第第PAGE\MERGEFORMAT1頁共NUMPAGES\MERGEFORMAT1頁生物技術與實驗安全題庫及答案解析（含答案及解析）姓名：科室/部門/班級：得分：題型單選題多選題判斷題填空題簡答題案例分析題總分得分

一、單選題（共20分）

1.在生物實驗中，處理有毒有害試劑時，以下哪種操作是錯誤的？

（）A.在通風櫥內操作

（）B.使用個人防護裝備（手套、護目鏡）

（）C.將廢液直接倒入下水道

（）D.操作完成后及時清潔實驗臺面

2.進行微生物培養(yǎng)時，為防止雜菌污染，以下哪項措施最為關鍵？

（）A.實驗室定期消毒

（）B.操作者洗手并佩戴手套

（）C.使用無菌接種環(huán)

（）D.培養(yǎng)基滅菌不徹底

3.使用移液器吸取液體時，以下哪種操作可能導致誤差？

（）A.先捏緊活塞再插入液體中

（）B.快速垂直吸取液體

（）C.吸取后緩慢釋放活塞

（）D.吸取不同密度液體時需校準移液器

4.在基因克隆實驗中，連接酶的作用是？

（）A.切割DNA雙鏈

（）B.合成RNA鏈

（）C.連接DNA片段

（）D.轉錄基因信息

5.實驗室發(fā)生生物泄漏時，以下哪項是首要處理步驟？

（）A.立即疏散人員

（）B.使用消毒劑處理污染區(qū)域

（）C.向主管報告

（）D.更換防護服

6.液氮罐使用時應注意什么？

（）A.罐體傾斜存放

（）B.罐口覆蓋濕布

（）C.定期檢查液位

（）D.直接用嘴吸液氮

7.PCR實驗中，引物退火溫度的設定依據是？

（）A.目標基因長度

（）B.引物GC含量

（）C.DNA模板濃度

（）D.實驗室溫度

8.離心實驗后，若樣品未完全分層，可能的原因是？

（）A.離心速度過低

（）B.離心管未平衡

（）C.液體粘度過高

（）D.以上都是

9.實驗室廢棄物分類中，以下哪項屬于生物危險廢物？

（）A.廢棄玻璃器皿

（）B.污染的培養(yǎng)基

（）C.廢棄化學試劑

（）D.廢棄辦公紙張

10.使用電泳儀進行凝膠電泳時，DNA片段的遷移速度受什么因素影響？

（）A.電場強度

（）B.凝膠濃度

（）C.DNA分子大小

（）D.以上都是

11.細胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基pH值應維持在什么范圍？

（）A.6.0-7.0

（）B.7.2-7.4

（）C.8.0-9.0

（）D.5.0-6.5

12.實驗室通風櫥的風速應保持在多少米/秒？

（）A.0.1-0.2

（）B.0.3-0.5

（）C.0.5-1.0

（）D.1.0-1.5

13.使用超凈工作臺時，以下哪項操作會降低潔凈度？

（）A.工作臺面保持清潔

（）B.關閉紫外燈進行操作

（）C.操作者說話

（）D.定期更換濾網

14.實驗室生物安全柜分為哪幾級？

（）A.I級和II級

（）B.I級、II級和III級

（）C.I級和III級

（）D.II級和III級

15.某實驗涉及重組質粒構建，根據《病原微生物實驗室生物安全管理條例》，該實驗應屬于哪個生物安全等級？

（）A.BSL-1

（）B.BSL-2

（）C.BSL-3

（）D.BSL-4

16.實驗室感染性廢棄物處理時，以下哪種消毒方法最常用？

（）A.煮沸消毒

（）B.高壓蒸汽滅菌

（）C.乙醇浸泡

（）D.離心沉淀

17.下列哪種個人防護裝備可防護化學splash？

（）A.口罩

（）B.化學護目鏡

（）C.耐酸堿手套

（）D.防護服

18.細胞培養(yǎng)皿滅菌通常采用哪種方法？

（）A.紫外線照射

（）B.高壓蒸汽滅菌

（）C.干熱滅菌

（）D.乙醇消毒

