ICS65.100.20

CCSB50

21

遼寧省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB21/T3451—2021

漁業(yè)水體中撲草凈殘留量的測定

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

Determinationofprometrynresidueinfisherieswater—

Liquidchromatography-tandemmassspectrometry

2021-06-30發(fā)布2021-07-30實施

遼寧省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB21/T3451—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任。

本文件由遼寧省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。

本文件由遼寧省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳歸口。

本文件起草單位：大連市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)發(fā)展服務(wù)中心、大連市檢驗檢測認(rèn)證技術(shù)服務(wù)中心。

本文件主要起草人：許炳雯、王駿、許巖、丁勇、劉彤、孫程鵬、宋曉陽、尚宏鑫、陳穎、馬琳、

楊婷婷、田斌。

本文件發(fā)布實施后，任何單位和個人如有問題和意見建議，均可以通過來電和來函等方式進(jìn)行反饋，

我們將及時答復(fù)并認(rèn)真處理，根據(jù)實際情況依法進(jìn)行評估及復(fù)審。

歸口管理部門通訊地址：遼寧省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管局（沈陽市和平區(qū)太原北街2號綜

合樓A座），聯(lián)系人：馬京京，聯(lián)系電話13840306249，電子郵箱：lnncpjg@163.com。

文件起草單位通訊地址：大連市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)發(fā)展服務(wù)中心（大連市沙河口區(qū)中山路678號），聯(lián)

系電話

I

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漁業(yè)水體中撲草凈殘留量的測定

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

1范圍

本文件規(guī)定了液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定漁業(yè)水體中撲草凈殘留量的原理、試劑和材料、儀器和設(shè)

備、測定步驟、空白試驗、定量限、準(zhǔn)確度和精密度。

本文件適用于漁業(yè)水體中撲草凈殘留量的測定。

本文件的定量限為5.0ng/L。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

HJ493水質(zhì)樣品的保存和管理技術(shù)規(guī)定

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4原理

水樣中的撲草凈用固相萃取柱富集、凈化、洗脫，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測，內(nèi)標(biāo)法定量。

5試劑和材料

除非另作說明，本方法所用試劑均為分析純，試驗用水為符合GB/T6682規(guī)定的一級水。

5.1乙腈：色譜純。

5.2甲醇：色譜純。

5.3水-乙腈混合溶液：水+乙腈（95+5，體積比）。

5.4微孔濾膜：孔徑0.22μm，水系。

5.5撲草凈標(biāo)準(zhǔn)品(Prometryn,C10H19N5S,CAS號,7287-19-6)：純度≥98%。

5.6氘代撲草凈(d6-撲草凈）內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液：濃度100μg/mL。

1

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5.7撲草凈標(biāo)準(zhǔn)儲備液（100μg/mL）：準(zhǔn)確稱取10mg（精確至0.1mg）撲草凈標(biāo)準(zhǔn)品（5.5），用甲

醇（5.2）溶解并定容至100mL，配置成100μg/mL的撲草凈標(biāo)準(zhǔn)儲備液，-18℃避光保存，有效期6

個月。

5.8標(biāo)準(zhǔn)中間液

5.8.1撲草凈標(biāo)準(zhǔn)中間液（1.0μg/mL）：準(zhǔn)確量取1.0mL室溫下的撲草凈標(biāo)準(zhǔn)儲備液（5.7）于100mL

容量瓶中，用甲醇（5.2）定容至刻度，配制成1.0μg/mL的撲草凈標(biāo)準(zhǔn)中間液，4℃避光保存，有效

期3周。

5.8.2氘代撲草凈(d6-撲草凈）標(biāo)準(zhǔn)中間液（1.0μg/mL）：準(zhǔn)確量取1.0mL室溫下的氘代撲草凈標(biāo)

準(zhǔn)儲備液（5.6）于100mL容量瓶中，用甲醇（5.2）定容至刻度，配制成1.0μg/mL的氘代撲草凈(d6-

撲草凈）標(biāo)準(zhǔn)中間液，4℃避光保存，有效期3周。

5.9標(biāo)準(zhǔn)工作液

5.9.1撲草凈標(biāo)準(zhǔn)工作液（0.05μg/mL）：準(zhǔn)確量取0.5mL室溫下的撲草凈標(biāo)準(zhǔn)中間液（5.8.1）于

10mL容量瓶中，用水-乙腈混合液（5.3）定容至刻度，配制成0.05μg/mL的撲草凈標(biāo)準(zhǔn)工作液，現(xiàn)配

現(xiàn)用。

5.9.2氘代撲草凈(d6-撲草凈）標(biāo)準(zhǔn)工作液（0.05μg/mL）：準(zhǔn)確量取0.5mL室溫下的氘代撲草凈(d6-

撲草凈）標(biāo)準(zhǔn)中間液（5.8.2）于10mL容量瓶中，用水-乙腈混合液（5.3）定容至刻度，配制成0.05μg/mL

的氘代撲草凈(d6-撲草凈）標(biāo)準(zhǔn)工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。

