12022年，中國食品藥品檢定研究院（以下簡稱中檢院）認(rèn)真貫徹落實國家藥監(jiān)局決策部署，統(tǒng)籌做好抓檢驗、保安全、促發(fā)展各項工作，堅決扛起疫情防控政治責(zé)任，全力以赴做好抗擊新冠病毒產(chǎn)品相關(guān)檢驗和科研工作，服務(wù)疫情防控大局取得了新成績。同時，全院的科研工作也取得了新成效。中檢院繼續(xù)堅持,檢驗依托科研、科研提升檢驗、戰(zhàn)略，始終把科研作為檢驗檢測發(fā)展進(jìn)步的第一推動力；始終堅持以習(xí)近平新時代中國特色社會主義思想為指導(dǎo)，堅決落實好黨中央、國務(wù)院，以及國家藥監(jiān)局的決策部署，全面提升檢驗檢測能力，努力推動藥檢事業(yè)開辟新天地，為藥品監(jiān)管治理體系和治理能力現(xiàn)代化建設(shè)提供有力的技術(shù)支撐，為人民群眾用藥安全有效提供堅實的技術(shù)保障。本報告對我院2022年科技工作進(jìn)行了總結(jié)，并結(jié)合學(xué)術(shù)發(fā)展方向，為中檢院,十四五、中期學(xué)科建設(shè)提供參考。2第一部分監(jiān)管科學(xué)實踐3一、持續(xù)開展新冠疫苗等疫情防控藥械科研攻關(guān)2022年，我院密切跟蹤新冠病毒變異株的發(fā)生，構(gòu)建了新冠病毒Omicron變異株假病毒，建立變異株中和抗體檢測方法和新冠病毒抗體廣譜性評價方法，對新冠疫苗免疫血清中和抗體效價等評價提供方法和假病毒，支持新冠疫苗序貫免疫策略評價和現(xiàn)有疫苗免疫血清對變異株中和效果的評價工作。根據(jù)國務(wù)院聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制科研攻關(guān)組疫苗研發(fā)專班和國家局領(lǐng)導(dǎo)的有關(guān)批示開展研究，為國務(wù)院聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制和疾控部門制訂或調(diào)整相關(guān)疫苗免疫策略提供了科學(xué)支持。二、踐行監(jiān)管科學(xué)，發(fā)揮檢驗檢測能力建設(shè)帶頭作用（一）開展監(jiān)管科學(xué)行動計劃第二批研究項目研究在國家藥監(jiān)局監(jiān)管科學(xué)行動計劃第二批研究項目中，中檢院牽頭或共同牽頭實施,化妝品新原料技術(shù)指南研究和化妝品安全監(jiān)測與分析預(yù)警方法研究、,新發(fā)突發(fā)傳染病診斷及治療產(chǎn)品評價研究、,中藥有效性安全性評價及全過程質(zhì)量控制研究、,基于遠(yuǎn)程傳輸、柔性電子技術(shù)及醫(yī)用機(jī)器人的創(chuàng)新醫(yī)療器械評價研究、及,新型生物材料安全性有效性評價研究、等8個項目，目前正在有序穩(wěn)步推進(jìn)。（二）檢驗檢測技術(shù)支撐能力不斷增強(qiáng)在中藥質(zhì)量與安全領(lǐng)域，圍繞全產(chǎn)業(yè)鏈開展多學(xué)科、多領(lǐng)域的綜合性研究。建立了多項中藥質(zhì)量檢定新技術(shù)、新方法、新標(biāo)準(zhǔn)。開展中藥DNA分子鑒定方法的標(biāo)準(zhǔn)提升和推廣應(yīng)用工作，建立了TaqMan探針熒光定量PCR技術(shù)中藥摻偽檢測平臺，起草多項4國家標(biāo)準(zhǔn)，為中藥摻偽打假提供有力的技術(shù)支撐；開展中藥內(nèi)源性有毒有害成分和中藥外源性有害殘留物檢測、限量標(biāo)準(zhǔn)與風(fēng)險評估研究。2022年組織實施的30個含細(xì)辛中成藥和10個含馬兜鈴屬藥材的中成藥標(biāo)準(zhǔn)提高課題正式立項；開展了基于人工智能、AR/VR和知識圖譜等技術(shù)的中藥數(shù)字化標(biāo)本研究，完成果實類藥材專題71種藥材研究，起草了中藥材標(biāo)本數(shù)字化規(guī)范；開展民族藥質(zhì)量安全檢測與標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究，組織專家對國家局注冊司民族藥示范研究二期項目進(jìn)行了結(jié)題評審，啟動了三期項目。2.化藥領(lǐng)域開展抗擊疫情特效藥品的檢驗檢測技術(shù)研究工作。建立完善抗疫藥品的應(yīng)急檢驗響應(yīng)機(jī)制，做好注冊檢驗前期技術(shù)儲備。密切關(guān)注抗擊新冠疫情藥品研發(fā)進(jìn)展，重點關(guān)注國內(nèi)外抗新冠化學(xué)藥物，以最快的時間完成瑞德西韋、阿比多爾、普克魯胺、阿茲夫定、Paxlovid等重點品種前置注冊檢驗工作；密切追蹤藥物基因毒性雜質(zhì)最新情況，開展遺傳毒性雜質(zhì)的檢測方法與策略的研究。積極追蹤國外事態(tài)進(jìn)展，組織開展風(fēng)險研判。研究建立了沙坦類藥物、雷尼替丁類藥物、二甲雙胍類、利福平類、降糖類等藥品中亞硝胺類化合物分析方法，開展了藥品中N-亞硝胺類基因毒性雜質(zhì)控制策略的研究，積極開展相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制工作，指導(dǎo)各省級藥品檢驗機(jī)構(gòu)開展相關(guān)檢測工作，為國家藥監(jiān)局組織重大問題的處理提供技術(shù)支撐。持續(xù)開展國家藥品標(biāo)準(zhǔn)方法的研究，重點加強(qiáng)臨床急需藥品標(biāo)準(zhǔn)的研究力度，開展了放射性藥品锝[99mTc]二巰丁二酸鹽注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高研究、抗生素發(fā)酵殘留物檢測新技術(shù)研究以及化學(xué)計量學(xué)指導(dǎo)原則的建立、溶出度與5釋放度測定法往復(fù)支架法的建立研究等國家藥品標(biāo)準(zhǔn)提高等研究3.生物制品領(lǐng)域加快開展新冠疫苗注冊檢驗工作，有力推動了相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)和應(yīng)用；積極做好中央部署的新冠病毒疫苗保質(zhì)量保供應(yīng)任務(wù)。統(tǒng)籌協(xié)調(diào)全國18家藥檢機(jī)構(gòu)，共同開展全國新冠病毒疫苗批簽發(fā)和第三方檢驗工作；密切跟蹤新冠病毒OmicronBA和BQ系列變異株等,完善新冠病毒廣譜性中和抗體評價假病毒庫，建立變異株中和抗體檢測方法和新冠病毒抗體廣譜性評價方法，支持新冠疫苗序貫免疫策略評價和現(xiàn)有疫苗免疫血清對變異株中和效果的評價工作；建立第二代新冠病毒中和抗體國家標(biāo)準(zhǔn)品，并對新冠病毒活病毒中和抗體檢測方法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化研究，提高新冠中和抗體檢測結(jié)果的可靠性，實現(xiàn)不同技術(shù)路線新冠疫苗中和抗體檢測結(jié)果的穩(wěn)健可比；利用治療性生物制品質(zhì)量控制技術(shù)平臺，對疫情防控所用的治療性抗體、特異人免疫球蛋白、疫苗生產(chǎn)用細(xì)胞基質(zhì)等產(chǎn)品進(jìn)行了應(yīng)急檢驗和評價，有力支持了相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)和上市；持續(xù)開發(fā)傳統(tǒng)疫苗效力試驗替代方法等質(zhì)量控制新方法，提升檢驗效率和檢驗?zāi)芰?。