制藥菌種培育工現(xiàn)場(chǎng)作業(yè)技術(shù)規(guī)程文件名稱：制藥菌種培育工現(xiàn)場(chǎng)作業(yè)技術(shù)規(guī)程編制部門：綜合辦公室編制時(shí)間：2025年類別：兩級(jí)管理標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)：審核人：版本記錄：第一版批準(zhǔn)人：一、總則

本規(guī)程適用于制藥菌種培育工在菌種培育過(guò)程中的現(xiàn)場(chǎng)作業(yè)。規(guī)程旨在規(guī)范菌種培育操作流程，確保菌種質(zhì)量穩(wěn)定，提高生產(chǎn)效率。操作人員應(yīng)熟悉本規(guī)程，并嚴(yán)格遵守各項(xiàng)規(guī)定?；疽蟀ǎ鹤袷貒?guó)家相關(guān)法律法規(guī)，遵循菌種培育的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，確保生產(chǎn)環(huán)境符合衛(wèi)生要求，保障人員安全和健康。

二、技術(shù)準(zhǔn)備

1.技術(shù)條件

a.操作人員應(yīng)具備菌種培育的基本知識(shí)和技能，熟悉菌種特性、生長(zhǎng)條件及培育流程。

b.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備適宜的溫濕度、光照等環(huán)境條件，滿足菌種生長(zhǎng)需求。

c.嚴(yán)格按照無(wú)菌操作規(guī)程，確保菌種在培育過(guò)程中的安全性。

2.設(shè)備校驗(yàn)

