ICS65.020

CCSB61

6111

楊凌農(nóng)業(yè)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)示范區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)

DB6111/T211—2024

羊肚菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

TechnicalregulationsfortheproductionofMorelstrains

2024-05-23發(fā)布2024-06-23實(shí)施

楊凌示范區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局??發(fā)布

DB6111/T211—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。

本文件由楊凌示范區(qū)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)和鄉(xiāng)村振興局提出并歸口。

本文件起草單位：楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院、楊凌君寶家庭農(nóng)場(chǎng)、陜西楊凌金麒麟生物科技有限公司。

本文件主要起草人：杜璨、王鋒、胡煜、姚瑞祺、杜璇、周濟(jì)銘、黃無(wú)非、高敏、趙玉鵬、

任文飛、強(qiáng)磊、張嘉程、陳德財(cái)、王時(shí)聰、王玉鵬、李應(yīng)濤。

本文件首次發(fā)布。

本文件由楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院負(fù)責(zé)解釋。

聯(lián)系人：杜璨

聯(lián)系方式/p>

聯(lián)系地址：陜西省楊凌示范區(qū)渭惠路24號(hào)

I

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羊肚菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了羊肚菌菌種生產(chǎn)的術(shù)語(yǔ)和定義、生產(chǎn)要求、技術(shù)要求、檢驗(yàn)、貯藏、記錄與留樣、標(biāo)

簽、標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸和貯存等要求。

本文件適用于羊肚菌各級(jí)菌種生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB191包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志

GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

GB/T12728-2006食用菌術(shù)語(yǔ)

NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

NY/T1742食用菌菌種通用技術(shù)要求

NY/T1846食用菌菌種檢驗(yàn)規(guī)程

NY/T1935食用菌栽培基質(zhì)質(zhì)量安全要求

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

羊肚菌Morel

學(xué)名：Morchellaspp.。羊肚菌科、羊肚菌屬真菌。菌蓋近球形、卵形至橢圓形，頂端鈍圓或尖，菌

蓋表面有似羊肚狀的凹坑，且凹坑大小不定，呈淡黃褐色至深褐色。菌柄近圓柱形，近白色，中空，圓

筒形，孢子長(zhǎng)橢圓形，無(wú)色，側(cè)絲頂端膨大，體輕，質(zhì)酥脆。

3.2

菌種Strains

通過(guò)生產(chǎn)試驗(yàn)驗(yàn)證具有特異性、均一性和穩(wěn)定性，產(chǎn)量高、抗性強(qiáng)的菌株或品種，具結(jié)實(shí)性的菌絲

培養(yǎng)物。包括母種、原種和栽培種。

[來(lái)源：GB/T12728—2006，2.5.6，有修改]

3.3

母種Stockculture

具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物。也稱一級(jí)種、試管種。

[來(lái)源：GB/T12728—2006，2.5.7，有修改]

3.4

原種Pre-culturespawn

由母種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。也稱二級(jí)種。

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[來(lái)源：GB/T12728—2006，2.5.8]

3.5

栽培種Spawn

由原種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。也稱為三級(jí)種。

注：只用于擴(kuò)大到栽培出菇袋或直接出菇，不宜再次擴(kuò)大繁殖菌種。

[來(lái)源：GB/T12728—2006，2.5.9，有修改]

4生產(chǎn)要求

4.1生產(chǎn)人員

從事菌種生產(chǎn)的技術(shù)人員和檢驗(yàn)人員，應(yīng)經(jīng)過(guò)專業(yè)培訓(xùn)、熟練掌握菌種生產(chǎn)技術(shù)要求。

4.2生產(chǎn)環(huán)境

場(chǎng)地選擇、廠房設(shè)置和布局、設(shè)備設(shè)施應(yīng)符合NY/T528的規(guī)定。

4.3生產(chǎn)設(shè)備

生產(chǎn)菌種的粉碎機(jī)、電子秤、攪拌機(jī)、裝袋（瓶）機(jī)、高壓滅菌鍋或常壓滅菌鍋、超凈工作臺(tái)或接

種箱、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)架、顯微鏡等設(shè)備，應(yīng)符合NY/T528規(guī)定。

4.4菌種來(lái)源

生產(chǎn)原種應(yīng)從具有相應(yīng)資質(zhì)的供種單位引進(jìn)。應(yīng)選擇抗性強(qiáng)，優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)、適合當(dāng)?shù)卦耘嗟膬?yōu)良菌株。

