艾滋病檢測技術(shù)與質(zhì)量控制試題一、單項選擇題（每題5分，共30分）1.艾滋病病毒抗體篩查最常用的技術(shù)是（）A.蛋白印跡試驗（WB）B.酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）C.核酸擴增試驗（NAAT）D.快速檢測試驗（RT）解析：ELISA因操作簡便、成本低、靈敏度高，是艾滋病抗體篩查的首選方法；WB多用于確證試驗，NAAT適用于早期診斷或特殊樣本檢測，RT作為補充篩查手段。答案：B2.艾滋病確證試驗的核心判斷依據(jù)是（）A.單一抗原條帶陽性B.出現(xiàn)特異性抗原抗體復(fù)合物C.滿足確證試驗的條帶組合要求（如HIV-1需至少2條env帶+1條gag帶）D.樣本OD值高于臨界值解析：WB確證試驗需根據(jù)條帶組合判斷（如HIV-1抗體陽性需至少出現(xiàn)gp41、gp160/gp120（env區(qū)）和p24（gag區(qū)）等特定條帶的組合），單一或非特異性條帶不能確證感染。答案：C3.室內(nèi)質(zhì)控中，弱陽性質(zhì)控品的主要作用是（）A.監(jiān)測實驗的靈敏度B.監(jiān)測實驗的特異性C.校準儀器D.替代陰性質(zhì)控解析：弱陽性質(zhì)控品含低濃度抗原/抗體，可反映實驗檢測低水平目標物的能力（即靈敏度）；陰性質(zhì)控監(jiān)測特異性，校準儀器需用校準品。答案：A4.以下哪項屬于艾滋病檢測實驗室質(zhì)量控制的核心環(huán)節(jié)？（）A.定期更換實驗耗材品牌B.參加國家級室間質(zhì)評計劃C.每天記錄實驗室溫度濕度D.每月對設(shè)備進行外觀清潔解析：室間質(zhì)評通過與其他實驗室比對，可發(fā)現(xiàn)檢測系統(tǒng)的偏差，是質(zhì)量控制的關(guān)鍵；耗材更換需驗證，溫濕度記錄、設(shè)備清潔為輔助管理環(huán)節(jié)。答案：B5.核酸擴增試驗（NAAT）在艾滋病檢測中的優(yōu)勢不包括（）A.可檢測窗口期樣本B.能區(qū)分HIV-1和HIV-2型別C.可用于新生兒早期診斷D.結(jié)果不受抗體變異影響解析：NAAT檢測病毒核酸，窗口期（抗體未產(chǎn)生時）即可檢出，也可用于新生兒早期診斷（避免母體抗體干擾）；但常規(guī)NAAT多檢測保守區(qū)，型別區(qū)分需結(jié)合序列分析，非其優(yōu)勢。答案：B6.快速檢測試驗（RT）的主要應(yīng)用場景是（）A.大規(guī)模人群篩查的初篩B.實驗室確證試驗C.急診樣本的快速診斷D.替代ELISA作為常規(guī)篩查解析：RT操作簡便、耗時短，適合急診、基層或應(yīng)急篩查，但靈敏度略低于ELISA，大規(guī)模篩查仍以ELISA為主，確證用WB。答案：C二、判斷題（每題4分，共20分）1.艾滋病檢測實驗室的SOP（標準操作程序）只需在首次建立時編寫，無需更新。（）解析：SOP需隨技術(shù)更新、設(shè)備更換、試劑變更等及時修訂，確保操作規(guī)范性。答案：×2.室間質(zhì)評結(jié)果不合格時，實驗室應(yīng)立即停止檢測工作，直至問題解決。（）解析：室間質(zhì)評不合格需分析原因（如試劑、操作、設(shè)備等），采取糾正措施并驗證有效后，可恢復(fù)檢測，無需直接停止。答案：×3.ELISA實驗中，洗板不充分會導(dǎo)致假陽性結(jié)果。（）解析：洗板不充分會殘留未結(jié)合的酶標抗體，與底物反應(yīng)后產(chǎn)生信號，導(dǎo)致假陽性。答案：√4.所有艾滋病抗體陽性樣本都需進行核酸檢測以確認感染。（）解析：抗體確證試驗（如WB）陽性且結(jié)合流行病學(xué)史/臨床癥狀，可診斷感染；核酸檢測多用于窗口期、母嬰傳播等特殊場景，非所有陽性樣本都需核酸確認。答案：×5.質(zhì)量控制圖中，若質(zhì)控品結(jié)果連續(xù)3次落在均值+2SD以上，提示實驗系統(tǒng)可能存在偏差。（）解析：根據(jù)Westgard質(zhì)控規(guī)則，連續(xù)3次在均值+2SD以上屬于“趨勢”，提示系統(tǒng)偏差（如試劑失效、設(shè)備漂移），需排查。答案：√三、簡答題（每題10分，共30分）1.簡述艾滋病抗體ELISA檢測的主要操作流程及質(zhì)量控制要點。