檢驗科試題及答案1.【單項選擇】患者男，48歲，因“乏力、黃疸”就診。實驗室檢查：TBil186μmol/L，DBil142μmol/L，ALT85U/L，AST68U/L，ALP420U/L，GGT380U/L，Hb91g/L，PLT62×10?/L，PT18s（對照12s）。最有助于明確病因的下一步檢驗是A.血清銅藍蛋白B.抗線粒體抗體M2亞型C.血清鐵蛋白D.血紅蛋白電泳E.血清游離輕鏈答案：B。膽汁淤積伴肝細胞輕度損傷、血小板減少、PT延長，首先考慮原發(fā)性膽汁性膽管炎，抗線粒體抗體M2亞型陽性率>95%。2.【單項選擇】某生化分析儀用苦味酸法測定肌酐，發(fā)現(xiàn)低值質控在1個月內持續(xù)漂移+15%，高值質控漂移<3%，最可能的干擾來源是A.試劑1中氫氧化鈉濃度降低B.樣品針攜帶污染C.血清中膽紅素升高D.維生素C體內累積E.校準品賦值錯誤答案：D。苦味酸法肌酐低值易受還原性物質干擾，維生素C體內累積可致正偏差；高值因肌酐濃度高，相對干擾小。3.【單項選擇】血培養(yǎng)報陽時間（TTP）與菌量關系的數(shù)學模型為ln(CFU/ml)=a–b×TTP。若a=12.6，b=0.42，某患者TTP=18h，則其菌血癥濃度最接近A.10CFU/mlB.102CFU/mlC.103CFU/mlD.10?CFU/mlE.10?CFU/ml答案：C。代入得ln(CFU)=12.6–0.42×18=5.04，CFU≈1.5×102≈103量級。4.【單項選擇】關于流式細胞術檢測HLA-B27，下列描述正確的是A.需分離CD14+細胞以減少假陽性B.FITC標記抗體可識別所有B27亞型C.平均熒光強度≥陰性對照2.5倍判為陽性D.溶血素含固定劑可致熒光淬滅E.交叉反應最常見于B07答案：E。B07與B27抗原表位高度同源，最易交叉；正確策略需用CD3+門，熒光比值≥4.0，溶血素不含固定劑。5.【單項選擇】新生兒足跟血篩查17-羥孕酮，采用時間分辨熒光免疫法，其標記元素最可能是A.Eu3?B.Tb3?C.Sm3?D.Dy3?E.Ce3?答案：A。Eu3?熒光壽命長、Stokes位移大，為新生兒篩查主流標記。6.【單項選擇】某實驗室自建PCR檢測BCR-ABL1，以下哪項不是CLIA要求的能力驗證材料A.世界衛(wèi)生組織國際遺傳參考品B.商品化陽性質控品C.既往患者凍存樣本D.數(shù)字PCR定量后的血漿稀釋系列E.室間質評機構提供的未知樣本答案：C?；颊邇龃鏄颖疚唇洏硕?，不可作為能力驗證材料。7.【單項選擇】電泳出現(xiàn)“β-γ橋”，最可能的蛋白是A.IgAB.IgGC.IgMD.游離輕鏈E.CRP答案：A。IgA分子量適中，電泳遷移率位于β與γ區(qū)間，肝硬化時多聚體形成致橋連。8.【單項選擇】關于利福平耐藥結核分枝桿菌檢測，以下哪項分子標志物位于rpoB基因的核心區(qū)域A.511-513位B.516-519位C.526-529位D.531-533位E.572-575位答案：D。81bp耐藥決定區(qū)（RRDR）531-533位點突變率最高。9.【單項選擇】采用液相色譜-串聯(lián)質譜測定25-羥維生素D，內標選擇原則錯誤的是A.同位素標記位點≥3個B.與待測物共提取率>90%C.保留時間相差<0.1minD.濃度與待測物接近E.同位素豐度≥98%答案：C。保留時間應完全一致才可校正基質效應，相差<0.1min屬系統(tǒng)誤差。10.【單項選擇】血涂片瑞氏染色見紅細胞內藍綠色小體，Perls’染色陽性，最可能為A.鐵粒幼紅細胞B.豪-喬小體C.嗜堿性點彩D.瘧原蟲環(huán)狀體E.巴貝斯蟲答案：A。