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檢驗科專業(yè)技術(shù)規(guī)范與崗位操作手冊一、標(biāo)本管理規(guī)范(一)標(biāo)本采集技術(shù)規(guī)范1.血液標(biāo)本采集患者準(zhǔn)備:生化、血脂等項目需空腹8-12小時,避免劇烈運動;抗凝治療患者血常規(guī)檢測需備注用藥情況。容器選擇:血清學(xué)檢測用無抗凝管,血常規(guī)用EDTA-K?抗凝管,凝血功能用枸櫞酸鈉抗凝管(嚴(yán)格按1:9比例采集)。操作要點:75%酒精消毒皮膚(待干后穿刺),避免過度擠壓血管;采集后輕柔顛倒抗凝管(避免凝塊),血清管靜置30分鐘后離心,防止溶血。2.尿液標(biāo)本采集清潔中段尿:女性清潔外陰、男性清潔尿道口,留取中段尿(10-20ml),2小時內(nèi)送檢;培養(yǎng)標(biāo)本需用無菌容器,采集后立即送檢。24小時尿:加入防腐劑(如甲苯、濃鹽酸),準(zhǔn)確記錄總量,混勻后取10-20ml送檢。3.體液標(biāo)本采集(胸水、腹水、腦脊液等)無菌操作:嚴(yán)格消毒穿刺部位,使用無菌容器;腦脊液常規(guī)+生化采集3-5ml,培養(yǎng)標(biāo)本需專用培養(yǎng)基;采集后立即送檢,必要時加抗凝劑防止凝固。(二)標(biāo)本接收與處理規(guī)范1.標(biāo)本接收信息核對:確認(rèn)患者姓名、標(biāo)本類型、采集時間與申請單一致,條碼/標(biāo)識清晰完整。質(zhì)量檢查:血液標(biāo)本無溶血、凝塊,尿液無明顯污染,體液無凝固/渾濁異常(如腦脊液渾濁需備注)。不合格處理:及時與臨床溝通(說明溶血、采集量不足等原因),建議重新采集,記錄處理過程。2.標(biāo)本處理離心:血清/血漿標(biāo)本3000rpm離心10分鐘(溫度依項目調(diào)整),分離后避免反復(fù)凍融。分裝與保存:檢測用與備用標(biāo)本分離標(biāo)記,備用標(biāo)本按要求保存(如-20℃或-80℃);運輸時防震、防漏,冷鏈標(biāo)本用保溫箱加冰袋。二、檢驗設(shè)備操作規(guī)范(一)生化分析儀操作規(guī)范1.開機與關(guān)機開機:檢查電源、試劑倉溫度(37℃恒溫),自檢通過后裝載試劑(核對批號、有效期)。關(guān)機:執(zhí)行清洗程序(管路、比色杯),關(guān)閉制冷,退出軟件并斷電,記錄運行情況。2.日常維護每日:清潔表面,檢查試劑余量,更換廢液桶,清洗比色杯(清洗液浸泡+超聲)。每周:校準(zhǔn)(校準(zhǔn)品驗證線性),檢查泵管磨損,清潔散熱口。每月:維護光路(清潔濾光片),校準(zhǔn)加樣針精度(測試加樣量準(zhǔn)確性)。3.故障處理加樣針堵塞:通針清理,檢查液面探測功能,必要時更換針組件。試劑報警:檢查試劑耗盡/管路堵塞,更換試劑或疏通管路。(二)血細(xì)胞分析儀操作規(guī)范1.操作流程開機:預(yù)熱30分鐘,加載稀釋液/溶血劑,質(zhì)控品檢測在控后啟動樣本檢測。樣本檢測:充分混勻標(biāo)本(顛倒10次),上機后觀察直方圖/散點圖(異常結(jié)果推片鏡檢)。關(guān)機:執(zhí)行清洗程序(管路、計數(shù)池),關(guān)閉試劑供應(yīng),記錄狀態(tài)。2.維護要點每日:清潔進樣針,更換廢液,室內(nèi)質(zhì)控。每周:校準(zhǔn)(調(diào)整計數(shù)參數(shù)),清潔計數(shù)池(專用清潔液)。(三)PCR儀操作規(guī)范1.操作流程核酸提?。荷锇踩駜?nèi)操作(帶濾芯槍頭,分區(qū):試劑準(zhǔn)備/樣本處理/擴增),避免交叉污染。PCR擴增:設(shè)置程序(變性、退火、延伸溫度/時間),裝載反應(yīng)管(無氣泡),擴增后在擴增區(qū)操作產(chǎn)物。2.污染防控分區(qū)管理:試劑、樣本、擴增、產(chǎn)物分析嚴(yán)格分區(qū),工具專用。環(huán)境消毒:工作區(qū)紫外線照射(30分鐘/次),臺面用10%次氯酸鈉消毒,定期監(jiān)測環(huán)境核酸污染。