臨床檢驗(yàn)儀器復(fù)習(xí)題及答案問題1：電阻抗法血液分析儀檢測(cè)細(xì)胞體積的基本原理是什么？檢測(cè)過程中如何區(qū)分白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板？答案1：電阻抗法（庫爾特原理）的核心是“脈沖計(jì)數(shù)”。當(dāng)細(xì)胞通過充滿電解質(zhì)溶液的微孔管時(shí)，會(huì)占據(jù)部分體積，導(dǎo)致微孔兩側(cè)電極間的電阻發(fā)生變化，產(chǎn)生與細(xì)胞體積成正比的電壓脈沖。脈沖的數(shù)量反映細(xì)胞數(shù)量，脈沖的幅度反映細(xì)胞體積大小。區(qū)分三種細(xì)胞的關(guān)鍵在于閾值設(shè)置和體積分布：①紅細(xì)胞體積較大（80-100fl），檢測(cè)時(shí)需先用溶血?jiǎng)┢茐募t細(xì)胞膜釋放血紅蛋白（但保留細(xì)胞膜殘余），此時(shí)紅細(xì)胞體積縮小為35-90fl；②血小板體積最?。?-20fl），位于體積直方圖最左側(cè)；③白細(xì)胞體積最大（35-450fl），通過溶血?jiǎng)┨幚砗螅行粤＜?xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞因胞質(zhì)和核結(jié)構(gòu)不同，體積差異可進(jìn)一步分類（如三分群儀器通過35-90fl為淋巴細(xì)胞群，90-160fl為中間細(xì)胞群，160-450fl為中性粒細(xì)胞群）。問題2：全自動(dòng)生化分析儀常用的分析方法有哪幾類？連續(xù)監(jiān)測(cè)法（速率法）與終點(diǎn)法的主要區(qū)別是什么？答案2：常用分析方法包括：①終點(diǎn)法（平衡法）：反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)檢測(cè)吸光度變化，如總蛋白、總膽紅素測(cè)定；②連續(xù)監(jiān)測(cè)法（速率法）：在反應(yīng)線性期連續(xù)監(jiān)測(cè)吸光度變化速率，如ALT、AST等酶活性測(cè)定；③兩點(diǎn)法（固定時(shí)間法）：檢測(cè)反應(yīng)起始和結(jié)束兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的吸光度差值，減少干擾；④比濁法：通過檢測(cè)溶液濁度變化（如免疫透射比濁、散射比濁）測(cè)定特定蛋白。連續(xù)監(jiān)測(cè)法與終點(diǎn)法的區(qū)別：①時(shí)間點(diǎn)：速率法監(jiān)測(cè)反應(yīng)動(dòng)態(tài)過程（通常2-5分鐘內(nèi)多個(gè)時(shí)間點(diǎn)），終點(diǎn)法僅測(cè)反應(yīng)平衡時(shí)的單點(diǎn)；②適用項(xiàng)目：速率法適用于酶促反應(yīng)（需線性期），終點(diǎn)法適用于非酶反應(yīng)或反應(yīng)能完全進(jìn)行的項(xiàng)目；③抗干擾能力：速率法通過監(jiān)測(cè)線性期可排除樣品空白、試劑空白的干擾（如內(nèi)源性物質(zhì)對(duì)反應(yīng)的延遲影響），終點(diǎn)法則易受反應(yīng)不完全或非特異性反應(yīng)干擾。問題3：化學(xué)發(fā)光免疫分析儀與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）相比，主要優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在哪些方面？