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文檔簡介
不同層次的“雜交”雜交的層次①個體雜交例如孟德爾的豌豆雜交實驗;②細(xì)胞雜交例如植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合;③分子雜交例如DNA分子雜交技術(shù)、抗原-抗體雜交技術(shù)。個體雜交個體雜交是通過不同的基因型的個體之間的交配而獲得某些雙親基因重新組合的個體的方法。其實質(zhì)是通過生殖細(xì)胞相互融合而達(dá)到這一目的。產(chǎn)生的后代統(tǒng)稱為雜種。根據(jù)親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近,可分為種內(nèi)雜交和遠(yuǎn)緣雜交。種內(nèi)雜交種內(nèi)雜交就是指同一物種內(nèi)不同品種個體間的有性交配。例如,孟德爾的豌豆雜交實驗,通過選取具有相對性狀的豌豆植株完成雜交實驗。具體操作是通過人工異花傳粉,實現(xiàn)豌豆不同品種個體的花粉和卵細(xì)胞結(jié)合,從而產(chǎn)生雜交后代。在遺傳圖解中表示雜交的符號為“×”,例如,純合高莖(DD)和矮莖(dd)的雜交表示為:DD×dd。
一般雜種(即雜交子一代))的活力優(yōu)于雜交雙親,這種現(xiàn)象叫做雜種優(yōu)勢,優(yōu)勢可以表現(xiàn)在生活力、繁殖率、抗逆性以及產(chǎn)量和品質(zhì)上。通過雜交的方法來育種即將兩個品種的優(yōu)良性狀通過交配集中在一起,再經(jīng)過選擇和培養(yǎng)獲得新的品種。例如,純合高桿抗銹病(DDRR)與矮桿易染病(ddrr)的小麥雜交,將獲得的矮桿抗銹病植株連續(xù)多代自交,直至性狀不發(fā)生分離,最終獲得矮桿抗病的優(yōu)良品種。種內(nèi)雜交另外,人類的三個亞種:黃種人、白種人和黑種人之間的婚配,即人種內(nèi)的“雜交”產(chǎn)生的后代統(tǒng)稱為“混血兒”。動物雜交后代亦可稱作“混血種”。遠(yuǎn)緣雜交就是指不同種間、屬間甚至親緣關(guān)系更遠(yuǎn)的物種之間的雜交。產(chǎn)生的后代統(tǒng)稱為遠(yuǎn)緣雜種。由于不同種屬間存在著生殖隔離,致使遠(yuǎn)緣雜交常表現(xiàn)不親和或獲得的遠(yuǎn)緣雜種表現(xiàn)不育。例如,雌馬和雄驢的雜交后代———騾子,它比雙親都強(qiáng)健,適于勞役,且又耐粗食。但是,不育。遠(yuǎn)緣雜交細(xì)胞雜交也稱為體細(xì)胞雜交或細(xì)胞融合。是指在離體條件下,使用人工方法使兩個或兩個以上的單個體細(xì)胞融合形成一個細(xì)胞的過程。新產(chǎn)生的融合細(xì)胞稱為雜種細(xì)胞,含有原來兩個或者多個細(xì)胞的不同遺傳信息。個體雜交在實質(zhì)上也是一種“細(xì)胞雜交”———通過生殖細(xì)胞的融合實現(xiàn)。細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交實際是指植物原生質(zhì)體的融合。這種技術(shù)克服了不同生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙,已經(jīng)培養(yǎng)出如白菜-甘藍(lán)、胡蘿卜-羊角芹等種間或?qū)匍g雜種。細(xì)胞雜交——植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞雜交——動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同。誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法也類似,有物理法(如電激)、化學(xué)法(聚乙二醇)和生物法(用滅活的病毒)。利用動物細(xì)胞融合技術(shù)發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)為制造單克隆抗體開辟了新途徑。分子雜交分子雜交是指不同來源的核酸單鏈之間或蛋白質(zhì)亞基之間由于結(jié)構(gòu)互補(bǔ)而發(fā)生的非共價鍵的結(jié)合。根據(jù)這一原理發(fā)展起來的各種技術(shù)統(tǒng)稱為分子雜交技術(shù)。分子雜交分為核酸分子雜交和蛋白質(zhì)分子雜交。分子雜交——核酸分子雜交1.DNA-DNA分子雜交和RNA-DNA分子雜交根據(jù)重組DNA分子中目的基因的部分DNA序列,人工合成(或用PCR技術(shù)合成)與之互補(bǔ)的一小段單鏈DNA(或RNA),用放射性同位素標(biāo)記形成探針,使其與基因組DNA雜交,短小的探針通過氫鍵特異性地與目的基因相結(jié)合,使后者被同位素所標(biāo)記。如果顯示出雜交帶(放射自顯影后在某位置出現(xiàn)的一條黑色條帶),則表明目的基因已插入染色體中。對于目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA的檢測方法,是采用RNA-DNA分子雜交。該方法與DNA-DNA分子雜交不同之處,是用探針與轉(zhuǎn)基因生物中的mRNA進(jìn)行雜交。分子雜交——核酸分子雜交分子雜交——核酸分子雜交2.基因芯片
基因芯片又稱DNA芯片、生物芯片、DNA微陣列等。它是在基因探針的基礎(chǔ)上研制出的,它將大量探針分子固定于硅片、玻片等支持物上,構(gòu)成一個二維DNA探針陣列,然后與標(biāo)記的樣品進(jìn)行雜交,通過檢測雜交信號的強(qiáng)度及分布來進(jìn)行分析?;蛐酒膽?yīng)用非常廣泛,主要包括基因表達(dá)檢測、突變檢測、基因組多態(tài)性分析和基因文庫作圖、雜交測序以及疾病診斷和治療、藥物篩選等。分子雜交——核酸分子雜交分子雜交——蛋白質(zhì)分子雜交蛋白質(zhì)分子雜交即抗原-抗體雜交,其原理是利用抗原抗體之間的特異性結(jié)合反應(yīng)。用于檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的
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