2025中科院武漢病毒所第一季度集中招聘29人筆試歷年典型考點題庫附帶答案詳解（第1套）一、單項選擇題下列各題只有一個正確答案，請選出最恰當(dāng)?shù)倪x項（共30題）1、在分子生物學(xué)實驗中，下列哪種技術(shù)主要用于檢測特定DNA序列的存在？A.WesternblotB.ELISAC.SouthernblotD.Immunofluorescence2、下列關(guān)于PCR反應(yīng)體系的描述，錯誤的是哪一項？A.需要耐高溫的DNA聚合酶B.需要一對特異性引物C.需要dNTP作為原料D.需要RNA聚合酶啟動擴增3、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，防止細(xì)菌污染最常用的抗生素是？A.青霉素和鏈霉素B.紅霉素和萬古霉素C.氯霉素和利福平D.慶大霉素和四環(huán)素4、下列哪種方法最適合用于測定病毒的滴度？A.紫外分光光度法B.血凝實驗C.空斑形成試驗（Plaqueassay）D.瓊脂糖凝膠電泳5、在蛋白質(zhì)電泳中，SDS的主要作用原理是什么？A.根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷差異進(jìn)行分離B.根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小進(jìn)行分離C.根據(jù)蛋白質(zhì)的等電點進(jìn)行分離D.根據(jù)蛋白質(zhì)的疏水性進(jìn)行分離6、在分子生物學(xué)實驗中，常用于檢測特定DNA序列的技術(shù)是：A.WesternblotB.ELISAC.SouthernblotD.Immunofluorescence7、下列哪種病毒屬于RNA病毒且具有反轉(zhuǎn)錄過程？A.乙肝病毒B.流感病毒C.HIVD.腺病毒8、在細(xì)胞培養(yǎng)中，常用于防止細(xì)菌污染的抗生素是：A.青霉素-鏈霉素雙抗B.氨芐青霉素C.卡那霉素D.氯霉素9、下列哪種方法最適合用于測定蛋白質(zhì)的分子量？A.瓊脂糖凝膠電泳B.SDSC.PCRD.紫外分光光度法10、在熒光定量PCR中，Ct值的含義是：A.DNA擴增完成時的溫度B.熒光信號達(dá)到設(shè)定閾值所需的循環(huán)數(shù)C.初始模板DNA的濃度D.引物退火時間11、在病毒學(xué)研究中，常用于觀察病毒形態(tài)的儀器是？A.光學(xué)顯微鏡B.倒置顯微鏡C.電子顯微鏡D.熒光顯微鏡12、下列哪種病毒屬于RNA病毒且具有反轉(zhuǎn)錄過程？A.乙肝病毒B.流感病毒C.HIV病毒D.腺病毒13、在實驗室進(jìn)行病毒培養(yǎng)時，最常用的細(xì)胞系來源是？A.原代細(xì)胞B.二倍體細(xì)胞C.傳代細(xì)胞系D.干細(xì)胞14、下列哪種方法可用于定量檢測病毒核酸？A.WesternblotB.RT-qPCRC.免疫組化D.病毒空斑試驗15、干擾素在抗病毒免疫中的主要作用機制是？A.直接殺傷病毒B.促進(jìn)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體C.激活NK細(xì)胞并誘導(dǎo)抗病毒蛋白表達(dá)D.促進(jìn)病毒包膜融合16、在病毒學(xué)研究中，常用于測定病毒滴度的空斑試驗（PlaqueAssay）依賴于以下哪種細(xì)胞反應(yīng)？A.細(xì)胞融合B.細(xì)胞凋亡C.細(xì)胞病變效應(yīng)D.細(xì)胞增殖17、下列哪種方法最適合用于檢測病毒基因組中的特定核酸序列？A.蛋白質(zhì)電泳B.免疫熒光染色C.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）D.紫外分光光度法18、在生物安全實驗室中，處理高致病性病毒樣本時，應(yīng)選擇哪一級別的生物安全實驗室（BSL）？A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-419、下列哪種免疫學(xué)技術(shù)常用于檢測血清中針對特定病毒的抗體？A.流式細(xì)胞術(shù)B.酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）C.核酸雜交D.限制性片段長度多態(tài)性分析（RFLP）20、病毒衣殼的主要化學(xué)成分是什么？A.脂質(zhì)B.多糖C.蛋白質(zhì)D.核酸21、在病毒學(xué)研究中，常用于檢測病毒核酸的“逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”（RT-PCR）技術(shù)，其關(guān)鍵步驟不包括以下哪一項？A.以RNA為模板合成cDNAB.使用DNA聚合酶進(jìn)行擴增C.利用限制性內(nèi)切酶切割DNAD.通過特異性引物識別靶序列22、下列哪種細(xì)胞器在病毒裝配過程中常被某些病毒利用作為組裝或出芽的位點？A.線粒體B.高爾基體C.核糖體D.中心體23、在實驗室進(jìn)行病毒培養(yǎng)時，最常用于流感病毒增殖的宿主系統(tǒng)是：A.普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基B.人源腫瘤細(xì)胞系C.雞胚尿囊腔D.厭氧發(fā)酵罐24、下列關(guān)于病毒滅活方法的描述，正確的是：A.75%乙醇可有效破壞病毒核酸結(jié)構(gòu)B.紫外線主要通過破壞病毒蛋白質(zhì)衣殼滅活C.加熱至56℃持續(xù)30分鐘可滅活多數(shù)包膜病毒D.青霉素可通過抑制病毒復(fù)制達(dá)到滅活效果25、在病毒免疫學(xué)檢測中，ELISA法檢測病毒抗原的原理主要依賴于：A.病毒RNA的擴增信號B.抗原與特異性抗體的結(jié)合反應(yīng)C.T細(xì)胞的免疫應(yīng)答激活D.病毒在細(xì)胞內(nèi)的熒光標(biāo)記26、在病毒學(xué)研究中，常用于檢測病毒核酸的“逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”（RT-PCR）技術(shù)，其最關(guān)鍵的酶是哪一種？A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.連接酶27、下列哪種細(xì)胞器在病毒感染過程中常被用作病毒復(fù)制的“工廠”？A.線粒體B.高爾基體C.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)D.溶酶體28、在實驗室進(jìn)行病毒培養(yǎng)時，最常用的宿主系統(tǒng)是以下哪一種？A.細(xì)菌培養(yǎng)B.酵母細(xì)胞C.哺乳動物細(xì)胞系D.植物原生質(zhì)體29、以下哪種免疫檢測方法最適用于定量檢測血清中特異性抗病毒抗體水平？A.免疫熒光法（IFA）B.酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）C.蛋白質(zhì)印跡（WesternBlot）D.流式細(xì)胞術(shù)30、在生物安全實驗室中，處理高致病性病毒樣本應(yīng)在哪一級生物安全實驗室（BSL）中進(jìn)行？A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-4二、多項選擇題下列各題有多個正確答案，請選出所有正確選項（共15題）31、在病毒學(xué)研究中，下列哪些方法常用于病毒的分離與鑒定？A.細(xì)胞培養(yǎng)法B.動物接種法C.PCR擴增與測序D.血清學(xué)中和試驗32、下列哪些因素會影響蛋白質(zhì)電泳的遷移率？A.蛋白質(zhì)分子大小B.所帶電荷數(shù)量C.電泳緩沖液pH值D.凝膠濃度33、關(guān)于實驗室生物安全等級（BSL）的描述，下列哪些是正確的？A.BSL-2實驗室適用于處理中等風(fēng)險病原體B.BSL-3實驗室要求使用生物安全柜和負(fù)壓環(huán)境C.BSL-1實驗室無需特殊防護設(shè)備D.所有病毒研究均需在BSL-3及以上進(jìn)行34、在酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）中，下列哪些步驟是必需的？A.包被抗原或抗體B.封閉非特異性結(jié)合位點C.加入酶標(biāo)二抗D.加入底物顯色35、下列哪些技術(shù)可用于檢測病毒的核酸？A.實時熒光定量PCR（qRT-PCR）B.原位雜交C.WesternblotD.