生物生產(chǎn)技術(shù)試題及答案一、單項選擇題（每題2分，共30分）1.下列哪種微生物發(fā)酵時需要嚴(yán)格厭氧條件？A.酵母菌B.醋酸菌C.乳酸菌D.青霉菌答案：C。乳酸菌是厭氧菌，在發(fā)酵過程中嚴(yán)格厭氧條件下進(jìn)行乳酸發(fā)酵。酵母菌在有氧和無氧條件下都能生存，有氧時進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，無氧時進(jìn)行酒精發(fā)酵；醋酸菌是好氧菌；青霉菌是好氧真菌。2.植物組織培養(yǎng)過程中，愈傷組織的形成和形態(tài)發(fā)生是十分關(guān)鍵的一步。這除需要必備的營養(yǎng)和一些刺激因素外，還需要有起誘導(dǎo)作用的物質(zhì)，它是A.銅、鋅等微量元素B.細(xì)胞分裂素和生長素C.蔗糖和葡萄糖D.維生素和氨基酸答案：B。在植物組織培養(yǎng)中，細(xì)胞分裂素和生長素的比例可以調(diào)控愈傷組織的形成和分化。當(dāng)細(xì)胞分裂素與生長素的比例高時，有利于芽的分化；比例低時，有利于根的分化；比例適中時，促進(jìn)愈傷組織的形成。微量元素、糖類、維生素和氨基酸等是組織培養(yǎng)中的營養(yǎng)物質(zhì)，不是起誘導(dǎo)作用的關(guān)鍵物質(zhì)。3.下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是A.培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會發(fā)生改變C.二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D.惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)答案：D。具有接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上只能形成單層細(xì)胞，A錯誤；克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細(xì)胞的基因型不會發(fā)生改變，B錯誤；二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是有限的，一般傳至1050代就會出現(xiàn)核型變化等，C錯誤；惡性細(xì)胞系的細(xì)胞具有不死性，可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，D正確。4.下列關(guān)于單克隆抗體制備過程的敘述，正確的是A.制備過程中不需要動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B.雜交瘤細(xì)胞具有漿細(xì)胞與癌細(xì)胞的所有特點(diǎn)C.經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細(xì)胞即可用于單克隆抗體的生產(chǎn)D.單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑答案：D。單克隆抗體制備過程中需要動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)來培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞等，A錯誤；雜交瘤細(xì)胞具有漿細(xì)胞分泌抗體和癌細(xì)胞無限增殖的特點(diǎn)，但不是具有二者所有特點(diǎn)，B錯誤；經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細(xì)胞還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，才能用于單克隆抗體的生產(chǎn)，C錯誤；單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑，D正確。5.基因工程中，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法是A.顯微注射法B.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法C.基因槍法D.花粉管通道法答案：B。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法，它利用農(nóng)桿菌能感染植物細(xì)胞并將其Ti質(zhì)粒上的TDNA轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的特點(diǎn)。顯微注射法是將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞的常用方法；基因槍法和花粉管通道法也是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法，但不是最常用的。6.下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法，錯誤的是A.蛋白質(zhì)工程能定向改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)，使之更加符合人類需要B.蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作，定向改變分子的結(jié)構(gòu)C.蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生自然界中不曾存在的新型蛋白質(zhì)分子D.蛋白質(zhì)工程與基因工程密不可分，又稱為第二代基因工程答案：B。蛋白質(zhì)工程是通過對基因進(jìn)行改造或合成新的基因來定向改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)，而不是直接對蛋白質(zhì)分子進(jìn)行操作，B錯誤。蛋白質(zhì)工程能定向改造蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)以符合人類需求，能產(chǎn)生自然界不存在的新型蛋白質(zhì)，它與基因工程密切相關(guān)，被稱為第二代基因工程，A、C、D正確。