答案3：化學(xué)發(fā)光免疫分析（CLIA）相比ELISA的優(yōu)勢(shì)包括：①靈敏度更高：化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的量子產(chǎn)率（光信號(hào)強(qiáng)度）遠(yuǎn)高于酶促顯色（如HRP催化DAB顯色），檢測(cè)下限可達(dá)pg/mL甚至fg/mL級(jí)別（ELISA通常為ng/mL）；②檢測(cè)速度更快：CLIA多采用磁微粒分離技術(shù)（如鏈霉親和素-生物素系統(tǒng)），結(jié)合自動(dòng)化加樣和溫育，全程時(shí)間可縮短至20-60分鐘（ELISA需2-4小時(shí)）；③線性范圍更寬：發(fā)光信號(hào)與待測(cè)物濃度在較寬范圍內(nèi)呈線性關(guān)系（如10^3-10^5），減少稀釋步驟；④重復(fù)性更好：自動(dòng)化儀器減少人工操作誤差（如洗板、加樣），CV值通常＜5%（ELISA手工操作CV可達(dá)10%-15%）；⑤無放射性污染：避免了RIA（放射免疫）的同位素危害；⑥多項(xiàng)目聯(lián)檢能力：部分儀器支持同時(shí)檢測(cè)多種指標(biāo)（如腫瘤標(biāo)志物、激素組合），提高效率。問題4：全自動(dòng)微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)（如VITEK2）的工作原理是什么？如何實(shí)現(xiàn)細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)？答案4：VITEK2系統(tǒng)基于光電比色和熒光檢測(cè)原理：①鑒定卡：每張卡含64個(gè)反應(yīng)孔（革蘭陽性/陰性菌、酵母等專用卡），孔內(nèi)包被不同碳源、氮源、酶底物（如β-半乳糖苷酶底物）。細(xì)菌代謝產(chǎn)物（酸/堿、酶活性）會(huì)改變孔內(nèi)pH（通過指示劑顯色）或產(chǎn)生熒光物質(zhì)（如4-MU標(biāo)記底物被酶解后釋放熒光），儀器通過850nm紅外光（測(cè)濁度，反映菌量）和530nm綠光（測(cè)顯色）、450nm藍(lán)光（測(cè)熒光）檢測(cè)反應(yīng)孔的光學(xué)變化。②藥敏卡：含不同濃度抗生素（覆蓋臨床常用品種），通過檢測(cè)細(xì)菌在抗生素存在下的生長(zhǎng)抑制情況（濁度變化），計(jì)算最小抑菌濃度（MIC），并根據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)判讀敏感（S）、中介（I）、耐藥（R）。系統(tǒng)通過數(shù)據(jù)庫比對(duì)（含2000+菌種的代謝模式）完成鑒定，藥敏試驗(yàn)則通過生長(zhǎng)曲線分析確定MIC值。問題5：實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（qPCR儀）的核心技術(shù)是什么？Ct值（循環(huán)閾值）的定義及臨床意義是什么？答案5：qPCR儀的核心技術(shù)是熒光檢測(cè)與溫度控制：①熒光檢測(cè)：通過激發(fā)光（如470nm）照射反應(yīng)體系，捕獲熒光基團(tuán)（如SYBRGreen嵌入雙鏈DNA，或TaqMan探針5’端報(bào)告基團(tuán)被切割后釋放熒光）的發(fā)射光（如520nm），實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR擴(kuò)增過程的熒光信號(hào)；②溫度控制：采用半導(dǎo)體加熱/制冷模塊（Peltier元件），實(shí)現(xiàn)快速變溫（升降溫速率＞5℃/秒），確保變性（95℃）、退火（55-65℃）、延伸（72℃）三階段的精確控溫（誤差＜0.1℃）。