參考答案：操作流程：①樣本處理（分離血清/血漿，避免溶血、脂血）；②加樣（樣本、酶標試劑、質(zhì)控品等，確保加樣量準確）；③孵育（嚴格控制溫度、時間，如37℃30分鐘，避免溫度波動）；④洗板（使用洗板機/手工洗板，確?？變?nèi)殘留液≤1μL，防止交叉污染）；⑤加底物（避光保存、現(xiàn)配現(xiàn)用）；⑥孵育顯色；⑦加終止液；⑧酶標儀讀數(shù)（校準波長，確保讀數(shù)準確）。質(zhì)量控制要點：①使用陰、陽、弱陽性質(zhì)控品（弱陽性監(jiān)測靈敏度，陰性質(zhì)控監(jiān)測特異性）；②嚴格遵循SOP，控制孵育溫度、時間、洗板次數(shù)等關(guān)鍵步驟；③定期校準酶標儀、洗板機；④實驗前驗證試劑有效性（試劑盒陰陽性對照符合要求）；⑤操作人員持證上崗，定期培訓(xùn)。2.艾滋病檢測實驗室如何通過室間質(zhì)評提升檢測質(zhì)量？參考答案：①積極參與：按要求參加國家級/省級室間質(zhì)評計劃，確保樣本檢測流程與常規(guī)一致；②結(jié)果分析：收到質(zhì)評報告后，分析自身結(jié)果與靶值/中位值的偏差，若不合格，排查原因（如試劑批號、操作步驟、設(shè)備狀態(tài)等）；③整改措施：針對問題（如操作不規(guī)范→強化培訓(xùn)；試劑偏差→更換批次并驗證；設(shè)備漂移→校準/維護）制定糾正措施，驗證有效后記錄存檔；④持續(xù)改進：將質(zhì)評結(jié)果納入實驗室質(zhì)量體系，優(yōu)化SOP，提升人員能力，確保檢測系統(tǒng)穩(wěn)定性。3.簡述HIV核酸檢測的臨床應(yīng)用場景及質(zhì)量控制難點。參考答案：應(yīng)用場景：①窗口期（抗體未產(chǎn)生時）早期診斷；②新生兒HIV感染診斷（避免母體抗體干擾）；③抗病毒治療療效監(jiān)測（結(jié)合CD4計數(shù)、病毒載量）；④特殊樣本（如干血斑、腦脊液）檢測；⑤HIV-1/HIV-2型別或亞型分析（結(jié)合序列測定）。質(zhì)量控制難點：①核酸污染：擴增產(chǎn)物易污染樣本/試劑，導(dǎo)致假陽性，需嚴格分區(qū)（試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)），使用防污染措施（如UNG酶、氣溶膠屏障吸頭）；②模板濃度差異：樣本病毒載量差異大（如急性期高、治療后低），需設(shè)置內(nèi)參監(jiān)控提取/擴增效率，避免假陰性；③設(shè)備精度要求高：實時熒光定量PCR儀需定期校準，確保溫度準確性和熒光檢測靈敏度；④操作人員技能：核酸提取、擴增步驟對操作規(guī)范性要求高，需嚴格培訓(xùn)，避免操作誤差。四、案例分析題（20分）案例：某縣級實驗室開展艾滋病ELISA篩查時，連續(xù)2批樣本出現(xiàn)“弱陽性”結(jié)果異常升高（較歷史均值高30%），但陰性質(zhì)控品結(jié)果正常，弱陽性質(zhì)控品OD值超出+3SD范圍。請分析可能的原因及解決措施?？赡茉颍?.試劑問題：新批次ELISA試劑靈敏度異常（如包被抗原濃度過高），或試劑保存不當（反復(fù)凍融、溫度超標）導(dǎo)致活性改變；2.操作環(huán)節(jié)：加樣器校準失效，導(dǎo)致樣本/酶標試劑加樣量偏多；孵育溫度過高（如孵育箱實際溫度39℃）或時間過長，增強抗原抗體反應(yīng)；洗板不充分（洗板機壓力不足、洗液殘留），殘留酶標抗體與底物反應(yīng)；3.設(shè)備故障：酶標儀濾光片老化，導(dǎo)致吸光度讀數(shù)偏差；孵育箱溫度失控（顯示37℃但實際偏高）。解決措施：1.試劑驗證：更換同品牌不同批次試劑，或使用參考實驗室的質(zhì)控品驗證當前試劑；若新試劑結(jié)果恢復(fù)正常，說明原試劑批次問題，聯(lián)系廠家更換；2.操作核查：校準加樣器（使用校準儀檢測加樣精度）；檢查孵育箱溫度（用溫度計校準，確保37±1℃）；優(yōu)化洗板程序（增加洗板次數(shù)或壓力，確?？變?nèi)無殘留）；3.設(shè)備維護：校準酶標儀（使用標準光片或已知濃度溶液驗證吸光度準確性）；更換老化濾光片；4.人員培訓(xùn)：重新培訓(xùn)操作人員，強調(diào)孵育時間、溫度、洗板等關(guān)鍵步驟的規(guī)范性，模擬實驗驗證操作能