5.10固相萃取柱：HLB，3mL/60mg，或相當(dāng)?shù)膬艋?/p>

6儀器和設(shè)備

6.1高效液相色譜-三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源（ESI）。

6.2電子天平：感量0.01mg。

6.3氮氣吹干儀：可控溫。

6.4高速冷凍離心機(jī)：最高轉(zhuǎn)速不低于12000r/min。

6.5固相萃取裝置。

6.6漩渦振蕩器。

6.7超聲波清洗器。

7測定步驟

7.1試樣的采集與保存

將現(xiàn)場采集水樣裝入潔凈的棕色具塞玻璃瓶中，按HJ493規(guī)定條件保存。

7.2樣品前處理

2

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先后用5mL甲醇和5mL一級水對HLB固相萃取柱進(jìn)行活化，流速均為6mL/min。取200mL水樣，加入

40μL氘代撲草凈(d6-撲草凈）標(biāo)準(zhǔn)工作液（5.9.2），搖勻，微孔濾膜抽濾備用。準(zhǔn)確吸取100mL上述

水樣，以6mL/min的流速通過活化好的HLB固相萃取柱，棄去流出液，用5mL一級水以6mL/min的流速潤

洗固相萃取柱，再以25mL/min的流速注入20mL空氣對固相萃取柱進(jìn)行干燥。干燥后用8mL甲醇以6

mL/min的流速洗脫，收集洗脫液，氮氣吹干，用水-乙腈混合液（5.3）定容至1.0mL，經(jīng)高速冷凍離心

機(jī)以12000r/min的速度離心15分鐘后，取上清液過微孔濾膜待測。

7.3測定條件

7.3.1液相色譜條件

液相色譜條件如下：

a)色譜柱：C18柱，50mm×2.1mm，1.7μm，或其他等效柱。

b)柱溫：40℃。

c)進(jìn)樣量：0.5μL。

梯度洗脫流動相參見表1。

表1梯度洗脫流動相

時間（min）水（%）乙腈（%）流速（mL/min）

0.0095.05.00.40

0.1095.05.00.40

1.405.095.00.40

2.405.095.00.40

2.5095.05.00.40

3.5095.05.00.40

7.3.2質(zhì)譜條件

質(zhì)譜條件如下：

a)離子源：電噴霧離子源（ESI）。

b)掃描方式：正離子模式。

c)檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。

d)離子源溫度：150℃。

e)脫溶劑氣溫度：550℃。

f)脫溶劑氣流量：1000L/Hr。

g)碰撞氣（氬氣）流量：0.15mL/min。

h)毛細(xì)管電壓：1.00kV。

監(jiān)測離子對及碰撞能量見表2。

表2監(jiān)測離子對及碰撞能量

名稱定性離子對（m/z）定量離子對（m/z）碰撞能量/V

242/20018

撲草凈242/158

242/15822

氘代撲草凈（d6-撲草凈）248/206248/20618

3

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7.4定性測定

樣品中撲草凈和氘代撲草凈（d6-撲草凈）的保留時間之比，與標(biāo)準(zhǔn)溶液中對應(yīng)的時間之比，偏差

在±2.5%之內(nèi)；且樣品中定性離子和定量離子的相對豐度比，與濃度接近的標(biāo)準(zhǔn)溶液相比，若偏差不超

過表3規(guī)定的范圍，則可判定為樣品中存在撲草凈。

表3定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差

相對離子豐度＞50%＞20%至50%＞10%至20%≤10%

允許的最大偏差±20%±25%±30%±50%

7.5定量測定

在儀器正常工作條件下，對標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)樣，以標(biāo)準(zhǔn)溶液中撲草凈峰面積和氘代撲草凈（d6-撲

草凈）峰面積的比值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液中撲草凈濃度與氘代撲草凈（d6-撲草凈）濃度的比值為橫坐

標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對樣品進(jìn)行定量，樣品溶液中撲草凈的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器測定

的線性范圍內(nèi)（0.25ng/mL～10ng/mL）。內(nèi)標(biāo)法定量。撲草凈和氘代撲草凈（d6-撲草凈）的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

的多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）色譜圖參見附錄A。

7.6結(jié)果計算

樣品中撲草凈的含量按式（1）計算，結(jié)果需扣除空白值。

ccAAV

Xsisi2······························································(1)

csiAsAiV1

式中：

X——樣品中撲草凈的含量，單位為納克每升（ng/L）；

cs——標(biāo)準(zhǔn)上機(jī)液中撲草凈質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；

ci——水樣中氘代撲草凈質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；

csi——標(biāo)準(zhǔn)上機(jī)液中氘代撲草凈質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；

A——水樣中撲草凈峰面積；

Asi——標(biāo)準(zhǔn)上機(jī)液中氘代撲草凈峰面積；

As——標(biāo)準(zhǔn)上機(jī)液中撲草凈峰面積；

Ai——水樣中氘代撲草凈峰面積；

V2——最終定容體積，單位為毫升（mL）；

V1——過柱水樣體積，單位為升（L）。

7.7結(jié)果表示

平行測定結(jié)果用算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。

8空白試驗

除不加試樣外，均按上述測定條件和步驟進(jìn)行。

9定量限、準(zhǔn)確度和精密度

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9.1定量限

水樣中撲草凈的定量限為5.0ng/L。

9.2準(zhǔn)確度

水樣中撲草凈的添加濃度為5.0ng/L～50