Ct值定義為熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定閾值（基線熒光標(biāo)準(zhǔn)差的10倍）時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。臨床意義：①定量依據(jù)：Ct值與初始模板濃度的對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系（Ct=-k·lgC0+b），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線可計(jì)算樣本中靶基因拷貝數(shù)；②判斷陽性：Ct值＜35（需結(jié)合實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)）提示陽性，35-40為可疑（需重復(fù)檢測(cè)），＞40為陰性（無擴(kuò)增或擴(kuò)增效率低）；③評(píng)估擴(kuò)增效率：理想情況下，每循環(huán)模板數(shù)翻倍（擴(kuò)增效率E=100%），則Ct值每增加1，模板濃度降低1倍；若E＜100%（如引物二聚體、抑制物存在），則Ct值與濃度的線性關(guān)系偏離。問題6：尿液干化學(xué)分析儀的試紙條通常包含哪些檢測(cè)項(xiàng)目？各項(xiàng)目的檢測(cè)原理是什么？答案6：常見檢測(cè)項(xiàng)目及原理：①pH：甲基紅（pH4.2-6.2）和溴麝香草酚藍(lán)（pH6.0-7.6）混合指示劑，顏色隨尿液pH變化（橙→綠→藍(lán)）；②白細(xì)胞（LEU）：粒細(xì)胞酯酶水解吲哚酚酯，與重氮鹽反應(yīng)生成紫色化合物（僅檢測(cè)中性粒細(xì)胞，對(duì)淋巴細(xì)胞不敏感）；③亞硝酸鹽（NIT）：革蘭陰性菌（如大腸埃希菌）將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，與對(duì)氨基苯砷酸和1,2,3,4-四氫并喹啉-3-酚反應(yīng)生成紅色偶氮化合物（需尿液停留膀胱＞4小時(shí)）；④蛋白質(zhì)（PRO）：指示劑蛋白誤差法（溴酚藍(lán)在pH3.2時(shí)呈黃色，與蛋白結(jié)合后變?yōu)樗{(lán)色，顏色深度與白蛋白濃度正相關(guān)，對(duì)球蛋白不敏感）；⑤葡萄糖（GLU）：葡萄糖氧化酶催化葡萄糖生成葡萄糖酸和H2O2，過氧化物酶催化H2O2與色原（如鄰聯(lián)甲苯胺）反應(yīng)顯色（特異性高，僅檢測(cè)葡萄糖）；⑥酮體（KET）：亞硝基鐵氰化鈉與乙酰乙酸、丙酮反應(yīng)生成紫色化合物（對(duì)β-羥丁酸無反應(yīng)）；⑦隱血（BLD）：血紅蛋白/肌紅蛋白的過氧化物酶樣活性催化H2O2與色原反應(yīng)顯色（檢測(cè)完整紅細(xì)胞時(shí)需紅細(xì)胞膜破裂釋放血紅蛋白）；⑧膽紅素（BIL）：重氮鹽與結(jié)合膽紅素反應(yīng)生成偶氮化合物（酸性條件下呈紅色）；⑨尿膽原（URO）：對(duì)二甲氨基苯甲醛與尿膽原縮合生成紅色化合物；⑩比重（SG）：多聚電解質(zhì)（甲基乙烯基醚-馬來酸酐）在尿液中解離，釋放H+使溴麝香草酚藍(lán)變色（反映離子濃度，與折射法結(jié)果有差異）。問題7：流式細(xì)胞儀（FCM）的基本組成包括哪些部分？在臨床檢驗(yàn)中主要用于哪些項(xiàng)目的檢測(cè)？