建立了基于Luminex技術(shù)的多聯(lián)多價疫苗中各個組分抗原與抗體檢測新方法，大大加速了新型聯(lián)合疫苗的臨床效果評價工作。應(yīng)用LC-MS質(zhì)譜技術(shù)，對破傷風(fēng)、白喉類毒素的脫毒后抗原進(jìn)行了脫毒位點確認(rèn)，用于殘余毒性的質(zhì)量控制，并為提升批間一致性提供新工具。4.器械領(lǐng)域建立了腦部植入實驗、變性膠原蛋白檢測—胰蛋白酶敏感性6實驗、醫(yī)療器械致癌性篩查-體外細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗和提取蛋白類（膠原蛋白、絲素蛋白）生物材料的質(zhì)量評價方法等5項新方法；完成了主動脈瓣膜及二尖瓣膜的PIV流場測試用模塊的設(shè)計及加工；完成人工血管順應(yīng)性測試方法研究的動態(tài)順應(yīng)性測試和數(shù)據(jù)采集；開展了7項新工具研究：內(nèi)窺鏡檢測工裝順利升級上市、醫(yī)用機(jī)器人的性能檢測工裝研制成功、介入式人工心測試平臺、腔鏡畸變延時檢測平臺、相機(jī)色還原性檢測平臺、聲阻抗儀測量、氣源管路高壓檢驗平臺研究順利推進(jìn)。5.化妝品領(lǐng)域完善化妝品標(biāo)準(zhǔn)體系，加強(qiáng)化妝品標(biāo)準(zhǔn)體系研究，協(xié)助籌建化妝品技術(shù)規(guī)范委員會；持續(xù)完善技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)體系，已經(jīng)完成27項化妝品、化妝品新原料及毒理學(xué)試驗等相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則（草稿）的制訂，部分指導(dǎo)原則已經(jīng)應(yīng)用于化妝品及新原料的技術(shù)審評實踐中，用以規(guī)范相關(guān)技術(shù)審評工作；持續(xù)優(yōu)化完善,化妝品智慧申報審評系統(tǒng)、，積極開展第二批智慧審評功能建設(shè)，以智慧化手段進(jìn)一步提高審評效率和審評質(zhì)量。對,化妝品原料安全信息登記平臺、進(jìn)行持續(xù)優(yōu)化和數(shù)據(jù)利用，該平臺現(xiàn)已完成22余萬個原料信息的收集，為我國化妝品監(jiān)管和安全技術(shù)評價提供了強(qiáng)有力的大數(shù)據(jù)支撐。6.輔料包材領(lǐng)域承擔(dān)國家局食品藥品審核查驗中心的《藥用輔料行業(yè)生產(chǎn)質(zhì)撰寫,藥劑學(xué)前沿叢書、之一《藥品包裝材料》，為行業(yè)提供最新技術(shù)前沿資料；建立國內(nèi)首個兒童制劑用輔料數(shù)據(jù)庫，填補國內(nèi)7兒童制劑領(lǐng)域的空白；繼續(xù)完善仿制藥一致性評價藥用輔料功能性指標(biāo)數(shù)據(jù)庫，強(qiáng)化仿制藥常用輔料質(zhì)量監(jiān)督；建立新輔料二硬脂酰磷脂酰甘油鈉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，服務(wù)高端制劑研發(fā)；完成12個藥用玻璃中國藥典方法標(biāo)準(zhǔn)的起草，服務(wù)行業(yè)規(guī)范；研制開發(fā),卡脖子、輔料總計20個新藥用輔料標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，包括合成磷脂系列、聚維酮系列、脂肪酸酯系列和聚山梨酯系列，有力保障了藥典及其增補本的順利實施。首次建立全院生物安全類設(shè)備的質(zhì)量分析報告系統(tǒng)，推動全院生物安全類設(shè)備檢測報告數(shù)字化管理。開拓性設(shè)計潔凈環(huán)境領(lǐng)域能力驗證活動，首批能力驗證活動（風(fēng)速、懸浮粒子和照度）成功實施，促進(jìn)潔凈環(huán)境行業(yè)檢測技術(shù)的提升。將,京津冀潔凈檢測技術(shù)聯(lián)盟、擴(kuò)容為,中國藥監(jiān)潔凈檢測技術(shù)聯(lián)盟、（秘書處設(shè)在中檢院輔料包材所積極組織潔凈環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)和技術(shù)交流，服務(wù)行業(yè)發(fā)展。7.體外診斷試劑領(lǐng)域以疫情防控產(chǎn)品為重點，全力做好新冠診斷試劑質(zhì)量評價；積極推進(jìn)承擔(dān)的國家藥品監(jiān)管科學(xué)項目行動計劃第二批重點項目，并取得了有效進(jìn)展；積極開展標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制工作，2021年2月批復(fù)成立以來，共完成標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制13項；起草的抗人球蛋白檢測卡（柱凝集法）等3項行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)獲得發(fā)布；積極推進(jìn),醫(yī)用高通量測序標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)歸口單位、有關(guān)工作；作為,國際標(biāo)準(zhǔn)化組織醫(yī)用臨床檢驗實驗室和體外診斷系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會第六聯(lián)標(biāo)準(zhǔn)。8.藥品安全評價領(lǐng)域8緊密圍繞國家藥監(jiān)局監(jiān)管需求，緊跟國際先進(jìn)技術(shù)前沿和監(jiān)管研究理念，進(jìn)一步加強(qiáng)藥物安全性評價技術(shù)體系建設(shè)，開展前瞻性技術(shù)研究。其中，基因和細(xì)胞治療評價、新型抗體和疫苗評價、納米藥物評價、生物分布、生物標(biāo)志物等多項關(guān)鍵技術(shù)研究水平與國際先進(jìn)水平一致，全面支撐國家藥品科學(xué)監(jiān)管。初步建立了人體器官芯片技術(shù)、3D肝臟細(xì)胞模型、神經(jīng)毒性早期篩選模型、遺傳毒性計算機(jī)虛擬篩選和預(yù)測技術(shù)、轉(zhuǎn)基因新模式動物、AI病理診斷技術(shù)等。開展了30余種創(chuàng)新藥物品種的全面安全評溶瘤病毒產(chǎn)品等。其中三項藥物獲得臨床批件，一項通過國家干細(xì)胞臨床研究項目備案，極大地推進(jìn)了我國細(xì)胞和基因治療產(chǎn)品等重大創(chuàng)新藥物的上市。參與國家局首批監(jiān)管科學(xué)研究項目，起草納米藥物、ADCs等國家標(biāo)準(zhǔn)和指導(dǎo)原則，促進(jìn)藥品監(jiān)管科學(xué)體系的建立。