Perls’染色陽性提示含鐵血黃素，位于紅細胞內為鐵粒幼紅細胞。11.【單項選擇】下列關于高靈敏度肌鈣蛋白I第99百分位值建立，正確的是A.參考人群需排除高血壓B.男女分層后女性第99百分位低于男性C.每實驗室至少120例健康人D.樣本需采用肝素抗凝E.采用ROC曲線取最佳cut-off答案：B。女性心肌細胞質量小，基線肌鈣蛋白低于男性，需單獨建立。12.【單項選擇】某患者動脈血氣：pH7.28，pCO?28mmHg，HCO??13mmol/L，Na?138mmol/L，Cl?110mmol/L，K?3.2mmol/L，乳酸2.1mmol/L。酸堿失衡類型A.代謝性酸中毒伴呼吸代償B.呼吸性堿中毒合并代謝性酸中毒C.高氯性正常陰離子間隙酸中毒D.乳酸性酸中毒E.酮癥酸中毒答案：C。AG=138–110–13=15，正常；HCO??下降與Cl?升高對應，為腎小管酸中毒或腹瀉丟失HCO??。13.【單項選擇】流式細胞術檢測CD34+干細胞計數(shù)，ISHAGE方案要求A.獲取至少100個CD34+細胞B.使用7-AAD排除凋亡細胞C.單平臺需加TruCount微球D.設門需包含CD45dim/SSlowE.結果以百分比報告答案：C。單平臺絕對計數(shù)必須加內標微球；獲取至少75個CD34+，7-AAD非必需，結果以細胞數(shù)/μl報告。14.【單項選擇】下列哪項不是導致假性高鉀的體外因素A.延遲分離血清>2hB.使用EDTA-K?采血管C.血小板計數(shù)>1000×10?/LD.標本置4℃保存E.機械性溶血答案：D。低溫可抑制Na?/K?-ATP酶，反而降低鉀釋放。15.【單項選擇】免疫比濁法測定D-二聚體，以下哪項可消除嗜異性抗體干擾A.聚乙二醇6000預處理B.稀釋線性回算C.加入鼠IgG阻斷D.增加乳膠粒徑E.波長由570nm改為800nm答案：C。嗜異性抗體多為抗鼠或抗兔，加入對應物種IgG可阻斷。16.【單項選擇】質譜法測定糖化血紅蛋白，監(jiān)測的碎片離子為A.β鏈N-端1-8肽+葡萄糖B.β鏈1-6肽+果糖C.α鏈1-9肽+葡萄糖D.β鏈1-7肽+galactoseE.β鏈1-5肽+mannose答案：A。HbA1c特指β鏈N-端纈氨酸與葡萄糖結合，質譜監(jiān)測m/z952→8肽+Glc。17.【單項選擇】某孕婦孕18周，血清AFP2.8MOM，freeβ-hCG0.5MOM，最可能的胎兒異常A.21-三體B.18-三體C.13-三體D.開放性神經管缺陷E.死胎答案：D。AFP升高伴freeβ-hCG降低提示神經管缺陷；21-三體表現(xiàn)為二者均升高。18.【單項選擇】全自動凝血儀測定APTT，試劑含硅土激活劑，若結果延長而PT正常，首先應A.更換批號試劑B.檢查因子VIII活性C.觀察血漿顏色D.重測FIBE.加做TT答案：B。硅土對內源途徑敏感，APTT單獨延長提示VIII、IX、XI、XII缺乏或抑制物。19.【單項選擇】關于宏基因組二代測序（mNGS），下列哪項屬于人源背景噪音去除關鍵步驟A.使用Nextera建庫B.去除低復雜度readsC.比對GRCh38并剔除D.使用Kraken2比對細菌庫E.增加測序深度至100M答案：C。人源序列占比>90%，需先比對人類參考基因組并剔除。20.【單項選擇】某患者尿沉渣鏡檢見“棺材蓋”樣結晶，最可能的藥物為A.磺胺甲噁唑B.阿莫西林C.阿昔洛韋D.茚地那韋E.環(huán)磷酰胺答案：D。茚地那韋在pH>3.5時形成單水化合物，呈長方形“棺材蓋”。21.【單項選擇】血清蛋白電泳出現(xiàn)雙白蛋白帶，下列哪項處理可確認A.免疫固定電泳B.醋酸纖維素薄膜電泳pH4.0C.尿素D.等電聚焦E.