答案7：流式細(xì)胞儀由五部分組成：①液流系統(tǒng)：鞘液（PBS緩沖液）包裹樣品流（單細(xì)胞懸液）形成穩(wěn)定的層流，確保細(xì)胞逐個(gè)通過檢測(cè)區(qū)；②光學(xué)系統(tǒng)：激光光源（常用488nm氬離子激光、633nm氦氖激光）、分光鏡、濾光片（如530nmFITC、585nmPE），用于激發(fā)熒光標(biāo)記的細(xì)胞并分離不同波長(zhǎng)的熒光信號(hào)；③信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng)：光電倍增管（PMT）將光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)；④數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)：通過FSC（前向散射光，反映細(xì)胞大?。?、SSC（側(cè)向散射光，反映細(xì)胞內(nèi)部復(fù)雜度）和熒光參數(shù)（如CD3、CD4、CD8等表面標(biāo)記）進(jìn)行多參數(shù)分析；⑤細(xì)胞分選系統(tǒng)（可選）：通過充電偏轉(zhuǎn)板將目標(biāo)細(xì)胞分選收集（如分選CD34+造血干細(xì)胞）。臨床應(yīng)用：①免疫分型：白血病/淋巴瘤的細(xì)胞表面抗原分析（如CD3、CD19、CD34）；②細(xì)胞周期分析（PI染色DNA）；③網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RNA熒光染色）；④血小板功能檢測(cè)（CD62P活化標(biāo)記）；⑤流式尿沉渣分析（識(shí)別紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型）；⑥HLA-B27檢測(cè)（診斷強(qiáng)直性脊柱炎）；⑦微小殘留病（MRD）監(jiān)測(cè)（白血病治療后殘留的異常細(xì)胞）。問題8：全自動(dòng)凝血分析儀的檢測(cè)方法主要有哪些？各方法的適用項(xiàng)目是什么？答案8：檢測(cè)方法及適用項(xiàng)目：①凝固法（生物學(xué)法）：通過檢測(cè)血漿凝固過程中的物理變化（如光學(xué)濁度、磁珠位移）判斷凝固時(shí)間。適用項(xiàng)目：PT（凝血酶原時(shí)間）、APTT（活化部分凝血活酶時(shí)間）、TT（凝血酶時(shí)間）、纖維蛋白原（FIB，Clauss法）；②發(fā)色底物法（生物化學(xué)法）：凝血因子（如Xa、IIa）水解人工合成的發(fā)色底物（如Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA），釋放對(duì)硝基苯胺（pNA），在405nm處測(cè)吸光度變化，計(jì)算因子活性（如FⅧ:C、FⅨ:C）；③免疫學(xué)法（免疫學(xué)方法）：通過抗原抗體反應(yīng)（如ELISA、免疫比濁）檢測(cè)凝血因子抗原量（如FⅧ:Ag）或抗凝蛋白（如AT-Ⅲ、PC、PS）；④生物傳感器法：利用電極檢測(cè)凝血過程中產(chǎn)生的電信號(hào)變化（如血栓彈力圖TEG，反映凝血全貌：R時(shí)間、K時(shí)間、α角、MA值）。問題9：血培養(yǎng)儀（如BacT/ALERT）的工作原理是什么？如何判斷血培養(yǎng)瓶是否陽性？答案9：BacT/ALERT系統(tǒng)采用顏色感應(yīng)法：培養(yǎng)瓶底部含CO2感應(yīng)膜（含熒光指示劑和pH指示劑），當(dāng)微生物代謝產(chǎn)生CO2時(shí)，感應(yīng)膜吸收CO2導(dǎo)致pH降低，指示劑顏色從深綠色變?yōu)辄S色（或熒光強(qiáng)度變化）。