a.檢查所有設(shè)備，如培養(yǎng)箱、離心機(jī)、顯微鏡等，確保其正常運(yùn)行。

b.對(duì)培養(yǎng)箱進(jìn)行溫度、濕度、CO2濃度等參數(shù)的校驗(yàn)，確保其符合培育要求。

c.對(duì)離心機(jī)進(jìn)行平衡測(cè)試，確保其運(yùn)行穩(wěn)定。

d.對(duì)顯微鏡進(jìn)行校準(zhǔn)，確保觀察結(jié)果的準(zhǔn)確性。

3.原料準(zhǔn)備

a.檢查原料質(zhì)量，確保符合菌種培育要求。

b.對(duì)原料進(jìn)行預(yù)處理，如滅菌、過(guò)濾等，消除潛在污染源。

4.培養(yǎng)基配制

a.根據(jù)菌種生長(zhǎng)需求，配制適宜的培養(yǎng)基。

b.按照規(guī)定比例稱取原料，加入適量的蒸餾水或去離子水。

c.混合均勻后，進(jìn)行高壓滅菌處理，確保培養(yǎng)基的無(wú)菌狀態(tài)。

5.參數(shù)設(shè)置

a.根據(jù)菌種特性，設(shè)定適宜的培育溫度、濕度、CO2濃度等參數(shù)。

b.設(shè)定適宜的培育時(shí)間，確保菌種生長(zhǎng)至最佳狀態(tài)。

c.設(shè)置培養(yǎng)箱中的通風(fēng)條件，保證菌種在適宜的氧氣濃度下生長(zhǎng)。

6.儀器設(shè)備準(zhǔn)備

a.檢查無(wú)菌操作箱、無(wú)菌操作臺(tái)等設(shè)備，確保其符合無(wú)菌操作要求。

b.準(zhǔn)備無(wú)菌操作所需的工具，如無(wú)菌鑷子、無(wú)菌移液器等。

c.檢查無(wú)菌手套、口罩等個(gè)人防護(hù)用品，確保其完好無(wú)損。

7.文檔記錄

a.準(zhǔn)備菌種培育記錄表，記錄操作過(guò)程、參數(shù)設(shè)置、觀察結(jié)果等。

b.做好實(shí)驗(yàn)記錄，便于后續(xù)分析和質(zhì)量追溯。

8.其他準(zhǔn)備

a.檢查實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，確保無(wú)污染源。

b.檢查應(yīng)急設(shè)備，如滅火器、急救箱等，確保其處于良好狀態(tài)。

c.確保操作人員具備應(yīng)急處理能力，熟悉應(yīng)急預(yù)案。

三、技術(shù)操作程序

1.操作順序

a.首先進(jìn)行設(shè)備檢查和校驗(yàn)，確保所有設(shè)備正常運(yùn)行。

b.準(zhǔn)備培養(yǎng)基，包括稱量、溶解、滅菌等步驟。

c.進(jìn)行無(wú)菌操作，包括穿戴無(wú)菌防護(hù)用品、準(zhǔn)備無(wú)菌操作環(huán)境。

d.接種菌種，按照無(wú)菌操作規(guī)程進(jìn)行。

e.將接種后的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱，設(shè)定培育參數(shù)。

f.定期觀察菌種生長(zhǎng)情況，記錄相關(guān)數(shù)據(jù)。

g.根據(jù)培育結(jié)果，進(jìn)行后續(xù)操作或調(diào)整培育參數(shù)。

2.技術(shù)方法

a.培養(yǎng)基配制：準(zhǔn)確稱量原料，加入適量溶劑，攪拌均勻后進(jìn)行高壓滅菌。

b.無(wú)菌操作：穿戴無(wú)菌防護(hù)用品，使用無(wú)菌工具進(jìn)行操作，確保環(huán)境無(wú)菌。

c.接種：使用無(wú)菌移液器吸取菌種，均勻接種于培養(yǎng)基表面。

d.培育：將接種后的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱，控制好溫度、濕度、CO2濃度等參數(shù)。

e.觀察與記錄：定期觀察菌種生長(zhǎng)情況，記錄顏色、形態(tài)、生長(zhǎng)速度等數(shù)據(jù)。

3.故障處理

a.設(shè)備故障：立即停止操作，查找故障原因，采取相應(yīng)措施修復(fù)或更換設(shè)備。

b.培養(yǎng)基污染：發(fā)現(xiàn)污染時(shí)，立即隔離污染區(qū)域，對(duì)污染物品進(jìn)行滅菌處理，重新配制培養(yǎng)基。

c.菌種生長(zhǎng)異常：分析可能原因，如培養(yǎng)基配制不當(dāng)、接種操作不規(guī)范等，調(diào)整操作流程或條件。

d.環(huán)境污染：發(fā)現(xiàn)環(huán)境污染時(shí)，立即進(jìn)行消毒處理，改善環(huán)境條件。

4.安全注意事項(xiàng)

a.操作過(guò)程中，嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程，防止交叉污染。

b.使用化學(xué)試劑時(shí)，注意個(gè)人防護(hù)，避免直接接觸皮膚和呼吸道。

c.使用高溫高壓設(shè)備時(shí)，注意安全操作，防止?fàn)C傷或爆炸。

d.在緊急情況下，迅速采取有效措施，確保人員安全。

5.結(jié)束操作

a.完成培育后，關(guān)閉培養(yǎng)箱，整理實(shí)驗(yàn)環(huán)境。

b.清潔實(shí)驗(yàn)器材，進(jìn)行消毒處理。

c.記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，整理實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

d.按規(guī)定進(jìn)行廢棄物處理。

四、設(shè)備技術(shù)狀態(tài)

1.技術(shù)參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)

a.溫度：培養(yǎng)箱、發(fā)酵罐等設(shè)備應(yīng)保持在設(shè)定溫度范圍內(nèi)，如37℃±1℃。

b.濕度：控制室、培養(yǎng)箱等環(huán)境應(yīng)保持恒定的濕度，如45%±5%。

c.CO2濃度：CO2培養(yǎng)箱應(yīng)能精確控制CO2濃度，如5%±1%。

d.氧氣濃度：需氧培養(yǎng)設(shè)備應(yīng)確保氧氣濃度在18%±2%。

e.壓力：發(fā)酵罐等設(shè)備應(yīng)保持穩(wěn)定的工作壓力，如0.1MPa±0.05MPa。

f.滅菌效果：高壓滅菌器應(yīng)達(dá)到121℃±3℃，維持20分鐘以上。

2.異常狀態(tài)識(shí)別

a.溫度異常：設(shè)備溫度超出設(shè)定范圍，如培養(yǎng)箱溫度過(guò)高或過(guò)低。

b.濕度異常：環(huán)境濕度波動(dòng)超出規(guī)定范圍。

c.CO2濃度異常：CO2培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度不符合要求。

d.氧氣濃度異常：需氧培養(yǎng)設(shè)備內(nèi)氧氣濃度不符合要求。

e.壓力異常：設(shè)備壓力波動(dòng)超出安全范圍。

f.滅菌效果異常：高壓滅菌器未能達(dá)到預(yù)期的滅菌效果。

3.狀態(tài)檢測(cè)方法

a.定期檢查：每日對(duì)設(shè)備進(jìn)行目視檢查，確保設(shè)備外觀無(wú)損傷，運(yùn)行正常。

b.溫濕度監(jiān)測(cè)：使用溫濕度計(jì)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)箱、控制室等環(huán)境的溫濕度。

