ICS65.020.20

CCSB05

4114

商丘市地方標(biāo)準(zhǔn)

DB4114/T214—2023

馬鈴薯容器薯生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

2023-10-12發(fā)布2023-11-12實(shí)施

商丘市市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB4114/T214—2023

目次

前言.................................................................................II

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術(shù)語和定義.........................................................................1

4容器薯生產(chǎn)設(shè)施設(shè)備.................................................................1

5容器薯生產(chǎn)技術(shù).....................................................................2

6容器薯生產(chǎn).........................................................................2

附錄A（資料性）容器薯生產(chǎn)設(shè)備清單...................................................4

附錄B（資料性）常用試劑及植物生長物質(zhì)的配制.........................................5

附錄C（資料性）MS培養(yǎng)基母液成分及配制..............................................6

I

DB4114/T214—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由商丘市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出并歸口。

本文件起草單位：河南德道農(nóng)業(yè)科技有限公司、商丘師范學(xué)院、商丘職業(yè)技術(shù)學(xué)院、商丘市睢陽區(qū)

農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、商丘市睢陽區(qū)經(jīng)濟(jì)作物技術(shù)推廣中心、寧陵縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、商丘市梁園區(qū)農(nóng)業(yè)機(jī)械發(fā)展中

心、商丘市鄉(xiāng)村產(chǎn)業(yè)發(fā)展中心

本文件主要起草人：陳亞偉、馬麗、紀(jì)耀坤、李淑敏、軒青霞、路楠、蘇寒、劉為慧、何濤、劉靖、

李知翰、張馳

II

DB4114/T214—2023

馬鈴薯容器薯生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了馬鈴薯容器薯生產(chǎn)術(shù)語和定義、容器薯生產(chǎn)設(shè)施設(shè)備、容器薯生產(chǎn)技術(shù)、容器薯生產(chǎn)

等。

本文件適用于商丘市區(qū)域馬鈴薯容器薯生產(chǎn)

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB18133馬鈴薯種薯

GB/T29375馬鈴薯脫毒試管苗繁育技術(shù)規(guī)程

GB/T29376馬鈴薯脫毒原原種繁育技術(shù)規(guī)程

NY/T401脫毒馬鈴薯種薯（苗）病毒檢測技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

脫毒苗

應(yīng)用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的再生試管苗，經(jīng)檢測不帶馬鈴薯X病毒(PVX)、馬鈴薯Y病毒(PVY)、馬

鈴薯S病毒(PVS)、馬鈴薯卷葉病毒(PLRV)、馬鈴薯A病毒（PVA）等病毒和馬鈴薯紡錘塊莖類病毒(PSTVd)

，即為脫毒苗。

3.2

容器薯

用脫毒苗組織培養(yǎng)的方法,在培養(yǎng)容器內(nèi)通過誘導(dǎo)生產(chǎn)的微型小薯。

4容器薯生產(chǎn)設(shè)施設(shè)備

4.1組織培養(yǎng)室

面積20m2?40m2可調(diào)溫,調(diào)濕,調(diào)光,消毒滅菌處理,能進(jìn)行脫毒苗有光培養(yǎng)和暗培養(yǎng)誘導(dǎo)的培養(yǎng)室.

4.2容器

直徑不小于6.5cm普通廣口玻璃瓶.

4.3生產(chǎn)設(shè)備

1

DB4114/T214—2023

容器薯所需主要設(shè)備參見附錄表A

4.4玻璃器皿及耗材

包括盛裝器皿（燒杯、試劑瓶等）、計(jì)量器皿（量筒、容量瓶等）以及其他常用消耗品等。主要有：

試劑瓶、容量瓶、燒杯、玻璃棒、洗瓶、培養(yǎng)瓶及瓶蓋、瓶刷、工作服、手套等。

5容器薯生產(chǎn)技術(shù)

5.1母液的配制與保存

配制基本培養(yǎng)基母液，MS基本培養(yǎng)基母液配制比例參見附錄C。配制應(yīng)使用去離子水，配好的母液

置于4℃保存，母液保存期應(yīng)不超過30d。母液容器上應(yīng)貼好標(biāo)簽，注明名稱、配制日期。

5.2培養(yǎng)基制作

擴(kuò)繁培養(yǎng)基：MS+蔗糖30g/L+瓊脂7g，pH5.8，固體培養(yǎng)基。1L固體培養(yǎng)基加蒸餾水700mL（按

所需容量的70%左右），再加入瓊脂7g，加熱并不斷攪拌使瓊脂完全融化。加入蔗糖30g，待完全溶

解后，按附錄A加入母液，再根據(jù)要求加入適量植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)并充分?jǐn)嚢?，最后定容?L。用0.1

mol/L的HCL或0.1mol/L的NaOH調(diào)節(jié)pH值至5.8。制作液體培養(yǎng)基的過程與固態(tài)培養(yǎng)基基本相同，但不需

要加瓊脂，加熱時(shí)間可以適當(dāng)縮短。

壯苗培養(yǎng)基：MS+蔗糖30g/L，pH5.8，液體培養(yǎng)基。

試管薯誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS+500mg/LCCC+80g/L白糖+0.1%活性炭，pH5.8，液體培養(yǎng)基。

常用試劑及植物生長物質(zhì)的配制見附錄B。

5.3培養(yǎng)基滅菌

制作好的培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)瓶中后，裝入高壓滅菌鍋，在0.1Mpa壓力下溫度115℃滅菌22min，