儀器通過反射光檢測(cè)顏色變化（或熒光強(qiáng)度），并計(jì)算每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的Δ值（當(dāng)前值與初始值的差異）。當(dāng)Δ值超過閾值（提示CO2產(chǎn)生量達(dá)到檢測(cè)限），系統(tǒng)報(bào)警提示陽性。判斷陽性的依據(jù)：①動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)：每10-15分鐘檢測(cè)一次，連續(xù)監(jiān)測(cè)5-7天（需氧瓶、厭氧瓶、兒童瓶等不同類型）；②生長(zhǎng)曲線：陽性瓶的Δ值隨時(shí)間呈上升趨勢(shì)（對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期），陰性瓶Δ值基本穩(wěn)定；③排除干擾：需區(qū)分污染（如皮膚正常菌群）和真正感染（結(jié)合臨床癥狀、重復(fù)培養(yǎng)）。問題10：全自動(dòng)酶免分析儀的加樣系統(tǒng)容易出現(xiàn)哪些故障？如何進(jìn)行日常維護(hù)？答案10：常見故障及維護(hù)：①加樣不準(zhǔn)確：原因可能是注射器活塞磨損（導(dǎo)致吸液量偏差）、管道氣泡（阻礙液體流動(dòng)）、針頭堵塞（樣本/試劑殘留凝固）。維護(hù)措施：每日開機(jī)前進(jìn)行吸液量校準(zhǔn)（用稱重法檢測(cè)100μL加樣誤差＜2%）；定期更換注射器密封墊（每3-6個(gè)月）；使用后用去離子水沖洗管道（避免蛋白沉淀）；②交叉污染：樣本針/試劑針清洗不徹底（殘留前一次檢測(cè)的DNA/抗體）。維護(hù)措施：設(shè)置針內(nèi)外壁雙重沖洗（先用含酶洗液，再用去離子水）；定期更換清洗液（避免微生物滋生）；檢測(cè)高濃度樣本后增加沖洗次數(shù)；③溫度失控：溫育模塊加熱不均（導(dǎo)致抗原抗體結(jié)合不充分）。維護(hù)措施：每周用溫度探頭檢測(cè)溫育孔溫度（37℃±0.5℃）；清潔溫育模塊表面（避免灰塵影響導(dǎo)熱）；④機(jī)械卡阻：傳動(dòng)軌道潤(rùn)滑不足（導(dǎo)致加樣針移動(dòng)卡頓）。維護(hù)措施：每月用專用潤(rùn)滑劑涂抹軌道（避免使用普通機(jī)油）；檢查傳感器位置（確保加樣針復(fù)位準(zhǔn)確）。問題11：原子吸收光譜儀（AAS）在臨床檢驗(yàn)中的主要應(yīng)用是什么？其與電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）相比有哪些局限性？答案11：AAS主要用于檢測(cè)生物樣品中的金屬元素（如血清/全血中的K+、Na+、Ca2+、Mg2+、Fe、Cu、Zn、Pb、Cd等）。其原理是空心陰極燈發(fā)射待測(cè)元素的特征譜線，樣品經(jīng)原子化器（火焰/石墨爐）轉(zhuǎn)化為基態(tài)原子，吸收特征譜線后，通過檢測(cè)吸光度降低值計(jì)算元素濃度（符合朗伯-比爾定律）。與ICP-MS相比的局限性：①單元素檢測(cè)：AAS一次只能檢測(cè)一種元素（需更換空心陰極燈），ICP-MS可同時(shí)檢測(cè)多元素（如7Li到238U）；②靈敏度差異：石墨爐AAS檢測(cè)限為pg/mL級(jí)別（火焰法為ng/mL），ICP-MS可達(dá)fg/mL（對(duì)痕量元素如Hg、As更敏感）；③干擾因素：AAS存在化學(xué)干擾（如磷酸鹽抑制Ca2+原子化）、光譜干擾（背景吸收），需加入釋放劑（如La3+）或使用氘燈扣背景；ICP-MS主要干擾為質(zhì)譜干擾（如ArCl+對(duì)As+的干擾），可通過碰撞池技術(shù)（如He碰撞）消除；④線性范圍：AAS線性范圍較窄（通常1-2個(gè)數(shù)量級(jí)），需稀釋高濃度樣品；ICP-MS線性范圍可達(dá)9個(gè)數(shù)量級(jí)（從ng/L到g/L）。