c.CO2和氧氣濃度監(jiān)測(cè)：使用CO2和氧氣濃度計(jì)定期檢測(cè)培養(yǎng)箱、發(fā)酵罐等設(shè)備內(nèi)的氣體濃度。

d.壓力檢測(cè)：使用壓力表檢查發(fā)酵罐、培養(yǎng)箱等設(shè)備的工作壓力。

e.滅菌效果檢測(cè)：定期對(duì)高壓滅菌器進(jìn)行效能測(cè)試，確保其滅菌效果。

f.儀器校準(zhǔn)：定期對(duì)溫濕度計(jì)、CO2和氧氣濃度計(jì)、壓力表等儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，確保其準(zhǔn)確性。

4.維護(hù)與保養(yǎng)

a.定期清潔設(shè)備，去除污垢和殘留物，防止交叉污染。

b.檢查設(shè)備緊固件，確保設(shè)備連接牢固。

c.檢查密封件，如橡膠墊圈，確保其完好無(wú)損。

d.檢查電氣系統(tǒng)，確保電路連接正確，無(wú)短路或漏電現(xiàn)象。

e.對(duì)易損部件進(jìn)行更換，如傳感器、加熱元件等。

f.記錄維護(hù)保養(yǎng)情況，包括時(shí)間、內(nèi)容、更換部件等，便于跟蹤和追溯。

5.故障處理

a.立即停止使用設(shè)備，防止事故擴(kuò)大。

b.識(shí)別故障原因，采取相應(yīng)措施排除故障。

c.如果無(wú)法自行處理，通知維修人員或設(shè)備供應(yīng)商。

d.記錄故障處理過(guò)程，包括故障現(xiàn)象、處理措施、處理結(jié)果等。

五、技術(shù)測(cè)試與校準(zhǔn)

1.測(cè)試方法

a.溫度測(cè)試：使用高精度溫度計(jì)對(duì)培養(yǎng)箱、發(fā)酵罐等設(shè)備的溫度進(jìn)行測(cè)試，確保其符合設(shè)定溫度范圍。

b.濕度測(cè)試：使用濕度計(jì)對(duì)培養(yǎng)室、培養(yǎng)箱等環(huán)境的濕度進(jìn)行測(cè)試，確保其濕度穩(wěn)定在規(guī)定范圍內(nèi)。

c.CO2濃度測(cè)試：使用CO2濃度計(jì)對(duì)CO2培養(yǎng)箱內(nèi)的氣體濃度進(jìn)行測(cè)試，確保其濃度準(zhǔn)確。

d.氧氣濃度測(cè)試：使用氧氣濃度計(jì)對(duì)需氧培養(yǎng)設(shè)備內(nèi)的氧氣濃度進(jìn)行測(cè)試，確保其濃度符合要求。

e.壓力測(cè)試：使用壓力表對(duì)發(fā)酵罐、培養(yǎng)箱等設(shè)備的工作壓力進(jìn)行測(cè)試，確保壓力穩(wěn)定。

f.滅菌效果測(cè)試：定期對(duì)高壓滅菌器進(jìn)行效能測(cè)試，包括溫度、壓力、時(shí)間等參數(shù)，確保滅菌效果。

2.校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)

a.溫度計(jì)：使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)作為參照，對(duì)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有溫度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。

b.濕度計(jì)：使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)濕度計(jì)作為參照，對(duì)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有濕度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。

c.CO2和氧氣濃度計(jì)：使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)氣體濃度計(jì)作為參照，對(duì)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有相關(guān)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。

d.壓力表：使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)壓力表作為參照，對(duì)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有壓力表進(jìn)行校準(zhǔn)。

e.高壓滅菌器：根據(jù)制造商提供的校準(zhǔn)指南，對(duì)高壓滅菌器進(jìn)行定期校準(zhǔn)。

3.結(jié)果處理

a.記錄所有測(cè)試和校準(zhǔn)結(jié)果，包括測(cè)試時(shí)間、儀器型號(hào)、測(cè)試值、標(biāo)準(zhǔn)值等。

b.分析測(cè)試結(jié)果，如果測(cè)試值與標(biāo)準(zhǔn)值存在偏差，分析原因并采取相應(yīng)措施。

c.對(duì)不合格的設(shè)備進(jìn)行維修或更換，確保設(shè)備性能符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