高通量測序36、在病毒學(xué)研究中，下列哪些方法常用于病毒的分離與培養(yǎng)？A.細(xì)胞培養(yǎng)法B.雞胚接種法C.動物接種法D.血清中和試驗法37、下列關(guān)于PCR技術(shù)的描述，哪些是正確的？A.可用于病毒核酸的定性與定量檢測B.需要耐熱DNA聚合酶參與C.擴增過程包括變性、退火、延伸三個步驟D.適用于所有病毒的蛋白表達(dá)分析38、在實驗室生物安全防護中，下列哪些措施屬于二級生物安全實驗室（BSL-2）的基本要求？A.實驗人員需穿戴防護服和手套B.實驗室應(yīng)配備生物安全柜C.實驗室門應(yīng)保持常開以便通風(fēng)D.配備高壓滅菌設(shè)備處理廢棄物39、下列哪些技術(shù)可用于病毒抗原的檢測？A.酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）B.免疫熒光技術(shù)C.WesternblotD.逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）40、在病毒基因組研究中，高通量測序技術(shù)可用于實現(xiàn)以下哪些目標(biāo)？A.病毒全基因組序列測定B.病毒變異株的追蹤與分析C.病毒蛋白三維結(jié)構(gòu)預(yù)測D.新病毒的快速鑒定41、在病毒學(xué)研究中，常用于病毒培養(yǎng)的方法包括哪些？A.雞胚接種B.細(xì)胞培養(yǎng)C.動物接種D.血瓊脂平板培養(yǎng)42、下列關(guān)于PCR技術(shù)的描述，正確的是哪些？A.需要耐高溫的DNA聚合酶B.可用于病毒核酸的定性與定量檢測C.反應(yīng)過程包括變性、退火、延伸三個步驟D.擴增產(chǎn)物可通過瓊脂糖凝膠電泳檢測43、在生物安全實驗室操作中，下列哪些措施符合二級生物安全防護（BSL-2）要求？A.實驗人員佩戴醫(yī)用口罩和乳膠手套B.使用Ⅱ級生物安全柜進(jìn)行氣溶膠操作C.實驗室門保持常開以便通風(fēng)D.實驗結(jié)束后對工作臺面進(jìn)行消毒44、下列哪些是蛋白質(zhì)分離純化中常用的技術(shù)？A.離子交換層析B.聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）C.差速離心D.Westernblot45、關(guān)于ELISA實驗的描述，正確的是哪些？A.可用于檢測抗原或抗體B.常用的酶標(biāo)記物為辣根過氧化物酶（HRP）C.必須在放射性防護條件下操作D.顯色反應(yīng)的吸光度與目標(biāo)物濃度成正比三、判斷題判斷下列說法是否正確（共10題）46、病毒的遺傳物質(zhì)可以是DNA或RNA，但不能同時包含兩者。A.正確B.錯誤47、在蛋白質(zhì)電泳中，SDS主要依據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小進(jìn)行分離。A.正確B.錯誤48、PCR反應(yīng)中，退火溫度通常高于引物的Tm值以確保特異性結(jié)合。A.正確B.錯誤49、細(xì)胞培養(yǎng)過程中，使用CO?培養(yǎng)箱的主要目的是維持培養(yǎng)液的pH穩(wěn)定。A.正確B.錯誤50、ELISA實驗中，酶標(biāo)二抗的作用是識別并結(jié)合目標(biāo)抗原，產(chǎn)生顏色反應(yīng)。A.正確B.錯誤51、病毒的遺傳物質(zhì)可以是DNA或RNA，但不能同時具備兩種核酸類型。A.正確B.錯誤52、在分子克隆實驗中，限制性內(nèi)切酶主要用于連接DNA片段。A.正確B.錯誤53、ELISA檢測法可用于定量分析樣品中特定抗原或抗體的濃度。A.正確B.錯誤54、細(xì)胞培養(yǎng)過程中，抗生素的常規(guī)添加可完全防止所有微生物污染。A.正確B.錯誤55、PCR反應(yīng)中，TaqDNA聚合酶的最適作用溫度通常在72℃左右。A.正確B.錯誤

參考答案及解析1.【參考答案】C【解析】Southernblot是用于檢測特定DNA序列的經(jīng)典技術(shù)，其原理是將DNA片段經(jīng)電泳分離后轉(zhuǎn)移到膜上，再用標(biāo)記的探針進(jìn)行雜交。而Westernblot用于檢測蛋白質(zhì)，ELISA用于抗原或抗體的定量分析，Immunofluorescence用于細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)定位。因此，檢測DNA應(yīng)選擇Southernblot，C正確。2.【參考答案】D【解析】PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）依賴耐高溫的DNA聚合酶（如Taq酶）、一對特異性引物和dNTP作為合成原料。反應(yīng)通過變性、退火、延伸三步循環(huán)擴增目標(biāo)DNA片段。RNA聚合酶用于轉(zhuǎn)錄過程，不參與PCR擴增。因此D項錯誤，為正確答案。3.【參考答案】A【解析】青霉素抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成，鏈霉素抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成，兩者聯(lián)合使用可廣譜抑制常見細(xì)菌污染，是細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的抗生素組合。其他選項雖為抗生素，但在常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)中應(yīng)用較少，或因細(xì)胞毒性限制使用。因此A為正確答案。4.【參考答案】C【解析】空斑形成試驗通過統(tǒng)計病毒感染細(xì)胞后形成的空斑數(shù)量，可定量活病毒的數(shù)量，是測定病毒滴度的金標(biāo)準(zhǔn)之一。紫外分光光度法用于核酸定量，血凝實驗用于某些病毒的半定量檢測，電泳用于核酸分離，均不能準(zhǔn)確反映具有感染性的病毒顆粒數(shù)量。故C正確。5.【參考答案】B【解析】SDS中，SDS使蛋白質(zhì)變性并均勻帶上負(fù)電荷，消除電荷差異，使遷移率主要取決于分子量大小。蛋白質(zhì)在凝膠中按分子大小分離，小分子遷移快，大分子遷移慢。因此該技術(shù)依據(jù)分子量分離蛋白質(zhì)，B正確。A、C適用于非變性電泳或等電聚焦，D非電泳主要依據(jù)。6.【參考答案】C【解析】Southernblot是用于檢測特定DNA序列的經(jīng)典技術(shù)，通過將DNA片段電泳分離后轉(zhuǎn)移到膜上，再用標(biāo)記探針雜交檢測目標(biāo)序列。Westernblot用于檢測蛋白質(zhì)，ELISA主要用于抗原或抗體檢測，Immunofluorescence用于細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的定位。該技術(shù)由EdwinSouthern發(fā)明，是基因分析中的基礎(chǔ)方法之一，廣泛應(yīng)用于基因診斷、克隆鑒定等領(lǐng)域。7.【參考答案】C【解析】HIV是人類免疫缺陷病毒，屬于反轉(zhuǎn)錄病毒科，其遺傳物質(zhì)為RNA，在復(fù)制過程中依賴反轉(zhuǎn)錄酶將RNA反轉(zhuǎn)錄為DNA。乙肝病毒雖也使用反轉(zhuǎn)錄，但屬于嗜肝DNA病毒科，其基因組為部分雙鏈DNA。流感病毒為單股負(fù)鏈RNA病毒，無反轉(zhuǎn)錄過程；腺病毒為雙鏈DNA病毒。因此，同時滿足RNA病毒和反轉(zhuǎn)錄特征的只有HIV。8.【參考答案】A【解析】青霉素-鏈霉素雙抗溶液是細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的抗生素組合，能有效抑制革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性菌。其他抗生素如氨芐青霉素、卡那霉素等多用于基因工程菌篩選，而非常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)。氯霉素雖具廣譜抗菌性，但因細(xì)胞毒性較強，較少用于哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。雙抗?jié)舛韧ǔ榍嗝顾?00U/mL，鏈霉素100μg/mL。9.【參考答案】B【解析】SDS（十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳）可在變性條件下根據(jù)分子量大小分離蛋白質(zhì)，通過與標(biāo)準(zhǔn)蛋白比較，準(zhǔn)確估算目標(biāo)蛋白分子量。