問題12：尿液有形成分分析儀（如尿沉渣儀）與干化學(xué)分析儀的檢測(cè)結(jié)果為何需要相互驗(yàn)證？答案12：兩者檢測(cè)原理不同，存在互補(bǔ)和差異，需相互驗(yàn)證：①檢測(cè)對(duì)象：干化學(xué)儀檢測(cè)尿液中的化學(xué)成分（如蛋白、葡萄糖）和細(xì)胞代謝產(chǎn)物（如白細(xì)胞酯酶），尿沉渣儀通過流式細(xì)胞術(shù)或數(shù)字成像識(shí)別有形成分（紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型、結(jié)晶）；②局限性：干化學(xué)法白細(xì)胞（LEU）僅檢測(cè)中性粒細(xì)胞（對(duì)淋巴細(xì)胞無反應(yīng)），尿沉渣儀可直接計(jì)數(shù)所有白細(xì)胞；干化學(xué)隱血（BLD）可能因肌紅蛋白、過氧化物酶污染出現(xiàn)假陽性，尿沉渣儀可區(qū)分完整紅細(xì)胞（均一性/非均一性）與游離血紅蛋白；干化學(xué)蛋白（PRO）對(duì)球蛋白不敏感（如多發(fā)性骨髓瘤患者的本周蛋白），尿沉渣儀若發(fā)現(xiàn)管型（提示腎小球損傷）需結(jié)合蛋白定量；③結(jié)晶檢測(cè)：干化學(xué)無法檢測(cè)結(jié)晶類型（如草酸鈣、尿酸鹽），尿沉渣儀通過形態(tài)學(xué)分析可提示結(jié)石風(fēng)險(xiǎn)；④藥物干擾：某些藥物（如維生素C）會(huì)抑制干化學(xué)GLU、BLD的顯色反應(yīng)，導(dǎo)致假陰性，尿沉渣儀不受影響。因此，當(dāng)干化學(xué)結(jié)果異常（如LEU+但尿沉渣白細(xì)胞數(shù)正常）或臨床癥狀不符時(shí)，需通過尿沉渣鏡檢確認(rèn)。問題13：全自動(dòng)血型分析儀的主要檢測(cè)方法有哪些？如何避免ABO血型鑒定的假陰性/假陽性？答案13：檢測(cè)方法：①凝聚胺法：利用凝聚胺（多價(jià)陽離子）中和紅細(xì)胞表面負(fù)電荷，促進(jìn)抗原抗體結(jié)合（用于交叉配血）；②微柱凝膠法：凝膠介質(zhì)中進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，凝集紅細(xì)胞滯留于凝膠上層，未凝集紅細(xì)胞沉降至管底（用于ABO/Rh血型鑒定、抗體篩查）；③固相紅細(xì)胞法：將紅細(xì)胞抗原固定于微孔板底部，待測(cè)血清中的抗體與抗原結(jié)合后，加入指示紅細(xì)胞（未結(jié)合的抗體與指示紅細(xì)胞結(jié)合形成凝集）；④免疫熒光法：熒光標(biāo)記抗體與紅細(xì)胞表面抗原結(jié)合，通過熒光強(qiáng)度判斷陽性（如RhD血型弱表達(dá)的檢測(cè)）。避免假陰性/假陽性的措施：①嚴(yán)格控制反應(yīng)條件：溫度（22℃±2℃用于IgM抗體，37℃用于IgG抗體）、時(shí)間（微柱凝膠法通常10-15分鐘）；②使用對(duì)照：每批檢測(cè)需設(shè)置陽性對(duì)照（已知血型的標(biāo)準(zhǔn)血清/紅細(xì)胞）和陰性對(duì)照（生理鹽水）；③排除干擾：高蛋白血癥（如多發(fā)性骨髓瘤）可能導(dǎo)致錢串狀凝集（非免疫性），需用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞；冷凝集素（4℃時(shí)凝集）需在37℃環(huán)境下檢測(cè)；④弱抗原/弱抗體處理：ABO亞型（如A2型）需用抗A1血清確認(rèn)，弱D型需通過間接抗人球蛋白試驗(yàn)（IAT）確認(rèn)。