毛細管電泳答案：D。等電聚焦可區(qū)分遺傳變異體與藥物結合所致雙帶。22.【單項選擇】下列哪項不是導致血EPO假性升高的體外因素A.采血前劇烈運動B.使用促凝管C.溶血>500mg/dlD.標本反復凍融E.高膽紅素血癥答案：E。膽紅素對化學發(fā)光干擾??；溶血、反復凍融使紅細胞碎片釋放假性EPO。23.【單項選擇】采用微滴式數(shù)字PCR檢測BRAFV600E，微滴數(shù)低于推薦值，首先應A.增加模板量B.降低退火溫度C.更換探針染料D.檢查微滴生成油E.延長延伸時間答案：D。微滴數(shù)不足90%提示油相乳化失敗。24.【單項選擇】某患者血清IgG43.2g/L（參考<1.35），IgG18g/L，最可能疾病A.多發(fā)性骨髓瘤IgG型B.系統(tǒng)性紅斑狼瘡C.免疫球蛋白G4相關疾病D.普通變異型免疫缺陷E.重鏈病答案：C。IgG4/IgG比值>0.24支持IgG4-RD。25.【單項選擇】下列哪項不是導致血氨假性降低的體外因素A.使用EDTA抗凝B.置冰浴30min未分離C.采血前高蛋白飲食D.使用氟化鈉/肝素混合管E.延遲檢測>1h答案：C。高蛋白飲食使體內氨升高，但體外穩(wěn)定，不導致假性降低。26.【單項選擇】全自動生化儀校準后，發(fā)現(xiàn)葡萄糖回收率110%，可能原因為A.試劑中NADH氧化B.校準品瓶口揮發(fā)濃縮C.樣本針堵塞D.溫度偏低E.波長漂移2nm答案：B。校準品水分揮發(fā)致濃度升高，回收率假性升高。27.【單項選擇】關于HEVRNA檢測，下列哪項引物設計最佳A.5′UTR高度保守區(qū)B.ORF1區(qū)RdRp基因C.ORF2區(qū)衣殼蛋白D.ORF3區(qū)E.3′UTRpolyA尾答案：B。RdRp基因兼具保守性與豐度，為WHO推薦。28.【單項選擇】某患者尿微量白蛋白/肌酐比值（ACR）3.8mg/mmol，復查應A.次日晨尿B.24h尿蛋白定量C.隨機尿D.禁水12h尿E.導尿標本答案：A。首次陽性需用晨尿確認，減少運動、直立影響。29.【單項選擇】下列哪項不是導致血PTH假性升高的體外因素A.使用EDTA管B.采血后未冰浴C.溶血>200mg/dlD.高甘油三酯血癥E.使用促凝管答案：A。EDTA可穩(wěn)定PTH，促凝管因蛋白酶激活致降解。30.【單項選擇】采用MALDI-TOF鑒定真菌，下列哪項前處理可提高得分A.甲酸乙腈提取B.70%乙醇滅活C.加入玻璃珠震蕩D.用α-氰基肉桂酸基質E.延長干燥時間答案：C。玻璃珠破碎厚壁真菌，釋放蛋白。31.【多項選擇】可導致血5-羥吲哚乙酸（5-HIAA）假性升高的因素有A.食用香蕉B.服用對乙酰氨基酚C.使用EDTA抗凝D.腎功能不全E.使用單胺氧化酶抑制劑答案：A、B、D。香蕉含5-HT前體；對乙酰氨基酚在酸性條件下與5-HIAA共洗脫；腎衰減少排泄。32.【多項選擇】關于數(shù)字PCR絕對定量，下列描述正確的是A.無需標準曲線B.不受PCR效率差異影響C.可檢測單拷貝D.需內參基因E.可區(qū)分0.5倍差異答案：A、B、C、E。數(shù)字PCR為終點法，無需內參。33.【多項選擇】下列哪些屬于高同型半胱氨酸血癥的遺傳缺陷A.MTHFRC677TB.CBS833T>CC.MTRA2756GD.MTRRA66GE.TCNI776C>G答案：A、B、C、D。TCNI為轉鈷胺素II，影響維生素B12轉運，非直接遺傳缺陷。34.【多項選擇】可導致血維生素B12測定假性降低的情況有A.高劑量生物素攝入B.使用促凝管C.妊娠晚期D.服用奧美拉唑E.多發(fā)性骨髓瘤答案：A、C、E。生物素干擾化學發(fā)光；妊娠結合蛋白升高，競爭法假性降低；骨髓瘤異嗜抗體干擾。