瓊脂糖凝膠電泳主要用于DNA或RNA分離；PCR用于核酸擴增；紫外分光光度法可測定蛋白質(zhì)濃度，但無法提供分子量信息。SDS使蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷且構(gòu)象線性化，遷移率僅與分子量相關(guān)。10.【參考答案】B【解析】Ct值（Cyclethreshold）是指熒光信號強度超過背景閾值所需的PCR循環(huán)數(shù)，與模板初始量呈負(fù)相關(guān)，即Ct值越小，起始模板越多。它是定量分析的核心參數(shù)，廣泛用于基因表達(dá)分析、病毒載量檢測等。其他選項中，退火溫度與引物特性相關(guān)，初始濃度需通過標(biāo)準(zhǔn)曲線換算得出，而Ct值本身是直接測量結(jié)果，具有高度重復(fù)性和靈敏度。11.【參考答案】C【解析】病毒個體極小，通常直徑在20-300納米之間，遠(yuǎn)低于光學(xué)顯微鏡的分辨極限（約200納米）。電子顯微鏡利用電子束代替光束，分辨率可達(dá)0.1納米，能清晰顯示病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)，如冠狀病毒的刺突結(jié)構(gòu)。因此，電子顯微鏡是觀察病毒形態(tài)的標(biāo)準(zhǔn)工具。其他顯微鏡適用于細(xì)胞或熒光標(biāo)記觀察，不適用于未標(biāo)記的病毒顆粒直接成像。12.【參考答案】C【解析】HIV（人類免疫缺陷病毒）屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科，其遺傳物質(zhì)為單鏈RNA，在復(fù)制過程中依賴反轉(zhuǎn)錄酶將RNA反轉(zhuǎn)錄為DNA，再整合入宿主基因組。乙肝病毒雖也涉及DNA合成，但屬于嗜肝DNA病毒，其復(fù)制過程存在RNA中間體和反轉(zhuǎn)錄，但分類上為DNA病毒。流感病毒為RNA病毒但無反轉(zhuǎn)錄過程，腺病毒為雙鏈DNA病毒。因此，唯一符合“RNA病毒+反轉(zhuǎn)錄”的是HIV。13.【參考答案】C【解析】傳代細(xì)胞系（如Vero、HeLa、MDCK細(xì)胞）可無限增殖，易于規(guī)?；囵B(yǎng)，是病毒分離與擴增的常用工具。原代細(xì)胞雖接近體內(nèi)狀態(tài)，但壽命短、制備復(fù)雜；二倍體細(xì)胞（如WI-38）用于疫苗生產(chǎn)，但傳代有限；干細(xì)胞主要用于發(fā)育研究，不適用于常規(guī)病毒培養(yǎng)。因此，傳代細(xì)胞系因穩(wěn)定性高、成本低成為首選。14.【參考答案】B【解析】RT-qPCR（逆轉(zhuǎn)錄實時熒光定量PCR）可將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，并通過熒光信號實時監(jiān)測擴增過程，實現(xiàn)核酸的精確定量，廣泛用于病毒載量檢測（如新冠病毒檢測）。Westernblot和免疫組化用于蛋白檢測，病毒空斑試驗用于活病毒滴度測定，屬功能檢測而非核酸定量。因此，只有RT-qPCR兼具高靈敏度與定量能力。15.【參考答案】C【解析】干擾素（如IFN-α/β）由病毒感染細(xì)胞分泌，不直接殺滅病毒，而是作用于鄰近細(xì)胞，誘導(dǎo)其表達(dá)多種抗病毒蛋白（如蛋白激酶R、2'-5'寡腺苷酸合成酶），抑制病毒復(fù)制。同時，干擾素可激活自然殺傷（NK）細(xì)胞，增強其對感染細(xì)胞的殺傷力。該機制屬于先天免疫的重要組成部分，區(qū)別于抗體介導(dǎo)的體液免疫。因此，C項準(zhǔn)確概括其核心功能。16.【參考答案】C【解析】空斑試驗通過接種稀釋的病毒液至單層細(xì)胞，病毒在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并擴散，引起周圍細(xì)胞死亡，形成肉眼可見的空斑。這一過程依賴于病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE），如細(xì)胞變圓、脫落等?？瞻邤?shù)量與病毒濃度成正比，用于精確測定感染性病毒顆粒的數(shù)量。該方法廣泛應(yīng)用于噬菌體和動物病毒的滴度測定，是病毒學(xué)實驗中的經(jīng)典定量技術(shù)。17.【參考答案】C【解析】PCR技術(shù)通過特異性引物擴增目標(biāo)DNA片段，可高靈敏度、高特異性地檢測病毒基因組中的特定核酸序列，廣泛應(yīng)用于病毒的早期診斷與分子分型。蛋白質(zhì)電泳用于分析蛋白質(zhì)大小，免疫熒光檢測病毒抗原，紫外分光光度法僅測定核酸濃度，不具備序列特異性。因此，PCR是檢測特定病毒核酸序列的首選方法。18.【參考答案】C【解析】BSL-3實驗室適用于處理可通過氣溶膠傳播、引起嚴(yán)重或致死性疾病的高致病性病毒，如結(jié)核桿菌、西尼羅病毒等。其具備負(fù)壓環(huán)境、高效空氣過濾系統(tǒng)（HEPA）、雙門進(jìn)入和嚴(yán)格人員防護要求。BSL-4用于埃博拉等極高危病原體，BSL-1和BSL-2防護等級不足。多數(shù)高致病性病毒研究在BSL-3條件下進(jìn)行，確保實驗安全。19.【參考答案】B【解析】ELISA利用抗原-抗體特異性結(jié)合的原理，通過酶標(biāo)記的二抗顯色反應(yīng)，可定性或定量檢測血清中的特異性抗體，廣泛用于病毒感染的血清學(xué)診斷，如HIV、登革熱等。流式細(xì)胞術(shù)用于細(xì)胞表面標(biāo)記分析，核酸雜交與RFLP用于基因分析，不適用于抗體檢測。ELISA具有高通量、操作簡便、靈敏度高等優(yōu)點。20.【參考答案】C【解析】病毒衣殼是由多個病毒編碼的結(jié)構(gòu)蛋白亞單位（殼粒）組裝而成的蛋白質(zhì)外殼，其主要功能是保護內(nèi)部核酸并參與宿主細(xì)胞識別與侵入。衣殼蛋白具有高度對稱性，常見有二十面體、螺旋對稱等結(jié)構(gòu)。脂質(zhì)主要存在于包膜中，多糖常作為包膜糖蛋白的修飾成分，核酸位于核心。因此，衣殼的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。21.【參考答案】C【解析】RT-PCR用于檢測RNA病毒，首先通過逆轉(zhuǎn)錄酶將RNA轉(zhuǎn)為cDNA（A正確），再以cDNA為模板，在DNA聚合酶作用下進(jìn)行PCR擴增（B正確），擴增過程依賴特異性引物識別目標(biāo)序列（D正確）。限制性內(nèi)切酶用于基因克隆或RFLP分析，不屬于RT-PCR流程，故C錯誤，為正確答案。22.【參考答案】B【解析】許多包膜病毒（如冠狀病毒、流感病毒）在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制后，利用高爾基體或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜系統(tǒng)進(jìn)行糖蛋白修飾和病毒顆粒的組裝與出芽。線粒體參與能量代謝，核糖體參與蛋白質(zhì)合成但不參與裝配，中心體與細(xì)胞分裂有關(guān)。因此，高爾基體是病毒利用的重要細(xì)胞器，B正確。23.【參考答案】C【解析】流感病毒難以在普通培養(yǎng)基生長，需活細(xì)胞環(huán)境。雞胚尿囊腔富含血管和易感細(xì)胞，是傳統(tǒng)用于流感病毒分離與擴增的理想系統(tǒng)，廣泛應(yīng)用于疫苗制備。人源細(xì)胞系如MDCK也可使用，但雞胚法更經(jīng)典穩(wěn)定。A和D不適用于病毒培養(yǎng)，故C為最佳答案。24.【參考答案】C【解析】56℃加熱30分鐘是常用的病毒滅活方法，可破壞包膜和蛋白結(jié)構(gòu)，使多數(shù)包膜病毒失活（C正確）。75%乙醇主要破壞脂質(zhì)包膜而非核酸（A錯）；紫外線主要引起核酸突變（如形成嘧啶二聚體），非破壞衣殼（B錯）；青霉素針對細(xì)菌細(xì)胞壁，對病毒無效（D錯）。因此選C。25.【參考答案】B【解析】ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）通過將待測樣本中的病毒抗原固定在固相載體上，加入特異性抗體（一抗）結(jié)合，再用酶標(biāo)二抗識別，最后通過底物顯色判斷結(jié)果。其核心是抗原-抗體特異性結(jié)合（B正確）。