檢驗科血液凝血功能測試操作流程演講人：日期:目錄/CONTENTS2樣本接收與處理3凝血功能測試操作4儀器操作規(guī)范5質量控制程序6結果審核與報告1測試前準備測試前準備PART01試劑與耗材檢查試劑有效期及儲存條件確認標準品與質控品準備耗材完整性檢查檢查所有凝血功能測試試劑是否在有效期內(nèi)，并確保其儲存溫度符合要求（如避光、冷藏等），避免因試劑失效導致檢測結果偏差。核對采血管、移液槍頭、反應杯等耗材的包裝是否完好，確保無污染或破損，防止樣本交叉污染或操作失誤。提前取出標準品和質控品，平衡至室溫并充分混勻，以保證校準和質控過程的準確性。凝血分析儀校準儀器需提前通電預熱至規(guī)定溫度，避免因溫度波動影響凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）等關鍵指標的穩(wěn)定性。預熱時間控制背景檢測與基線確認運行空白測試以檢查儀器本底信號，確保光學系統(tǒng)或電極無異常干擾，保證后續(xù)樣本檢測的可靠性。按照儀器操作手冊執(zhí)行校準程序，使用配套校準品調整儀器參數(shù)，確保檢測系統(tǒng)處于最佳工作狀態(tài)。儀器校準與預熱生物安全防護措施個人防護裝備穿戴操作人員需佩戴手套、口罩及防護面罩，穿隔離衣，避免接觸血液樣本時發(fā)生職業(yè)暴露或生物污染。樣本處理區(qū)域消毒銳器（如采血針）需投入專用銳器盒，污染耗材與廢棄樣本應密封后按醫(yī)療廢物處理規(guī)范移交專業(yè)機構銷毀。使用含氯消毒劑或75%乙醇對工作臺面、離心機及儀器接觸部位進行定時消毒，降低病原體傳播風險。廢棄物分類處置樣本接收與處理PART02確保使用標準枸櫞酸鈉抗凝管（藍帽管），抗凝劑與血液比例為1:9，避免因比例不當導致假性結果偏差。采血管類型驗證標本采集規(guī)范核對穿刺技術評估樣本完整性確認檢查采血過程是否規(guī)范，包括止血帶使用時間不超過1分鐘、避免反復穿刺或淤血，防止組織因子激活影響凝血參數(shù)。核對樣本無凝塊、溶血或脂血現(xiàn)象，發(fā)現(xiàn)異常需記錄并聯(lián)系臨床重新采集。雙人核對機制通過LIS系統(tǒng)掃描樣本條碼，自動關聯(lián)電子申請單，減少人工輸入導致的批次錯誤或項目遺漏風險。條碼系統(tǒng)匹配危急值標注對疑似DIC、肝衰竭等需優(yōu)先處理的樣本，在系統(tǒng)內(nèi)標記紅色預警并同步通知檢驗人員。由接收人員與錄入人員分別核對患者姓名、ID號、檢測項目與醫(yī)囑一致性，確保信息零誤差。樣本標識與信息錄入設定離心機轉速為1500×g，持續(xù)15分鐘，確保血漿層無殘留血小板（血小板計數(shù)需<10×10^9/L）。離心參數(shù)標準化常規(guī)樣本在采集后1小時內(nèi)完成離心，急診樣本需在15分鐘內(nèi)處理，避免凝血因子降解或假性PT/APTT延長。時效性分級處理使用一次性吸頭轉移血漿至次級凍存管，避免反復凍融，分裝后樣本在-80℃條件下可穩(wěn)定保存3個月。離心后血漿分裝離心條件及時效控制凝血功能測試操作PART03PT檢測標準化流程樣本采集與處理使用真空采血管采集靜脈血，確?？鼓齽┡c血液比例為1:9，采集后立即輕柔顛倒混勻，避免凝血或溶血，并在規(guī)定時間內(nèi)離心分離血漿。質量控制措施每批次檢測需同時運行正常和異常質控品，結果須在預設范圍內(nèi)，定期參與室間質評以保證檢測準確性。