取出后水平擺放，冷卻備用。

6容器薯生產(chǎn)

6.1誘導(dǎo)材料選取

馬鈴薯種薯符合GB18133規(guī)定。選擇具備該品種典型性狀的株系，挑選植株健壯、長勢良好、莖稈

粗壯、根系發(fā)達(dá)的脫毒苗作為誘導(dǎo)材料。

6.2脫毒苗繁育

6.2.1脫毒苗轉(zhuǎn)接

馬鈴薯脫毒苗繁育符合GB/T29375規(guī)定。將健壯基礎(chǔ)苗剪去頂芽和基部莖節(jié)，留中間帶4個(gè)～6個(gè)

節(jié)的莖段，轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)基用淺層靜止方式培養(yǎng)。3周～4周后每個(gè)莖段發(fā)育成一株帶有5個(gè)～7個(gè)節(jié)

的健壯苗。

6.2.2培養(yǎng)條件

培養(yǎng)室溫度為白天23℃～25℃、夜間16℃～20℃,光照時(shí)間16h/d，光照強(qiáng)度2500Lx～4000Lx

以上。

2

DB4114/T214—2023

6.2.3病毒檢測

病毒檢測符合NY/T401規(guī)定。

6.3容器薯誘導(dǎo)

在無菌條件下，將培養(yǎng)瓶中原來的培養(yǎng)基倒掉，再注入誘導(dǎo)結(jié)薯培養(yǎng)基。在室溫及光照16h/d條

件下培養(yǎng)48h以促進(jìn)匍匐莖的形成，然后轉(zhuǎn)入18℃±1℃黑暗間散射光(8h/d，光照強(qiáng)度500Lx～1000

Lx)培養(yǎng)，3d～4d后便可以產(chǎn)生容器薯，40d～45d容器薯發(fā)育到直徑5mm以上可以收獲。符合GB/T29376

規(guī)定。

6.4收獲及儲(chǔ)存

收獲時(shí)將容器薯及莖段從培養(yǎng)瓶中取出，摘取符合收獲標(biāo)準(zhǔn)的小薯，用清水多次沖洗，直至洗凈

表面附著的培養(yǎng)基，于陰涼處陰干或烘干，再貯藏于透氣的容器中，置于4℃條件下保存。容器薯經(jīng)國

家法定植檢部門檢驗(yàn)合格后，方可作為商品容器種薯。

3

DB4114/T214—2023

A

A

附錄A

（資料性）

容器薯生產(chǎn)設(shè)備清單

容器薯生產(chǎn)設(shè)備清單見表A.1。

表A.1容器薯生產(chǎn)設(shè)備清單

設(shè)備名稱型號(hào)單位數(shù)量

耐高溫組培筐52.5cm×42.5cm×7cm個(gè)500

鋼質(zhì)洗瓶槽XSC-3套4

半自動(dòng)洗瓶機(jī)NH-CX-12臺(tái)1

超純水機(jī)SH-H-CSJ120臺(tái)1

培養(yǎng)基加熱爐NH-H28臺(tái)1

培養(yǎng)基自助灌裝機(jī)2D70SJ臺(tái)1

超凈工作臺(tái)NH-CJ-2S臺(tái)4

接種器具殺菌器NH-330/nH350臺(tái)5

高效節(jié)能培養(yǎng)架NH-PYJ-10A套100

臭氧發(fā)生器120臺(tái)2

生物顯微鏡XSP-8C臺(tái)1

電子天平（1/10000g）FA1104A臺(tái)1

電子天平（1/1000g）JA2103N臺(tái)1

電子秤ACS-3臺(tái)1

酸度計(jì)PHS-3C臺(tái)1

高壓滅菌鍋DSX-280B臺(tái)1

低溫低濕柜CZ-250FC臺(tái)1

智能光照培養(yǎng)箱GTOP-310B臺(tái)1

空調(diào)新風(fēng)系統(tǒng)KFR-35GW/BP3DNIY臺(tái)2

冰箱BCD-88CM88L臺(tái)1

4

DB4114/T214—2023

B

B

附錄B

（資料性）

常用試劑及植物生長物質(zhì)的配制

B.10.1mol/LHCl的配制：根據(jù)鹽酸的密度37%鹽酸溶液的密度為1.19g/mL，假設(shè)要配制1000

mL1mol/LHCl，則需要鹽酸的物質(zhì)的量為1mol，所以需要量取37%的鹽酸為0.1*36.5/37%/1.19=8.2

mL

B.20.1mol/LNaOH的配制：稱0.4gNaOH，溶于100mL蒸餾水中。

B.395%的酒精配制成75%的酒精：用量筒量取750mL的95%酒精加入200mL的蒸餾水，即可得到75%

的酒精。

5

DB4114/T214—2023

C

C

附錄C

（資料性）

MS培養(yǎng)基母液成分及配制

MS培養(yǎng)基母液成分及配制見表C.1。

表C.1MS培養(yǎng)基母液成分及配制

配制1升MS培養(yǎng)基吸取

母液種類成分稱取用量（g）母液定容體積（mL）

量（mL）

CaCl2(無水)3.32

KNO319.0

大量元素

KH2PO41.71000100

（A）

NH4NO316.5

MgSO4·7H2O3.7

H3BO30.620

MnSO4·H2O2.230

ZnSO4·7H2O0.860

微量元素

KI0.08310