19.在動物實驗中，若動物出現(xiàn)急性中毒，應立即采取什么措施？

（）A.繼續(xù)觀察

（）B.立即停止實驗

（）C.報告并記錄

（）D.以上都是

20.實驗記錄本應記錄哪些內容？

（）A.實驗日期、操作者

（）B.實驗步驟、現(xiàn)象

（）C.數(shù)據、結果分析

（）D.以上都是

二、多選題（共15分，多選、錯選不得分）

21.生物安全實驗室的日常管理應包括哪些內容？

（）A.門禁管理

（）B.消毒記錄

（）C.培訓記錄

（）D.設備維護

22.PCR實驗中可能導致擴增失敗的常見原因有哪些？

（）A.引物設計不合理

（）B.DNA模板降解

（）C.退火溫度過高

（）D.緩沖液錯誤

23.細胞培養(yǎng)過程中，以下哪些操作可能導致細胞污染？

（）A.培養(yǎng)基污染

（）B.實驗器皿未滅菌

（）C.操作者手部消毒不徹底

（）D.空氣流通不暢

24.實驗室廢棄物處理時應遵循哪些原則？

（）A.分類收集

（）B.安全運輸

（）C.合理處置

（）D.隨意丟棄

25.電泳實驗中，凝膠類型包括哪些？

（）A.聚丙烯酰胺凝膠

（）B.瓊脂糖凝膠

（）C.聚合物凝膠

（）D.硫酸纖維素凝膠

三、判斷題（共10分，每題0.5分）

26.實驗室門應始終關閉，以防止空氣污染。

（）√

（）×

27.佩戴普通眼鏡即可替代護目鏡進行實驗操作。

（）√

（）×

28.液氮罐應存放在陰涼通風處。

（）√

（）×

29.微生物實驗完成后，培養(yǎng)皿可直接丟棄。

（）√

（）×

30.細胞培養(yǎng)過程中，pH值波動對細胞生長無影響。

（）√

（）×

31.實驗室發(fā)生火情時，應優(yōu)先搶救儀器設備。

（）√

（）×

32.使用移液器時，快吸慢放可減少誤差。

（）√

（）×

33.基因工程實驗中，載體質粒必須含有抗生素抗性基因。

（）√

（）×

34.高壓蒸汽滅菌的溫度和時間與滅菌效果無關。

（）√

（）×

35.實驗記錄本可使用圓珠筆書寫。

（）√

（）×

四、填空題（共10空，每空1分，共10分）

36.實驗室發(fā)生生物泄漏時，應立即啟動________預案。

37.操作有毒試劑時，應佩戴________和________。

38.PCR實驗中，________是合成DNA的引物。

39.細胞培養(yǎng)的適宜溫度通常為________℃。

40.實驗室廢棄物分為________、________和化學廢物。

41.高壓蒸汽滅菌的標準溫度為________℃，時間不少于________分鐘。

42.實驗室通風櫥的進風口應設置在________側。

43.細胞培養(yǎng)基通常含有________、________和激素。

44.使用電泳儀時，DNA片段的遷移方向是________極。

45.實驗記錄本應字跡工整，________，便于查閱。

五、簡答題（共30分）

46.簡述生物安全實驗室的“三不”原則（不外流、不擴散、不感染）及其意義。（5分）

47.在進行動物實驗前，應如何評估實驗風險并采取相應的安全措施？（6分）

48.PCR實驗中，如何判斷引物設計是否合理？請列舉至少三種評估指標。（6分）

49.實驗室發(fā)生火情時，應如何應急處理？（6分）

50.細胞培養(yǎng)過程中，如何防止細菌污染？（6分）

六、案例分析題（共15分）

某生物技術公司實驗室正在進行重組蛋白表達實驗，實驗過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液出現(xiàn)渾濁，懷疑存在污染。請分析以下問題：

