I

CS65.020.20

ICS65.020.20

CCSB15DB23

黑龍江省地方標準

DB23/T2979—2021

大豆對大豆擬莖點種腐病抗病性

鑒定技術規(guī)程

2021-09-08發(fā)布2021-10-07實施

黑龍江省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB23/T2979—2021

前??言

本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起

草。

請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別這些專利的責任。

本文件由黑龍江省農業(yè)農村廳提出。

本文件由黑龍江省農業(yè)標準化技術委員會歸口。

本文件起草單位：中國科學院東北地理與農業(yè)生態(tài)研究所。

本文件主要起草人：許艷麗、陸欣春、韓曉增、潘鳳娟、鄒文秀、李雪光、戰(zhàn)麗莉、嚴君、陳旭。

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DB23/T2979—2021

大豆對大豆擬莖點種腐病抗病性鑒定技術規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了大豆對由大豆擬莖點種腐病菌（PhomopsislongicollaHobbs）引起的種腐病抗病性鑒

定術語和定義、病原菌接種體制備、大豆種子要求、大豆種子抗病性鑒定和大豆植株抗病性鑒定。

本文件適用于大豆對大豆擬莖點種腐病抗病性的鑒定和評價。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB4404.2糧食作物種子第2部分：豆類

SN/T4865大豆擬莖點種腐病菌檢疫鑒定方法

3術語和定義

菌絲覆蓋率

是指在大豆種子抗病性鑒定中，大豆擬莖點種腐病菌接種的種子中，菌絲全部覆蓋的種子數(shù)占供試

種子總數(shù)的百分率。

4病原菌接種體制備

4.1培養(yǎng)基準備

病原菌菌株純化及分離所用培養(yǎng)基為酸性?PDA?培養(yǎng)基(??APDA?)，配方為馬鈴薯?200?g?、葡萄糖?20?g?、

瓊脂條?20?g?，待?PDA?培養(yǎng)基冷卻到?45?℃?～?50?℃?時，用過濾除菌的85%乳酸調節(jié)?pH?至4.5后到平板。

4.2病原菌接種體制備

挑取少量活化的大豆擬莖點種腐病菌菌絲到?APDA?上，25?℃?～?28?℃?12?h?光照?12?h?黑暗交替培養(yǎng)，

直到長出典型菌落，并符合?SN/T4865?的規(guī)定。

5大豆種子要求

所用品種種子的質量要求按?GB4404.2?的規(guī)定執(zhí)行。

6大豆種子抗病性鑒定

1

DB23/T2979—2021

6.1鑒定方法和公式

將病原菌接種于APDA培養(yǎng)基平板上，25?℃?暗培養(yǎng)?5?d?后，選取健康大豆種子，經(jīng)?75?%?酒精消毒

?3?min，用無菌水沖洗?3?遍，放置于滅菌的濾紙上稍風干，勻距擺放在菌落邊緣，以?APDA?培養(yǎng)基上不接

種病原菌的大豆種子為對照，繼續(xù)?25?℃?暗培養(yǎng)5d。每皿?10?粒，重復3次。接種后第?4?d?和第?5?d?分別

調查發(fā)芽種子數(shù)，第?5?d?調查被菌絲覆蓋的大豆種子數(shù)，計算種子發(fā)芽勢、發(fā)芽率和菌絲覆蓋率。

計算公式：

種子菌絲覆蓋率(?%?)?=?(被菌絲覆蓋種子數(shù)/鑒定種子總數(shù))?×?100

發(fā)芽勢(?%?)=［發(fā)芽初期(第?4?d?)正常發(fā)芽種子數(shù)/鑒定種子總數(shù)］?×?100