菌種質(zhì)量符合NY/T1742的要求。

4.5生產(chǎn)原料

生產(chǎn)原種及栽培種所需的小麥粒、玉米芯、麥麩、石膏、石灰等主料原料的質(zhì)量及貯藏應(yīng)符合NY/T

1935要求。生產(chǎn)用水應(yīng)符合GB5749要求。

5技術(shù)要求

5.1母種

5.1.1容器

應(yīng)選用18mm×180mm或者20mm×200mm的試管。試管棉塞應(yīng)使用梳棉、化纖棉或硅膠塞。

5.1.2培養(yǎng)基配方

馬鈴薯200g(用浸出液)，葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL，pH自然。

5.1.3分裝滅菌

配置好的培養(yǎng)基應(yīng)立即分裝。裝量為試管長(zhǎng)度的1/4～1/5。試管口應(yīng)保持潔凈，并用試管塞封口后

包扎，直立放入高壓滅菌鍋內(nèi)（壓力0.12Mpa～0.15Mpa、溫度121℃～126℃），滅菌20min。

5.1.4擺斜面

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滅菌完成后，在壓力表指針降為0Mpa時(shí)，打開(kāi)排氣閥，立即將試管趁熱擺成適當(dāng)?shù)男倍龋徛?/p>

卻至瓊脂凝固成長(zhǎng)度不超過(guò)試管3/4的斜面。

5.1.5接種

5.1.5.1接種室(箱)處理程序

清潔→搬入接種物和被接種物→接種室(箱)的消毒處理。

5.1.5.2接種室(箱)消毒

應(yīng)藥物消毒后，再用紫外燈照射30min。

5.1.5.3超凈工作臺(tái)的消毒

應(yīng)先用75%酒精或新潔爾滅溶液進(jìn)行表面擦拭消毒，之后預(yù)凈20min。

5.1.5.4接種操作

在超凈工作臺(tái)上，嚴(yán)格按無(wú)菌操作要求接種。每一箱(室)接種應(yīng)為單一品種，接種完成后應(yīng)及時(shí)貼

好標(biāo)簽。

5.1.5.5接種點(diǎn)

試管斜面的中部。

5.1.5.6接種室(箱)后處理

接種室(箱)每次使用后，要及時(shí)清理清潔，排除廢氣，清除廢物，臺(tái)面要用75%酒精或新潔爾滅溶

液擦拭消毒。

5.1.6培養(yǎng)

接種后，將試管置于培養(yǎng)室，在溫度16℃～20℃，空氣濕度75%以下，通風(fēng)避光培養(yǎng)。定期檢查，

清除污染試管。菌絲長(zhǎng)滿試管，穩(wěn)定3d～5d即可用于原種生產(chǎn)。

5.2原種

5.2.1容器

采用750mL以下、瓶口直徑≤40mm、耐126℃高溫的聚丙烯菌種瓶或玻璃瓶。

5.2.2培養(yǎng)基配方

小麥53%，玉米芯40%，麥麩5%，石膏1%，石灰1%。

5.2.3培養(yǎng)基制備

玉米芯粉碎至5mm以下，用清水浸泡24h，瀝干，堆成梯形，在堆面上每間隔30cm～50cm打1個(gè)

通氣孔，用塑料薄膜遮蓋，自然發(fā)酵24h～48h備用。

小麥用1%的石灰水浸泡12h后，清水煮沸15min，攪動(dòng)至麥粒漲而不破立即撈出，瀝干。

將發(fā)酵后的玉米芯、煮漲后的麥粒與麥麩、石膏、石灰等干原料按比例拌和均勻，含水量65%，pH

值6.5～7.5。

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5.2.4裝瓶

采用裝瓶機(jī)或人工，將培養(yǎng)基質(zhì)裝至瓶身的3/4處，裝瓶后立即滅菌。采用人工裝瓶的，需用打孔

器在瓶口處打直徑1.0cm～1.5cm、深8.0cm～12.0cm的孔。

5.2.5滅菌

滅菌要：

a)高壓滅菌在121℃～126℃下滅菌3h～4h。

b)常壓滅菌在3h之內(nèi)使溫度升至100℃，恒溫保持10h～12h。

5.2.6冷卻

采用高壓滅菌的，滅菌結(jié)束自然降壓至0.05Mpa以下，打開(kāi)排氣閥降溫20min～30min取出料袋；

常壓滅菌的，滅菌結(jié)束后保持3h后取出料袋。迅速移入冷卻室，冷卻至25℃以下即可接種。

5.2.7接種

5.2.7.1接種室(箱)處理程序

同5.1.5.1。

5.2.7.2接種室(箱)消毒

同5.1.5.2。

5.2.7.3超凈工作臺(tái)的消毒

同5.1.5.3。

5.2.7.4接種操作

同5.1.5.4。

5.2.7.5接種點(diǎn)