三、培養(yǎng)科技人才，充分發(fā)揮人才引領(lǐng)作用為加強(qiáng)人才隊伍建設(shè)，提升能力和水平，增強(qiáng)學(xué)術(shù)氛圍，中檢院開展了一系列科技交流活動，并設(shè)立專項基金支持院內(nèi)科研工作和人才成長。（一）院內(nèi)科技周交流活動為了提升科研能力，促進(jìn)學(xué)術(shù)發(fā)展，適應(yīng)監(jiān)管科學(xué)和醫(yī)藥發(fā)舉辦科技活動周。本次交流活動以監(jiān)管科學(xué)為主線，圍繞當(dāng)前食品藥品監(jiān)管熱點安排了4個領(lǐng)域分會場的線上和線下交流活動。9理化分析領(lǐng)域分會場，來自中國計量科學(xué)研究院、武漢工程大學(xué)的專家分別以,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)計量溯源性、、,核磁共振技術(shù)在復(fù)雜混合物分析中的應(yīng)用、做了報告。中檢院專家圍繞中藥質(zhì)量評價、藥物新型制劑評價等主題，做了,板藍(lán)根質(zhì)量評價創(chuàng)新模式,中藥中肝毒性吡咯里西啶生物堿的檢測及其風(fēng)險評估、、,基于質(zhì)譜信息庫系統(tǒng)的中藥材及飲片智能化9身份9鑒定方法研究、、,核磁共振技術(shù)在藥品及藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中的應(yīng)用、、,頭孢菌素類抗生素的聚合物研究、、,透皮貼劑質(zhì)量控制研究進(jìn)展、、,復(fù)雜制劑效能性質(zhì)量指標(biāo)的控制探討、、,流變學(xué)在藥用輔料及藥品質(zhì)量控制方面應(yīng)用、、,注射劑包裝容器密封完整性評估技術(shù)研究、、,納米技術(shù)化妝品安全評價研究、、,保健食品中藻類毒素檢測、等報告。生物領(lǐng)域分會場，來自空軍軍醫(yī)大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)的專家分別以,新冠病毒新型受體的研究、、,廣譜冠狀病毒疫苗的研發(fā)、為題，與大家分享了相關(guān)領(lǐng)域的最新研究進(jìn)展。院內(nèi)從事生物制品、實驗動物、食品檢定和診斷試劑的專家，則以,ADC藥物研發(fā)進(jìn)展、、,干細(xì)胞研究進(jìn)展、、,結(jié)核防治產(chǎn)品研究進(jìn)展、、,傳染性疾病動物模型的研究進(jìn)展、、,多雜質(zhì)大樣本量液體中沙門氏菌的檢測、、,病原體宏基因組測序方法的評價、為題做了報告。藥理毒理領(lǐng)域分會場，開展了化妝品動物實驗替代方法研究成果示范活動。旨在提高我國化妝品安全評價技術(shù)水平，促進(jìn),3R、動物替代理念在化妝品領(lǐng)域的推廣和動物實驗替代方法的示范，加強(qiáng)全國藥檢系統(tǒng)化妝品替代毒理技術(shù)培訓(xùn)。來自東南大學(xué)、中國疾病預(yù)防控制中心、浙江省食品藥品檢驗研究院的專家，分別以,人體器官芯片在藥物和化妝品篩選評價及精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)中的研究和應(yīng)用、、,動物替代試驗在化妝品原料安全評價中的應(yīng)用、、,我國化妝品功效評價的現(xiàn)狀和思考、做了報告。中檢院專家分別就,創(chuàng)新技術(shù)化妝品新原料安全評價研究、、,三維皮膚模型用于皮膚刺激及納米材料透皮性研究、、,方法轉(zhuǎn)移和替代的統(tǒng)計比較規(guī)范研究、、,三維培養(yǎng)模型用于遺傳毒性替代研究進(jìn)展、、,化妝品安全評價最新進(jìn)展、、,替代新技術(shù)新方法在藥品安全性評價中的應(yīng)用、等進(jìn)行了交流。醫(yī)療器械領(lǐng)域分會場，來自中檢院的11位技術(shù)專家匯報了近一年來在本領(lǐng)域所做的研究工作。分別以,國家標(biāo)準(zhǔn)品量值溯源和生化標(biāo)準(zhǔn)品賦值研究、、,新型冠狀病毒中和抗體檢測的標(biāo)準(zhǔn)化—體外替代方法探討、、,丙肝診斷的標(biāo)準(zhǔn)及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、、,數(shù)字療法產(chǎn)品質(zhì)量評價探討、、,穿戴式電聲設(shè)備質(zhì)量評價方法研究、、,持續(xù)葡萄糖監(jiān)測系統(tǒng)（CGM）質(zhì)量評價方法的研究、、,血液透析器的生物安全性研究、為題目，圍繞醫(yī)療器械質(zhì)量評價、檢驗檢測平臺建設(shè)和技術(shù)創(chuàng)新等熱點問題作報告。本次交流活動按照疫情防控要求未安排主會場活動，4個分會場交流由中檢院學(xué)術(shù)委員會各分委會主辦，采取線上線下相結(jié)合的方式舉辦。來自藥檢系統(tǒng)、高校、科研院所及相關(guān)企業(yè)等400余家單位參與交流。中檢院學(xué)術(shù)委員會委員、相關(guān)業(yè)務(wù)所科研人員約300余人次參加了本次科技周活動。（二）繼續(xù)辦學(xué)術(shù)論壇，為新藥研發(fā)和安全監(jiān)管“鋪路架橋”1．醫(yī)用增材制造醫(yī)療器械技術(shù)及標(biāo)準(zhǔn)發(fā)展學(xué)術(shù)論壇術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)歸口單位秘書處承擔(dān)單位以及國家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械質(zhì)量研究與評價重點實驗室，組織召開了,醫(yī)用增材制造醫(yī)療器械技術(shù)及標(biāo)準(zhǔn)發(fā)展學(xué)術(shù)論壇、。來自監(jiān)管機(jī)構(gòu)、檢驗檢測機(jī)構(gòu)、增材制造相關(guān)生產(chǎn)研發(fā)企業(yè)、科研機(jī)構(gòu)、大專院校、臨床機(jī)構(gòu)等單位300余人在線上參加了本次論壇。中檢院器械所主要負(fù)責(zé)人致詞并介紹了醫(yī)用增材制造技術(shù)及標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)展，指出我國雖然已經(jīng)在醫(yī)用增材制造技術(shù)方面取得了一定進(jìn)展，但標(biāo)準(zhǔn)需求仍然很大，急需制定具有我國知識產(chǎn)權(quán)的相關(guān)技術(shù)方法和標(biāo)準(zhǔn)。