問題14：離心機(jī)在臨床檢驗(yàn)中的主要用途是什么？高速離心機(jī)與低速離心機(jī)的關(guān)鍵區(qū)別是什么？答案14：離心機(jī)用途：①分離細(xì)胞與血漿/血清（如血常規(guī)需全血，生化檢測(cè)需血清，需3000rpm離心10分鐘）；②沉淀尿沉渣（1500rpm離心5分鐘，取沉渣鏡檢）；③純化核酸/蛋白質(zhì)（如PCR前需12000rpm離心去除雜質(zhì)）；④免疫沉淀（如免疫復(fù)合物離心收集）。高速離心機(jī)（轉(zhuǎn)速＞10000rpm，離心力＞10000×g）與低速離心機(jī)（轉(zhuǎn)速＜6000rpm，離心力＜6000×g）的區(qū)別：①轉(zhuǎn)子材料：高速離心機(jī)使用鈦合金或碳纖維轉(zhuǎn)子（耐高壓、輕量化），低速離心機(jī)多用鋁合金轉(zhuǎn)子；②制冷系統(tǒng)：高速離心機(jī)需配備冷凍系統(tǒng)（-20℃至40℃），防止高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的熱量破壞生物活性物質(zhì)（如酶、核酸）；低速離心機(jī)通常無制冷（或僅室溫）；③平衡要求：高速離心機(jī)對(duì)樣品平衡要求極高（管間重量差＜0.1g），否則可能導(dǎo)致轉(zhuǎn)子變形甚至爆炸；低速離心機(jī)允許重量差＜1g；④應(yīng)用場(chǎng)景：高速離心機(jī)用于分子生物學(xué)（如質(zhì)粒提取、外泌體分離），低速離心機(jī)用于常規(guī)檢驗(yàn)（血清分離、尿沉渣制備）。問題15：血?dú)夥治鰞x的電極系統(tǒng)包括哪些部分？各電極的檢測(cè)原理是什么？答案15：電極系統(tǒng)由三部分組成：①pH電極：玻璃電極（內(nèi)充0.1mol/LHCl，外膜為對(duì)H+敏感的玻璃膜）與參比電極（Ag/AgCl電極，內(nèi)充KCl溶液）組成，通過能斯特方程（E=E0+2.303RT/F·pH）檢測(cè)H+活度；②PCO2電極（Severinghaus電極）：由pH電極外包裹透氣膜（聚四氟乙烯，允許CO2通過）和碳酸氫鹽溶液（0.01mol/LNaHCO3）組成，CO2擴(kuò)散入內(nèi)液后與水結(jié)合生成H2CO3，解離出H+導(dǎo)致pH變化，通過pH電極間接檢測(cè)PCO2（E=E0-2.303RT/F·logPCO2）；③PO2電極（Clark電極）：鉑陰極（極化電壓-0.65V）與Ag/AgCl陽極組成，外包裹透氣膜（允許O2通過），內(nèi)充KCl溶液。O2擴(kuò)散至陰極被還原（O2+2H2O+4e-→4OH-），產(chǎn)生與PO2成正比的電流（電流=K·PO2，K為膜滲透系數(shù)）。校準(zhǔn)要求：每日需用標(biāo)準(zhǔn)氣體（如5%CO2、20%O2平衡N2）和標(biāo)準(zhǔn)緩沖液（pH7.383、pH6.840）校準(zhǔn)電極，確保檢測(cè)準(zhǔn)確性。問題16：全自動(dòng)血培養(yǎng)儀的厭氧瓶與需氧瓶在培養(yǎng)基成分上有何區(qū)別？為何兒童血培養(yǎng)需使用專用培養(yǎng)瓶？答案16：需氧瓶培養(yǎng)基含蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖（支持需氧菌生長(zhǎng)），并添加活性炭/樹脂（吸附抗生素）和抗凝劑（如SPS，防止血液凝固）；厭氧瓶培養(yǎng)基除基礎(chǔ)成分外，還添加還原劑（如L-半胱氨酸、維生素C）降低氧化還原電位（Eh＜-150mV），并充入N2/CO2混合氣體（排除O2）。