三、檢測技術(shù)規(guī)范(一)血常規(guī)檢測(以電阻抗法為例)1.操作步驟標(biāo)本處理:充分混勻EDTA抗凝全血(放置過久需37℃溫育后重混)。上機檢測:設(shè)置參數(shù),加載標(biāo)本,觀察直方圖(如紅細(xì)胞直方圖異常提示貧血類型)。結(jié)果審核:結(jié)合臨床信息,異常結(jié)果推片鏡檢(瑞氏染色,油鏡觀察細(xì)胞形態(tài))。(二)生化檢測(以肝功能ALT為例)1.操作步驟試劑準(zhǔn)備:復(fù)溶干粉試劑(避免起泡),2-8℃保存(避免反復(fù)凍融)。樣本處理:血清分離后2小時內(nèi)檢測,脂血樣本高速離心(____rpm,10分鐘)去脂蛋白。結(jié)果審核:對比質(zhì)控結(jié)果,異常結(jié)果(如超出線性)稀釋重測,結(jié)合臨床反饋調(diào)整報告。(三)免疫檢測(以ELISA為例)1.操作步驟試劑平衡:試劑盒室溫放置30分鐘,稀釋洗滌液(按說明書比例)。加樣與孵育:樣本/標(biāo)準(zhǔn)品/質(zhì)控品加樣(帶濾芯槍頭),37℃孵育30分鐘,棄液后拍干。洗滌與顯色:洗滌3-5次(拍干),加酶標(biāo)試劑孵育,加底物(避光15分鐘),加終止液后測吸光度。(四)分子診斷(以新冠核酸檢測為例)1.操作步驟核酸提?。荷锇踩駜?nèi)操作,樣本與裂解液混合,磁珠法提取核酸(避免RNA降解)。PCR擴增:設(shè)置程序(逆轉(zhuǎn)錄50℃15分鐘,循環(huán)45次),加載反應(yīng)管后上機。結(jié)果判讀:ORF1ab和N基因均擴增(Ct≤35)為陽性;單基因陽性/Ct35-40需復(fù)查。四、質(zhì)量控制體系(一)室內(nèi)質(zhì)量控制1.質(zhì)控品管理選擇匹配項目的質(zhì)控品(含醫(yī)學(xué)決定水平),每批次檢測前/中/后測定。2.失控處理停止檢測,分析質(zhì)控圖(Levey-Jennings圖),查找原因(試劑/儀器/操作),糾正后重測質(zhì)控品,記錄過程。(二)室間質(zhì)量評價1.樣本處理與上報按常規(guī)處理質(zhì)評樣本,規(guī)定時間內(nèi)檢測并上報(注明方法/儀器/試劑)。2.結(jié)果分析對比靶值偏差,查找差異原因(方法學(xué)/試劑批次),制定改進措施。(三)質(zhì)量體系管理1.SOP文件定期審核更新(每年≥1次),員工嚴(yán)格按SOP操作,記錄過程。2.人員培訓(xùn)新員工崗前培訓(xùn)(理論+實操,考核合格上崗),在職員工定期培訓(xùn)(新技術(shù)/質(zhì)控)。五、崗位操作流程(一)標(biāo)本接收崗1.操作流程核對標(biāo)本與申請單信息,檢查質(zhì)量,錄入LIS系統(tǒng),分類送檢(急查/冷藏標(biāo)本標(biāo)記)。不合格標(biāo)本通知臨床,記錄并保存24小時待查。(二)檢測崗1.操作流程儀器自檢/校準(zhǔn)/質(zhì)控,接收標(biāo)本后處理(離心/分裝),上機檢測,記錄數(shù)據(jù),異常結(jié)果重測并排查原因。(三)報告審核崗1.操作流程核對結(jié)果關(guān)聯(lián)性(如ALT與膽紅素),異常結(jié)果復(fù)核,生成報告后發(fā)送臨床,解答咨詢/處理投訴。(四)設(shè)備維護崗1.操作流程日常維護(清潔/潤滑/換耗材),定期校準(zhǔn)/質(zhì)控,故障排查維修(記錄原因/方法),管理試劑(驗收/庫存/報廢)。六、生物安全與職業(yè)防護(一)生物安全管理1.標(biāo)本處理生物安全柜內(nèi)操作,醫(yī)療廢物分類(感染性/損傷性),每日含氯消毒劑擦拭臺面,紫外線照射空氣。2.應(yīng)急預(yù)案標(biāo)本泄漏:吸水紙覆蓋+含氯消毒劑(1000mg/L)作用30分鐘,清理后消毒。銳器傷:擠出傷口血液,肥皂水沖洗+75%酒精消毒,報告院感科隨訪。(二)職業(yè)防護1.個人防護操作時戴

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