論壇首先由西安交通大學(xué)盧秉恒院士做了定制化醫(yī)療器械標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)情況的報告，中檢院作為秘書處單位，由秘書長介紹了醫(yī)用增材制造技術(shù)醫(yī)療器械行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)制定進(jìn)展，北京大學(xué)第三醫(yī)院劉忠軍教授從增材制造醫(yī)療器械在骨科的應(yīng)用方面探討了相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的制定問題，中國醫(yī)療器械行業(yè)協(xié)會3D專委會等專家分別做了增材制造團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)制定及實踐思考、醫(yī)用增材制造技術(shù)發(fā)展的機(jī)遇與挑戰(zhàn)、醫(yī)用增材制造構(gòu)件及其標(biāo)準(zhǔn)融入功能適配的意義和作用、醫(yī)用增材制造生物陶瓷標(biāo)準(zhǔn)的探索與實踐、骨科醫(yī)用增材制造技術(shù)應(yīng)用與發(fā)展等報告。與會專家及代表圍繞增材制造原材料的質(zhì)量控制及標(biāo)準(zhǔn)等內(nèi)容進(jìn)行了交流和討論。中檢院器械所材料室負(fù)責(zé)人致閉幕詞，感謝產(chǎn)學(xué)研各行業(yè)專家和業(yè)界同仁對本次論壇的支持，未來將以技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)為紐帶，共同促進(jìn)醫(yī)用增材制造技術(shù)的研發(fā)和創(chuàng)新成果轉(zhuǎn)化，引領(lǐng)行業(yè)健康發(fā)展。2.神經(jīng)修復(fù)與再生研究產(chǎn)品研發(fā)及質(zhì)量評價學(xué)術(shù)論壇2022年1月13日，中檢院,國家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械質(zhì)量研究與評價重點實驗室、和南通大學(xué),國家藥品監(jiān)督管理局組織工程技術(shù)產(chǎn)品研究與評價重點實驗室、聯(lián)合舉辦,神經(jīng)修復(fù)與再生研究產(chǎn)品研發(fā)及質(zhì)量評價學(xué)術(shù)論壇、。為推動神經(jīng)修復(fù)與再生植入類醫(yī)療器械產(chǎn)品質(zhì)量評價技術(shù)研究和標(biāo)準(zhǔn)化進(jìn)程，解決創(chuàng)新技術(shù)產(chǎn)品轉(zhuǎn)化上市的,卡脖子、問題，南通大學(xué)顧曉松院士團(tuán)隊領(lǐng)銜的神經(jīng)修復(fù)領(lǐng)域知名科研團(tuán)隊和相關(guān)的研究機(jī)構(gòu)、臨床單位、檢測機(jī)構(gòu)、監(jiān)管部門、企業(yè)代表和中檢院組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品分技術(shù)委員會等代表共300余人在線上參加了本次論壇。顧曉松院士致開幕詞并介紹了生物可降解組織工程神經(jīng)構(gòu)建與產(chǎn)品研發(fā)進(jìn)展，指出我國在神經(jīng)修復(fù)這一創(chuàng)新領(lǐng)域已取得可喜進(jìn)展，但面臨的國際形勢仍然十分嚴(yán)峻，急需制定自己的標(biāo)準(zhǔn)，以保護(hù)和促進(jìn)我國具有自主知識產(chǎn)權(quán)的創(chuàng)新成果轉(zhuǎn)化，并引領(lǐng)國際。希望各方積極交流合作，通過標(biāo)準(zhǔn)制定，共同促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)領(lǐng)域的發(fā)展。中檢院徐麗明研究員介紹了神經(jīng)修復(fù)與再生醫(yī)療產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)體系構(gòu)想及標(biāo)準(zhǔn)預(yù)研計劃。中科院戴建武教授團(tuán)隊介紹了脊髓損傷再生修復(fù)研究，北航李曉光教授介紹了中樞神經(jīng)再生的新思路——調(diào)控成年神經(jīng)發(fā)生修復(fù)腦和脊髓損傷，中山大學(xué)曾園山教授介紹了生物材料治療脊髓損傷，中山大學(xué)朱慶棠教授介紹了周圍神經(jīng)損傷修復(fù)的臨床評價，南開大學(xué)朱美峰教授介紹取向結(jié)構(gòu)材料促進(jìn)外周神經(jīng)修復(fù)，北京大學(xué)人民醫(yī)院張培訓(xùn)教授介紹了甲殼質(zhì)周圍神經(jīng)套接管修復(fù)周圍神經(jīng)損傷，中國人民解放軍總醫(yī)院彭江教授介紹了細(xì)胞外基質(zhì)源性組織工程神經(jīng)修復(fù)周圍神經(jīng)缺損，清華大學(xué)王秀梅教授介紹了基于多模態(tài)組織工程策略的神經(jīng)再生修復(fù)研究，北京匯福康公司陳寬介紹了周圍神經(jīng)套接管產(chǎn)品的設(shè)計開發(fā)，廣州中大醫(yī)療張陽介紹了神橋—科技成果轉(zhuǎn)化之路，江蘇益通生物科技有限公司趙敏健介紹了周圍神經(jīng)修復(fù)移植物產(chǎn)品性能研究與質(zhì)量評價，四川大學(xué)敖強(qiáng)教授介紹了神經(jīng)脫細(xì)胞基質(zhì)材料安全性、有效性評價及質(zhì)量控制，中山大學(xué)鄭燦鑌介紹了周圍神經(jīng)缺損修復(fù)的動物模型，首都醫(yī)科大學(xué)楊朝陽介紹了生物活性材料誘導(dǎo)成體內(nèi)源神經(jīng)發(fā)生修復(fù)腦損傷。與會專家圍繞質(zhì)量評價和標(biāo)準(zhǔn)制定進(jìn)行研討和交流，提出了各自需求和建議。顧曉松院士進(jìn)行會議總結(jié)。中檢院器械所負(fù)責(zé)人致閉幕詞，感謝顧曉松院士的支持和各專家團(tuán)隊的積極參與，指出中檢院作為國家局醫(yī)療器械質(zhì)量評價和研究重點實驗室和組織工程醫(yī)療器械分技委秘書處，將為集聚各方力量、協(xié)調(diào)各方需求，制定科學(xué)系統(tǒng)的質(zhì)量評價新方法、新工具和新標(biāo)準(zhǔn)，為提供全方位服務(wù)及神經(jīng)修復(fù)領(lǐng)域的創(chuàng)新發(fā)展提供堅實技術(shù)支撐。本次論壇大咖云集，精彩紛呈，在短短一天內(nèi)從基礎(chǔ)研究、臨床研究、產(chǎn)品研發(fā)和質(zhì)量控制等多角度，全方位展現(xiàn)了我國在神經(jīng)修復(fù)領(lǐng)域的可喜進(jìn)展，激起了產(chǎn)學(xué)研檢各方的思維碰撞。參會團(tuán)隊紛紛表示，將以質(zhì)量研究為紐帶、以標(biāo)準(zhǔn)制定為目標(biāo)，共同促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)領(lǐng)域研發(fā)和創(chuàng)新成果轉(zhuǎn)化。以服務(wù)公眾健康為己任，通過國際標(biāo)準(zhǔn)化活動推動我國創(chuàng)新成果在國際神經(jīng)修復(fù)領(lǐng)域占領(lǐng)先機(jī)并發(fā)揮主導(dǎo)作用。（三）院內(nèi)科研支持基金課題工作科研處組織院學(xué)術(shù)委員會專家分別于2022年2月18日對醫(yī)療器械、化妝品評價、質(zhì)量管理領(lǐng)域的6個課題，2月23日對輔食品領(lǐng)域的5個課題驗收，17個課題均通過驗收(附表1)。