7.下列有關(guān)固定化酶和固定化細(xì)胞的說法，正確的是A.某種固定化酶的優(yōu)勢在于能催化一系列生化反應(yīng)B.固定化細(xì)胞技術(shù)一次只能固定一種酶C.固定化酶和固定化細(xì)胞都能反復(fù)使用，但酶的活性迅速下降D.固定化細(xì)胞常用包埋法，固定化酶常用物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法答案：D。固定化酶只能催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)，A錯誤；固定化細(xì)胞技術(shù)可以固定一系列酶，B錯誤；固定化酶和固定化細(xì)胞都能反復(fù)使用，且酶的活性一般不會迅速下降，C錯誤；固定化細(xì)胞常用包埋法，固定化酶常用物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法，D正確。8.下列關(guān)于PCR技術(shù)的敘述，正確的是A.PCR技術(shù)建立在對擴(kuò)增的目的基因序列完全已知的基礎(chǔ)上B.該技術(shù)需要解旋酶和熱穩(wěn)定的DNA聚合酶C.PCR技術(shù)中以核糖核苷酸為原料，以指數(shù)方式擴(kuò)增D.應(yīng)用PCR技術(shù)與探針雜交技術(shù)可以檢測基因突變答案：D。PCR技術(shù)不需要對擴(kuò)增的目的基因序列完全已知，只要知道部分序列就可以設(shè)計引物進(jìn)行擴(kuò)增，A錯誤；PCR技術(shù)通過高溫解旋，不需要解旋酶，需要熱穩(wěn)定的DNA聚合酶，B錯誤；PCR技術(shù)以脫氧核苷酸為原料，C錯誤；應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，再與探針雜交可以檢測基因突變，D正確。9.下列關(guān)于胚胎工程的敘述，錯誤的是A.體外受精是指獲能的精子和成熟的卵子在相應(yīng)溶液中受精B.受精卵發(fā)育到原腸胚階段才能進(jìn)行胚胎移植C.早期胚胎培養(yǎng)與動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液通常都需加入血清D.試管嬰兒技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)答案：B。受精卵發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段就可以進(jìn)行胚胎移植，而不是原腸胚階段，B錯誤。體外受精是獲能精子和成熟卵子在相應(yīng)溶液中受精，A正確；早期胚胎培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液通常都需加入血清，C正確；試管嬰兒技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)，D正確。10.下列關(guān)于生態(tài)工程的敘述，錯誤的是A.生態(tài)工程是一類少消耗、多效益、可持續(xù)的工程體系B.生態(tài)工程的原理包括物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理等C.生態(tài)工程可以解決所有的環(huán)境問題D.生態(tài)工程的研究對象為社會經(jīng)濟(jì)自然復(fù)合生態(tài)系統(tǒng)答案：C。生態(tài)工程是少消耗、多效益、可持續(xù)的工程體系，A正確；其原理包括物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理等多種原理，B正確；生態(tài)工程不能解決所有的環(huán)境問題，它只是一種生態(tài)建設(shè)和環(huán)境保護(hù)的手段，C錯誤；生態(tài)工程的研究對象是社會經(jīng)濟(jì)自然復(fù)合生態(tài)系統(tǒng)，D正確。11.下列有關(guān)發(fā)酵工程的說法，錯誤的是A.發(fā)酵工程的產(chǎn)品可以是微生物的代謝產(chǎn)物、酶等B.發(fā)酵工程中所用的菌種大多是從自然界中分離得到的C.發(fā)酵工程的整個過程都在無菌條件下進(jìn)行D.發(fā)酵工程的產(chǎn)品都需要進(jìn)行分離和提純答案：D。發(fā)酵工程的產(chǎn)品如果是微生物菌體，一般不需要進(jìn)行分離和提純，可直接作為產(chǎn)品，D錯誤。發(fā)酵工程產(chǎn)品可以是代謝產(chǎn)物、酶等，所用菌種大多從自然界分離得到，整個過程需在無菌條件下進(jìn)行，A、B、C正確。12.下列關(guān)于細(xì)胞融合的敘述，錯誤的是A.細(xì)胞融合可以在不同種細(xì)胞之間進(jìn)行B.細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動性C.細(xì)胞融合技術(shù)可用于制備單克隆抗體D.細(xì)胞融合只能通過物理方法實(shí)現(xiàn)答案：D。細(xì)胞融合可以在不同種細(xì)胞之間進(jìn)行，如動物細(xì)胞融合可實(shí)現(xiàn)不同種動物細(xì)胞的融合，A正確；細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動性，B正確；細(xì)胞融合技術(shù)是制備單克隆抗體的關(guān)鍵技術(shù)之一，通過融合漿細(xì)胞和癌細(xì)胞得到雜交瘤細(xì)胞，C正確；細(xì)胞融合的方法有物理方法（如電激）、化學(xué)方法（如聚乙二醇誘導(dǎo)）和生物方法（如滅活的病毒誘導(dǎo)），D錯誤。13.下列關(guān)于基因文庫的說法，正確的是A.基因文庫是指某種生物所有基因的集合B.基因組文庫包含某種生物的全部基因C.cDNA文庫只包含某種生物細(xì)胞中所有的mRNAD.構(gòu)建基因文庫的目的是為了在受體細(xì)胞中大量表達(dá)目的基因答案：B?