CAR-NK細胞治療質(zhì)量技術(shù)員崗位考試試卷及答案單項選擇題（每題2分，共10題）1.CAR-NK細胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基是（）A.DMEMB.RPMI1640C.McCoy's5AD.F122.細胞計數(shù)時，常用的染料是（）A.臺盼藍B.結(jié)晶紫C.中性紅D.伊紅3.以下哪種不屬于CAR-NK細胞的質(zhì)量檢測指標（）A.細胞活性B.細胞純度C.細胞大小D.表面標志物表達4.CAR-NK細胞凍存時，常用的凍存液成分不包括（）A.DMSOB.FBSC.PBSD.培養(yǎng)液5.無菌操作時，超凈工作臺紫外線消毒時間一般為（）A.15分鐘B.30分鐘C.45分鐘D.60分鐘6.用于CAR-NK細胞轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒需具備（）A.復(fù)制原點B.抗性基因C.目的基因D.以上都是7.細胞復(fù)蘇時，水浴溫度一般為（）A.30℃B.37℃C.40℃D.42℃8.檢測CAR-NK細胞表面標志物常用的技術(shù)是（）A.ELISAB.WesternblotC.流式細胞術(shù)D.免疫組化9.以下哪種因素不會影響CAR-NK細胞的活性（）A.培養(yǎng)時間B.培養(yǎng)溫度C.細胞接種密度D.培養(yǎng)箱內(nèi)濕度10.CAR-NK細胞治療產(chǎn)品放行前需進行（）A.安全性檢測B.有效性檢測C.質(zhì)量穩(wěn)定性檢測D.以上都是多項選擇題（每題2分，共10題）1.CAR-NK細胞的優(yōu)點包括（）A.安全性高B.殺瘤譜廣C.無移植物抗宿主病D.制備簡單2.細胞培養(yǎng)過程中，需要監(jiān)測的參數(shù)有（）A.溫度B.pH值C.溶解氧D.細胞密度3.質(zhì)量控制文件包括（）A.標準操作規(guī)程B.質(zhì)量標準C.檢驗記錄D.偏差處理記錄4.用于CAR-NK細胞激活的物質(zhì)有（）A.IL-2B.IL-15C.IL-18D.IFN-γ5.細胞凍存的注意事項包括（）A.緩慢降溫B.標記清晰C.凍存液現(xiàn)配現(xiàn)用D.凍存管密封性好6.檢測CAR-NK細胞活性的方法有（）A.MTT法B.CCK-8法C.乳酸脫氫酶釋放法D.熒光定量PCR法7.影響CAR-NK細胞轉(zhuǎn)染效率的因素有（）A.質(zhì)粒質(zhì)量B.轉(zhuǎn)染試劑C.細胞狀態(tài)D.轉(zhuǎn)染方法8.細胞培養(yǎng)過程中防止微生物污染的措施有（）A.無菌操作B.定期更換培養(yǎng)液C.對培養(yǎng)器材消毒D.空氣過濾9.CAR-NK細胞治療的質(zhì)量風(fēng)險點包括（）A.細胞來源B.制備工藝C.儲存運輸D.臨床應(yīng)用10.質(zhì)量檢測實驗室常用的儀器設(shè)備有（）A.流式細胞儀B.酶標儀C.離心機D.生物安全柜判斷題（每題2分，共10題）1.CAR-NK細胞可以無限傳代培養(yǎng)。（）2.細胞凍存液中DMSO的濃度越高越好。（）3.流式細胞術(shù)只能檢測細胞表面標志物。（）4.超凈工作臺在使用前不需要進行清潔。（）5.CAR-NK細胞治療產(chǎn)品不需要進行動物實驗。（）6.細胞培養(yǎng)過程中，CO?濃度對細胞生長無影響。（）7.檢測細胞純度只能用流式細胞術(shù)。（）8.質(zhì)粒提取過程中，不需要進行質(zhì)量檢測。（）9.質(zhì)量控制的目的是保證產(chǎn)品質(zhì)量符合標準。（）10.CAR-NK細胞在液氮中可以長期保存。（）簡答題（每題5分，共4題）1.簡述CAR-NK細胞治療質(zhì)量控制的主要環(huán)節(jié)。2.列舉兩種檢測CAR-NK細胞活性的常用方法及原理。3.細胞培養(yǎng)過程中，如何防止微生物污染？4.簡述CAR-NK細胞凍存和復(fù)蘇的基本步驟。討論題（每題5分，共4題）1.討論CAR-NK細胞治療與傳統(tǒng)腫瘤治療方法相比的優(yōu)勢和挑戰(zhàn)。2.若CAR-NK細胞治療產(chǎn)品在臨床應(yīng)用中出現(xiàn)不良反應(yīng)，從質(zhì)量控制角度應(yīng)如何分析和處理？3.談?wù)勀銓AR-NK細胞治療質(zhì)量標準化的理解和看法。4.隨著技術(shù)發(fā)展，CAR-NK細胞治療質(zhì)量檢測技術(shù)可能會有哪些新的突破？答案單項選擇題1.B2.A3.C4.C5.B6.D7.B8.C9.D10.D多項選擇題1.ABC2.ABCD3.ABCD4.ABCD5.ABCD6.ABC7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD判斷題1.×2.×3.×4.×5.×6.×7.×8.×9.√10.√簡答題1.主要環(huán)節(jié)包括細胞來源（供體篩選等）、細胞培養(yǎng)（過程參數(shù)監(jiān)控）、轉(zhuǎn)染（效率及質(zhì)量檢測）、收獲（活性、純度等檢測）、凍存與復(fù)蘇（效果檢測）、制劑制備（成分及無菌檢測）等。2.MTT法：利用活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲瓚，其生成量與活細胞數(shù)成正比。CCK-8法：在電子耦合試劑存在下，WST-8被細胞內(nèi)脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物，顏色深淺與細胞活性相關(guān)。3.嚴格無菌操作，如實驗前消毒雙手、實驗器材；定期更換培養(yǎng)液，防止營養(yǎng)耗盡和代謝產(chǎn)物積累；對培養(yǎng)器材進行嚴格消毒滅菌；維持培養(yǎng)環(huán)境（超凈臺、培養(yǎng)箱等）清潔，空氣過濾等。4.凍存：配制凍存液，收集細胞離心，棄上清，加入凍存液重懸，裝入凍存管，程序降溫（-20℃1h，-80℃過夜，轉(zhuǎn)入液氮）。復(fù)蘇：從液氮取出凍存管，迅速放入37℃水浴搖蕩至完全融化，離心棄凍存液，加培養(yǎng)液重懸培養(yǎng)。討論題1.優(yōu)勢：安全性高、殺瘤譜廣、無移植物抗宿主病等。挑戰(zhàn)：制備工藝復(fù)雜、成本高、質(zhì)量控制難度大、臨床應(yīng)用經(jīng)驗有限等。2.首先回顧整個制備流程，檢查細胞來源、培養(yǎng)條件、轉(zhuǎn)染效率等環(huán)節(jié)記錄，分析是否有操作失誤或質(zhì)量波動。對產(chǎn)品進行全面質(zhì)量檢測，對比放行標準。若因微生物污染，需追溯污染源頭；若細胞活性等問題，分析培養(yǎng)及處理過程因素，根據(jù)結(jié)果采取改進措施或重新制備。3.質(zhì)量標準化可確保不同實驗室、不同批次產(chǎn)品質(zhì)量一致，提高安全性和有效性。應(yīng)涵蓋從細胞采集到臨床應(yīng)用全流程，制定統(tǒng)一標準操作規(guī)范、