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臨床常見(jiàn)細(xì)菌特性及診斷要點(diǎn)臨床感染性疾病中,細(xì)菌感染的精準(zhǔn)診斷是指導(dǎo)抗感染治療、改善患者預(yù)后的核心環(huán)節(jié)。不同細(xì)菌在形態(tài)結(jié)構(gòu)、培養(yǎng)特性、致病性及對(duì)抗菌藥物的敏感性上存在顯著差異,需結(jié)合微生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)與臨床特征綜合分析。以下梳理臨床常見(jiàn)細(xì)菌的核心特性及診斷關(guān)鍵要點(diǎn),為臨床診療提供參考。一、革蘭陽(yáng)性球菌(一)葡萄球菌屬(以金黃色葡萄球菌為代表)1.生物學(xué)特性形態(tài)與染色:球形菌體呈葡萄串狀排列,革蘭染色陽(yáng)性;無(wú)芽胞、無(wú)鞭毛,部分菌株有莢膜。培養(yǎng)特性:需氧或兼性厭氧,營(yíng)養(yǎng)要求不高。血瓊脂平板上形成金黃色(或白色、檸檬色)菌落,多數(shù)致病性菌株伴β溶血環(huán)。生化反應(yīng):觸酶陽(yáng)性(區(qū)別于鏈球菌),凝固酶試驗(yàn)陽(yáng)性(致病性標(biāo)志,可凝固人/兔血漿);發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖等產(chǎn)酸,甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)陽(yáng)性(金黃色葡萄球菌特征)??乖c毒力:細(xì)胞壁含肽聚糖、磷壁酸,表面蛋白A(SPA)可結(jié)合IgGFc段逃避免疫;毒素(如腸毒素、表皮剝脫毒素)與侵襲性酶(如凝固酶、透明質(zhì)酸酶)參與致病。2.診斷要點(diǎn)標(biāo)本采集:依感染部位采集膿液、血液、痰液等,嚴(yán)格無(wú)菌操作(如血液需用厭氧/需氧培養(yǎng)瓶,痰液需深咳留?。?。直接鏡檢:革蘭染色見(jiàn)葡萄串狀陽(yáng)性球菌,提示疑似感染。分離培養(yǎng):血瓊脂平板培養(yǎng)后,挑取可疑菌落(β溶血、金黃色)行進(jìn)一步鑒定。鑒定試驗(yàn):凝固酶試驗(yàn)(玻片法測(cè)結(jié)合凝固酶,試管法測(cè)游離凝固酶);分子生物學(xué)(如PCR檢測(cè)*nuc*基因)可快速確診;甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)輔助區(qū)分金黃色葡萄球菌與表皮葡萄球菌。藥敏與治療:需檢測(cè)對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)(關(guān)注MRSA,可用頭孢西丁紙片法或*mecA*基因檢測(cè))、糖肽類(lèi)(萬(wàn)古霉素、替考拉寧)的敏感性,MRSA感染優(yōu)先選擇糖肽類(lèi)或利奈唑胺。(二)鏈球菌屬(以A群鏈球菌、肺炎鏈球菌為代表)1.A群鏈球菌(化膿性鏈球菌)生物學(xué)特性:球形菌體呈鏈狀排列,革蘭陽(yáng)性;無(wú)芽胞、無(wú)鞭毛,有M蛋白(抗吞噬、與風(fēng)濕熱相關(guān))。血瓊脂平板上形成β溶血(透明溶血環(huán))菌落,桿菌肽敏感(0.04U紙片抑菌環(huán)≥10mm)。致病性:引起化膿性感染(蜂窩織炎、扁桃體炎)、毒素性疾?。ㄐ杉t熱)、超敏反應(yīng)性疾?。L(fēng)濕熱、急性腎小球腎炎)。2.肺炎鏈球菌生物學(xué)特性:矛頭狀菌體成雙排列,革蘭陽(yáng)性;無(wú)芽胞、無(wú)鞭毛,致病株有莢膜。