2.學(xué)科帶頭人基金度立項的5個院學(xué)科帶頭人培養(yǎng)基金課題進(jìn)行驗收。5個課題均通過驗收（附表2）。3.院關(guān)鍵技術(shù)基金2022年1月21日，召開院長專題會議討論第一期院關(guān)鍵技術(shù)研究基金申報指南及申報評審方案，確定由各指南方向的申報受理部門遴選推薦。2022年6月29日發(fā)布中檢院關(guān)鍵技術(shù)研究基金第一期申報通知，10個方向共收到31項推薦課題。2022年請院內(nèi)22名專家和4名院外專家組成專家評審團(tuán)，對31項課題是否推薦立項給出意見并給出推薦理由和修改意見，最終確定31立項課題進(jìn)行了7個工作日的院內(nèi)公示，公示期內(nèi)未收到任何異度關(guān)鍵技術(shù)研究基金推薦立項課題，共31項（附表3支持經(jīng)費共2230萬元，其中院級經(jīng)費2000萬元，所級配套經(jīng)費230萬元。（四）院外科研立項及成果情況2022年立項課題共63個，其中國家級、省部級等課題32個（附表4收到驗收結(jié)論課題共26項，其中國家級、省部級等課題4項（附表5獲得專利授權(quán)58項（附表6獲得科學(xué)技術(shù)獎8項（附表7發(fā)表論文873篇，其中SCI論文234篇（附表8出版專著7部（附表9其中譯注4部。第二部分、課題研究進(jìn)展國家自然科學(xué)基金牛肉餡中產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌分離與遺傳溯源方法研究一、課題信息課題負(fù)責(zé)人：崔生輝主要研究實驗室：中國食品藥品檢定研究院/食品化妝品檢定所、遵義醫(yī)科大學(xué)二、主要目標(biāo)1．對我國八省市零售牛肉餡中STEC進(jìn)行分離；3．對我國八省市零售牛肉餡中STEC進(jìn)行基因組水平遺傳學(xué)分析。三、主要研究進(jìn)展1、對我國八個省市市售牛肉樣本進(jìn)行采集及stx基因qPCR肉餡樣本組成，對其本進(jìn)行stx基因熒光PCR初篩，得到535份stx陽性增菌液樣本，stx基因初篩陽性率為50.38%兩種血清型的分離株外，其余ST型都與血清型一一對應(yīng)。3、對我國八省市零售牛肉餡中STEC進(jìn)行基因組水平遺傳學(xué)分析結(jié)合耐藥表型、血清型及毒力基因進(jìn)一步分析STEC的危害來自6個省的農(nóng)貿(mào)市場牛肉樣品。這些分離株屬于三種血清型：STEC的耐藥基因型具有廣泛多樣性，按照藥物類別，獲得的43種耐藥基因分屬于11類抗生素（圖4）。四、主要成果1、發(fā)表與課題相關(guān)內(nèi)容文獻(xiàn)2篇：胡穎,趙琳娜,白莉,崔生輝.前增菌抗生素添加對產(chǎn)志賀2022,34(03):504-509.CuiX,ZhaoL,BaiL,CuiS,HeZ.ICharacterizationofShigaToxin-ProducingEscherichiacolifromRetailBeefSamplesfromEightProvincesinChina[J].名。3、參加國內(nèi)學(xué)術(shù)會議：均為線上會議，共計3次。國家自然科學(xué)基金基于何首烏中二蒽酮類成分致其肝毒性假說的炮制減毒機(jī)制及質(zhì)量控制關(guān)鍵技術(shù)研究一、課題信息課題負(fù)責(zé)人：馬雙成主要研究實驗室：中國食品藥品檢定究院中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所二、主要目標(biāo)研究目的：闡明何首烏中二蒽酮類成分的肝毒性；制何首烏質(zhì)量控制關(guān)鍵技術(shù)研究。解決問題：制定制何首烏的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，減低或消除其肝毒性不良反應(yīng)考核指標(biāo)：運用模式生物斑馬魚模型對制何首烏進(jìn)行毒性評價；對何首烏中二蒽酮成分群，進(jìn)行斑馬魚毒性評價；基于二蒽酮類成分進(jìn)行制何首烏炮制工藝研究，進(jìn)而建立制何首烏炮制減毒的質(zhì)量控制方法。三、主要研究進(jìn)展1、基于斑馬魚模型的制何首烏毒性評價研究以何首烏及制何首烏70%乙醇提取物的凍干粉末為樣品，以模式生物斑馬魚為評價模型，進(jìn)行斑馬魚胚胎毒性評價。每個樣品重復(fù)三次，分別于給藥后24h、48h觀察斑馬魚的發(fā)育變化，包括發(fā)育停滯、心包囊腫、脊柱彎曲等畸形狀況（圖1B、C、D并統(tǒng)計各實驗組斑馬魚的死亡率。以何首烏樣品炮制時間為橫坐標(biāo)，以擬合曲線的LC50值為縱坐標(biāo)作圖，樣品濃度-死亡曲線，詳見如圖2。結(jié)果顯示，隨著炮制時間的延長，制何首烏醇提物毒性總體呈下降趨勢，其中炮制后隨著炮制時間的延長，毒性略有回升后再下降，到炮制48h以圖2.樣品濃度-死亡曲線2、何首烏中二蒽酮類成分群致斑馬魚肝損傷評價2.1最大非致死濃度何首烏二蒽酮類成分群對斑馬魚的毒性評價結(jié)果，詳見表1。采用SPSS26.0軟件，利用“濃度-死亡率”擬合最佳效應(yīng)曲線，計2.20）濃度條件下斑馬魚未出現(xiàn)死亡，故實驗采用2.50μg/mL作表1.何首烏二蒽酮類成分群對斑馬魚毒性濃度摸索實驗結(jié)果（n=10）濃度(μg/mL）-00000000何首烏成分群00---表1.何首烏二蒽酮類成分群對斑馬魚毒性濃度摸索實驗結(jié)果（n=10）2.2肝臟組織病理切片分析胞輪廓清晰，細(xì)胞質(zhì)分布均勻，無腫大或空泡，細(xì)胞核大小形態(tài)規(guī)則，相互交錯。何首烏二蒽酮類成分群2.50μg/mL濃度組肝臟組織可見明顯空泡樣化（箭頭所示）及細(xì)胞排列不規(guī)則現(xiàn)象，細(xì)胞核固縮，但無明顯炎性浸潤。提示何首烏二蒽酮類成分群可誘圖3.何首烏二蒽酮類成分群處理后斑馬魚肝臟組織病理圖2.3肝毒性生化指標(biāo)評價在本實驗條件下，何首烏二蒽酮類成分群可降低肝臟GSH含表2.GSH,SOD和MDA實驗結(jié)果（n=10）組別濃度平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤SOD（U/mgprot）MDA(μmol/gprot）正常對照組-413±6.090.596±0.080給藥組2.5064.4±8.54***366±6.00***1.20±0.184**表2.GSH,SOD和MDA實驗結(jié)果（n=10）與正常對照組比較，***P<0.001，**P<0.01組別濃度平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤ALT（U/gprot）AST（U/gprot）正常對照組-2.70±0.22110.8±0.668給藥組2.5010.5±1.97***16.2±0.402***表3.ALT和AST實驗結(jié)果（n=10）2.4總結(jié)與討論分給藥濃度為2.50μg/mL，7天給藥后，斑馬魚出現(xiàn)了肝損傷現(xiàn)象，提示何首烏中二蒽酮類成分具有一定的肝毒性。3、何首烏及制何首烏中二蒽醌類成分的含量測定3.1專屬性考察6個二蒽酮對照品溶液、何首烏供試品溶液及空白溶液的色譜圖，如圖6所示?？