A為RT-PCR原理，C涉及細(xì)胞免疫，D為熒光顯微技術(shù)，均與ELISA無關(guān)。故選B。26.【參考答案】C【解析】RT-PCR技術(shù)首先通過逆轉(zhuǎn)錄酶將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴增。逆轉(zhuǎn)錄酶是該技術(shù)的關(guān)鍵，因其能以RNA為模板合成DNA。其他酶如DNA聚合酶在后續(xù)擴增中起作用，但不具備逆轉(zhuǎn)錄功能，故正確答案為C。27.【參考答案】C【解析】許多RNA病毒（如冠狀病毒）在感染后會誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)重組，形成雙層膜囊泡作為病毒RNA復(fù)制復(fù)合體的場所。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提供脂質(zhì)膜和蛋白質(zhì)合成環(huán)境，利于病毒組分組裝。線粒體、高爾基體和溶酶體雖參與細(xì)胞信號或降解，但非主要復(fù)制場所，故選C。28.【參考答案】C【解析】多數(shù)人類病毒需在真核環(huán)境中復(fù)制，哺乳動物細(xì)胞系（如Vero、HEK293）能提供合適的受體、轉(zhuǎn)錄翻譯機制和翻譯后修飾，是病毒分離與研究的首選。細(xì)菌和酵母缺乏相應(yīng)機制，植物系統(tǒng)不適用人類病毒，故C正確。29.【參考答案】B【解析】ELISA具有高靈敏度、可定量、通量大等優(yōu)點，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線可精確測定抗體濃度，廣泛用于血清學(xué)篩查。IFA和WesternBlot多用于定性或確認(rèn)試驗，流式主要用于細(xì)胞表面標(biāo)記分析，不適用于血清抗體定量，故選B。30.【參考答案】D【解析】BSL-4適用于對人體具有高度危險、可通過氣溶膠傳播且無有效疫苗或治療手段的病原體（如埃博拉病毒）。需配備正壓防護服、獨立建筑和高效空氣過濾系統(tǒng)。BSL-3適用于部分高致病病毒，但BSL-4防護等級最高，為最嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)，故D正確。31.【參考答案】ABCD【解析】病毒的分離與鑒定需結(jié)合多種技術(shù)手段。細(xì)胞培養(yǎng)法可觀察病毒引起的細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE），是經(jīng)典方法；動物接種法適用于不能體外培養(yǎng)的病毒，通過觀察動物癥狀判斷病毒活性；PCR擴增與測序可快速檢測并鑒定病毒核酸序列，靈敏度高；血清學(xué)中和試驗利用特異性抗體中和病毒活性，用于確認(rèn)病毒類型。四種方法互補，廣泛應(yīng)用于科研與檢測。32.【參考答案】ABCD【解析】蛋白質(zhì)在電場中的遷移率受多種因素影響：分子越小遷移越快；凈電荷越多，受電場力越大，遷移越快；緩沖液pH影響蛋白質(zhì)解離狀態(tài)，從而改變其電荷；凝膠濃度決定孔徑大小，高濃度凝膠對大分子阻礙更大。這些因素在SDS和天然電泳中均需綜合考慮，以獲得清晰分離結(jié)果。33.【參考答案】ABC【解析】BSL分級依據(jù)病原體危害程度。BSL-1適用于無害微生物，無需特殊防護；BSL-2用于常見中等風(fēng)險病原體，需生物安全柜和個人防護；BSL-3針對可通過氣溶膠傳播的高致病性病原體，要求負(fù)壓、高效過濾和嚴(yán)格操作規(guī)程。并非所有病毒研究都需BSL-3，如腺病毒可在BSL-2操作，故D錯誤。34.【參考答案】ABCD【解析】ELISA檢測依賴特異性免疫反應(yīng)。首先將抗原或抗體固定于微孔板（包被）；隨后用牛血清白蛋白等封閉液阻斷非特異結(jié)合，減少假陽性；再加入待測抗體及酶標(biāo)記的二抗，形成“夾心”或競爭復(fù)合物；最后加入顯色底物（如TMB），酶促反應(yīng)產(chǎn)生顏色變化，通過吸光度定量分析。各步驟缺一不可，確保檢測靈敏與準(zhǔn)確。35.【參考答案】ABD【解析】qRT-PCR可高靈敏檢測RNA病毒核酸，廣泛用于病毒載量測定；原位雜交可在組織切片中定位病毒核酸，保留空間信息；高通量測序可全面分析病毒基因組，適用于未知病原篩查。Westernblot用于檢測蛋白質(zhì)，而非核酸，故不適用。核酸檢測需基于DNA/RNA特性，上述A、B、D均為有效手段，廣泛用于病毒研究與診斷。36.【參考答案】A、B、C【解析】病毒是嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的微生物，需依賴活細(xì)胞進(jìn)行增殖。細(xì)胞培養(yǎng)法是最常用的病毒分離方法，通過將病毒接種于敏感細(xì)胞系中觀察細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）。雞胚接種法適用于流感病毒等可在雞胚中生長的病毒，具有成本低、易操作的優(yōu)點。動物接種法雖使用較少，但在某些特殊病毒（如腦炎病毒）研究中仍有價值。血清中和試驗用于檢測抗體，不屬于病毒分離培養(yǎng)方法，故D不選。37.【參考答案】A、B、C【解析】PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是分子生物學(xué)核心檢測技術(shù)，廣泛應(yīng)用于病毒核酸的檢測與定量（如qRT-PCR）。其反應(yīng)依賴耐熱Taq酶，經(jīng)歷高溫變性、低溫退火、中溫延伸的循環(huán)過程。然而，PCR用于核酸擴增，不直接分析蛋白質(zhì)表達(dá)，蛋白表達(dá)需借助Westernblot或ELISA等技術(shù)，故D錯誤。38.【參考答案】A、B、D【解析】BSL-2實驗室適用于處理中等風(fēng)險病原體。必須配備生物安全柜以防止氣溶膠擴散，實驗人員需穿戴個人防護裝備（如防護服、手套、口罩），并使用高壓滅菌器處理污染物品。實驗室門應(yīng)保持關(guān)閉以控制氣流和防止交叉污染，故C錯誤。39.【參考答案】A、B、C【解析】ELISA利用抗體檢測病毒抗原，具有高通量、靈敏度高的優(yōu)點；免疫熒光技術(shù)通過熒光標(biāo)記抗體在顯微鏡下定位抗原，適用于細(xì)胞內(nèi)病毒檢測；Westernblot用于確認(rèn)特定病毒蛋白的存在。而RT-PCR檢測的是病毒RNA，屬于核酸水平檢測，不直接檢測抗原，故D不選。40.【參考答案】A、B、D【解析】高通量測序（如Illumina、Nanopore）可快速獲得病毒完整基因組序列，用于病毒分類、進(jìn)化分析及變異監(jiān)測（如SARS-CoV-2變異株追蹤），并在未知病原體爆發(fā)時實現(xiàn)快速鑒定。但蛋白三維結(jié)構(gòu)預(yù)測主要依賴X射線晶體學(xué)、冷凍電鏡或計算機建模，非測序直接功能，故C不選。41.【參考答案】A、B、C【解析】病毒是嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的微生物，不能在無生命培養(yǎng)基上生長。雞胚接種利用活胚胎的豐富細(xì)胞層支持病毒復(fù)制，適用于流感病毒等；細(xì)胞培養(yǎng)是最常用的方法，通過體外培養(yǎng)宿主細(xì)胞進(jìn)行病毒增殖；動物接種雖成本高，但可用于研究病毒致病機制。D項為細(xì)菌培養(yǎng)方法，不適用于病毒。42.【參考答案】A、B、C、D【解析】PCR技術(shù)依賴TaqDNA聚合酶（耐高溫），循環(huán)進(jìn)行變性（使DNA雙鏈解開）、退火（引物結(jié)合）、延伸（合成新鏈）。該技術(shù)廣泛用于病毒如新冠病毒的核酸檢測，結(jié)合熒光探針可實現(xiàn)定量（qPCR）。擴增后常用瓊脂糖凝膠電泳檢測產(chǎn)物大小與特異性，四項均正確。43.【參考答案】A、B、D【解析】BSL-2實驗室適用于處理中等風(fēng)險病原體。必須佩戴個人防護裝備（口罩、手套等），進(jìn)行可能產(chǎn)生氣溶膠的操作應(yīng)在Ⅱ級生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，操作后須消毒臺面。實驗室門應(yīng)保持關(guān)閉以控制氣流，防止污染擴散，故C錯誤。44.【參考答案】A、B、C【解析】離子交換層析利用蛋白質(zhì)電荷差異進(jìn)行分離；PAGE根據(jù)分子大小和電荷分離蛋白質(zhì)，常用于純化過程監(jiān)測；差速離心用于初步分離細(xì)胞器或大分子復(fù)合物。