ICS65.020.20

CCSB05

DB15

內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標準

DB15/T2045—2020

甜菜組培快繁技術規(guī)程

Technicalcodeofpracticeofcultureandrapidpropagetiononsugarbeet

2020-12-24發(fā)布2021-01-24實施

內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB15/T2045—2020

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧廳提出。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)業(yè)標準化技術委員會（SAM/TC20）歸口。

本文件起草單位：內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學院。

本文件主要起草人：白晨、李曉東、張惠忠、張自強、王良、韓平安、張必周、趙尚敏、付增娟、

鄂圓圓、鄭文哲、張輝。

I

DB15/T2045—2020

甜菜組培快繁技術規(guī)程

1范圍

本文件確立了培養(yǎng)基、外植體的獲取、滅菌與萌發(fā)、無菌苗獲取、甜菜組培擴繁和移栽等技術要求。

本文件適用于甜菜組培快繁技術操作的全過程。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒有規(guī)范性引用文件。

3術語與定義

下列術語和定義適用于本文件。

3.1

種球bulb

甜菜的果實。

3.2

腋芽axillarybud

發(fā)生于葉的近軸面與莖的夾角處的定芽。

3.3

花序inflorescence

花序軸及其著生在上面的花的通稱。

4培養(yǎng)基

4.1瓊脂粉培養(yǎng)基

用于甜菜種球的萌發(fā)。成分為（1L）：瓊脂粉7.5g。

4.2誘導分化培養(yǎng)基

用于甜菜無菌苗誘導分化培養(yǎng)。成分為（1L）：MS培養(yǎng)基4.74g，蔗糖30g，NAA（萘乙酸）0.7mg，

KT（激動素）1.2mg，瓊脂粉7.5g。

4.3繼代培養(yǎng)基

1

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用于甜菜無菌苗的繼代培養(yǎng)。成分為（1L）：MS培養(yǎng)基4.74g，蔗糖30g，NAA0.5mg，KT0.4mg，

瓊脂粉7.5g。

4.4生根培養(yǎng)基

用于甜菜無菌苗的生根培養(yǎng)。成分為（1L）：MS培養(yǎng)基4.74g，蔗糖30g，NAA1.2mg，瓊脂粉

7.5g。

5外植體的獲取

5.1種球的獲取+

選取健康、籽粒飽滿、外觀完好的甜菜種球。

5.2腋芽的獲取

在甜菜生殖生長期，選擇生長健壯、無損傷、無病蟲害的甜菜植株，剪取幼嫩主枝或側枝。

5.3花序的獲取

在甜菜生殖生長期，選擇生長健壯、無損傷、無病蟲害的甜菜植株，剪取現(xiàn)蕾花序的末端約20cm。

6滅菌與萌發(fā)

6.1滅菌前準備

制備無菌水、75%酒精，0.1%升汞，80%次氯酸鈉。

6.2種球消毒

將甜菜種球磨光，用百菌清（煙劑型）密閉熏蒸24h后，在超凈工作臺中移至滅過菌的三角瓶中，

隨后用75%酒精消毒2min，無菌水漂洗3次，接著用0.1%的升汞處理20min，無菌水漂洗3次，最后

將消毒后的種子接種于瓊脂粉培養(yǎng)基上，每三角瓶（100ml）25粒。

6.3腋芽消毒

取回的主枝或側枝剪成保留1～2個腋芽小段，裝入燒杯放在自來水下沖洗1h，沖洗后在超凈工作

臺上用75%酒精消毒1min，無菌水洗3次，接著用80%次氯酸鈉消毒12min，無菌水洗3次，洗完后

按照形態(tài)學上端向上接種到繼代培養(yǎng)基中，每三角瓶（100ml）6個小段。

6.4花序消毒

室外取回的花序放入燒杯中，放到自來水下沖洗花序1h，沖洗后將花序切成1.5cm左右長度的花

序小段，在超凈工作臺上將花序小段首先用75%酒精消毒1min，無菌水洗3次，接著用80%次氯酸鈉

消毒2min～3min，無菌水洗3次，洗完后按照形態(tài)學上端向上接種到繼代培養(yǎng)基中，每三角瓶（100ml）

6個小段。

7無菌苗獲取

7.1種球成苗

2

DB15/T2045—2020

置于組培室培養(yǎng)，23℃條件下進行培養(yǎng)，7d～10d即可萌發(fā)。待芽長2.0cm～2.5cm時，帶子

葉一起切下，接種到新的繼代培養(yǎng)基中。培養(yǎng)環(huán)境：溫度23℃，光照強度3000Lux，光照時間14h。

培養(yǎng)20d～25d成苗。

7.2腋芽成苗

在組培室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)環(huán)境：溫度23℃，光照強度3000Lux，光照時間14h。腋芽培養(yǎng)20d～25d

即可長出新芽，切下新芽接種到新的繼代培養(yǎng)基上，約20d可得到健壯無菌苗。

7.3花序成苗

在組培室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)環(huán)境：溫度23℃，光照強度3000Lux，光照時間13h?；ㄐ蚺囵B(yǎng)30d～40d

即可長出新芽。切下新芽接種到新的繼代培養(yǎng)基上，約20d可得到健壯無菌苗。

8甜菜組培擴繁

8.1誘導分化培養(yǎng)

在超凈工作臺上，選取健壯無菌苗，接種于分化培養(yǎng)基中進行分化誘導培養(yǎng)。培養(yǎng)環(huán)境：溫度23℃，

光照強度3000Lux，光照時長為14h。

8.2繼代培養(yǎng)

當誘導的叢生芽長到約1cm～2cm，在超凈工作臺中將叢生芽分切為單苗，接種于繼代培養(yǎng)基中進

行繼代培養(yǎng)。培養(yǎng)環(huán)境：溫度23℃，光照強度3000Lux，光照時間14h。

8.3生根培養(yǎng)

將生長健壯的叢生芽分切成1cm～2cm單芽，接種到生根培養(yǎng)基中。培養(yǎng)環(huán)境：溫度23℃，光照

強度3000Lux，光照時間14h。20d～30d即可誘導出新生根。

9移栽

9.1煉苗

去掉封口膜，在組培室鍛煉2d～3d。

9.2室內(nèi)移栽

選擇根系生長健壯的組培苗從三角瓶中移出，用自來水浸泡根部12h，洗凈根部殘留培養(yǎng)基，移栽

到花盆中（育苗土由蛭石和田園土構成，二者比例為1:1），并遮陽，定期澆水，室內(nèi)培養(yǎng)7d～14d。

9.3大田移栽

待盆栽幼苗生長至4-6片真葉時，