ICS65.020.30

CCSB43

54

西藏自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)

DB54/T0356—2024

犏牛人工授精技術(shù)操作規(guī)程

2024-04-21發(fā)布2024-05-21實施

西藏自治區(qū)市場監(jiān)督管理局??發(fā)布

DB54/T0356—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由西藏自治區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心（西藏自治區(qū)畜牧總站）提出。

本文件由西藏自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)委員會歸口。

本文件起草單位：西藏自治區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心（西藏自治區(qū)畜牧總站）。

本文件主要起草人：達瓦、仁增頓珠、拉巴次仁、拉旺扎西、陳瑤、次仁多吉、孫鋒博、張楠、劉

楠、措姆。

I

DB54/T0356—2024

犏牛人工授精技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了犏牛人工授精術(shù)語定義、人工授精準(zhǔn)備、發(fā)情鑒定、輸精前的準(zhǔn)備、輸精、妊娠診

斷等。

本文件適用于犏牛養(yǎng)殖集中區(qū)域內(nèi)的犏牛養(yǎng)殖場、散養(yǎng)戶及配種站人工授精技術(shù)人員及其他相關(guān)從

業(yè)人員的技術(shù)操作。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB4143牛冷凍精液

GB/T5458液氮生物容器

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

犏牛

牦牛與黃牛雜交后所產(chǎn)生的第一代雜種統(tǒng)稱為犏牛，公犏牛無繁育能力。

3.2

冷凍精液

將原精液用稀釋液等溫稀釋、平衡后快速冷凍，在液氮中保存。犏牛的冷凍原精液來源是安格斯肉

牛，精液分裝細管凍精劑型。

3.3

人工授精

人為利用器械采取公畜的精液，經(jīng)過檢查和處理后，再用器械輸入到母畜的生殖道內(nèi)，使之受胎的

一種方法。

3.4

發(fā)情鑒定

通過外部觀察或直腸把握檢查方式確定母牛發(fā)情的方法，犏牛以直腸把握法為主要依據(jù)。

3.5

發(fā)情周期

2

DB54/T0356—2024

初情期后，每隔一定時間會發(fā)情一次，通常將這次發(fā)情開始至下次發(fā)情開始、或這次發(fā)情結(jié)束至下

次發(fā)情結(jié)束所間隔的時期，稱為發(fā)情周期，犏牛的發(fā)情周期為18d～24d。

3.6

能繁母犏牛

達到生殖年齡且具有生殖能力的母犏牛。

4人工授精準(zhǔn)備

4.1固定式與活動式相結(jié)合

犏牛養(yǎng)殖集中區(qū)建設(shè)配種點，每個配種點配備配種架、液氮罐、人工授精器械，消毒液、液體石蠟

等用于犏牛的配種工作。針對路途相對較遠的地方，配種員攜帶配種儀器設(shè)備開展巡邏式配種。

4.2儀器設(shè)備

試驗臺、桌布、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、液氮罐、液氮、細管凍精、輸精器、輸精器外套、玻璃

