DB34T33012018茶鮮葉中草銨膦殘留量的測定液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了茶鮮葉中草銨膦殘留量的液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜測定方法。草銨膦作為一種廣譜除草劑，在茶葉種植過程中的使用可能導(dǎo)致其在茶鮮葉中殘留，進(jìn)而影響茶葉產(chǎn)品的質(zhì)量安全。為保障消費者健康，規(guī)范茶葉生產(chǎn)中草銨膦的使用，建立準(zhǔn)確、靈敏的檢測方法具有重要意義。本標(biāo)準(zhǔn)的方法檢出限為0.01mg/kg，定量限為0.03mg/kg。在0.01mg/kg～0.5mg/kg添加濃度范圍內(nèi)，平均回收率為85.2%～95.7%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.2%～6.8%，能夠滿足茶葉中草銨膦殘留量檢測的技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)所用的試劑和材料如下：乙腈為色譜純，甲酸為色譜純，草銨膦標(biāo)準(zhǔn)品純度≥98.0%，實驗用水為GB/T6682規(guī)定的一級水。HLB固相萃取柱（200mg，6mL）或其他等效萃取柱，0.22μm有機(jī)相濾膜。草銨膦標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液的配制：準(zhǔn)確稱取草銨膦標(biāo)準(zhǔn)品10.0mg（精確至0.1mg），置于100mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度，配制成100mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，于4℃冰箱中避光保存，有效期3個月。標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制：吸取適量標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，用乙腈稀釋成0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。儀器和設(shè)備包括：液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜儀（配電噴霧離子源），電子天平（感量0.1mg和0.01g），組織搗碎機(jī)，渦旋混合器，離心機(jī)（轉(zhuǎn)速≥4000r/min），氮吹儀，固相萃取裝置，超聲波清洗器。液相色譜條件：色譜柱為C18柱（100mm×2.1mm，1.7μm）或等效柱；柱溫為40℃；進(jìn)樣量為5μL；流動相A為0.1%甲酸水溶液，流動相B為乙腈；梯度洗脫程序：0～2min，5%B；2～5min，5%～95%B；5～7min，95%B；7～7.5min，95%～5%B；7.5～10min，5%B；流速為0.3mL/min。質(zhì)譜條件：離子源為電噴霧離子源（ESI），掃描方式為多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），離子化模式為正離子模式，毛細(xì)管電壓為3.5kV，源溫度為150℃，脫溶劑氣溫度為500℃，脫溶劑氣流速為1000L/h，錐孔氣流速為50L/h。草銨膦的定量離子對為m/z180.1>126.0，定性離子對為m/z180.1>108.0和m/z180.1>90.0，碰撞能量分別為15eV、20eV和25eV。樣品的制備與測定：取代表性茶鮮葉樣品，用組織搗碎機(jī)搗碎混勻，稱取5.0g（精確至0.01g）試樣于50mL離心管中，加入20mL酸性乙腈溶液（含1%甲酸），渦旋混合2min，超聲提取15min，以4000r/min離心5min，取上清液待凈化。HLB固相萃取柱依次用5mL乙腈和5mL水活化，取5mL上清液過柱，用5mL水淋洗，抽干后用5mL乙腈洗脫，收集洗脫液于40℃水浴中氮吹至近干，用1mL乙腈溶解殘渣，過0.22μm有機(jī)相濾膜，供液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜儀測定。結(jié)果計算：試樣中草銨膦的殘留量按公式X=（c×V）/m計算，式中X為試樣中草銨膦的殘留量（mg/kg），c為從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的草銨膦濃度（mg/L），V為試樣最終定容體積（mL），m為試樣質(zhì)量（g）。計算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。方法的精密度和準(zhǔn)確度：在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的15%。在添加濃度為0.01mg/kg、0.05mg/kg、0.1mg/kg時，回收率分別為85.2%～92.5%、88.7%～95.7%、90.3%～94.8%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為5.8%、4.2%、3.2%。本標(biāo)準(zhǔn)由安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全研究所提出