；蛭膸焓侵笇⒑心撤N生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入受體菌的群體中儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因，A錯誤；基因組文庫包含某種生物的全部基因，B正確；cDNA文庫是通過反轉(zhuǎn)錄法以mRNA為模板合成cDNA后構(gòu)建的，它包含的是某種生物細(xì)胞中部分基因的cDNA，而不是mRNA，C錯誤；構(gòu)建基因文庫的目的主要是為了獲取目的基因，而不是在受體細(xì)胞中大量表達(dá)目的基因，D錯誤。14.下列關(guān)于蛋白質(zhì)的提取和分離的敘述，錯誤的是A.提取和分離蛋白質(zhì)的方法有凝膠色譜法、電泳法等B.凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法C.電泳法是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子本身大小、形狀的不同產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離D.蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定等步驟，其中純度鑒定時用得最多的是SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳答案：無錯誤選項。提取和分離蛋白質(zhì)的方法有凝膠色譜法、電泳法等；凝膠色譜法根據(jù)相對分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì)，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，路程長，移動速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，路程短，移動速度快；電泳法利用分子帶電性質(zhì)、大小和形狀差異實(shí)現(xiàn)分離；蛋白質(zhì)提取和分離一般分樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定等步驟，純度鑒定常用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。15.下列關(guān)于胚胎干細(xì)胞的敘述，錯誤的是A.胚胎干細(xì)胞具有體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯等特點(diǎn)B.胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞C.胚胎干細(xì)胞只能從早期胚胎中分離獲取D.胚胎干細(xì)胞可用于治療人類的某些頑癥答案：C。胚胎干細(xì)胞可以從早期胚胎（如囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）中分離獲取，也可以從胎兒的原始性腺中分離獲取，C錯誤。胚胎干細(xì)胞具有體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯等特點(diǎn)，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞，可用于治療人類某些頑癥，如帕金森氏綜合征等，A、B、D正確。二、多項選擇題（每題3分，共15分）1.下列有關(guān)生物技術(shù)安全性和倫理問題的觀點(diǎn)，合理的是A.對于轉(zhuǎn)基因技術(shù)，我們應(yīng)該趨利避害，理性看待B.我國禁止生殖性克隆和治療性克隆C.我國不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，并反對其擴(kuò)散D.對于基因檢測應(yīng)該保護(hù)個人遺傳信息的隱私權(quán)答案：ACD。對于轉(zhuǎn)基因技術(shù)，應(yīng)客觀理性看待，趨利避害，A正確；我國禁止生殖性克隆，但不反對治療性克隆，B錯誤；我國堅持不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，并反對其擴(kuò)散，C正確；基因檢測應(yīng)保護(hù)個人遺傳信息隱私權(quán)，D正確。2.下列關(guān)于植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的敘述，正確的是A.植物體細(xì)胞雜交必須先制備原生質(zhì)體B.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙C.植物體細(xì)胞雜交過程中需要使用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁D.雜種細(xì)胞含有兩個細(xì)胞的全部遺傳物質(zhì)，所以具有雙親的全部性狀答案：ABC。植物體細(xì)胞雜交必須先去除細(xì)胞壁制備原生質(zhì)體，常用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，A、C正確；該技術(shù)可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，實(shí)現(xiàn)不同種植物細(xì)胞的融合，B正確；雜種細(xì)胞含有兩個細(xì)胞的全部遺傳物質(zhì)，但由于基因的選擇性表達(dá)等原因，不一定具有雙親的全部性狀，D錯誤。3.下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述，正確的是A.基因治療是把正常基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用B.基因診斷的基本原理是DNA分子雜交C.抗蟲轉(zhuǎn)基因植物的目的基因主要是Bt毒蛋白基因D.利用基因工程生產(chǎn)的藥物有胰島素、干擾素等答案：ABCD?；蛑委熓菍⒄；?qū)氩∪梭w內(nèi)，讓其表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮治療作用，A正確；基因診斷是通過DNA分子雜交來檢測特定的基因，B正確；抗蟲轉(zhuǎn)基因植物的目的基因主要是Bt毒蛋白基因，它能產(chǎn)生對害蟲有毒的蛋白質(zhì)，C正確；利用基因工程可生產(chǎn)胰島素、干擾素等藥物，D正確。4.