瓶、玻璃棒、燒杯、溫度計、鑷子、一次性手套、常用消毒劑、紗布、衛(wèi)生紙、熱水壺、毛巾、臉盆、

肥皂等。

5發(fā)情鑒定

犏牛整體上呈季節(jié)性發(fā)情，發(fā)情季節(jié)主要集中在6月-9月份，但集中管理模式下可常年發(fā)情，夜晚

的發(fā)情率高于白天，下雨后天氣轉(zhuǎn)陰時發(fā)情率高，具體見附錄A。

5.1外部觀察

通過母牛的外部表現(xiàn)癥狀和行為變化判斷是否發(fā)情和發(fā)情程度。

5.2陰道檢查法

主要觀察生殖器變化，用開膣器使陰道開張，觀察外陰部的腫脹、流出的粘液、分泌物和子宮頸口

的變化，判斷母牛發(fā)情與否。

5.3直腸檢查

通過直腸檢查卵巢，觸摸卵泡發(fā)育程度，判斷發(fā)情程度及排卵時間。

6輸精前的準(zhǔn)備

6.1器具清洗和消毒

凡是觸碰凍精和母牛生殖道的器具都應(yīng)進行清洗和消毒。金屬器械清洗后，待自然條件下冷卻后待

用。使用前用75%酒精消毒干凈，有條件的地方使用高壓鍋對金屬器具進行消毒。器械消毒，可以在121

攝氏度，氣壓在102.9kPa下消毒20分鐘后取出使用。

6.2冷凍精液的準(zhǔn)備

3

DB54/T0356—2024

冷凍精液應(yīng)浸泡在液氮生物容器中貯存，定時補充液氮，保證細管凍精深埋于液氮面10cm以下，液

氮生物貯存應(yīng)符合GB/T5458有關(guān)規(guī)定，凍精在液氮容器外停留時間不得超過5s。

6.3冷凍精液的解凍

用長柄鑷子從液氮罐中取出細管凍精，尋找凍精不得超過10s，停留部位應(yīng)距頸管上口8cm以下。凍

精取好后放入38±2℃水中，解凍5s～10s，待全部融化后，取出擦干即可，用細管剪剪開不帶棉塞的一

端細管凍精封口，剪口應(yīng)正，斷面應(yīng)齊，將有棉塞的一端裝在輸精器推桿上，套上外保護套備用。解凍

后的精液應(yīng)在15min內(nèi)輸精，以防止對精子的第二次冷打擊。根據(jù)季節(jié)的不同，注意輸精前輸精器的保

溫措施，若路程較遠，可將準(zhǔn)備好的輸精器放于貼身衣物內(nèi)保暖,精液解凍后保存時間不應(yīng)超過1h。

6.4凍精質(zhì)量檢查

在顯微鏡下檢查做直線前進運動的精子占整個精子數(shù)的35%以上、視為合格，35%以下的棄之，凍精

質(zhì)量檢測應(yīng)符合GB4143。

6.5母牛的保定

經(jīng)發(fā)情鑒定確定輸精的母畜，將其牽入配種架內(nèi)保定好，注意安全措施。

6.6母牛外陰部的清潔

輸精前，帶上輸精器外套后，并對保定母畜外陰部周圍的糞便、污物用溫肥皂水清洗干凈，然后用

消毒液（高錳酸鉀水）清洗一遍。

6.7輸精準(zhǔn)備

將剪去封口的細管精液迅速裝入輸精器管內(nèi)，輸精器進入塑料外套管，管口頂緊外套管中固定圈，

向前推到頭，外套管后部與輸精器后部螺紋處擰緊，全部結(jié)合要緊密備用。

7輸精

7.1輸精時間

最佳輸精時間為母牛接收爬跨后的10h～18h。母牛接受爬跨后8h～12h為第一次輸精時間，第二次

輸精時間為母牛接受爬跨后16h～20h。在發(fā)情盛期、后期各輸精1次，兩次輸精的時間間隔為8h～12h。

7.2輸精方法

7.2.1觸摸卵泡法

在卵泡薄、滿而軟、有彈性和波動明顯，成熟葡萄狀，有一觸即破的感覺，接近成熟排卵時及時輸

精。6h-8h后在卵泡未破裂之前，再輸精一次。

7.2.2直腸把握法

母犏牛個體與牦牛接近，生殖器官組織結(jié)構(gòu)主要表現(xiàn)為子宮角發(fā)達、子宮體短小,子宮頸長5cm～

10cm,外壁直徑3cm～6cm，子宮頸口小，內(nèi)有明顯的三個具有許多細小而緊縮的皺璧的子宮頸環(huán)，子宮

頸宮口幾乎臨近角間溝縱隔。輸精員將手指甲剪短磨光，左手手臂套上乳膠手套，涂上一層潤滑劑，五

