2025年微生物檢測試題及答案一、單項選擇題（每題1分，共30分）1.2025版《臨床微生物檢驗操作規(guī)范》規(guī)定，血培養(yǎng)瓶在自動化儀器報警陽性后，最遲應在多少分鐘內(nèi)進行轉(zhuǎn)種？A.30分鐘?B.60分鐘?C.90分鐘?D.120分鐘答案：B解析：延遲轉(zhuǎn)種會顯著降低苛養(yǎng)菌檢出率，60分鐘內(nèi)完成可保證>95%的菌株存活。2.在MALDI-TOFMS鑒定流程中，用于校正基質(zhì)峰的內(nèi)標蛋白是：A.細胞色素C?B.肌紅蛋白?C.泛素?D.溶菌酶答案：A解析：細胞色素C（12361Da）在正離子線性模式下信號穩(wěn)定，且與大多數(shù)細菌蛋白峰無重疊。3.關于碳青霉烯酶基因bla_KPC的流行病學特征，下列哪項描述錯誤？A.常見于肺炎克雷伯菌?B.可通過IncFII質(zhì)粒傳播?C.對阿維巴坦天然耐藥?D.可被美羅培南-EDTA協(xié)同試驗初篩答案：C解析：bla_KPC編碼的KPC-2/3對阿維巴坦敏感，敏感率>90%，故C項錯誤。4.在厭氧菌藥敏試驗中，CLSIM100-Ed35推薦使用的培養(yǎng)基是：A.布魯氏血瓊脂?B.沙氏葡萄糖瓊脂?C.心浸液瓊脂+5%羊血?D.硫乙醇酸鹽肉湯答案：C解析：心浸液瓊脂富含血紅素和維生素K，支持脆弱擬桿菌組生長，且藥物擴散系數(shù)穩(wěn)定。5.采用mNGS技術檢測腦脊液病原體時，去除人源核酸最常用的探針庫是：A.hg19?B.GRCh38?C.Pan-human?D.HuErase答案：D解析：HuErase探針覆蓋>98%人源rRNA及mtDNA，可在建庫前將人源比例降至<5%，提高微生物reads占比。6.在VITEK-2Compact系統(tǒng)中，用于區(qū)分金黃色葡萄球菌和中間葡萄球菌的關鍵生化反應是：A.精氨酸脫羧酶?B.麥芽糖產(chǎn)酸?C.新生霉素耐藥?D.磷酸酶答案：B解析：中間葡萄球菌麥芽糖陰性，而金黃色葡萄球菌陽性，鑒定準確率>99%。7.下列哪種顯色培養(yǎng)基對O157:H7大腸桿菌的特異性最高？A.SMAC?B.CT-SMAC?C.CHROMagarO157?D.RainbowAgarO157答案：C解析：CHROMagarO157含β-葡萄糖醛酸酶底物，O157呈淡紫色，非O157大腸埃希菌為藍綠色，減少誤判。8.關于艱難梭菌毒素檢測，細胞毒中和試驗的“金標準”細胞系是：A.Vero?B.Hep-2?C.CHO?D.HeLa答案：C解析：CHO細胞對毒素B敏感，24h內(nèi)出現(xiàn)典型細胞病變，抗毒素中和后病變消失，特異性100%。9.在結(jié)核分枝桿菌rpoB基因測序中，與利福平耐藥無關的突變位點是：A.516?B.526?C.531?D.572答案：D解析：572位點突變與利福平耐藥無統(tǒng)計學關聯(lián)，主要突變集中在507-533的81bp核心區(qū)。10.用于檢測白色念珠菌生物膜形成能力的經(jīng)典96孔法，結(jié)晶紫染色后溶解染料的最佳溶劑是：A.95%乙醇?B.33%冰醋酸?C.30%甲醇-10%乙酸?D.DMSO答案：D解析：DMSO可完全溶解結(jié)晶紫-生物膜復合物，570nm吸光度與生物膜量呈線性相關，R2>0.99。11.在WS293-2025《醫(yī)院消毒供應中心監(jiān)測標準》中，壓力蒸汽滅菌生物監(jiān)測指示菌為：A.枯草芽孢桿菌5230?B.嗜熱脂肪芽孢桿菌7953?C.短小芽孢桿菌?D.凝結(jié)芽孢桿菌答案：B解析：嗜熱脂肪芽孢桿菌7953（ATCC7953）D值≥1.5min，能真實反映121℃下滅菌穿透效果。12.關于曲霉半乳甘露聚糖（GM）抗原檢測，下列哪項可造成假陽性？A.哌拉西林/他唑巴坦?B.頭孢吡肟?C.