試劑準備與儀器校準將PT試劑恢復至室溫，按照說明書進行復溶，使用標準血漿校準凝血分析儀，確保儀器處于最佳工作狀態(tài)。檢測執(zhí)行與結果分析將患者血漿與試劑按比例混合，儀器自動記錄凝固時間，結果以秒和INR值形式呈現(xiàn)，需與正常參考范圍對比并復核異常值。APTT檢測執(zhí)行步驟樣本前處理規(guī)范采用枸櫞酸鈉抗凝管采集全血，嚴格保證采血量準確，離心后獲得乏血小板血漿，避免反復凍融影響凝血因子活性。01試劑系統(tǒng)驗證APTT試劑需進行靈敏度驗證，選用特定激活物（如白陶土、鞣花酸）的試劑，確保能有效檢測肝素治療及內(nèi)源性凝血因子缺陷。檢測過程標準化將血漿與試劑孵育后加入氯化鈣溶液，儀器監(jiān)測纖維蛋白形成時間，同步檢測正常混合血漿作為對照，排除試劑變異干擾。臨床結果解讀延長結果提示可能存在凝血因子缺乏、肝素影響或狼瘡抗凝物，需結合其他檢驗結果和臨床表現(xiàn)綜合判斷。020304使用凝血酶原時間衍生法，將過量凝血酶加入稀釋血漿，通過凝固時間與標準曲線對比計算FIB濃度，需嚴格控制反應溫度和pH值。全自動凝血儀采用光學法或磁珠法檢測纖維蛋白原轉化為纖維蛋白的速率，需定期維護比色杯和磁珠感應器以保證檢測靈敏度。低值樣本需排除肝素污染或纖溶亢進，高值樣本應稀釋后復測，對持續(xù)異常結果建議進行功能學檢測驗證。新批號試劑需與既往試劑進行方法學比對，偏差超過5%時需重新建立參考區(qū)間，確保結果的可比性和連續(xù)性。FIB濃度測定方法克勞斯法操作要點儀器法檢測優(yōu)化異常結果處理流程方法學比對要求儀器操作規(guī)范PART04試劑裝載與參數(shù)設置試劑裝載標準化操作多項目并行檢測配置參數(shù)校準與質控設置嚴格遵循試劑瓶標簽信息核對流程，確保試劑類型、批號與系統(tǒng)登記一致，裝載時避免氣泡產(chǎn)生或交叉污染。冷藏試劑需室溫平衡后再使用，防止溫度差異影響檢測精度。根據(jù)檢測項目選擇對應的儀器預設參數(shù)模板，定期進行光電校準和空白校準。每日開機后需運行質控品，確保凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）等關鍵參數(shù)在允許誤差范圍內(nèi)。針對高通量檢測需求，合理分配試劑通道和樣本位，避免試劑耗盡或樣本排隊超時。系統(tǒng)需支持自動稀釋功能和異常值復檢規(guī)則設置。采集后的全血樣本需立即輕柔顛倒混勻5-8次，防止凝血或溶血。離心速度嚴格控制在1500-2000g范圍內(nèi)，分離血漿后需在4小時內(nèi)完成檢測，避免凝血因子活性衰減。樣本上機檢測流程樣本前處理規(guī)范樣本管條形碼雙向掃描確認，優(yōu)先檢測急診標本。儀器自動吸樣時需監(jiān)控液面探測狀態(tài)，防止樣本量不足導致結果偏差。檢測過程中實時監(jiān)控反應曲線，發(fā)現(xiàn)異常波形立即暫停并排查原因。上機檢測標準化步驟系統(tǒng)自動標記異常結果（如PT延長超過參考區(qū)間30%），觸發(fā)復檢流程。所有結果需與臨床信息匹配審核，排除藥物干擾（如華法林治療患者預期PT延長）后再簽發(fā)報告。結果復核與報告邏輯緊急故障處理預案突發(fā)系統(tǒng)死機時，優(yōu)先保存未完成檢測的樣本數(shù)據(jù)。重啟后運行儀器狀態(tài)診斷程序，對中斷檢測的樣本按急診優(yōu)先級重新上機，并在報告中備注技術原因。軟件系統(tǒng)崩潰處理發(fā)生樣本針堵塞或試劑泵異常時，立即啟動儀器自檢程序，使用專用通針工具處理。