35.【多項選擇】關于NGS檢測MSI，下列哪些指標可用于判定A.BAT25B.BAT26C.NR21D.NR24E.MONO27答案：A、B、C、D、E。上述均為NCI+Promegapanel位點。36.【多項選擇】可導致血ADAMTS13活性假性降低的有A.溶血>500mg/dlB.高甘油三酯血癥C.使用EDTA抗凝D.采血后未冰浴E.血小板>1000×10?/L答案：A、B、D。溶血釋放蛋白酶；脂血干擾熒光底物；未冰浴致降解。37.【多項選擇】下列哪些屬于原發(fā)性高草酸尿癥分型A.AGXT突變B.GRHPR突變C.HOGA1突變D.SLC26A1突變E.SPP1突變答案：A、B、C。分別為PH1、PH2、PH3；SLC26A1為繼發(fā)性。38.【多項選擇】可導致血醛固酮/腎素比值（ARR）假性升高的有A.使用β受體阻滯劑B.低鉀血癥C.使用ACEID.限制鈉鹽E.采血前直立2h答案：A、B。β阻滯劑抑制腎素；低鉀刺激醛固酮分泌，ARR升高。39.【多項選擇】關于宏基因組RNA病毒檢測，下列哪些步驟必需A.去除宿主rRNAB.使用隨機六聚體逆轉錄C.構建鏈特異性文庫D.使用RNaseH處理E.加入ERCC外參答案：A、B、E。rRNA占比>80%，需去除；隨機引物覆蓋RNA病毒；ERCC用于定量。40.【多項選擇】下列哪些屬于線粒體腦肌病實驗室表現(xiàn)A.血乳酸/丙酮酸比值>30B.腦脊液乳酸升高C.血CK輕中度升高D.血羥丁酸升高E.血丙氨酸降低答案：A、B、C、D。丙氨酸常升高，因丙酮酸轉氨。41.【填空】某實驗室自建Sanger測序檢測JAK2V617F，突變峰高比≥____%判為陽性。答案：20。42.【填空】采用LC-MS/MS測定兒茶酚胺，內標d?-腎上腺素的分子量比腎上腺素大____Da。答案：3。43.【填空】血培養(yǎng)報陽后，革蘭陰性桿菌直接藥敏采用____法，可在____h內報告。答案：MALDI-TOF+梯度擴散，4。44.【填空】數(shù)字PCR檢測BRCA1甲基化，經亞硫酸氫鹽處理后，未甲基化胞嘧啶轉化為____。答案：尿嘧啶。45.【填空】血清HE4測定采用____免疫法，其標記酶為____。答案：化學發(fā)光，辣根過氧化物酶。46.【填空】某患者血清蛋白電泳出現(xiàn)γ區(qū)窄峰，免疫固定為IgGκ，尿免疫固定陰性，最可能診斷為____。答案：MGUS。47.【填空】流式交叉配型中，CD3-FITC/CD19-PE雙陽性群體提示____細胞，需____處理。答案：B細胞，設門排除。48.【填空】采用qPCR檢測HBVDNA，使用TaqMan探針，其5′端標記熒光基團為____，3′端淬滅基團為____。答案：FAM，BHQ1。49.【填空】血氨測定采用干化學法，其原理為____脫氫酶催化，生成____在340nm測定。答案：谷氨酸，NADH。50.【填空】某患者血清冷球蛋白陽性，分型為II型，其成分為____+____。答案：單克隆IgM，多克隆IgG。51.【簡答】簡述高靈敏度肌鈣蛋白第99百分位值建立流程。答案：1.參考人群篩選：年齡18-70歲，無心血管病史，血壓<140/90mmHg，血脂正常，肝腎功能正常，女性未孕。2.樣本量：男女各120例，按年齡段分層。3.采血：空腹靜息30min，使用血清分離膠管，2h內離心，-80℃保存。4.檢測：在相同儀器、試劑、批號下連續(xù)3d完成，每份樣本測2次取均值。5.離群值處理：Dixon法剔除>3SD。6.統(tǒng)計：非參數(shù)法取第99百分位，bootstrap95%CI。7.驗證：另取60例獨立人群，確認值落在CI內。