ICS65．020.20

CCSB16

2301

黑龍江省哈爾濱市地方標(biāo)準(zhǔn)

DB2301/T156—2024

藍靛果鏈格孢屬葉斑病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程

2023-02-22發(fā)布2023-03-22實施

哈爾濱市市場監(jiān)督管理局??發(fā)布

DB2301/T156—2024

目次

前言............................................................................II

1范圍.................................................................................1

2規(guī)范性引用文件.......................................................................1

3術(shù)語和定義...........................................................................1

4圃地選擇.............................................................................1

5抗病性鑒定...........................................................................1

5.1接種體準(zhǔn)備.......................................................................1

5.2資源建植.........................................................................2

5.3接種.............................................................................2

5.4病情調(diào)查.........................................................................2

5.5抗性評價.........................................................................3

6生產(chǎn)檔案.............................................................................3

I

DB2301/T156—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任。

本文件由哈爾濱市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站提出。

本文件由哈爾濱市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局歸口。

本文件起草單位：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)、哈爾濱市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站、嫩江農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心、哈爾濱市

農(nóng)業(yè)科學(xué)院、哈爾濱市雙城區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心、哈爾濱市呼蘭區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心。

本文件主要起草人：李永剛、劉金鑫、曹寶祥、洪峰、金羽、高偉超、柴赫男、李愛華、張立微、

胡海江。

II

DB2301/T156—2024

藍靛果鏈格孢屬葉斑病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了藍靛果鏈格孢屬葉斑病抗性鑒定的術(shù)語和定義和藍靛果鏈格孢屬葉斑病抗性鑒定的

圃地選擇、抗病性鑒定、生產(chǎn)檔案等要求。

本文件適用于藍靛果育種資源和品種抗鏈格孢屬葉斑病的人工接種鑒定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB15618土壤環(huán)境質(zhì)量農(nóng)用地土壤污染風(fēng)險管控標(biāo)準(zhǔn)

DB23/T2981藍靛果綠枝扦插育苗技術(shù)規(guī)程

DB23/T3124黑龍江藍靛果種質(zhì)資源圃營建技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

藍靛果鏈格孢屬葉斑病Alternarialeafspotofbluehoneysuckle

藍靛果鏈格孢屬葉斑病是由極細鏈格孢（Alternariatenuissima）和鏈格孢(A.alternata)復(fù)合

侵染造成的一種真菌病害，受感染葉片最初表現(xiàn)為小的棕色和不規(guī)則的病變，后沿葉緣擴大為不規(guī)則的

斑點，在適宜發(fā)病條件下，受感染葉片逐漸枯萎并從植株上脫落。

4圃地選擇

4.1抗病鑒定圃應(yīng)選擇光照充足、排灌方便、土質(zhì)疏松、土壤pH5.0～pH7.0的平緩地塊。

4.2圃地土壤環(huán)境質(zhì)量應(yīng)符合GB15618的規(guī)定。

5抗病性鑒定

5.1接種體準(zhǔn)備

5.1.1菌種來源

應(yīng)選用在當(dāng)?shù)夭杉⒎蛛x并經(jīng)柯赫氏法則驗證后，通過形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定后的極細鏈格孢

（Alternariatenuissima）和鏈格孢(A.alternata)或者實驗室內(nèi)保存的有代表性的菌株。

5.1.2菌種保存

1

DB2301/T156—2024

將生長于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）菌種置于6～8℃冰箱中短期（3～6個月）保存或液氮長

期保存。

5.1.3接種體繁殖

5.1.3.1選取無雜菌，菌落暗灰色，在培養(yǎng)基上擴散生長，菌體在PDA培養(yǎng)基上擴繁7天后，打成菌

蝶（0.7cm），備用。

5.1.3.2將高粱粒用水煮20min后，撈出后稍瀝干水稱量100g后至于250ml三角瓶中，121℃滅菌30min，

冷卻后備用。

5.1.3.3轉(zhuǎn)移5個菌蝶至高粱粒的三角瓶內(nèi)，26℃恒溫箱中黑暗培養(yǎng)5天，每天搖晃一次使高粱粒表

面均勻長滿菌絲，置于4℃?zhèn)溆谩?/p>

5.2資源建植

5.2.1每待測品種或資源應(yīng)要插條45株定植，并按DB23/T2981的規(guī)定執(zhí)行。

5.2.2種植感病品種30株作為對照。

5.2.3施肥、澆水等田間管理按DB23/T3124的規(guī)定執(zhí)行。

5.2.4定植完成后，應(yīng)繪制定植圖，標(biāo)明每份品種或資源在鑒定圃內(nèi)的具體位置。

5.3接種

5.3.1接種宜在建植第二年7月進行，選擇生長均勻一致的30株進行抗病性鑒定。

5.3.2將擴繁好的帶有極細鏈格孢（Alternariatenuissima）和鏈格孢(A.alternata)的高粱粒用

無菌水分別沖洗配制孢子懸浮液，用滅菌的雙層紗布過濾，備用。

5.3.3用血球計數(shù)板稀釋至106個孢子/mL等量混和，備用。

5.3.4用噴霧器在下午4時后進行接種，噴至葉片表面和背面孢子懸浮液飽和。

5.3.5接種后用塑料布封閉保濕48h后移除塑料布，常規(guī)管理。

5.4病情調(diào)查

5.4.1調(diào)查周期

每3天觀察1次接種植株發(fā)病情況，待感病對照品種表現(xiàn)感或高感后，進行不同品種或育種資源調(diào)查。

5.4.2調(diào)查方法

5.4.2.1每份育種資源或品種調(diào)查30株。

5.4.2.2調(diào)查分級標(biāo)準(zhǔn)以葉斑病的數(shù)量及病斑所占面積的比例為依據(jù)，調(diào)查主要是根據(jù)分級標(biāo)準(zhǔn)目測

每份鑒定材料群體的發(fā)病狀況。

5.4.2.3藍靛果育種資源或品種抗鏈格孢屬葉斑病病情級別及劃分標(biāo)準(zhǔn)見表1。

表1藍靛果育種資源或品種抗鏈格孢屬葉斑病病情級別劃分標(biāo)準(zhǔn)

病情級別分級標(biāo)準(zhǔn)

1植株葉片上無病斑或病斑占葉面積少于或等于5%

3植株少數(shù)葉片上有少量病斑，占葉面積6%~10%

5植株大部分葉片有病斑，且病斑占葉面積11%~25%

7植株絕大部分葉片有病斑，且病斑占葉面積26%~50%

9全株葉片基本為病斑覆蓋，且病斑占葉面積大于51%或葉片全部枯死

2

DB2301/T156—2024

5.5抗性評價

5.5.1當(dāng)對照材料達到其相應(yīng)感病程度（7或9級），該批次鑒定視為有效

5.5.2抗病鑒定材料發(fā)病程度（病情級別）確定其抗性水平，藍靛果育種資源和品種抗鏈格孢屬葉斑

病的評價標(biāo)準(zhǔn)見表2。

表2藍靛果育種資源和品種抗鏈格孢屬葉斑病的評價標(biāo)準(zhǔn)

病情級別抗性

1高抗Highlyresistant（HR）

3抗Resistant（R）

5中抗Moderatelyresistant（MR）

7感Suscept