種子發(fā)芽率（?%?）=[發(fā)芽終期（第?5?d?）全部正常發(fā)芽總數(shù)／鑒定試種子總數(shù)]?×?100

6.2抗病評價標準

抗病標準以種子菌絲覆蓋率、種子發(fā)芽勢和發(fā)芽率降低率綜合評定，即如果種子菌絲覆蓋率高于

80.0?%?時，以種子菌絲覆蓋率為主要評價指標，如種子菌絲覆蓋率低于80.0?%?時，以種子發(fā)芽勢和

發(fā)芽率降低為主要指標。

標準如下：種子菌絲覆蓋率，種子發(fā)芽勢和發(fā)芽率降低

低于40.0?%?：抗病品種；

40.0?%?~?59.9?%：中抗品種；

60.0?%?~?79.9?%：中感品種；

80.0?%?~?99.90?%：感病品種；

100.0?%：高感品種。

記錄見附錄表A。

7大豆植株抗病性鑒定

7.1植株準備

采用苗期切頂端接種法。在溫室花盆中播種大豆，待大豆植株的第一片三出復葉展平時，在莖節(jié)點

下面的橫切面上將莖稈剪斷，下部植株用于接種。

7.2鑒定方法

將病原菌在?APDA?培養(yǎng)基平板上?25?℃?暗培養(yǎng)?10?d?，在菌落邊緣用打孔器打取直徑為?5?mm?

的菌絲塊貼于剛剪斷的植株莖稈橫切面上，用封口膜包住接種體和植株莖稈橫切面，套塑料袋保濕?48

?h?，接種?30?株；以直徑?5?mm?的?APDA?培養(yǎng)基塊貼于大豆植株莖稈橫切面作對照。

7.3抗病性評價標準

接種后?2?d?取下接種體，接種?后7?d?測量大豆植株莖病斑長度，并計算莖病斑長度占植株莖長度的

百分率。

莖病斑長比率（?%?）=（?莖病斑長度?／?植株莖長度?）×100

莖病斑長度占植株莖長度的百分率：

低于4.0?%?：抗病品種；

4.0?%?~?5.9?%：中抗品種；

2

DB23/T2979—2021

6.0?%?~?7.9?%：中感品種；

8.0?%?~?9.9?%：感病品種；

10.0?%以上：高感品種。

記錄見附錄表?B。

7.4調查記錄

詳細記載調查方法和鑒定過程，并記錄存檔。

3

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附錄A

（資料性）

大豆擬莖點種腐病種子抗病性鑒定記載、評價表

表?A.1大豆擬莖點種腐病種子抗病性鑒定種子菌絲覆蓋率調查表

接種日期：鑒定地點：調查日期：

調查人：記錄人：單位：

鑒定編號重復鑒定種子數(shù)被菌絲覆蓋種子數(shù)種子菌絲覆蓋率

（?%?）

I

II

III

I

II

III

I

II

III

…

表?A.2大豆擬莖點種腐病種子抗病性鑒定種子發(fā)芽勢和種子發(fā)芽率調查表

接種日期：鑒定地點：調查日期：

調查人：記錄人：單位：

鑒定重復鑒定種子發(fā)芽數(shù)種子發(fā)芽勢種子發(fā)芽率（?%?）

編號種子數(shù)（?%?）

接種第?4?d接種第?5?d

I

II

III

I

II

III

I

II

III

…

4

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表?A.3大豆擬莖點種腐病種子抗病性鑒定評價表

接種日期：鑒定地點：調查日期：

調查人：記錄人：單位：

鑒定編號…

鑒定品種

種子菌I

絲覆蓋II

率（?%?）III

平均

降低

種子發(fā)I

芽勢II

（?%?）III

平均

降低

種子發(fā)I

芽率II

（?%?）III

平均

降低

抗病性級別

抗病性評價

5

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附錄B

（資料性）

大豆擬莖點種腐病植株抗病性鑒定記載、評價表

表B.1大豆擬莖點種腐病植株抗病性鑒定莖病斑長度調查表

播種日期：接種日期：調查日期：

調查人：記錄人：鑒定地點：

鑒定重復