指并攏呈錐形，伸入直腸，掏出糞便。動作要輕柔，左手臂進入直腸25cm～30cm，在直腸內(nèi)觸摸并握住

子宮頸，左手稍微下壓，使陰門張開，右手持輸精管（槍）由陰門緩緩插入，先稍向上斜插，避開尿道

4

DB54/T0356—2024

口，然后再向下平插至子宮頸口，將輸精器前端插入子宮頸口內(nèi)3cm-4cm(約經(jīng)過2個-3個皺襞），若能

確定左右兩側(cè)具體卵泡發(fā)育位置，可將輸精器繼續(xù)伸向卵泡發(fā)育側(cè)輸精；若不能確定具體位置，則將輸

精器微微后拉再行輸精。輸精后緩緩將輸精器拔出，并適當(dāng)按摩陰蒂，以防止精液倒流，可有效提高受

胎率。

7.3輸精部位及輸精量

將精液輸?shù)浇咏訉m角間溝分岔部的子宮體內(nèi)，一次輸0.25ml，一個情期輸精兩次。

7.4注意事項

輸精過程要嚴格按照慢插、適深、輕注、緩出、防倒流的原則進行，直腸檢查或輸精時母牛努責(zé)、

腸道形成空洞時，不要硬性抓捏，防止損傷母犏牛陰道壁、子宮頸口和子宮體。

8妊娠診斷

妊娠診斷時間一般在輸精后第一個發(fā)情周期開始到兩個月。未妊娠的母牛進行查胎補配，已妊娠的

母牛進行加強飼養(yǎng)管理，做好保胎、防流工作。

8.1外部觀察

母犏牛妊娠后，經(jīng)過2個-3個情期后，周期性發(fā)情停止，食欲增進，營養(yǎng)狀況改善，毛色潤澤，性

情變得溫順，行為變安穩(wěn)，體重增加。妊娠中后期腹圍增大，甚至可觀察到胎動，乳房逐漸腫大。

8.2直腸檢查法

輸精后三個情期未發(fā)情，通過直腸檢查卵巢、子宮角的形狀、質(zhì)地變化來判斷是否妊娠。主要根據(jù)

子宮角的卵巢黃體的變化進行診斷，妊娠母牛子宮角兩側(cè)不對稱，孕角側(cè)卵巢比另一側(cè)卵巢大，孕角有

波動感，卵巢有妊娠黃體突出于排卵側(cè)卵巢表面，黃體質(zhì)地柔軟、豐滿、頂端觸感凸起。

具體方法為先摸到子宮頸，再將中指向前滑動，尋找角間溝，然后將手向前、向下、再向后分別觸

摸兩個子宮角及卵巢的變化。一般懷孕20d～25d，孕角側(cè)卵巢比另一側(cè)卵巢大，并有黃體，子宮壁較厚，

有彈性；懷孕60d，孕角大小為空角的兩倍左右，波動感明顯，角間溝變得寬平，子宮向腹腔下垂；懷

孕90d，孕側(cè)子宮角變大，直徑8㎝～13㎝，波動明顯，角間溝消失，有時可觸摸到綠豆大小的子葉。

9記錄

包括配種母牛編號、畜主、輸精時間、輸精操作人員、凍精號、精子活力、品種、供應(yīng)商、妊娠檢

查、產(chǎn)犢日期見附錄B,以及受胎率，繁殖率計算方法見附錄C。上述內(nèi)容可用表格的形式記錄。

5

DB54/T0356—2024

A

A

附錄A

（規(guī)范性）

表1母犏牛發(fā)情表現(xiàn)

期別發(fā)情初期發(fā)情盛期發(fā)情末期

母犏牛鳴叫不安，人靠近豎起

母犏牛極度不安，食欲停止，

耳朵搖頭，食欲減退，經(jīng)常爬母犏牛性欲減退，不再爬跨其它牛，由狂躁轉(zhuǎn)為

外部表現(xiàn)性欲旺盛，尾巴翹起，接受爬

跨其它牛，但拒絕公?；蛘咂浒察o。

跨，爬跨其它牛。

他母犏牛的爬跨。

外陰輕微紅腫，陰道粘膜充血，外陰部明顯腫脹，流出粘液增

生殖器官變化流出稀薄透明多，尾部毛發(fā)被其他牛趴跨時外陰部腫脹減退，粘液變稠，呈黃白色。

液體。翻起來的現(xiàn)象。

直腸檢查子宮松軟，卵泡體積

直腸檢查子宮變軟，卵巢有一直腸檢查子宮頸變松軟，卵泡壁變薄，波動明顯，

增大，直徑1～1.5cm，突出于

卵泡發(fā)育程度側(cè)增大，有卵泡，無彈性，此成熟葡萄狀，有一觸即破的感覺，此期約維持8～

卵巢表面，彈性強，有波動感。

期維持10h左右。10h。

此期約維持8～12h。

B

B

C

附錄B

（規(guī)范性）

表2母犏牛配種記錄表

C

D

母畜公畜備注

發(fā)情日期輸精日期妊娠檢查

凍活

序畜主編胎檢是產(chǎn)品供貨廠