萬古霉素?D.利奈唑胺答案：A解析：哌拉西林/他唑巴坦部分批次發(fā)酵殘留GM，血清指數(shù)可>1.0，停藥48h后轉(zhuǎn)陰。13.在布魯氏菌抗體檢測中，SAT試驗凝集滴度≥多少時具有診斷意義？A.1:50?B.1:100?C.1:160?D.1:320答案：C解析：我國《布魯氏菌病診斷標準》規(guī)定，SAT≥1:160且臨床表現(xiàn)支持即可確診。14.用于檢測ESBLs表型確證的CLSI推薦底物是：A.頭孢噻肟/克拉維酸?B.頭孢他啶/克拉維酸?C.A+B?D.頭孢曲松/克拉維酸答案：C解析：任一藥物聯(lián)合克拉維酸后抑菌圈≥5mm即判為ESBL陽性，可減少漏檢。15.在諾如病毒GⅡ型實時熒光RT-PCR中，最常用的內(nèi)參基因是：A.RNaseP?B.β-actin?C.MS2?D.GI/GII共用探針答案：A解析：RNaseP在人體細胞中高表達，可監(jiān)控核酸提取及擴增全過程，防止假陰性。16.關于高毒力肺炎克雷伯菌（hvKP）的拉絲試驗，陽性標準判定為：A.≥3mm?B.≥5mm?C.≥8mm?D.≥10mm答案：B解析：接種環(huán)挑取菌落拉絲≥5mm即判陽性，與毒力質(zhì)粒rmpA高度相關。17.在軍團菌培養(yǎng)中，添加頭孢哌酮的主要作用是：A.抑制真菌?B.抑制革蘭陽性菌?C.抑制革蘭陰性菌?D.抑制支原體答案：C解析：頭孢哌酮可抑制大部分腸桿菌科，提高軍團菌分離率，濃度為4mg/L。18.用于檢測碳青霉烯酶表型的CarbaNP試驗，陽性對照菌株推薦：A.NDM-1大腸埃希菌?B.KPC-2肺炎克雷伯菌?C.IMP-1銅綠假單胞菌?D.任何產(chǎn)金屬酶菌株答案：B解析：KPC-2酶活性高，水解美羅培南速度快，30min內(nèi)可顯色，肉眼判讀清晰。19.在幽門螺桿菌克拉霉素耐藥檢測中，23SrRNA基因最常見的點突變是：A.A2142G?B.A2143G?C.A2142C?D.T2182C答案：B解析：A2143G突變導致核糖體構象改變，藥物結(jié)合力下降，與MIC升高≥256倍相關。20.關于皮膚癬菌鏡檢，KOH溶液最佳濃度為：A.5%?B.10%?C.20%?D.40%答案：B解析：10%KOH可軟化角蛋白而不破壞菌絲結(jié)構，熒光染色后鏡檢清晰度高。21.在BACTECFX系統(tǒng)中，檢測結(jié)核分枝桿菌的熒光底物是：A.刃天青?B.熒光素二乙酸酯?C.羥基萘酚藍?D.熒光CO?敏感染料答案：D解析：熒光CO?敏感染料隨分枝桿菌代謝產(chǎn)酸發(fā)生淬滅，儀器每10min讀取一次，縮短報告時間至5-7天。22.關于SARS-CoV-2變異株檢測，下列哪項突變與奧密克戎BA.5免疫逃逸最相關？A.L452R?B.N501Y?C.R346T?D.P681R答案：C解析：R346T位于受體結(jié)合域，可顯著降低中和抗體親和力，導致康復血清FRNT50下降6-8倍。23.在真菌藥敏試驗中，E-test條與CLSIM38-A2微量稀釋法對兩性霉素B的MIC差異≥幾倍需重復試驗？A.2?B.4?C.8?D.16答案：B解析：兩種方法對曲霉屬的MIC差異>4倍時，需重新鑒定菌種并復核，排除邊緣生長效應。24.用于檢測產(chǎn)志賀毒素大腸埃希菌（STEC）的“金標準”方法是：A.血清型分型?B.Vero細胞毒性試驗?C.stx基因PCR?D.免疫層析stx抗原答案：B解析：Vero細胞毒性試驗可直接證明毒素活性，中和試驗確認，特異性100%，靈敏度1pg/mL。25.在鸚鵡熱衣原體實驗室診斷中，可安全開展血清學檢測的實驗室生物安全級別為：A.BSL-1?B.BSL-2?C.BSL-3?D.BSL-4答案：B解析：滅活后的血清學試驗可在BSL-2進行，但培養(yǎng)、動物感染需BSL-3。26.