若光電模塊報錯，需切換備用檢測通道并聯(lián)系工程師進行光路校準。硬件故障應急響應配備不間斷電源（UPS）保障突發(fā)停電時完成正在進行的檢測。溫控系統(tǒng)失效時，立即轉移試劑至備用冷藏設備，并暫停檢測直至環(huán)境溫度恢復至18-25℃標準范圍。電力與環(huán)境異常應對質量控制程序PART05每日質控品運行要求環(huán)境與設備校準質控前需確認實驗室溫濕度符合要求，儀器完成每日維護（如光源檢查、液路沖洗），并記錄校準狀態(tài)以確保系統(tǒng)穩(wěn)定性。03每臺儀器在開機后、檢測患者樣本前必須運行質控，每日至少覆蓋低、中、高三個濃度水平，若連續(xù)檢測超過規(guī)定樣本量需追加質控批次。02運行頻率與批次質控品選擇與準備需選用與檢測項目匹配的凍干或液體質控品，復溶時嚴格按說明書操作，確保溶解充分且無氣泡，避免影響檢測結果準確性。01質控數(shù)據(jù)記錄與分析周期性統(tǒng)計分析每月匯總質控數(shù)據(jù)，計算均值、標準差和變異系數(shù)（CV），評估檢測系統(tǒng)精密度，并與歷史數(shù)據(jù)對比識別潛在漂移。多規(guī)則判讀方法采用Westgard規(guī)則（如1-3s、2-2s、R-4s）分析質控數(shù)據(jù)，結合Levey-Jennings質控圖觀察趨勢性偏移或離散度異常。數(shù)據(jù)錄入規(guī)范所有質控結果需實時錄入實驗室信息系統(tǒng)（LIS），包括檢測時間、操作者、質控品批號及靶值范圍，避免手工轉錄錯誤。即時響應流程發(fā)現(xiàn)失控后立即暫?；颊邩颖緳z測，復測同一質控品以排除偶然誤差，若仍失控則更換新開瓶質控品或校準品驗證。系統(tǒng)性排查步驟檢查試劑有效期、儲存條件及儀器狀態(tài)（如加樣針堵塞、比色杯污染），必要時聯(lián)系工程師進行光學或機械部件檢修。糾正后驗證與記錄重新運行質控直至結果在控，追溯失控期間檢測的樣本并評估影響，填寫失控報告存檔，包括根本原因分析與預防措施。失控結果糾正措施結果審核與報告PART06異常值復核機制對超出參考范圍的檢測結果，需由初級檢驗員標記后提交至高級技師復核，必要時結合儀器原始數(shù)據(jù)、質控記錄及臨床信息進行綜合判斷，確保結果的準確性。多層級復核流程儀器與人工比對臨床溝通機制異常值需通過不同檢測方法（如光學法與磁珠法）或更換試劑批次復測，排除儀器誤差或試劑干擾因素，同時人工復核樣本狀態(tài)（如溶血、脂血等干擾因素）。與申請醫(yī)生溝通患者病史、用藥情況（如抗凝治療）及其他實驗室指標（如血小板計數(shù)），輔助判斷異常值是否具有臨床意義，避免誤報或漏報。信息完整性驗證雙人核對患者基本信息（姓名、ID號）、檢測項目名稱、結果數(shù)值與單位是否匹配，確保報告無遺漏或錯位。需特別關注臨界值結果的標注（如“↑”“↓”）及備注欄的警示說明。報告簽發(fā)雙人核對邏輯一致性審查結合凝血功能指標間的關聯(lián)性（如APTT延長伴纖維蛋白原降低可能提示DIC），核查結果是否符合病理生理規(guī)律，對矛盾數(shù)據(jù)啟動復檢流程。電子簽名與追溯采用LIS系統(tǒng)雙電子簽名確認，系統(tǒng)自動記錄核對人員、時間及操作日志，確保責任可追溯，紙質報告需加蓋檢驗專用章并歸檔備查。數(shù)據(jù)歸檔與存儲規(guī)范分級存儲策略原始檢測數(shù)據(jù)（如凝血曲線