下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述，正確的是A.植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)都需要無菌條件B.植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合都可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙C.植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)都體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性D.植物組織培養(yǎng)可用于快速繁殖、作物脫毒等，動物細(xì)胞培養(yǎng)可用于制備單克隆抗體等答案：ABD。植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)都需要在無菌條件下進(jìn)行，A正確；植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合都能打破物種間的生殖隔離，克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，B正確；植物組織培養(yǎng)體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性，而動物細(xì)胞培養(yǎng)只是細(xì)胞增殖，沒有體現(xiàn)細(xì)胞全能性，C錯誤；植物組織培養(yǎng)可用于快速繁殖、作物脫毒等，動物細(xì)胞培養(yǎng)可用于制備單克隆抗體等，D正確。5.下列關(guān)于生態(tài)工程實(shí)例的敘述，正確的是A.農(nóng)村綜合發(fā)展型生態(tài)工程實(shí)現(xiàn)了物質(zhì)的多級循環(huán)利用和能量的多級利用B.小流域綜合治理生態(tài)工程主要運(yùn)用了整體性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理等C.大區(qū)域生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)工程的關(guān)鍵是植被恢復(fù)和土壤微生物群落的重建D.濕地生態(tài)恢復(fù)工程采用工程和生物措施相結(jié)合的方法，使受到干擾的濕地得以恢復(fù)答案：ABCD。農(nóng)村綜合發(fā)展型生態(tài)工程實(shí)現(xiàn)了物質(zhì)的多級循環(huán)利用和能量的多級利用，提高了經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益，A正確；小流域綜合治理生態(tài)工程主要運(yùn)用了整體性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理等，通過工程措施和生物措施相結(jié)合治理小流域，B正確；大區(qū)域生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)工程的關(guān)鍵是植被恢復(fù)和土壤微生物群落的重建，C正確；濕地生態(tài)恢復(fù)工程采用工程和生物措施相結(jié)合的方法，使受到干擾的濕地恢復(fù)其生態(tài)功能，D正確。三、填空題（每空1分，共10分）1.微生物的接種方法很多，最常用的是平板劃線法和__________法。答案：稀釋涂布平板2.植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中，常用的植物激素有生長素和__________。答案：細(xì)胞分裂素3.基因工程中構(gòu)建基因表達(dá)載體時，除了目的基因外，還需要__________、__________、標(biāo)記基因等。答案：啟動子；終止子4.單克隆抗體制備過程中，誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合常用的生物誘導(dǎo)劑是__________。答案：滅活的病毒5.固定化酶和固定化細(xì)胞常用的方法有包埋法、__________和化學(xué)結(jié)合法。答案：物理吸附法6.PCR技術(shù)的原理是__________，該技術(shù)擴(kuò)增DNA時需要加入的物質(zhì)有模板DNA、引物、__________、熱穩(wěn)定的DNA聚合酶等。答案：DNA雙鏈復(fù)制；脫氧核苷酸7.胚胎工程中，精子獲能處理常用的方法有培養(yǎng)法和__________法。答案：化學(xué)誘導(dǎo)四、簡答題（共45分）1.（10分）簡述植物組織培養(yǎng)的基本過程和原理。答：植物組織培養(yǎng)的基本過程包括：（1）外植體的選取與消毒：選取合適的植物組織或器官作為外植體，并進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理，以防止雜菌污染。（2）脫分化：將消毒后的外植體接種到含有適當(dāng)植物激素（如生長素和細(xì)胞分裂素）的培養(yǎng)基上，在一定的溫度、光照等條件下培養(yǎng)，使外植體細(xì)胞失去其原有的分化狀態(tài)，形成愈傷組織。愈傷組織是一團(tuán)排列疏松、無規(guī)則、高度液泡化的薄壁細(xì)胞。（3）再分化：將愈傷組織轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上，通過調(diào)整植物激素的比例，誘導(dǎo)愈傷組織重新分化出根、芽等器官，形成完整的小植株。（4）移栽：將培養(yǎng)成的小植株移栽到土壤中，使其在自然環(huán)境中生長發(fā)育。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性，即每個具有完整細(xì)胞核的植物細(xì)胞都含有該物種的全部遺傳信息，在適宜的條件下，能夠發(fā)育成完整的植株。2.（10分）請說明基因工程的基本操作步驟。答：基因工程的基本操作步驟主要包括以下四個方面：（1）目的基因的獲?。韩@取目的基因的方法有多種，如從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因、通過化學(xué)合成法人工合成目的基因等。