關于mcr-1基因介導的黏菌素耐藥機制，正確的是：A.修飾脂質(zhì)A的磷酸基團?B.合成磷酸乙醇胺?C.降低外膜孔蛋白?D.激活外排泵答案：B解析：mcr-1編碼磷酸乙醇胺轉(zhuǎn)移酶，催化脂質(zhì)A添加PEtN，降低黏菌素結(jié)合力，MIC升高32-128倍。27.在流感嗜血桿菌培養(yǎng)中，需添加的輔酶是：A.V因子?B.X因子?C.A+B?D.膽堿答案：C解析：V因子（NAD）和X因子（血紅素）為流感嗜血桿菌生長必需，巧克力平板已同時提供。28.用于快速檢測難辨梭菌谷氨酸脫氫酶（GDH）的免疫層析法，其靈敏度約為：A.70%?B.80%?C.90%?D.95%答案：C解析：GDH抗原在菌體中高度保守，免疫層析法靈敏度90%，陰性預測值>98%，適合初篩。29.在淋病奈瑟菌耐藥監(jiān)測中，PPNG菌株的質(zhì)粒多為：A.3.2MDa?B.4.4MDa?C.5.3MDa?D.7.4MDa答案：B解析：4.4MDa亞洲型質(zhì)粒攜帶TEM-1基因，介導高水平青霉素耐藥，占全球PPNG80%以上。30.關于白色念珠菌T2MR檢測，其原理基于：A.核酸雜交?B.質(zhì)譜?C.核磁共振?D.實時熒光PCR答案：C解析：T2MR利用納米顆粒增強核磁共振信號，檢測真菌特有甘露聚糖，全程<3h，靈敏度1CFU/mL。二、配伍題（每題1分，共10分）A.蠟樣芽孢桿菌?B.炭疽芽孢桿菌?C.蘇云金芽孢桿菌?D.枯草芽孢桿菌31.在血瓊脂上呈“毛玻璃”菌落，有“水母頭”溶血，無動力，青霉素MIC>4mg/L32.產(chǎn)生伴胞晶體，對蚊幼蟲致病，對人類無莢膜33.革蘭陽性大桿菌，有周鞭毛，卵磷脂酶陽性，在4℃可生長34.在營養(yǎng)瓊脂上菌落粗糙，邊緣“卷發(fā)狀”，有莢膜，噬菌體γ陽性35.可產(chǎn)生表面活性素，用于工業(yè)酶生產(chǎn)，對多黏菌素敏感答案：31-B?32-C?33-A?34-B?35-D三、判斷題（每題1分，共10分）36.艱難梭菌毒素A/B基因PCR陽性即可確診活動性感染。答案：錯?解析：PCR僅提示產(chǎn)毒株定植，需結(jié)合臨床癥狀及毒素檢測。37.在CarbaNP試驗中，加入EDTA后顏色恢復提示絲氨酸酶。答案：錯?解析：EDTA抑制金屬酶，顏色恢復提示金屬酶，絲氨酸酶不受EDTA影響。38.曲霉GM指數(shù)>0.5即可診斷侵襲性曲霉病。答案：錯?解析：需結(jié)合宿主因素、影像及連續(xù)監(jiān)測，單次0.5-0.8可能為假陽性。39.布魯氏菌SAT試驗前需56℃30min滅活補體，避免假陰性。答案：對?解析：補體可干擾抗原抗體反應，滅活后滴度升高1-2個梯度。40.產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對頭孢吡肟天然耐藥。答案：錯?解析：部分ESBL菌株對頭孢吡肟敏感，需根據(jù)MIC結(jié)果用藥。41.在VITEK-2中，若鑒定率<90%但生化譜典型，可直接報告菌種。答案：錯?解析：需補充手工試驗或質(zhì)譜確認，防止誤報。42.白色念珠菌對氟康唑耐藥率>90%提示存在CDR1外排泵高表達。答案：對?解析：CDR1高表達可使氟康唑MIC>256mg/L，與臨床失敗相關。43.諾如病毒RT-PCRCt值>35即可排除感染。答案：錯?解析：Ct值受采樣、保存影響，需結(jié)合病程重復檢測。44.結(jié)核分枝桿菌rpoB531位突變提示對高劑量利福布丁仍敏感。答案：錯?解析：531突變導致對所有利福類交叉耐藥，不推薦利福布丁。45.鸚鵡熱衣原體可在McCoy細胞中形成胞漿內(nèi)包涵體，碘染色陽性。答案：錯?解析：鸚鵡熱衣原體包涵體不含糖原，碘染色陰性，與沙眼衣原體不同。四、填空題（每空1分，共20分）46.