Westernblot是檢測特定蛋白質(zhì)的技術(shù)，用于鑒定而非純化，故D不選。三項均為分離純化關(guān)鍵技術(shù)。45.【參考答案】A、B、D【解析】ELISA廣泛用于檢測病毒抗原或宿主抗體，如HIV或新冠病毒抗體檢測。HRP是最常用的酶標(biāo)記物，催化底物產(chǎn)生顏色變化。實驗無需放射性物質(zhì)，無需放射防護。在定量檢測中，吸光度值與目標(biāo)物濃度呈正相關(guān)，D正確。C錯誤，故不選。46.【參考答案】A【解析】病毒屬于非細(xì)胞生物，其遺傳物質(zhì)只能是DNA或RNA中的一種，不會同時具備雙鏈DNA和RNA作為遺傳物質(zhì)。例如，腺病毒以DNA為遺傳物質(zhì)，流感病毒則以RNA為遺傳物質(zhì)。這是病毒分類的重要依據(jù)之一。雖然某些病毒在復(fù)制過程中會產(chǎn)生RNA中間體（如逆轉(zhuǎn)錄病毒），但其原始基因組仍為單一類型，因此該說法正確。47.【參考答案】A【解析】SDS（十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳）通過SDS使蛋白質(zhì)變性并帶上均勻負(fù)電荷，消除了電荷差異對遷移率的影響，此時蛋白質(zhì)在凝膠中的遷移速率主要取決于其分子量大小。小分子蛋白遷移更快，大分子則較慢，因此該技術(shù)可用于估算蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量，說法正確。48.【參考答案】B【解析】退火溫度一般設(shè)定為比引物Tm值低3–5℃，以保證引物能與模板DNA有效且特異性結(jié)合。若退火溫度過高，引物無法結(jié)合模板，導(dǎo)致擴增失?。粶囟冗^低則可能引發(fā)非特異性結(jié)合。因此，合理控制退火溫度是PCR成功的關(guān)鍵，原說法錯誤。49.【參考答案】A【解析】CO?培養(yǎng)箱通過維持5%左右的CO?濃度，與培養(yǎng)基中的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)共同作用，保持培養(yǎng)液pH在7.2–7.4之間。CO?溶于水形成碳酸，調(diào)節(jié)酸堿平衡，防止因代謝產(chǎn)物積累導(dǎo)致pH波動，從而保障細(xì)胞正常生長，因此該說法正確。50.【參考答案】B【解析】酶標(biāo)二抗并不直接識別目標(biāo)抗原，而是識別與抗原結(jié)合的一抗（特異性抗體），并通過偶聯(lián)的酶催化底物顯色。信號強度間接反映抗原含量。直接識別抗原的是特異性一抗，因此該說法錯誤。51.【參考答案】A【解析】所有已知病毒均僅含有一種類型的核酸，即要么是DNA，要么是RNA，不會同時擁有雙鏈DNA和RNA作為遺傳物質(zhì)。這是病毒分類的重要依據(jù)之一。雖然某些病毒在復(fù)制過程中會產(chǎn)生RNA中間體（如逆轉(zhuǎn)錄病毒），但其成熟病毒顆粒中僅含一種核酸。因此該說法正確。52.【參考答案】B【解析】限制性內(nèi)切酶的功能是識別特定DNA序列并進(jìn)行切割，產(chǎn)生黏性末端或平末端，用于后續(xù)的DNA片段分離與插入。而DNA連接酶才是負(fù)責(zé)將DNA片段共價連接的工具酶。因此該說法錯誤，混淆了兩種酶的功能。53.【參考答案】A【解析】酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）基于抗原抗體特異性結(jié)合原理，通過酶標(biāo)記顯色反應(yīng)實現(xiàn)檢測。標(biāo)準(zhǔn)曲線法可對目標(biāo)分子進(jìn)行精確定量，廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)與科研領(lǐng)域。因此該說法正確。54.【參考答案】B【解析】抗生素可抑制部分細(xì)菌生長，但無法消除真菌、支原體或病毒污染，且長期使用可能掩蓋低水平污染或影響細(xì)胞狀態(tài)。無菌操作和規(guī)范的培養(yǎng)環(huán)境才是防控污染的關(guān)鍵。因此該說法錯誤。55.【參考答案】A【解析】Taq酶來源于嗜熱菌，具有良好的熱穩(wěn)定性，其最適延伸溫度為72℃，在此溫度下能高效合成DNA鏈。PCR循環(huán)中的延伸步驟通常設(shè)定為此溫度，確保擴增效率與特異性。因此該說法正確。

2025中科院武漢病毒所第一季度集中招聘29人筆試歷年典型考點題庫附帶答案詳解（第2套）一、單項選擇題下列各題只有一個正確答案，請選出最恰當(dāng)?shù)倪x項（共30題）1、在病毒學(xué)研究中，常用于培養(yǎng)動物病毒的細(xì)胞類型是？A.原核細(xì)胞B.真菌細(xì)胞C.傳代細(xì)胞系D.植物細(xì)胞2、下列哪種技術(shù)最常用于檢測病毒的核酸？A.WesternblotB.ELISAC.RT-PCRD.免疫熒光染色3、下列哪項是干擾素在抗病毒免疫中的主要作用機制？A.直接殺死病毒顆粒B.抑制病毒核酸復(fù)制C.促進(jìn)病毒包膜融合D.增強病毒蛋白合成4、病毒衣殼的主要化學(xué)成分是？A.脂質(zhì)B.多糖C.蛋白質(zhì)D.核酸5、在生物安全實驗室分級中，處理高致病性病毒（如埃博拉病毒）應(yīng)在哪一級實驗室進(jìn)行？A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-46、在分子生物學(xué)實驗中，下列哪種技術(shù)主要用于檢測特定RNA分子的表達(dá)水平？A.WesternblotB.PCRC.NorthernblotD.Southernblot7、下列關(guān)于限制性內(nèi)切酶的描述，正確的是？A.只能識別單鏈DNA序列B.通常識別4-8個堿基對的回文序列C.切割后均產(chǎn)生粘性末端D.在真核細(xì)胞中廣泛合成8、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，防止細(xì)菌污染最常用的抗生素是？A.鏈霉素B.青霉素C.慶大霉素D.青霉素-鏈霉素雙抗溶液9、ELISA實驗中，用于檢測抗體的間接法所需的關(guān)鍵試劑是？A.酶標(biāo)抗原B.酶標(biāo)第一抗體C.酶標(biāo)第二抗體D.酶標(biāo)抗原抗體復(fù)合物10、下列哪種方法最適合用于測定蛋白質(zhì)的分子量？A.瓊脂糖凝膠電泳B.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS）C.等電聚焦電泳D.親和層析11、在病毒學(xué)研究中，常用于檢測病毒核酸的分子生物學(xué)技術(shù)是：A.WesternBlotB.ELISAC.RT-PCRD.免疫熒光染色12、下列哪種培養(yǎng)基常用于細(xì)菌的分離與純培養(yǎng)？A.LB培養(yǎng)基B.DMEM培養(yǎng)基C.PBS緩沖液D.RPMI-164013、在實驗室生物安全等級中，處理高致病性病原微生物如埃博拉病毒應(yīng)在哪一級實驗室進(jìn)行？A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-414、下列哪種方法最適合用于測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量？A.瓊脂糖凝膠電泳B.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS）C.等電聚焦電泳D.Southernblot15、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，防止細(xì)菌污染最常用的抗生素是：A.青霉素和鏈霉素B.慶大霉素和放線菌素C.利福平和四環(huán)素D.氯霉素和紅霉素16、在病毒學(xué)研究中，下列哪種方法最適合用于定量檢測病毒顆粒的感染性？A.光學(xué)顯微鏡觀察B.血凝試驗C.空斑形成試驗（PlaqueAssay）D.RT-PCR17、在蛋白質(zhì)免疫印跡（WesternBlot）實驗中，下列哪一步驟主要用于將凝膠中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到固相膜上？A.封閉B.電轉(zhuǎn)移C.顯色D.一抗孵育18、下列哪種細(xì)胞器主要參與外源性抗原的加工與MHCII類分子的裝載？A.線粒體B.高爾基體C.溶酶體D.