瞻兹芤涸诖郎y化合物對應(yīng)位臵沒有干擾峰，待測化合物峰分離度較好，提示方法專屬性好。A1HB-220211003MRMof12ChannelsES-TICA11.06e6248.0010.0012.00.10509.04>254.06(DT-01)1005.06e511HB-220211003MRMof12ChannelsES-6.008.01HB-220211003MRMof12ChannelsES-509.1>254.03(DT-02)06.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.001HB-2202110032MRMof12ChannelsES-1HB-22021100323.03e53.03e518.0020.00MRMof12ChannelsES-523.05>253.98(DT-04)1HB-220211003314.0010.0012.0016.008.001H1HB-220211003MRMof12ChannelsES-2.56e56.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.00537.13>522.16(DT-05)1004.10e441HB-220211003MRMof12ChannelsES-6.008.01HB-220211003MRMof12ChannelsES-537.13>522.16(DT-06)46.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.00560h-220210923MRMof12ChannelsES-0h-220210923100B5.06e5100B13243206.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.000h-220210923MRMof12ChannelsES-509.04>225.07(DT-01)5.98e310016.000h-26.000h-2202109238.0010.0012.0014.0016.0018.0020.008.0010.0012.0014.0016.00MRMof12ChannelsES-509.1>254.03(DT-02)2.48e510026.000h-26.000h-2202109231008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.00MRMof12ChannelsES-523.12>254.04(DT-03)31.23e506.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.000h-220210923MRMof12ChannelsES-523.05>253.98(DT-04)1001.27e5100406.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.000h-220210923MRMof12ChannelsES-537.13>522.16(DT-05)1.63e410056.000h-2202109236.000h-2202109238.0010.0012.0014.0016.0018.0020.00MRMof12ChannelsES-537.13>522.16(DT-06)1.48e41006006.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.0050%EtOH-320210924MRMof12ChannelsES-C220TICC2206.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.00506.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.0050%EtOH-320210924MRMof12ChannelsES-509.04>254.06(DT-01)010.0012.0014.0018.0020.0010.0012.0014.0018.0020.0050%EtOH-320210924220509.1>254.03(DT-02)2206.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.00506.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.0050%EtOH-320210924MRMof12ChannelsES-523.12>254.04(DT-03)6.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.00506.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.0050%EtOH-320210924MRMof12ChannelsES-523.05>253.98(DT-04)14.006.008.0050%14.006.008.0050%EtOH-32021092410.0012.0018.0020.00537.13>522.16(DT-0-10010.0012.0014.0018.0020.0010.0012.0014.0018.0020.00537.13>522.16(DT-50%EtOH-32021092400-100i ———————————————————————————-100i6.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.00反式-大黃素-大黃素二蒽酮；2，順式-大黃素-大黃素二蒽酮；3，反式-大黃素-大黃素甲醚二蒽酮；4，順式-大黃素-大黃素甲醚二蒽酮；5，反式-大黃素甲醚-大黃素甲醚二蒽酮；6，順式-大黃素甲醚-大黃素甲醚二蒽酮）3.2結(jié)果分析在56批不同產(chǎn)區(qū)何首烏中，6個游離二蒽酮總量為0.2084μg/g-380.3744μg/g，差異較大，可達(dá)三個數(shù)量級。安徽亳州產(chǎn)區(qū)何首烏樣品中總游離二蒽酮含量最低，為0.2084μg/g；廣東高州產(chǎn)區(qū)何首烏樣品中總游離二蒽酮含在30批廣東德慶不同生長年限何首烏中，6個游離二蒽酮總量為0.2084μg/g-380.3744μg/g（見圖7A以相同生長年限不同批次含量測定的平均值（折線圖頂點）進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)隨著生長年限的增長，何首烏中總游離二蒽酮含圖7.廣東德慶產(chǎn)區(qū)總游離二蒽酮含量測定結(jié)果對不同炮制工藝的制何首烏中總游離二蒽酮進(jìn)行含量分析，結(jié)果顯示，四種工藝中總游離二蒽酮含量隨著炮制時間延長呈下降趨勢。對比四種工藝，以總游離二蒽酮含量作為指標(biāo)，九蒸九制工藝產(chǎn)品含量最低，炮制工藝最佳，具體含量(μg/g）QZHDZ-1DZ炮制時間(h)圖8.不同炮制工藝制何首烏總游離二蒽酮含量測定結(jié)果綜上所述，何首烏和部分制何首烏樣品中均能檢出二蒽酮類成分，由此可初步推得何首烏和炮制不合理的制何首烏年版）制何首烏質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)項下，建立二蒽酮類成分的限量檢查項。