血瓊脂平板上形成α溶血(草綠色溶血環(huán))菌落,膽汁溶菌試驗(yàn)陽(yáng)性(加膽汁/膽鹽溶解菌落)、Optochin(奧普托欣)敏感(抑菌環(huán)≥14mm)。致病性:大葉性肺炎、腦膜炎、中耳炎等,常繼發(fā)于上呼吸道感染。3.診斷要點(diǎn)(鏈球菌屬)標(biāo)本采集:膿液、咽拭子(避免唾液污染)、痰液、腦脊液等。直接鏡檢:革蘭陽(yáng)性鏈狀球菌(A群)或矛頭狀雙球菌(肺炎鏈球菌)。分離培養(yǎng):血瓊脂平板培養(yǎng),觀察溶血類(lèi)型(A群β溶血,肺炎鏈球菌α溶血)。鑒定試驗(yàn):A群鏈球菌:桿菌肽敏感試驗(yàn)、CAMP試驗(yàn)(與B群鏈球菌鑒別,B群CAMP陽(yáng)性);肺炎鏈球菌:膽汁溶菌試驗(yàn)、Optochin敏感試驗(yàn),莢膜腫脹試驗(yàn)快速鑒定。藥敏與治療:A群鏈球菌對(duì)青霉素大多敏感;肺炎鏈球菌需檢測(cè)青霉素敏感性(耐藥株用三代頭孢、萬(wàn)古霉素)。二、革蘭陰性桿菌(一)腸桿菌科(以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌為代表)1.大腸埃希菌生物學(xué)特性:革蘭陰性短桿菌,多數(shù)有周生鞭毛,有菌毛。麥康凱瓊脂上呈粉紅色菌落(發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸),IMViC試驗(yàn)++--(吲哚+、甲基紅+、VP-、枸櫞酸鹽-),動(dòng)力陽(yáng)性。致病性:腸道內(nèi)為正常菌群,移位可致尿路感染、敗血癥;腸道致病性菌株(如ETEC、EHEC)引起腹瀉,EHEC(O157:H7)可致出血性結(jié)腸炎。2.肺炎克雷伯菌生物學(xué)特性:革蘭陰性短桿菌,無(wú)鞭毛,有厚莢膜,菌落粘稠(拉絲試驗(yàn)陽(yáng)性)。麥康凱瓊脂上呈粉紅色菌落,IMViC試驗(yàn)--++(吲哚-、甲基紅-、VP+、枸櫞酸鹽+),動(dòng)力陰性。致病性:肺炎(高毒力株可致壞死性肺炎)、尿路感染、敗血癥等,產(chǎn)ESBLs/碳青霉烯酶菌株耐藥性強(qiáng)。3.診斷要點(diǎn)(腸桿菌科)標(biāo)本采集:尿液(中段尿,清潔外陰)、血液、痰液、糞便(腸道感染)等,糞便需新鮮。直接鏡檢:革蘭陰性短桿菌,結(jié)合標(biāo)本來(lái)源判斷。分離培養(yǎng):麥康凱瓊脂分離,觀察菌落形態(tài)(肺炎克雷伯菌粘稠菌落)。鑒定試驗(yàn):生化試驗(yàn)(API20E、VITEK系統(tǒng)),腸桿菌科氧化酶陰性(區(qū)別于非發(fā)酵菌);分子生物學(xué)(如PCR檢測(cè)EHEC的*stx*基因)。藥敏與治療:產(chǎn)ESBLs菌株避免三代頭孢,優(yōu)先選擇碳青霉烯類(lèi)(除非產(chǎn)碳青霉烯酶)、酶抑制劑復(fù)合制劑(如哌拉西林-他唑巴坦);碳青霉烯酶株需用多粘菌素或替加環(huán)素。(二)非發(fā)酵革蘭陰性桿菌(以銅綠假單胞菌為代表)1.生物學(xué)特性革蘭陰性桿菌,有端生鞭毛,氧化酶陽(yáng)性(區(qū)別于腸桿菌科)。血瓊脂平板上形成灰綠色、金屬光澤菌落,有生姜?dú)馕?;麥康凱瓊脂上為無(wú)色/淡綠色菌落(不發(fā)酵乳糖)。致病性:機(jī)會(huì)性感染,常見(jiàn)于燒傷、免疫低下患者,引起肺炎、敗血癥等,分泌物常呈綠色(綠膿素)。2.診斷要點(diǎn)標(biāo)本采集:痰液(支氣管肺泡灌洗液更優(yōu))、血液、膿液等,避免污染。直接鏡檢:革蘭陰性桿菌,鏡下運(yùn)動(dòng)活潑(端生鞭毛)。分離培養(yǎng):血瓊脂、麥康凱瓊脂培養(yǎng),觀察菌落顏色、氣味(灰綠色、生姜味具特征性)。