52.【簡答】說明數(shù)字PCR與qPCR在檢測EGFRL858R時的靈敏度差異原因。答案：數(shù)字PCR將樣本分割至2萬微滴，每個微滴0或1個模板，終點擴增后統(tǒng)計陽性比例，理論上可檢測單拷貝；qPCR依賴Ct，背景熒光、引物二聚體、抑制物影響閾值判斷，靈敏度約10拷貝。數(shù)字PCR無需標準曲線，不受擴增效率差異影響，可區(qū)分0.1%突變；qPCR需ΔCt≥6才能判定，靈敏度約1%。53.【簡答】列舉導致血25-羥維生素D測定假性升高的3種體外因素并給出糾正措施。答案：1.高甘油三酯：脂血散射光，超速離心去除乳糜微粒后復測。2.異嗜抗體：HAMA干擾，使用異嗜抗體阻斷管或PEG沉淀后復測。3.維生素D類似物攝入：如阿法骨化醇，LC-MS/MS可區(qū)分，免疫法需停藥72h。54.【簡答】描述采用NGS檢測BRCA1/2大片段缺失的實驗關鍵步驟。答案：1.DNA提?。菏褂么胖榉?，總量≥200ng，OD260/280=1.8-2.0。2.文庫構建：酶切法片段化至200-400bp，末端修復，加A尾，連接含UMI接頭。3.雜交捕獲：使用xGen探針覆蓋BRCA1/2外顯子及側翼20bp，65℃雜交16h。4.測序：NovaSeq6000，PE150，平均深度>500×。5.生信：BWA比對，GATK去重，CNVkit計算覆蓋度，ExonDel檢測缺失>1exon，閾值log?<-1.0。6.驗證：MLPA確認。55.【簡答】說明血培養(yǎng)報陽后快速藥敏（RAST）的實驗流程及局限性。答案：流程：1.報陽后取2ml陽性肉湯，離心富集菌體，生理鹽水調0.5McF。2.涂布MH平板，貼E-test條，35℃、5%CO?孵育4-6h。3.用卡尺讀取抑制環(huán)，與標準MIC對比。局限性：1.僅適用于生長快的大腸桿菌、肺克等，對銅綠、厭氧菌不準。2.無法檢測誘導耐藥，如ESBL、AmpC。3.菌量高時抑制環(huán)模糊，需稀釋。56.【案例分析】患者女，32歲，孕2產1，因“頭痛、視物模糊”就診。血壓160/110mmHg，尿蛋白++。實驗室：PLT88×10?/L，ALT126U/L，AST98U/L，LDH890U/L，TBil42μmol/L，Cr96μmol/L，尿沉渣見紅細胞管型。外周血涂片見破碎紅細胞>5%。問題：1.最可能的診斷？2.需補充哪些實驗室檢查？3.如何與TTP鑒別？答案：1.診斷：HELLP綜合征。2.檢查：ADAMTS13活性、外周血破碎紅細胞計數(shù)、24h尿蛋白定量、血清結合珠蛋白、直接Coombs試驗。3.鑒別：HELLP常ADAMTS13活性>10%，TTP<5%；HELLP產后72h內緩解，TTP需血漿置換；HELLP血小板降低不如TTP顯著，腎損傷更重。57.【案例分析】患者男，55歲，因“消瘦、黃疸”入院。CA19-9980U/ml，CEA12ng/ml，TBil260μmol/L，DBil198μmol/L，ALP560U/L，GGT420U/L。影像學：胰頭占位，肝內外膽管擴張。問題：1.為明確梗阻性質，首選的檢驗組合？2.若ERCP刷片陰性，下一步分子檢測？3.如何解釋CA19-9與膽紅素同步升高？答案：1.首選：ERCP刷片細胞學+KRAS突變+CEA沖洗液。2.下一步：EUS-FNA穿刺，行NGS檢測KRAS、GNAS、TP53、SMAD4突變。3.膽紅素>170μmol/L可致CA19-9排泄受阻，出現(xiàn)假性升高，需減黃后復測。58.【案例分析】患者男，28歲，因“反復低鉀、肌無力”就診。血壓128/78mmHg，血K?2.8mmol/L，Cl?98mmol/L