在BACTEC9240中，培養(yǎng)瓶報陽時間<____h且革蘭染色未見細菌，需做____染色排除分枝桿菌。答案：5；抗酸47.檢測產(chǎn)碳青霉烯酶銅綠假單胞菌時，EDTA協(xié)同試驗抑菌圈增加≥____mm提示金屬酶。答案：548.高毒力肺炎克雷伯菌的毒力質(zhì)粒常攜帶____、____和____基因。答案：rmpA；rmpA2；iroBCDN49.在曲霉GM試驗中，口服____可造成假陽性，需停藥____小時后采血。答案：哌拉西林/他唑巴坦；4850.艱難梭菌毒素B的受體是____，阻斷其信號通路可用____單抗。答案：CSPG4；bezlotoxumab51.用于快速鑒定MRSA的顯色培養(yǎng)基含____底物，菌落呈____色。答案：頭孢硝噻吩；品紅52.布魯氏菌SAT試驗中，需使用____抗原，pH調(diào)至____，37℃反應____小時。答案：牛種544A；6.8；2453.在mNGS生信分析中，去除人源序列常用____比對，閾值設定____。答案：BWA-MEM；q3054.白色念珠菌生物膜形成分四期：____、____、____和____。答案：黏附；微菌落；成熟；分散55.檢測產(chǎn)志賀毒素大腸埃希菌時，stx1與stx2探針的Tm值差異應<____℃，以防____。答案：2；交叉擴增五、簡答題（每題10分，共30分）56.簡述2025版CLSIM100對頭孢他啶-阿維巴坦（CZA）腸桿菌科折點變化及臨床意義。答案：2025版將CZA對腸桿菌科敏感折點由≤8/4mg/L下調(diào)至≤4/4mg/L，中介16/4mg/L，耐藥≥32/4mg/L。理由為PK/PD模擬顯示，當MIC>4mg/L時，fT>MIC低于目標值45%，臨床失敗率升高18%。新折點可減少劑量不足導致的耐藥選擇，尤其對bla_KPC-3、bla_CTX-M-15高表達菌株。實驗室需重新驗證自動化系統(tǒng)，防止將MIC=8mg/L誤報敏感。57.描述利用T2MR技術診斷念珠菌血癥的全過程及質(zhì)量控制要點。答案：流程：（1）采集3mL全血，加入裂解管，56℃10min滅活補體；（2）加入納米顆粒偶聯(lián)甘露聚糖抗體，37℃雜交30min；（3）置于T2MR儀，通過核磁共振信號變化定量；（4）結(jié)果以CFU/mL報告，檢測限1CFU/mL。質(zhì)控：每日運行陽性質(zhì)控（白色念珠菌ATCC10231，100CFU/mL）和陰性質(zhì)控（無菌血），CV<10%；若陽控偏差>2SD，需校準磁場并重新檢測；每季度參加CAP室間質(zhì)評，合格率100%。58.闡述mNGS在結(jié)核性腦膜炎診斷中的優(yōu)勢、局限及與常規(guī)方法的互補策略。答案：優(yōu)勢：mNGS無需培養(yǎng)，可在24h內(nèi)檢出<10CFU/mL的結(jié)核分枝桿菌復合群，且能發(fā)現(xiàn)非結(jié)核分枝桿菌及合并感染；可同步檢測耐藥基因，如rpoB、katG、inhA，提前指導用藥。局限：人源核酸占比高（>95%），需富集；RNA易降解，需現(xiàn)場裂解；費用高，生信門檻大；無法區(qū)分死菌與活菌?；パa策略：對涂片陰性、培養(yǎng)陰性且臨床高度疑似的腦膜炎，先送mNGS快速篩查；若陽性，立即啟動抗結(jié)核治療，同時留取腦脊液繼續(xù)培養(yǎng)，獲取菌株做表型藥敏；若mNGS陰性但癥狀持續(xù)，可重復腰椎穿刺或采用XpertMTB/RIFUltra，提高檢出率至94%。六、案例分析題（共2題，每題20分，共40分）59.患者，男，58歲，肝移植術后第12天，持續(xù)高熱、氣促，CT示雙肺彌漫磨玻璃影。BALF培養(yǎng)陰性，血清GM0.3，mNGS檢出序列：黃曲霉復合群847reads、人皰疹病毒6型120reads、鮑曼不動