兒童血培養(yǎng)專用瓶的原因：①血量少：兒童通常采集1-3mL血液（成人需8-10mL），專用瓶培養(yǎng)基體積較?。s40mL），避免血液被過度稀釋；②營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化：添加更多生長(zhǎng)因子（如維生素B12、輔酶A），支持苛養(yǎng)菌（如流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌）生長(zhǎng)；③減少抑制物：降低SPS濃度（兒童對(duì)SPS更敏感，高濃度可能抑制某些細(xì)菌如奈瑟菌）；④標(biāo)識(shí)明確：區(qū)分成人與兒童樣本，避免混淆導(dǎo)致培養(yǎng)條件錯(cuò)誤（如厭氧瓶誤用于兒童需氧菌檢測(cè)）。問題17：化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的磁微粒分離技術(shù)相比傳統(tǒng)珠式固相分離有何優(yōu)勢(shì)？答案17：磁微粒（直徑0.5-5μm的超順磁性顆粒）分離技術(shù)的優(yōu)勢(shì)：①更大比表面積：磁微粒表面可包被更多抗體（每mg微粒結(jié)合抗體量是聚苯乙烯珠的10倍以上），提高反應(yīng)靈敏度；②更快反應(yīng)速度：磁微粒在液體中呈懸浮狀態(tài)，抗原抗體碰撞概率增加（反應(yīng)時(shí)間從ELISA的1小時(shí)縮短至15-30分鐘）；③更徹底分離：通過外部磁場(chǎng)（磁分離架）可快速吸附磁微粒（30秒內(nèi)完成分離），避免離心或洗滌導(dǎo)致的樣本損失（傳統(tǒng)珠式需離心5分鐘，可能丟失10%-20%的結(jié)合物）；④自動(dòng)化適配：磁微?？赏ㄟ^管道轉(zhuǎn)移（無需機(jī)械臂夾取珠子），適合全自動(dòng)儀器的連續(xù)加樣和清洗流程；⑤減少非特異性吸附：磁微粒表面經(jīng)惰性物質(zhì)（如牛血清白蛋白）封閉，降低與樣本中其他蛋白的非特異性結(jié)合（傳統(tǒng)珠式可能因表面不光滑導(dǎo)致背景值升高）。問題18：尿液分析儀的試紙條為什么需要在規(guī)定時(shí)間內(nèi)讀取結(jié)果？哪些項(xiàng)目容易因延遲讀數(shù)出現(xiàn)誤差？答案18：試紙條反應(yīng)多為酶促反應(yīng)或酸堿指示劑反應(yīng)，時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致：①酶失活：如白細(xì)胞酯酶試紙條，超過2分鐘后酶活性下降，可能漏檢弱陽性樣本；②指示劑擴(kuò)散：pH試紙的甲基紅和溴麝香草酚藍(lán)在尿液中擴(kuò)散，顏色邊界模糊，影響比色準(zhǔn)確性；③氧化還原反應(yīng)逆轉(zhuǎn)：如隱血試紙條的過氧化物酶反應(yīng)，長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中，H2O2可能被氧化分解，導(dǎo)致假陰性；④蒸發(fā)濃縮：尿液蒸發(fā)導(dǎo)致溶質(zhì)濃度升高（如葡萄糖、蛋白質(zhì)），可能出現(xiàn)假陽性。易受影響的項(xiàng)目：①白細(xì)胞（LEU）：超過2分鐘后，酯酶水解產(chǎn)物可能被氧化，顏色變淺；②亞硝酸鹽（NIT）：重氮反應(yīng)產(chǎn)物不穩(wěn)定，3分鐘后開始褪色；③膽紅素（BIL）：重氮化合物見光易分解（需避光讀數(shù)），延遲讀數(shù)可能顏色變淺；④尿膽原（URO）：與對(duì)二甲氨基苯甲