四、取得的階段研究成果（發(fā)表論文20篇，SCI收錄6篇；申請專利2項，其中獲得授權(quán)1項）4.1發(fā)表相關(guān)文章1.楊建波,汪祺,王雪婷,程顯隆,王瑩,高慧宇,宋云飛,魏鋒*,馬雙成*.基于植物代謝組學(xué)技術(shù)研究何首烏和制何首烏的差異性成分[J].中國藥物警戒,2022,19(6):615-619.2.楊建波,高博聞,孫華,靳洪濤,高慧宇,?；?程顯隆,王雪婷,宋云飛,魏鋒*,汪祺,王瑩,胡笑文,馬雙成*.何首烏肝毒性物質(zhì)基礎(chǔ)研究進(jìn)展[J].中國藥物警戒,2022,19(6):610-614.3.楊建波,汪祺,高慧宇,王雪婷,宋云飛,王瑩,程顯隆,魏鋒*,靳洪濤,段寶忠,馬雙成*.何首烏及首烏藤中二蒽酮類成分研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代中藥,2022,24(8):1431-1436.4.楊建波,汪祺,程顯隆,王瑩,高慧宇,王雪婷,宋云飛,魏鋒*,馬雙成*.何首烏中1個新的二苯乙烯苷類化合物[J].中國現(xiàn)代中藥,2022,24(8):1415-1419.5.汪祺,楊建波,王瑩,李妍怡,馬雙成*,張玉杰*.何首烏提取物大鼠體內(nèi)組織蓄積比較研究[J].中國現(xiàn)代中藥,2022,24(7):1317-1322.6.汪祺,楊建波,文海若*,馬雙成*.大黃素-大黃素甲醚型二蒽酮化合物安全性研究[J].中國現(xiàn)代中藥,2022,7.汪祺,楊建波,王瑩,李妍怡,文海若*,馬雙成*.基于轉(zhuǎn)運體的何首烏致肝損傷作用機(jī)制探討[J].中國現(xiàn)代中藥,2022,24(9):1720-1726.8.汪祺,楊建波,文海若*,馬雙成*.基于UDP-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A1抑制探討二蒽酮的潛在肝毒性[J].藥物評價研究,2022,45(9):1779-1785.9.王瑩,辜冬琳,范晶,楊建波,劉越,王雪婷,汪祺*,金紅宇,魏鋒,馬雙成*.九蒸九曬炮制過程何首烏中5-羥甲基糠醛和二苯乙烯苷含量變化分析[J].中國藥物警戒,2022,19(12):1291-1295.10.王瑩,辜冬琳,楊建波,劉晶晶,范晶,劉越,汪祺*,金紅宇,魏鋒,馬雙成*.何首烏九蒸九曬炮制過程中多糖結(jié)構(gòu)的動態(tài)變化研究[J].中國藥物警戒,2022,19(12):1285-1290.11.李妍怡,王瑩,張南平,楊建波,劉越,汪祺*,張玉杰,馬雙成*.基于UPLC-MS/MS分析不同采收時期對何首烏蒽醌含量的影響[J].中國藥物警戒,2022,19(12):12.李妍怡,張玉杰,汪祺*,馬雙成*.何首烏相關(guān)肝毒性的機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國藥物警戒,2022,19(6):13.李妍怡,王瑩,張南平,楊建波,劉越,汪祺*,張玉杰,魏鋒,馬雙成*.基于UPLC-MS/MS檢測技術(shù)探討清蒸時間對何首烏26種化學(xué)成分的影響[J].中國藥物警戒,14.王瑩,金紅宇,李耀磊,劉芫汐,楊建波,辜冬琳,左甜甜,魏鋒,馬雙成*.何首烏中外源性有害殘留物的風(fēng)險評估與其致肝毒相關(guān)性初評[J].中國藥事,2022,36(10):1134-1146.usingdinuclearanthraquinoneswithpotentialhepatotoxicity.Molecules,2022,27:6760.spectrum-effectrelationshiptoelucidatethe17.Yun-feiSong,Jian-boYang,Xue-tingWPharmacokineticsand2022,290:115123.Disruptingthemetabolismofbilirubinandbileacid[J].ImmunomodulatoryActivityFrontiersinPharmacology,2022,13:934710.20.Hai-yanJiang,Hui-yuGao,JieLi,Tian-yuZhou,Shu-tingWang,Jian-boYang,Rui-ruiHao,FeiPang,Jiu-mingHe,Hong-taoJin*.Integratedspatiallyinvestigatethehepatotoxicitymec1.高慧宇,馬雙成,魏鋒,楊建波,等.一種何首烏中6種二蒽酮類化合物的檢測方法.申請(專利)號：化合物在制備預(yù)防和/或治療心肌缺血性疾病及其相關(guān)病癥的藥物中的應(yīng)用.發(fā)明專利證書第5370221號.授權(quán)公告國家自然科學(xué)基金新型冠狀病毒及相關(guān)冠狀病毒跨種屬傳播及抗原性差異的機(jī)制研究一、課題信息課題負(fù)責(zé)人：聶建輝主要研究實驗室：艾滋室二、主要目標(biāo)（限300字）相關(guān)冠狀病毒情況，構(gòu)建相應(yīng)的假病毒，該項工作在每一年度實時進(jìn)行，不斷擴(kuò)充假病毒庫。2．在不同種屬細(xì)胞、不同受體表達(dá)細(xì)胞和不同蛋白酶受體細(xì)胞中研究不同假病毒感染性差異，初步評價跨種屬傳播風(fēng)險。3．通過比較不同S蛋白表達(dá)、轉(zhuǎn)運、誘導(dǎo)融合能力，及假病毒表面S蛋白，表達(dá)水平和S1/S2比例等，初步確定S蛋白變異對感染性影響的機(jī)制。三、主要研究進(jìn)展3.1B.1.617變異株的感染性和動物嗜性研究B.1.617變異株在四種SARS-CoV-2敏感細(xì)胞系中略有增ACE2-過表達(dá)細(xì)胞的病毒感染性。盡管B.1.617亞系中其他物數(shù)物種的感染性增加（圖1（B。圖1.B.1.617感染性分析。A.靶細(xì)胞的歸一化化學(xué)發(fā)光信號（RLUs）與D614G參考株進(jìn)行比較。數(shù)據(jù)代表四個重復(fù)實驗的結(jié)果。虛線表示兩倍和四倍變化。B.將來自不同物種的等量的ACE2過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到293T細(xì)胞中。3.2蛋白酶對變異株感染性的影響由于所有B.1.617變異株都攜帶P681R突變，與蛋白水解位點相鄰，因此我們研究了蛋白酶過表達(dá)（使用多種蛋白酶）對病毒感染性的影響。在B.1.617變異株中，弗林酶過表達(dá)表達(dá)時沒有觀察到類似的現(xiàn)象。隨后，我們通過檢查假病毒顆粒中S1和S2蛋白酶的蛋白水解來研究酶蛋白水解活性。如單突變異株或P681R突變異株的S2比例沒有顯著增加。3.3B.1.617變異株細(xì)胞融合特性的變化為了研究B.1.617變異株的S蛋白和P681R突變是否改變細(xì)胞間融合特征，使用了Renillalucifase（spRL）與綠色熒光蛋白（spGFP）融合的雙報告系統(tǒng)。熒光素酶或GFP信號的強(qiáng)度表明宿主細(xì)胞融合的程度（圖2（C。在供體細(xì)胞和受體細(xì)胞混合后1至8小時內(nèi)監(jiān)測熒光素酶和熒光信號。使用沒有經(jīng)典弗林(δPRRA）位點的假病毒作為陰性對照。