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)19、在分子克隆中，使用限制性內(nèi)切酶切割質(zhì)粒DNA后，最常用于驗證酶切效果的方法是？A.測序B.紫外分光光度法C.瓊脂糖凝膠電泳D.蛋白質(zhì)電泳20、下列哪種技術(shù)可用于檢測細(xì)胞因子的分泌水平？A.流式細(xì)胞術(shù)B.ELISAC.免疫熒光染色D.原位雜交21、在病毒學(xué)研究中，常用于檢測病毒核酸的“逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”（RT-PCR）技術(shù)，其最關(guān)鍵的酶是哪一種？A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.限制性內(nèi)切酶22、下列哪種細(xì)胞器在病毒感染過程中常被病毒利用作為復(fù)制場所？A.線粒體B.高爾基體C.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)D.溶酶體23、在實驗室進(jìn)行病毒培養(yǎng)時，最常用的細(xì)胞系來源是以下哪種組織？A.肝臟組織B.腎臟組織C.肺組織D.神經(jīng)組織24、下列哪種免疫球蛋白在黏膜抗病毒免疫中起主要作用？A.IgGB.IgMC.IgAD.IgE25、在生物安全實驗室分級中，處理高致病性病毒（如埃博拉病毒）應(yīng)在哪一級實驗室進(jìn)行？A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-426、在病毒分類系統(tǒng)中，以下哪一項是依據(jù)病毒核酸類型的分類標(biāo)準(zhǔn)？A.衣殼的對稱性B.是否具有包膜C.核酸為單鏈或雙鏈D.宿主細(xì)胞類型27、在實驗室進(jìn)行病毒培養(yǎng)時，最常用于培養(yǎng)動物病毒的方法是？A.液體培養(yǎng)基培養(yǎng)B.人工合成培養(yǎng)基C.細(xì)胞培養(yǎng)D.厭氧培養(yǎng)28、下列哪種方法最適合用于檢測病毒的抗原成分？A.PCR技術(shù)B.WesternblotC.ELISAD.逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)29、在生物安全實驗室分級中，處理高致病性病毒（如埃博拉病毒）應(yīng)在哪一級實驗室進(jìn)行？A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-430、下列關(guān)于干擾素的描述，正確的是？A.是病毒復(fù)制的產(chǎn)物B.能直接殺滅病毒C.具有廣譜抗病毒活性D.僅由B細(xì)胞產(chǎn)生二、多項選擇題下列各題有多個正確答案，請選出所有正確選項（共15題）31、下列關(guān)于病毒核酸類型的描述，正確的是：A.冠狀病毒的遺傳物質(zhì)為單股正鏈RNAB.乙肝病毒含有雙鏈線性DNAC.流感病毒基因組由多個單股負(fù)鏈RNA片段組成D.HIV屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒，其基因組為單股正鏈RNA32、在病毒實驗室常用的消毒與滅活方法中，以下哪些措施有效？A.75%乙醇作用5分鐘可有效滅活多數(shù)包膜病毒B.紫外線照射主要用于空氣和物體表面消毒C.高壓蒸汽滅菌適用于耐高溫實驗器材D.抗生素可有效殺滅病毒污染物33、下列哪些技術(shù)常用于病毒的檢測與鑒定？A.實時熒光定量PCR（qRT-PCR）B.酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）C.Westernblot檢測病毒特異性蛋白D.血平板培養(yǎng)分離病毒34、關(guān)于干擾素的抗病毒作用機制，下列說法正確的是：A.誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白（如蛋白激酶R）B.可直接殺滅病毒顆粒C.增強自然殺傷（NK）細(xì)胞活性D.抑制病毒mRNA翻譯35、在生物安全實驗室操作中，下列哪些屬于二級生物安全防護（BSL-2）的要求？A.實驗人員需穿戴防護服、手套和護目鏡B.實驗室門應(yīng)保持常閉狀態(tài)C.必須配備III級生物安全柜進(jìn)行所有操作D.實驗廢物需經(jīng)高壓滅菌處理36、在分子生物學(xué)實驗中，以下哪些技術(shù)常用于檢測特定DNA序列的存在？A.WesternblotB.SouthernblotC.PCR擴增D.Northernblot37、下列關(guān)于病毒復(fù)制周期的描述，哪些是正確的？A.病毒必須依賴宿主細(xì)胞的核糖體進(jìn)行蛋白質(zhì)合成B.所有病毒均在細(xì)胞核內(nèi)完成基因組復(fù)制C.包膜病毒常通過出芽方式釋放D.逆轉(zhuǎn)錄病毒以RNA為模板合成DNA38、在實驗室生物安全防護中，以下哪些措施符合BSL-2實驗室標(biāo)準(zhǔn)？A.實驗人員需穿戴防護服和護目鏡B.實驗室門應(yīng)保持常開以便通風(fēng)C.使用生物安全柜進(jìn)行氣溶膠操作D.實驗廢棄物需高壓滅菌處理39、以下哪些因素會影響酶促反應(yīng)速率？A.底物濃度B.酶的濃度C.pH值D.抑制劑的存在40、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪些操作有助于防止細(xì)菌污染？A.在超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作B.培養(yǎng)基中添加抗生素C.定期在普通室內(nèi)環(huán)境中開瓶檢查培養(yǎng)狀態(tài)D.使用前對培養(yǎng)基和器皿進(jìn)行高壓滅菌41、在分子生物學(xué)實驗中，以下哪些方法可用于檢測特定DNA序列的存在？A.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）B.WesternblotC.SouthernblotD.實時熒光定量PCR（qPCR）42、下列關(guān)于病毒復(fù)制周期的描述，哪些是正確的？A.病毒吸附依賴于宿主細(xì)胞表面的特異性受體B.所有病毒均在細(xì)胞核內(nèi)完成基因組復(fù)制C.逆轉(zhuǎn)錄病毒需將RNA逆轉(zhuǎn)錄為DNAD.病毒組裝通常發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核內(nèi)43、以下哪些技術(shù)常用于蛋白質(zhì)的分離與純化？A.凝膠電泳B.離子交換層析C.親和層析D.質(zhì)粒轉(zhuǎn)化44、在實驗室生物安全級別（BSL）中，以下哪些特征屬于BSL-3實驗室？A.適用于處理可經(jīng)氣溶膠傳播的高致病性病原體B.實驗人員需穿戴正壓防護服C.實驗室需配備生物安全柜和負(fù)壓通風(fēng)系統(tǒng)D.可進(jìn)行未經(jīng)培養(yǎng)的高致病性樣本操作45、以下哪些因素會影響酶促反應(yīng)速率？A.底物濃度B.酶的濃度C.溫度D.抑制劑的存在三、判斷題判斷下列說法是否正確（共10題）46、在病毒復(fù)制過程中，RNA病毒通常依賴宿主細(xì)胞的RNA聚合酶進(jìn)行基因組復(fù)制。A.正確B.錯誤47、原核生物基因表達(dá)調(diào)控主要通過操縱子機制實現(xiàn)，其中乳糖操縱子屬于可誘導(dǎo)型負(fù)調(diào)控系統(tǒng)。A.正確B.錯誤48、蛋白質(zhì)變性后，其一級結(jié)構(gòu)不被破壞，仍可能恢復(fù)原有生物學(xué)功能。A.正確B.錯誤49、PCR反應(yīng)中，TaqDNA聚合酶的最適作用溫度通常在72℃左右。A.正確B.錯誤50、在細(xì)胞凋亡過程中，細(xì)胞膜保持完整，不會引發(fā)炎癥反應(yīng)。A.正確B.錯誤51、在蛋白質(zhì)變性過程中，其一級結(jié)構(gòu)通常不會被破壞。A.正確B.錯誤52、PCR技術(shù)中，TaqDNA聚合酶的最適工作溫度通常在72℃左右。A.正確B.錯誤53、所有病毒都含有DNA和RNA兩種核酸。A.正確B.錯誤54、在光學(xué)顯微鏡下可以清晰觀察到細(xì)菌的鞭毛結(jié)構(gòu)。A.正確B.錯誤55、瓊脂糖凝膠電泳可用于分離不同大小的DNA片段。A.正確B.錯誤