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：這是基因工程的核心步驟?；虮磉_(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。啟動子位于目的基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA；終止子位于目的基因的尾端，能使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止；標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。通常是用同一種限制酶切割目的基因和載體，然后用DNA連接酶將它們連接起來，形成重組DNA分子。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞的不同，導(dǎo)入目的基因的方法也有所不同。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞常用顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞常用感受態(tài)細(xì)胞法，即用Ca2?處理細(xì)胞，使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。（4）目的基因的檢測與鑒定：目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，需要檢測目的基因是否插入到受體細(xì)胞的染色體DNA上，常用DNA分子雜交技術(shù)；檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可采用分子雜交技術(shù)；檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，可采用抗原抗體雜交技術(shù)。此外，還可以通過個體生物學(xué)水平的鑒定，如抗蟲、抗病的接種實(shí)驗等，來確定轉(zhuǎn)基因生物是否具有所期望的性狀。3.（10分）簡述單克隆抗體制備的過程。答：單克隆抗體制備的過程如下：（1）免疫動物：給小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)，小鼠體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞會增殖分化，產(chǎn)生能分泌相應(yīng)抗體的漿細(xì)胞。（2）細(xì)胞融合：從免疫小鼠的脾臟中獲取漿細(xì)胞，將其與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞在滅活的病毒或聚乙二醇等誘導(dǎo)劑的作用下進(jìn)行融合，形成雜交瘤細(xì)胞。由于融合是隨機(jī)的，會出現(xiàn)多種融合情況，如漿細(xì)胞漿細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合以及漿細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合等。（3）篩選雜交瘤細(xì)胞：將融合后的細(xì)胞接種到特定的選擇性培養(yǎng)基（如HAT培養(yǎng)基）上培養(yǎng)，該培養(yǎng)基可以抑制未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合的細(xì)胞生長，只有漿細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞能夠存活。（4）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測：對篩選出的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即通過單細(xì)胞培養(yǎng)，使其增殖形成細(xì)胞群。同時，對每個細(xì)胞群產(chǎn)生的抗體進(jìn)行檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。（5）單克隆抗體的生產(chǎn)：有兩種方式。一種是將篩選得到的雜交瘤細(xì)胞在體外進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)，從培養(yǎng)液中提取單克隆抗體；另一種是將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)，在小鼠腹腔中增殖，從小鼠腹水中提取單克隆抗體。4.（7分）簡述固定化酶和固定化細(xì)胞的優(yōu)缺點(diǎn)。答：固定化酶的優(yōu)點(diǎn)：（1）酶的穩(wěn)定性提高，可重復(fù)使用，降低了生產(chǎn)成本。固定化后酶與底物和產(chǎn)物容易分離，便于連續(xù)化、自動化生產(chǎn)。（2）可以實(shí)現(xiàn)酶的連續(xù)催化反應(yīng)，提高生產(chǎn)效率。（3）酶的活性基本不變，能保持較高的催化效率。固定化酶的缺點(diǎn)：（1）固定化過程可能會導(dǎo)致酶的活性部分損失。（2）只能催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)，應(yīng)用范圍相對較窄。（3）固定化成本較高，技術(shù)要求也較高。固定化細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)：（1）細(xì)胞內(nèi)含有多種酶，能催化一系列連續(xù)的酶促反應(yīng)，可用于生產(chǎn)多種產(chǎn)物。（2）細(xì)胞固定化的操作相對簡單，成本較低。（3）細(xì)胞的穩(wěn)定性較好，能在較長時間內(nèi)保持活性。固定化細(xì)胞的缺點(diǎn)：（1）固定化細(xì)胞中酶的活性可能受到細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的影響，催化效率可能不如游離酶。（2）底物和產(chǎn)物的擴(kuò)散可能受到一定限制，影響反應(yīng)速率。（3）細(xì)胞內(nèi)可能含有一些不需要