項(xiàng)操作正確，D選項(xiàng)操作正確。

5.B

解析：疑似氣溶膠暴露事件應(yīng)立即用大量清水沖洗暴露部位，并立即上報(bào)，以便及時(shí)處理。A選項(xiàng)錯(cuò)誤，C選項(xiàng)錯(cuò)誤，D選項(xiàng)錯(cuò)誤。

6.B

解析：DMSO的主要作用是提高模板DNA的解旋效率，有助于PCR反應(yīng)的進(jìn)行。A選項(xiàng)錯(cuò)誤，C選項(xiàng)錯(cuò)誤，D選項(xiàng)錯(cuò)誤。

7.D

解析：實(shí)驗(yàn)室生物安全記錄范圍包括實(shí)驗(yàn)人員培訓(xùn)考核記錄、實(shí)驗(yàn)設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)記錄、廢棄物處理臺(tái)賬等，但不包括實(shí)驗(yàn)室布局平面圖。A、B、C選項(xiàng)均屬于記錄范圍。

8.C

解析：使用一次性槍頭可以避免交叉污染。A選項(xiàng)操作不當(dāng)，B選項(xiàng)操作不當(dāng)，D選項(xiàng)操作不當(dāng)。

9.A

解析：PCR實(shí)驗(yàn)室常用的消毒劑有效成分濃度通常為0.1%-0.5%。B、C、D選項(xiàng)濃度過(guò)高或過(guò)低。

10.D

解析：優(yōu)化引物設(shè)計(jì)可以減少非特異性條帶的出現(xiàn)。A、B、C選項(xiàng)均可能導(dǎo)致非特異性條帶增多。

11.B

解析：在P3級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作時(shí)，必須穿著標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)服，以防止病原微生物的感染。A、C、D選項(xiàng)防護(hù)不足。

12.C

解析：PCR實(shí)驗(yàn)室常用的消毒劑對(duì)細(xì)菌芽孢無(wú)效。A、B、D選項(xiàng)均有效。

13.C

解析：將實(shí)驗(yàn)廢棄物直接放入生物安全柜內(nèi)腔會(huì)污染內(nèi)腔。A、B、D選項(xiàng)操作正確。

14.A

解析：高壓蒸汽滅菌可以有效地滅活PCR產(chǎn)物。B、C、D選項(xiàng)滅活效果較差或操作不當(dāng)。

15.A

解析：所有實(shí)驗(yàn)室都需要制定應(yīng)急預(yù)案，以應(yīng)對(duì)可能發(fā)生的生物安全事件。B、C、D選項(xiàng)錯(cuò)誤。

16.A

解析：引物濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致引物二聚體增多。B、C、D選項(xiàng)均可能導(dǎo)致引物二聚體減少。

17.B

解析：用力擠壓傷口會(huì)加重?fù)p傷，應(yīng)避免。A、C、D選項(xiàng)操作正確。

18.C

解析：使用渦旋混合器振蕩樣品會(huì)產(chǎn)生氣溶膠，增加污染風(fēng)險(xiǎn)。A、B、D選項(xiàng)操作相對(duì)安全。

19.B

解析：PCR實(shí)驗(yàn)常用的陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)包含已知陽(yáng)性的模板DNA，以驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)體系是否正常。A、C、D選項(xiàng)錯(cuò)誤。

20.C

解析：在生物安全柜工作區(qū)域內(nèi)快速移動(dòng)物品會(huì)導(dǎo)致空氣外泄。A、B、D選項(xiàng)操作正確。

二、多選題（共15分，多選、錯(cuò)選均不得分）

21.ABCD

解析：PCR實(shí)驗(yàn)室常用的消毒劑包括75%乙醇、0.5%次氯酸鈉、10%甲醛、0.1%吡咯烷酮碘等。

22.ABCD

解析：引物設(shè)計(jì)、DNA聚合酶種類(lèi)、循環(huán)次數(shù)、實(shí)驗(yàn)室溫度等因素都會(huì)影響PCR擴(kuò)增效率。

23.ABCD

解析：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立實(shí)驗(yàn)人員健康管理制度、設(shè)備使用維護(hù)制度、廢棄物處理制度、微生物實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程等管理制度。

24.ABD

解析：在生物安全柜工作區(qū)域內(nèi)飲食或吸煙、使用一次性手套但未及時(shí)更換、放置個(gè)人物品都會(huì)增加污染風(fēng)險(xiǎn)。C選項(xiàng)操作正確。

25.ABCD

解析：PCR實(shí)驗(yàn)室常用的防護(hù)設(shè)備包括生物安全柜、防護(hù)服、護(hù)目鏡、12號(hào)手術(shù)口罩等。

26.ABC

解析：引物設(shè)計(jì)不合理、退火溫度過(guò)高、模板DNA質(zhì)量差都可能導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增。D選項(xiàng)可能導(dǎo)致擴(kuò)增效率降低。

27.ABC

解析：實(shí)驗(yàn)室生物安全事件報(bào)告應(yīng)包括事件發(fā)生時(shí)間地點(diǎn)、涉及的病原微生物種類(lèi)、事件后果及處理措施等內(nèi)容。D選項(xiàng)不屬于報(bào)告內(nèi)容。

28.ABCD

解析：PCR實(shí)驗(yàn)室常用的個(gè)人防護(hù)用品包括防護(hù)服、防護(hù)眼鏡、一次性手套、帽子等。

29.AB

解析：使用生物安全柜時(shí)，應(yīng)定期進(jìn)行功能檢查，保持工作區(qū)域整潔。C選項(xiàng)操作不當(dāng)，D選項(xiàng)操作正確。

30.ABCD

解析：PCR實(shí)驗(yàn)室常用的廢棄物包括含有病原微生物的培養(yǎng)基、離心管、防護(hù)服、一次性手套等。

三、判斷題（共10分，每題0.5分）

31.√

32.×

33.√

34.×

35.×

36.√

37.×

38.√

39.×

40.×

四、填空題（共10空，每空1分，共10分）

41.75%乙醇或0.5%次氯酸鈉

42.三

43.已知陽(yáng)性的模板DNA

44.氣流

45.高溫加熱或化學(xué)滅活

46.肥皂水

47.引物自身退火形成的非特異性產(chǎn)物

48.實(shí)驗(yàn)室生物安全

49.前窗玻璃或工作臺(tái)面；內(nèi)壁

50.醫(yī)療廢物

五、簡(jiǎn)答題（共30分，每題6分）

51.答：

①75%乙醇：通過(guò)使蛋白質(zhì)變性來(lái)殺滅微生