參考答案及解析1.【參考答案】C【解析】動物病毒只能在活的真核細(xì)胞中復(fù)制，原核細(xì)胞（如細(xì)菌）無細(xì)胞核和相關(guān)細(xì)胞器，無法支持大多數(shù)動物病毒的增殖。傳代細(xì)胞系（如Vero、HeLa細(xì)胞）具有持續(xù)分裂能力，廣泛用于病毒分離與擴增。真菌和植物細(xì)胞在結(jié)構(gòu)與代謝上與動物細(xì)胞差異大，不適用于常規(guī)動物病毒培養(yǎng)。因此，傳代細(xì)胞系是病毒學(xué)實驗中最常用的細(xì)胞模型。2.【參考答案】C【解析】RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）可將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA并擴增，具有高靈敏度和特異性，廣泛用于病毒核酸的定性和定量檢測。Westernblot和ELISA用于檢測病毒蛋白或抗體，免疫熒光染色用于定位病毒抗原。核酸是病毒遺傳物質(zhì)，RT-PCR是直接檢測病原體的首選方法，尤其適用于早期感染診斷。3.【參考答案】B【解析】干擾素是宿主細(xì)胞感染病毒后分泌的細(xì)胞因子，不直接殺滅病毒，而是作用于鄰近細(xì)胞，誘導(dǎo)抗病毒蛋白（如蛋白激酶R、2'-5'寡腺苷酸合成酶）表達(dá)，從而抑制病毒mRNA翻譯和核酸復(fù)制。該過程屬于先天免疫的重要組成部分，有效延緩病毒擴散，為適應(yīng)性免疫爭取時間。4.【參考答案】C【解析】病毒衣殼是由多個蛋白質(zhì)亞基（殼粒）組成的保護性結(jié)構(gòu)，包裹病毒核酸，維持病毒形態(tài)并參與宿主細(xì)胞識別與侵入。脂質(zhì)主要存在于包膜中，來源于宿主細(xì)胞膜；多糖常作為表面糖蛋白的修飾成分；核酸位于核心，不構(gòu)成衣殼。因此，衣殼的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。5.【參考答案】D【解析】BSL-4（生物安全四級）實驗室適用于對人類高度危險、易通過氣溶膠傳播且無有效治療手段的病原體。埃博拉病毒等烈性病毒需在最高防護等級下操作，配備正壓防護服、獨立通風(fēng)系統(tǒng)和嚴(yán)格進(jìn)出程序。BSL-1至BSL-3防護等級依次升高，但不足以安全操作此類病原體。6.【參考答案】C【解析】Northernblot用于檢測RNA的表達(dá)水平，通過電泳分離RNA后，轉(zhuǎn)移到膜上并用特異性探針雜交。Westernblot檢測蛋白質(zhì)，Southernblot檢測DNA，PCR雖可擴增RNA反轉(zhuǎn)錄后的cDNA，但本身不直接檢測表達(dá)量。因此，正確答案為C。7.【參考答案】B【解析】限制性內(nèi)切酶主要來源于原核生物，識別雙鏈DNA中特異的回文序列（通常4-8bp），切割后可產(chǎn)生粘性末端或平末端。并非所有酶都產(chǎn)生粘性末端，如SmaI產(chǎn)生平末端。真核細(xì)胞一般不合成此類酶。因此選B正確。8.【參考答案】D【解析】青霉素抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成，鏈霉素抑制蛋白質(zhì)合成，兩者聯(lián)用可廣譜抑制革蘭氏陽性與陰性菌。在細(xì)胞培養(yǎng)中，青霉素-鏈霉素雙抗溶液是預(yù)防細(xì)菌污染的標(biāo)準(zhǔn)添加物，單獨使用效果有限。因此D為最佳答案。9.【參考答案】C【解析】間接ELISA用于檢測樣本中的抗體。先包被抗原，加入待測抗體（第一抗體），再加入酶標(biāo)記的抗抗體（即第二抗體），最后顯色。第二抗體識別第一抗體的種屬特異性，具有信號放大作用。因此關(guān)鍵試劑為酶標(biāo)第二抗體，選C。10.【參考答案】B【解析】SDS在變性條件下使蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷且形狀一致，遷移率僅與分子量相關(guān)，可通過標(biāo)準(zhǔn)蛋白曲線估算未知蛋白分子量。瓊脂糖電泳主要用于核酸分離；等電聚焦分離基于等電點；親和層析用于純化而非測定分子量。故B正確。11.【參考答案】C【解析】RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是檢測RNA病毒核酸的核心技術(shù)，先將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，再進(jìn)行PCR擴增，具有高靈敏度和特異性。WesternBlot用于檢測蛋白質(zhì)，ELISA用于抗原或抗體檢測，免疫熒光染色用于定位病毒抗原，均不直接檢測核酸。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于病毒的早期診斷與定量分析。12.【參考答案】A【解析】LB（Luria-Bertani）培養(yǎng)基是一種富含蛋白胨和酵母提取物的通用型固體或液體培養(yǎng)基，廣泛用于大腸桿菌等細(xì)菌的培養(yǎng)與分離。DMEM和RPMI-1640為真核細(xì)胞培養(yǎng)基，含糖、氨基酸和生長因子，不適合細(xì)菌培養(yǎng)。PBS為緩沖液，無營養(yǎng)功能。在微生物實驗中，LB平板是細(xì)菌克隆篩選的常用工具。13.【參考答案】D【解析】BSL-4（生物安全四級）實驗室適用于對個體和群體高度危險的病原體，如埃博拉、馬爾堡病毒，要求最高防護等級，包括正壓防護服、獨立供氣系統(tǒng)和嚴(yán)格出入控制。BSL-3用于嚴(yán)重呼吸道傳染病如結(jié)核桿菌，BSL-2用于常見病原體如流感病毒，BSL-1用于無致病性微生物。14.【參考答案】B【解析】SDS通過在變性條件下使蛋白質(zhì)帶上均勻負(fù)電荷，其遷移率主要取決于分子大小，可與標(biāo)準(zhǔn)蛋白比較估算分子量。瓊脂糖凝膠用于DNA分離，等電聚焦用于測定蛋白質(zhì)等電點，Southernblot用于DNA檢測。SDS是蛋白分析中最常用的分子量測定方法。15.【參考答案】A【解析】青霉素抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成，鏈霉素抑制蛋白質(zhì)合成，兩者聯(lián)合使用可廣譜抑制革蘭氏陽性與陰性菌，是細(xì)胞培養(yǎng)中最常見的抗生素組合。其他抗生素雖具抗菌活性，但在細(xì)胞毒性或譜系覆蓋上不如青鏈霉素常用。需注意長期使用可能掩蓋低水平污染或影響細(xì)胞代謝。16.【參考答案】C【解析】空斑形成試驗是評估病毒感染性滴度的經(jīng)典方法，通過測定病毒感染單層細(xì)胞后形成的空斑數(shù)量，可準(zhǔn)確反映具有活性的病毒顆粒濃度。光學(xué)顯微鏡無法識別病毒顆粒；血凝試驗僅適用于具有血凝特性的病毒，且不反映感染性；RT-PCR檢測核酸存在，但無法區(qū)分活病毒與死病毒。因此，C選項為最科學(xué)、準(zhǔn)確的定量感染性方法。17.【參考答案】B【解析】電轉(zhuǎn)移（Electroblotting）是WesternBlot中的關(guān)鍵步驟，利用電場將SDS凝膠中的蛋白質(zhì)遷移至硝酸纖維素膜或PVDF膜上，以便后續(xù)抗體識別。封閉是防止非特異性結(jié)合，一抗孵育用于識別目標(biāo)蛋白，顯色用于信號檢測。因此，B選項正確。18.【參考答案】C【解析】外源性抗原經(jīng)抗原呈遞細(xì)胞吞噬后，進(jìn)入吞噬溶酶體系統(tǒng)，在酸性環(huán)境下被降解為肽段，并在MHCII類小室（MIIC）中與MHCII類分子結(jié)合。溶酶體提供蛋白水解酶和酸性環(huán)境，是抗原加工的關(guān)鍵場所。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)主要參與內(nèi)源性抗原與MHCI類分子的組裝。因此，C為正確選項。19.【參考答案】C【解析】瓊脂糖凝膠電泳可依據(jù)DNA片段大小分離酶切產(chǎn)物，通過與DNA標(biāo)記物比較，判斷是否出現(xiàn)預(yù)期條帶，從而驗證酶切是否成功。測序雖準(zhǔn)確但成本高、耗時長，不用于常規(guī)驗證；紫外分光光度法僅測定濃度與純度；蛋白質(zhì)電泳用于蛋白質(zhì)分析。因此，C為最常用且有效的方法。20.【參考答案】B【解析】ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）利用特異性抗體捕獲細(xì)胞因子，具有高靈敏度和定量能力，廣泛用于檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清或血清中的細(xì)胞因子濃度。