d.定期審查測(cè)試和校準(zhǔn)記錄，確保記錄完整、準(zhǔn)確。

e.對(duì)校準(zhǔn)后的設(shè)備貼上校準(zhǔn)標(biāo)簽，注明校準(zhǔn)日期和下次校準(zhǔn)日期。

4.校準(zhǔn)周期

a.溫度計(jì)、濕度計(jì)、CO2和氧氣濃度計(jì)等：每年至少校準(zhǔn)一次。

b.壓力表：每半年至少校準(zhǔn)一次。

c.高壓滅菌器：每季度至少校準(zhǔn)一次。

5.校準(zhǔn)后的驗(yàn)證

a.校準(zhǔn)后的設(shè)備應(yīng)在正常工作條件下進(jìn)行驗(yàn)證，確保其性能穩(wěn)定。

b.記錄驗(yàn)證結(jié)果，包括驗(yàn)證時(shí)間、驗(yàn)證條件、驗(yàn)證值等。

c.如驗(yàn)證結(jié)果不合格，應(yīng)重新校準(zhǔn)或更換設(shè)備。

六、技術(shù)操作姿勢(shì)

1.操作姿態(tài)

a.站立姿勢(shì)：操作時(shí)保持身體直立，雙腳與肩同寬，避免長(zhǎng)時(shí)間站立導(dǎo)致的疲勞。

b.坐姿：在操作臺(tái)前工作時(shí)，選擇合適的椅子，保持背部挺直，雙腳平放在地面，避免長(zhǎng)時(shí)間保持同一姿勢(shì)。

c.手臂位置：手臂自然下垂，操作時(shí)保持手腕放松，避免過(guò)度彎曲或扭曲。

d.頭部位置：保持頭部直立，視線與操作物品保持水平，避免長(zhǎng)時(shí)間低頭或仰頭。

2.移動(dòng)范圍

a.操作區(qū)域：保持操作區(qū)域整潔，避免物品堆放過(guò)高或過(guò)密，確保操作人員有足夠的空間進(jìn)行移動(dòng)。

b.行走路線：行走時(shí)選擇最短路徑，避免頻繁折返和繞道。

c.轉(zhuǎn)身空間：在轉(zhuǎn)身時(shí)確保有足夠的空間，避免碰撞或擠壓。

3.休息安排

a.工作周期：每工作45-60分鐘后，應(yīng)至少休息5-10分鐘，進(jìn)行簡(jiǎn)單的伸展或走動(dòng)，以緩解肌肉緊張。

b.休息區(qū)域：設(shè)置專門的休息區(qū)域，提供舒適的座椅和適宜的休息環(huán)境。

c.休息時(shí)間：根據(jù)工作強(qiáng)度和個(gè)體差異，合理安排休息時(shí)間，確保身體得到充分恢復(fù)。

4.個(gè)人防護(hù)

a.穿著合適的防護(hù)服，如實(shí)驗(yàn)服、防護(hù)鞋等，以防止化學(xué)物質(zhì)或生物污染。

b.使用防護(hù)眼鏡或面罩，保護(hù)眼睛和面部不受傷害。

c.根據(jù)操作需求，佩戴手套、口罩等個(gè)人防護(hù)用品。

5.環(huán)境因素

a.確保工作環(huán)境通風(fēng)良好，保持空氣新鮮，避免有害氣體或粉塵的積累。

b.控制室內(nèi)溫度和濕度，確保操作人員在舒適的環(huán)境中工作。

c.避免強(qiáng)光直射，使用護(hù)眼燈或調(diào)整工作臺(tái)位置，減少眼睛疲勞。

6.安全意識(shí)

a.操作前了解并熟悉所有安全規(guī)程，確保自身和他人的安全。

b.在操作過(guò)程中，時(shí)刻保持警惕，注意周圍環(huán)境變化，防止意外發(fā)生。

c.發(fā)生緊急情況時(shí)，迅速采取正確的應(yīng)對(duì)措施，確保人員安全。

七、技術(shù)注意事項(xiàng)