B.1.617變異株感染細(xì)胞的熒光信號比D614G參考菌株高1.2-2.3倍（圖2（D。還比較了熒光素酶信號，變化不如熒光信號明顯?；趩蝹€突變的進(jìn)一步分析表明，P681R單個突變增強(qiáng)了細(xì)胞間擴(kuò)散能力（圖2（D。圖2.蛋白水解活性和細(xì)胞間融合的分析。A.弗林酶和TMPRSS2分別在293T-hACE2細(xì)胞中過度表達(dá)。B.B.1.617和參考假病毒蛋白質(zhì)印跡。C.雙報告細(xì)胞-細(xì)胞融合系統(tǒng)的示意圖。D.細(xì)胞-細(xì)胞融合的時間過程曲線。3.4動物免疫血清的中和特性變化我們首先測試了RBD蛋白免疫馬血清的中和活性。針對還檢測了用其他變異株（例如D614G，B.1.351和B.1.429）免疫的血清的中和活性。全長刺突DNA加假型病毒用于對小鼠進(jìn)行免疫，產(chǎn)生一系列免疫后血清。對免疫血清的分析表明，通過B.1.351和B.1.429免疫獲得的抗血清與D614G參考株相比，免疫原對B.1.617變異株的中和活性沒有降低（圖3圖3.接種D614G和其他SARS-CoV-2變異株的動物的中和活性。圖中顯示了與D614G參考株相比的歸一化ID50比值。A.RBD蛋白免疫馬血清的中和活性。B.來自全長刺突DNA免疫和假型病毒免疫小鼠血清的中和活性。免疫程序顯示在左側(cè)面板中。四、主要成果4.1.B.1.617變異株感染性及免疫原性研究，本研究針對B.1.617變異株及其對應(yīng)的單氨基酸突變構(gòu)建了22種假型病毒。系統(tǒng)研究了B.1.617變異株感染性和抗原性變化，以及引起這些變化的原因。包括蛋白酶對變異株感染性的影響、變異對細(xì)胞融合的影響以及動物免疫血清的中和特性變化。4.2.Lamda變異株感染性和抗原性研究，本研究系統(tǒng)研究了Lamda變異株感染性的差異，以及這些變異引起的抗原性的變化。4.3.系統(tǒng)研究了VOC和VOI變異株交叉中和反應(yīng)特性。4.4發(fā)表文章：1Liu,S.etal.AbroaderneutralizingantibodyagainstallthecurrentVOCsandVOIstargetsuniquedoi:10.1038/s41421-022-00443-w(2022).2Wang,M.etal.Reducedsensitivityofneutralizingantibodiesinducedbyinfectionandvaccination.EmergMicrobesInfect11,18-29,doi:10.1080/22221751.2021.2008775(2022).3Zhang,L.etal.AnalysisofSARS-CoV-2variantsB.1.617:hosttropism,proteolyticactivation,cell-cellfusion,andneutralizationsensitivity.doi:10.1080/22221751.2022.2054369(2022).4Li,T.etal.Aggregationofhigh-frequencyRBDsignificantantigenicdrift.JMedVirol94,2108-2125,doi:10.1002/jmv.27596(2022).5Li,Q.etal.Antigenicitycomparisonofe130,doi:10.1002/mco2.130(2022).6Li,Q.etal.Cross-reactivityofeightSARS-CoV-2variantsrationallypredictsimmunogenicityclusteringinsarbecoviruses.SignalTransductTargetTher7,256,doi:10.1038/s41392-022-01123-7(2022).7聶建輝;李倩倩;王佑春新型冠狀病毒刺突蛋白的變異及其對中和活性的影響中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，42(1)：1-10.高通量液質(zhì)聯(lián)用檢測方法及診斷試劑研發(fā)一、課題信息課題負(fù)責(zé)人曹進(jìn)主要研究實驗室食品所理化一室北京市醫(yī)療器械檢驗研究院天津國科醫(yī)工科技發(fā)展有限公司中國計量科學(xué)研究院二、主要目標(biāo)針對我國目前體外診斷質(zhì)譜用生物基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)缺乏的現(xiàn)狀，通過開發(fā)可溯源標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備方法，建立維生素、類固醇激素、免疫抑制劑等臨床常見診斷生物標(biāo)志物高通量精準(zhǔn)檢測方法，解決溯源性和一致性的問題，保證臨床檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確可比，并在此基礎(chǔ)上，配套研制多靶標(biāo)臨床定量檢測試劑盒，為國產(chǎn)液質(zhì)聯(lián)用儀自主評價體系的建立提供基礎(chǔ)條件支撐。三、主要研究進(jìn)展3.1基于可溯源性標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)缺乏的問題，本課題在充分調(diào)研的基礎(chǔ)上篩選出以下8種目標(biāo)組分，并已完成通用性制備技術(shù)的摸索：現(xiàn)已完成冷凍人血清中葉酸、冷凍人血清中孕酮、冷凍人血清中維生素D、冷凍人血清中肌酐及人血紅蛋白中糖化血紅蛋白等5種生物基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)原料的收集、篩選、分組及分裝制備工藝流程的摸索；現(xiàn)已完成胍基乙酸、肌酸及他克莫司等3種純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的原料篩選，并通過同位素稀釋法、重量分析法、質(zhì)量平衡法、定量核磁法等進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)主成分定值研究。3.2基于臨床樣本基質(zhì)復(fù)雜、樣本量少以及通量問題，本課題針對臨床亟需的內(nèi)外源性指標(biāo)，開發(fā)新型高效前處理材料，并采用液質(zhì)聯(lián)用儀開發(fā)了高通量精準(zhǔn)檢測方法：現(xiàn)已完成新型磁性固相萃取微球材料（兩親性磁性固相萃取微球并鍵合不同表面官能團(tuán)）的制備，并在此基礎(chǔ)上針對人血漿中兒茶酚胺、類固醇激素、維生素等內(nèi)源性以及免疫抑制劑（他克莫司，西羅莫司，依維莫司，環(huán)孢霉素A）等指標(biāo)建立了對復(fù)雜生物基質(zhì)的分散型萃取體系，將傳統(tǒng)的移液、離心、氮吹、孵育等前處理步驟簡化為多次單一移液前處理，為自動化前處理設(shè)備開發(fā)提供基礎(chǔ)條件，同時解決了傳統(tǒng)固相萃取存在的溝渠效應(yīng)及孔間差異，可獲得重復(fù)性好、準(zhǔn)確度高、靈敏度高、通量高的臨床液質(zhì)聯(lián)用檢測結(jié)果。