（1）可能存在的污染類型有哪些？（3分）

（2）應如何排查污染源？（4分）

（3）為防止污染擴散，應采取哪些措施？（4分）

（4）總結該案例的教訓，提出改進建議。（4分）

參考答案及解析

一、單選題（共20分）

1.C

解析：有毒有害試劑廢液應按規(guī)范處理（如滅菌后倒入指定容器），直接倒入下水道會污染環(huán)境，其他選項均為正確操作。

2.B

解析：操作者手部消毒和佩戴手套是防止雜菌污染的關鍵，其他選項雖有助于降低污染風險，但核心在于操作者自身防護。

3.B

解析：吸取液體時應垂直緩慢插入，快速垂直吸取可能導致氣泡混入或液體濺出，其他選項均為正確操作。

4.C

解析：連接酶在基因克隆中用于連接DNA片段，其他選項描述錯誤（切割酶為限制性內切酶，RNA合成由RNA聚合酶完成）。

5.B

解析：生物泄漏時首要步驟是使用消毒劑控制污染源，其他選項雖重要但需在控制污染后進行。

6.C

解析：液氮罐應直立存放并定期檢查液位，其他選項均存在安全隱患。

7.B

解析：引物退火溫度與GC含量相關（GC含量越高，Tm值越高），其他選項與退火溫度無直接關系。

8.D

解析：樣品未分層可能是離心速度、管平衡或液體粘度過高等多種因素導致，其他選項均可能部分影響分層效果。

9.B

解析：污染的培養(yǎng)基屬于生物危險廢物，其他選項分類錯誤（玻璃器皿為銳器廢物，化學試劑為化學廢物）。

10.D

解析：DNA遷移速度受電場強度、凝膠濃度和分子大小共同影響，其他選項均起部分作用。

11.B

解析：細胞培養(yǎng)pH值通常維持在7.2-7.4，其他范圍均不適宜。

12.C

解析：通風櫥風速0.5-1.0米/秒可確?？諝饬鲃樱渌L速過低或過高均不合適。

13.C

解析：操作者說話會擾動氣流，降低潔凈度，其他選項有助于維持潔凈環(huán)境。

14.B

解析：生物安全柜分為I級、II級和III級，其他選項分類不全或錯誤。

15.B

解析：重組質粒構建涉及病原微生物操作，屬于BSL-2級別，其他級別風險過低或過高。

16.B

解析：高壓蒸汽滅菌可高效消毒感染性廢棄物，其他方法效果有限或操作不便。

17.B

解析：化學護目鏡可防護splash，其他選項防護范圍有限（口罩防護呼吸道，手套防護接觸）。

18.B

解析：細胞培養(yǎng)皿需高溫高壓滅菌，其他方法效果不足或適用范圍不同。

19.D

解析：動物實驗出現(xiàn)急性中毒應立即停止、報告并記錄，三者均需采取。

20.D

解析：實驗記錄本應包含所有內容，確?？勺匪菪?，其他選項不全面。

二、多選題（共15分，多選、錯選不得分）

21.ABCD

解析：生物安全實驗室管理需全面覆蓋門禁、消毒、培訓和設備維護，缺一不可。

22.ABC

解析：引物設計不合理、DNA降解和退火溫度過高均會導致擴增失敗，緩沖液錯誤影響較小。

23.ABCD

解析：培養(yǎng)基、器皿、手部消毒和空氣流通均可能導致細胞污染，需嚴格防控。

24.ABC

解析：廢棄物處理需分類、運輸和合理處置，隨意丟棄嚴禁。

25.AB

解析：聚丙烯酰胺和瓊脂糖是常用凝膠類型，聚合物和硫酸纖維素較少用于常規(guī)電泳。

三、判斷題（共10分）

26.√

解析：實驗室門關閉可減少空氣流動，防止病原微生物擴散。

27.×

解析：護目鏡防護范圍遠超普通眼鏡，必須使用。

28.√

解析：液氮罐需陰涼通風存放，避免爆炸風險。

29.×

解析：微生物培養(yǎng)皿需高壓滅菌后處理，不可直接丟棄。

30.×

解析：pH值波動會影響細胞生長和代謝。

31.×

解析：火情時優(yōu)先搶救人員，設備可后續(xù)處理。

32.√

解析：快吸慢放可減少液體粘滯誤差，提高準確性。

33.×

解析：載體質粒不一定含抗生素抗性基因，依實驗需求選擇。

34.×

解析：滅菌效果與溫度、時間直接相關。

35.×

解析：實驗記錄本需使用藍黑墨水或打印，圓珠筆易褪色。

四、填空題（共10空，每空1分，共10分）

36.生物安全

37.手套、護目鏡

38.引物

39.37

40.生物危險、化學危險

41.121.3、15

42.靠近

43.營養(yǎng)物質、血清

44.正

45.永久

五、簡答題（共30分）

46.答：

①不外流：實驗產生的病原微生物不得外溢擴散。

②不擴散：防止實驗過程中病原微生物擴散到其他區(qū)域。

③不感染：實驗人員不得感染病原微生物。

意義：保障實驗人員和環(huán)境安全，防止生物安全事故。

47.答：

①風險評估：分析實驗操作可能存在的生物危害（如感染、過敏），確定風險等級。

②安全措施：

-選用低毒或無毒試劑；

-佩戴防護裝備（手套、口罩、防護服）；

-在生物安全柜操作；

-定期消毒實驗設備。

48.答：

①引物特異性（與模板結合能力）；

②引物二聚體形成傾向；

③退火溫度范圍；

④產物大小與預期匹配。

49.答：

①立即切斷火源；

②使用滅火器（選擇合適類型）