鑒定試驗(yàn):氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性,生化試驗(yàn)(不發(fā)酵乳糖、葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(yàn)為氧化型);分子生物學(xué)(如PCR檢測(cè)*oprD*基因,與碳青霉烯類(lèi)耐藥相關(guān))。藥敏與治療:天然對(duì)多種抗生素耐藥,需檢測(cè)對(duì)哌拉西林-他唑巴坦、頭孢他啶、碳青霉烯類(lèi)的敏感性,常聯(lián)合用藥(如β-內(nèi)酰胺類(lèi)+氨基糖苷類(lèi))。三、厭氧菌(以脆弱擬桿菌為代表)1.生物學(xué)特性革蘭陰性桿菌,兩端鈍圓,有莢膜,無(wú)芽胞、無(wú)鞭毛,呈多形性。嚴(yán)格厭氧,血瓊脂平板(厭氧環(huán)境)上形成灰白色、β溶血菌落,膽汁肉湯中生長(zhǎng)良好(膽汁促進(jìn)生長(zhǎng))。致病性:腹腔、盆腔感染的主要厭氧菌,常與需氧菌混合感染,毒力因子包括莢膜、內(nèi)毒素、蛋白酶。2.診斷要點(diǎn)標(biāo)本采集:膿液(注射器抽取,排盡空氣)、血液(厭氧培養(yǎng)瓶)、組織標(biāo)本(無(wú)菌切取,厭氧轉(zhuǎn)運(yùn)),避免接觸空氣、勿冷藏。直接鏡檢:革蘭陰性桿菌,多形性,無(wú)芽胞。分離培養(yǎng):接種厭氧血瓊脂、膽汁肉湯,置厭氧培養(yǎng)箱(80%N?、10%H?、10%CO?)培養(yǎng)48-72小時(shí)。鑒定試驗(yàn):膽汁生長(zhǎng)試驗(yàn)陽(yáng)性、吲哚陽(yáng)性、酯酶陽(yáng)性;氣相色譜分析代謝產(chǎn)物(乙酸、琥珀酸);分子生物學(xué)(16SrRNA測(cè)序)。藥敏與治療:對(duì)甲硝唑、克林霉素、β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合制劑敏感,青霉素多耐藥(產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶)。四、分枝桿菌屬(以結(jié)核分枝桿菌為代表)1.生物學(xué)特性細(xì)長(zhǎng)略彎桿菌,抗酸染色陽(yáng)性(齊-尼氏染色呈紅色),無(wú)芽胞、無(wú)鞭毛、無(wú)莢膜。專(zhuān)性需氧,羅氏培養(yǎng)基上2-4周形成粗糙、干燥菌落,耐熱觸酶陰性(區(qū)別于非結(jié)核分枝桿菌)。致病性:引起結(jié)核?。ǚ谓Y(jié)核、肺外結(jié)核),致病與免疫損傷(遲發(fā)型超敏反應(yīng))和細(xì)菌抗吞噬能力有關(guān)。2.診斷要點(diǎn)標(biāo)本采集:痰液(晨痰,連續(xù)3天)、腦脊液、胸水等,痰液需深咳留取。直接鏡檢:抗酸染色油鏡下見(jiàn)紅色細(xì)長(zhǎng)桿菌,結(jié)合臨床癥狀(低熱、盜汗、咳嗽)。分離培養(yǎng):接種羅氏培養(yǎng)基或MGIT液體培養(yǎng)基(快速培養(yǎng)5-14天),觀察菌落形態(tài)(粗糙干燥)。鑒定試驗(yàn):生化試驗(yàn)(煙酸試驗(yàn)+、耐熱觸酶-、硝酸鹽還原+);分子生物學(xué)(PCR檢測(cè)*IS6110*基因);免疫學(xué)(γ-干擾素釋放試驗(yàn)IGRA,如T-SPOT.TB,特異性高于PPD)。藥敏與治療:檢測(cè)對(duì)異煙肼、利福平、乙胺丁醇的敏感性,耐多藥結(jié)核(MDR-TB

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