應(yīng)從容器開(kāi)口處一點(diǎn)接種，不應(yīng)打孔多點(diǎn)接種。1支母種轉(zhuǎn)接原種不超過(guò)6瓶。

5.2.7.6接種室(箱)后處理

同5.1.5.6。

5.2.8培養(yǎng)

接種后放入培養(yǎng)室，溫度15℃～18℃，相對(duì)濕度不超過(guò)60%，避光。保持培養(yǎng)室通風(fēng)良好，每天

通風(fēng)1～2次，每次25min～30min。15d～20d菌絲長(zhǎng)滿全瓶后，繼續(xù)培養(yǎng)3d～5d即可用于栽培種生

產(chǎn)。培養(yǎng)期間應(yīng)定期檢查，及時(shí)揀出不合格菌種。

5.3栽培種

5.3.1容器

宜采用15cm×28cm×0.005cm或17cm×35cm×0.005cm規(guī)格的聚丙烯（高壓滅菌）或低壓聚

乙烯（常壓滅菌）折角塑料袋。

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5.3.2培養(yǎng)基配方

同5.2.2。

5.3.3培養(yǎng)基制備

同5.2.3。

5.3.4裝袋

將培養(yǎng)料分裝在塑料袋內(nèi)，松緊適度，袋口和袋外壁保持潔凈。當(dāng)天拌好的料應(yīng)當(dāng)天裝完，并立即

滅菌。

5.3.5滅菌

同5.2.5。

5.3.6冷卻

同5.2.6。

5.3.7接種

1瓶原種轉(zhuǎn)接栽培種不超過(guò)60袋，其他技術(shù)要求同5.2.7。

5.3.8培養(yǎng)

同5.2.8。

6檢驗(yàn)

母種、原種和栽培種的抽樣、感官檢驗(yàn)和判定按照NY/T1846中的規(guī)定執(zhí)行。

7貯藏

培養(yǎng)好的菌種應(yīng)置于0℃～4℃的冷庫(kù)中貯存。栽培種貯存應(yīng)不超過(guò)30d。

8記錄與留樣

8.1記錄

應(yīng)詳細(xì)記錄生產(chǎn)單位、菌種來(lái)源、生產(chǎn)時(shí)間、生產(chǎn)數(shù)量等信息。記錄表參見(jiàn)附錄A，保留2年以上。

8.2留樣

各級(jí)菌種均應(yīng)按生產(chǎn)批次隨機(jī)抽樣留存?zhèn)洳?。每個(gè)批次抽樣留存量應(yīng)不少于3支(瓶、袋)，并在

1℃～4℃條件下保存至正常出菇。

9標(biāo)簽、標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸和貯存

9.1標(biāo)簽、標(biāo)志

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出售的菌種應(yīng)貼標(biāo)簽。注明菌種品種、級(jí)別、接種日期、生產(chǎn)單位、地址電話等。外包裝上應(yīng)有符

合GB191規(guī)定的防曬、防潮、防倒立、防高溫、防雨、防重壓等標(biāo)志。

9.2包裝

母種外包裝應(yīng)用木盒或有足夠強(qiáng)度的紙盒、原種和栽培種外包裝用木箱或有足夠強(qiáng)度的紙箱包裝，

盒（箱）內(nèi)除菌種外的空隙應(yīng)用輕質(zhì)材料填滿塞牢。盒（箱）內(nèi)應(yīng)附使用說(shuō)明書(shū)。

9.3運(yùn)輸

菌種運(yùn)輸中應(yīng)有防曬、防潮、防雨、防凍、防震及防止雜菌污染的設(shè)施與措施。不得與有毒有害物

品混裝混運(yùn)。

9.4貯存

應(yīng)在干燥、低溫、無(wú)陽(yáng)光直射，無(wú)污染的場(chǎng)所貯存。母種應(yīng)在4℃~6℃、原種和栽培種應(yīng)在1℃～

4℃的冰箱或冷庫(kù)內(nèi)貯存。

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A

A

附錄A

（資料性）