ICS65.020.30

CCSB44

15

內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)

DB15/T2407—2021

興羔肉羊分子標(biāo)記輔助育種技術(shù)規(guī)程

Technicalcodeofbreedingpracticewithmolecularmarkerassisted

selectionforXinggaomuttonsheep

2021-10-15發(fā)布2021-11-15實施

內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB15/T2407—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)委員會（SAM/TC19）歸口。

本文件起草單位：內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院、內(nèi)蒙古賽諾種羊科技有限公司、內(nèi)蒙古杜美牧業(yè)生

物科技有限公司。

本文件主要起草人：付紹印、劉永斌、王標(biāo)、祁云霞、何小龍、達(dá)賴、孫素珍、特日格勒、何江峰、

王力偉、李俊龍、馬躍軍、劉學(xué)文、郝宸昉、陳欣、方勤圓。

I

DB15/T2407—2021

興羔肉羊分子標(biāo)記輔助育種技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了興羔肉羊分子標(biāo)記輔助育種的基本要求和操作要求。

本文件適用于興羔肉羊的育種。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

NY/T1236綿、山羊生產(chǎn)性能測定技術(shù)規(guī)范

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

分子標(biāo)記輔助選擇molecularmarkerassistedselection；MAS

利用性狀關(guān)聯(lián)的主效基因或者緊密連鎖的DNA分子標(biāo)記對目標(biāo)性狀進行選擇的育種技術(shù)。

3.2

標(biāo)記輔助最佳線性無偏預(yù)測marker-assistedbestlinearunbiasedprediction;MA-BLUP

適用于羊MAS的一種混合線性模型方法。該混合線性模型同時利用分子標(biāo)記和表型信息，通過混合

模型方程組(MME)求解分子標(biāo)記效應(yīng)和微效多基因效應(yīng)，羊個體估計育種值為分子標(biāo)記效應(yīng)和微效多基

因效應(yīng)之和。

4基本要求

4.1分子標(biāo)記輔助選擇的適用范圍和條件應(yīng)滿足以下基本要求：

4.1.1分子標(biāo)記類型一般為單核苷酸多態(tài)。

4.1.2已知目標(biāo)性狀的主效基因或與之緊密連鎖的標(biāo)記，且分型標(biāo)記來自于主效基因內(nèi)部或與之緊密

連鎖的側(cè)翼標(biāo)記。

4.1.3單基因或寡基因的標(biāo)記輔助選擇適用于質(zhì)量性狀、閾性狀以及數(shù)量性狀已知主效基因或大效應(yīng)

位點的情形。

4.1.4多基因標(biāo)記輔助選擇的適用對象主要為數(shù)量性狀或微效多基因的性狀。

4.2實施分子標(biāo)記輔助選擇的基本要求：

1

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具備表型測定與采集，樣品采集、運輸、標(biāo)識和存儲，基因分型的實驗條件和技術(shù)人員。

4.3分子標(biāo)記輔助選擇包含內(nèi)容：

分子標(biāo)記輔助選擇的活動應(yīng)包括檢驗（血液或組織樣品采集、DNA提取和純化、DNA定量、PCR擴增

與產(chǎn)物分型）、有利與有害基因型的判定、個體育種值估計、目標(biāo)個體的保留與淘汰等環(huán)節(jié)。

5操作要求

5.1采樣

5.1.1采樣時，需要填寫采樣日期、采樣地點、被采個體信息（耳號、年齡、性別）、樣品編號、采樣

人等，并妥善保存相關(guān)記錄。

5.1.2樣品可以是血液、組織樣品，也可以是其它生物學(xué)樣品。

5.1.3樣品采集過程避免個體交叉污染。

5.1.4樣品采集后應(yīng)冷凍保存和運輸。

5.2DNA提取與純化

按照農(nóng)業(yè)農(nóng)村部2406號公告-7-2016執(zhí)行。

5.3基因分型

5.3.1標(biāo)記位點或基因的來源

宜選公開文獻報道且已公開并獲使用許可的專利；也可由實施單位或委托單位前期研究獲得影響同

一性狀的標(biāo)記或基因。標(biāo)記的最小等位基因頻率應(yīng)滿足多態(tài)性的定義。

5.3.2分型與結(jié)果判讀

單基因標(biāo)記可采用PCR擴增產(chǎn)物的相關(guān)方法判讀基因型（PCR-RFLP、單分辨率熔解曲線、KASP等）。

多基因標(biāo)記可采用分別針對每個標(biāo)記分型的策略，亦可采用適合多基因標(biāo)記分型的其他方法進行分型。

5.4表型測定

生產(chǎn)性能測定按NY/T1236要求執(zhí)行。單基因標(biāo)記輔助選擇無需進行表型測定。

5.5分子標(biāo)記輔助選擇

5.5.1直接選擇

直接根據(jù)育種群的基因分型結(jié)果，淘汰不利基因型（或有害基因型）或基因型組合的個體，保留有

利基因型（或理想基因型）或基因型組合的個體。根據(jù)育種規(guī)模，可按照一次選擇或者多次選擇的方法

進行選種留種。

5.5.2兩階段選擇

對于在進行生產(chǎn)性能測定前必須進行預(yù)選的情形，宜使用兩階段選擇法。第一階段，根據(jù)育種群目

標(biāo)基因檢測分型結(jié)果，保留全部有利基因型或基因型組合的個體，淘汰不利基因型或基因型組合的個體。

2

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第二階段，對保留個體組成的育種群進行性能測定獲得表型信息，實施基于傳統(tǒng)育種的遺傳評估（如

BLUP），根據(jù)目標(biāo)性狀的個體育種值選留優(yōu)秀親本。

5.5.3MA-BLUP選擇

對于多基因或者微效多基因控制的數(shù)量性狀，宜采用MA-BLUP進行選擇：利用MA-BLUP模型見附錄A

整合系譜、表型和分子標(biāo)記信息，估計個體MA-BLUP育種值并排序，按預(yù)設(shè)留種率選留優(yōu)秀親本。

3

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A

A

附錄A

（資料性）

MA-BLUP模型及說明

MA-BLUP基本模型計算見式A.1:

y=Xb+Wa+Zu+e………………(A.1)

式中：

y—為羊性狀表型值向量，