流式細(xì)胞術(shù)多用于細(xì)胞表面標(biāo)志物或胞內(nèi)蛋白檢測；免疫熒光用于定位；原位雜交檢測核酸。因此，B為最適宜的技術(shù)。21.【參考答案】C【解析】RT-PCR技術(shù)用于檢測RNA病毒，需先將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，該過程依賴逆轉(zhuǎn)錄酶。隨后再通過PCR擴增cDNA，使用DNA聚合酶。但整個流程的關(guān)鍵起始酶是逆轉(zhuǎn)錄酶，常見于HIV、流感病毒等RNA病毒檢測中。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于病毒載量測定和早期感染診斷，是病毒學(xué)實驗室核心技術(shù)之一。22.【參考答案】C【解析】許多RNA病毒（如冠狀病毒、登革病毒）在感染宿主細(xì)胞后，會誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)重塑，形成雙層膜小泡作為病毒RNA復(fù)制的“復(fù)制工廠”。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提供脂質(zhì)膜和蛋白質(zhì)合成環(huán)境，有利于病毒組分組裝。線粒體參與抗病毒信號通路，高爾基體參與蛋白分選，溶酶體負(fù)責(zé)降解，均非主要復(fù)制場所。該知識點是病毒與宿主互作研究的重點內(nèi)容。23.【參考答案】B【解析】Vero細(xì)胞（非洲綠猴腎細(xì)胞）和MDCK細(xì)胞等腎臟來源細(xì)胞系廣泛用于病毒分離與增殖，因其貼壁生長穩(wěn)定、對多種病毒敏感且易于維持。如Vero細(xì)胞常用于狂犬病、埃博拉、新冠病毒的培養(yǎng)。肝臟和神經(jīng)組織細(xì)胞培養(yǎng)難度高，肺組織雖可用于流感病毒研究，但應(yīng)用范圍不及腎細(xì)胞系廣泛。該考點涉及病毒實驗技術(shù)基礎(chǔ)操作。24.【參考答案】C【解析】分泌型IgA（sIgA）存在于呼吸道、消化道等黏膜表面，能中和病毒，阻止其侵入上皮細(xì)胞，是黏膜免疫的第一道防線。IgG主要在血液中發(fā)揮中和作用，IgM為早期應(yīng)答抗體，IgE與過敏反應(yīng)相關(guān)。在鼻腔噴霧疫苗或腸道病毒感染防御中，sIgA水平是關(guān)鍵保護指標(biāo)。該內(nèi)容屬于免疫學(xué)在病毒防護中的應(yīng)用重點。25.【參考答案】D【解析】BSL-4實驗室適用于危險且極易傳播的致病因子，要求最高防護等級，包括正壓防護服、獨立供氣系統(tǒng)和嚴(yán)格進(jìn)出控制。埃博拉、馬爾堡等病毒必須在BSL-4條件下操作。BSL-3適用于結(jié)核、SARS等空氣傳播病毒，但仍可在密閉設(shè)備中操作。BSL-1和BSL-2不適用于高致病性病毒研究。該知識點是實驗室安全管理核心內(nèi)容。26.【參考答案】C【解析】病毒的分類依據(jù)國際病毒分類委員會（ICTV）的標(biāo)準(zhǔn)，主要包括核酸類型（DNA或RNA）、鏈數(shù)（單鏈或雙鏈）、有無包膜、衣殼對稱性等。其中，核酸是病毒分類的核心標(biāo)準(zhǔn)之一。單鏈或雙鏈特性直接影響病毒復(fù)制機制與分類歸屬，如雙鏈DNA病毒屬于不同的科（如皰疹病毒科），而單鏈RNA病毒則屬于其他科（如冠狀病毒科）。因此，核酸的鏈數(shù)是關(guān)鍵分類依據(jù)，選項C正確。27.【參考答案】C【解析】動物病毒無法在無生命的培養(yǎng)基上生長，必須依賴活細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)通過體外培養(yǎng)宿主細(xì)胞（如Vero細(xì)胞、HeLa細(xì)胞），為病毒提供復(fù)制所需的代謝系統(tǒng)，是目前最常用且有效的病毒培養(yǎng)方法。雞胚接種和動物接種雖也可用，但成本高、倫理限制多。細(xì)胞培養(yǎng)具有可觀察細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）、易于規(guī)?；葍?yōu)勢，廣泛應(yīng)用于病毒分離與研究，故C為正確答案。28.【參考答案】C【解析】ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合的檢測技術(shù)，常用于檢測樣本中的病毒抗原或抗體。其原理是利用已知抗體捕獲病毒抗原，再通過酶標(biāo)二抗顯色，靈敏度高、操作簡便，適用于大規(guī)模篩查。PCR和逆轉(zhuǎn)錄用于核酸檢測，Westernblot雖可檢測蛋白，但主要用于確認(rèn)而非初篩。因此，檢測病毒抗原首選ELISA，答案為C。29.【參考答案】D【解析】生物安全實驗室分為四個等級（BSL-1至BSL-4），等級越高，防護措施越嚴(yán)格。BSL-4適用于對人體具有高度危險、可通過氣溶膠傳播且無有效治療手段的病原體，如埃博拉、馬爾堡病毒。其要求負(fù)壓環(huán)境、獨立供氣系統(tǒng)、穿戴正壓防護服等。BSL-3適用于部分高致病性病毒（如結(jié)核桿菌、SARS-CoV），但埃博拉等烈性病毒必須在BSL-4操作，故正確答案為D。30.【參考答案】C【解析】干擾素（IFN）是宿主細(xì)胞在病毒感染后產(chǎn)生的細(xì)胞因子，具有廣譜抗病毒作用，可誘導(dǎo)鄰近細(xì)胞進(jìn)入抗病毒狀態(tài)，抑制病毒復(fù)制，但不能直接殺滅病毒。其主要由感染的病毒刺激后由多種細(xì)胞（如白細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、NK細(xì)胞）分泌，非病毒產(chǎn)物。I型干擾素（IFN-α/β）在抗病毒免疫中起關(guān)鍵作用。因此，干擾素具有廣譜性、間接抗病毒特性，答案為C。31.【參考答案】A、C、D【解析】冠狀病毒為單股正鏈RNA病毒，可直接作為mRNA翻譯蛋白（A正確）。乙肝病毒雖為DNA病毒，但其基因組為不完全雙鏈環(huán)狀DNA，非線性（B錯誤）。流感病毒為分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA病毒，共8個節(jié)段（C正確）。HIV為逆轉(zhuǎn)錄病毒，基因組含兩條相同的單股正鏈RNA（D正確）。32.【參考答案】A、B、C【解析】75%乙醇可破壞包膜病毒脂質(zhì)包膜，有效滅活（A正確）。紫外線通過破壞核酸結(jié)構(gòu)實現(xiàn)表面和空氣消毒（B正確）。高壓蒸汽（121℃）可徹底滅活病毒，適用于金屬、玻璃器材（C正確）?？股貎H針對細(xì)菌，對病毒無效（D錯誤）。33.【參考答案】A、B、C【解析】qRT-PCR可檢測病毒核酸，靈敏度高（A正確）。ELISA用于檢測病毒抗原或宿主抗體（B正確）。Westernblot用于確認(rèn)病毒蛋白表達(dá)（C正確）。病毒不能在血平板等細(xì)菌培養(yǎng)基上生長，需使用細(xì)胞培養(yǎng)（D錯誤）。34.【參考答案】A、C、D【解析】干擾素不直接滅活病毒，而是通過與細(xì)胞受體結(jié)合，誘導(dǎo)抗病毒蛋白合成，如PKR抑制病毒蛋白翻譯（A、D正確）。同時激活NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞增強清除能力（C正確）。干擾素?zé)o直接殺毒作用（B錯誤）。35.【參考答案】A、B、D【解析】BSL-2實驗室要求標(biāo)準(zhǔn)防護（防護服、手套、護目鏡）（A正確）、門禁管理（B正確）、實驗廢物滅菌（D正確）。III級生物安全柜用于BSL-3及以上，BSL-2通常使用I或II級安全柜（C錯誤）。36.【參考答案】B、C【解析】Southernblot用于檢測特定DNA序列，通過電泳分離DNA片段并用探針雜交識別目標(biāo)序列。PCR擴增可在體外特異性擴增目的DNA片段，從而實現(xiàn)檢測。Westernblot用于檢測蛋白質(zhì)，Northernblot用于檢測RNA，因此不適用于DNA檢測。這兩種技術(shù)在基因分析、病原體檢測和遺傳病診斷中廣泛應(yīng)用，是分子診斷的核心方法之一。37.【參考答案】A、C、D【解析】病毒無獨立代謝系統(tǒng)，依賴宿主核糖體合成蛋白（A正確）；但并非所有病毒都在核內(nèi)復(fù)制，如正鏈RNA病毒常在細(xì)胞質(zhì)中復(fù)制（B錯誤）；包膜病毒通過出芽獲取宿主細(xì)胞膜形成包膜（C正確）；逆轉(zhuǎn)