1.技術(shù)要點(diǎn)

a.嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)程，確保菌種培育過(guò)程的無(wú)菌性。

b.掌握菌種生長(zhǎng)的最佳條件，如溫度、濕度、pH值等，以促進(jìn)菌種健康生長(zhǎng)。

c.正確使用實(shí)驗(yàn)設(shè)備，了解其操作原理和注意事項(xiàng)，避免誤操作。

d.定期檢查和維護(hù)設(shè)備，確保其正常運(yùn)行，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并解決潛在問(wèn)題。

e.嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行操作，不得隨意更改實(shí)驗(yàn)參數(shù)，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.避免的錯(cuò)誤

a.避免在無(wú)菌操作過(guò)程中觸碰非無(wú)菌物品或區(qū)域，防止交叉污染。

b.避免使用未經(jīng)過(guò)滅菌處理的工具或耗材，確保實(shí)驗(yàn)的無(wú)菌性。

c.避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在有害氣體或化學(xué)物質(zhì)中，采取適當(dāng)防護(hù)措施。

d.避免在操作過(guò)程中分心，確保注意力集中，防止操作失誤。

e.避免在不適當(dāng)?shù)臏囟然驖穸葪l件下保存菌種，影響菌種質(zhì)量。

3.必須遵守的紀(jì)律

a.嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度，保持實(shí)驗(yàn)室整潔、有序。

b.不得在實(shí)驗(yàn)室飲食、吸煙或使用明火，確保實(shí)驗(yàn)室安全。

c.不得擅自更改實(shí)驗(yàn)設(shè)備和實(shí)驗(yàn)材料，未經(jīng)批準(zhǔn)不得隨意處理廢棄物。

d.不得將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)隨意篡改，保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)性和可靠性。

e.不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的活動(dòng)，確保實(shí)驗(yàn)效率。

4.安全防護(hù)

a.使用個(gè)人防護(hù)裝備，如防護(hù)服、手套、護(hù)目鏡等，防止化學(xué)物質(zhì)或生物物質(zhì)的傷害。

b.在操作有害化學(xué)品時(shí)，佩戴防毒面具，避免吸入有害氣體。

c.了解實(shí)驗(yàn)室緊急處理流程，如火災(zāi)、化學(xué)泄漏等，確保在緊急情況下能夠迅速應(yīng)對(duì)。

d.定期參加安全培訓(xùn)，提高安全意識(shí)和應(yīng)急處理能力。

5.溝通與合作

a.與同事保持良好溝通，及時(shí)分享實(shí)驗(yàn)進(jìn)展和問(wèn)題，共同解決問(wèn)題。

b.遵守團(tuán)隊(duì)協(xié)作原則，尊重他人意見(jiàn)，共同完成實(shí)驗(yàn)任務(wù)。

c.在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，保持謙遜和學(xué)習(xí)的態(tài)度，不斷提高自身技術(shù)水平。

八、作業(yè)收尾處理

1.數(shù)據(jù)記錄

a.完成實(shí)驗(yàn)后，及時(shí)、準(zhǔn)確記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，包括菌種生長(zhǎng)情況、培養(yǎng)條件、觀察結(jié)果等。

b.數(shù)據(jù)記錄應(yīng)清晰、完整，便于后續(xù)分析和查閱。

c.對(duì)異常數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，查找原因，并記錄在案。

2.設(shè)備狀態(tài)確認(rèn)

a.操作結(jié)束后，檢查設(shè)備是否處于正常狀態(tài)，包括溫度、濕度、壓力等參數(shù)。

b.確認(rèn)設(shè)備無(wú)損壞，如有異常，及時(shí)報(bào)告并處理。

c.關(guān)閉所有設(shè)備，確保安全。

3.資料整理

a.整理實(shí)驗(yàn)記錄、報(bào)告、數(shù)據(jù)等資料，歸檔保存。

b.對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用的耗材、試劑等進(jìn)行清點(diǎn)，確保無(wú)誤。

c.清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)面和設(shè)備，保持實(shí)驗(yàn)室整潔。

4.廢棄物處理

a.對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的廢棄物進(jìn)行分類，按照規(guī)定進(jìn)行無(wú)害化處理。

b.確保廢棄物處理符合環(huán)保要求，避免污染環(huán)境。

5.安全檢查

a.檢查實(shí)驗(yàn)室門窗是否關(guān)閉，確保實(shí)驗(yàn)室安全。

b.確認(rèn)所有設(shè)備已關(guān)閉，電源切斷，防止意外發(fā)生。

6.交接工作

a.如有需要，將實(shí)驗(yàn)情況和后續(xù)工作交接給下一班次或相關(guān)人員。

b.確保交接過(guò)程清晰、完整，避免信息遺漏。

九、技術(shù)故障處理

1.故障診斷

a.迅速識(shí)別故障現(xiàn)象，如設(shè)備異常、數(shù)據(jù)異常、操作異常等。

b.收集相關(guān)信息，包括故障發(fā)生的時(shí)間、環(huán)境條件、操作步驟等。

c.分析故障