IT/ZZB0474—2018前言 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14基本要求 25產(chǎn)品技術(shù)要求 26檢驗方法 37檢驗規(guī)則 58標志、包裝、運輸和貯存 69質(zhì)量承諾與服務(wù) 6附錄A（規(guī)范性附錄）破壁率的測定方法 7附錄B（規(guī)范性附錄）過氧化值的測定方法 8附錄C（規(guī)范性附錄）功效性成分的測定方法 9附錄D（規(guī)范性附錄）指紋圖譜的測定方法 T/ZZB0474—2018本標準按照GB/T1.1-2009給出規(guī)則起草和編寫。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別這些專利的責任。本標準由浙江省品牌建設(shè)聯(lián)合會提出并歸口。本標準由浙江藍箭萬幫標準技術(shù)有限公司組織制定。本標準主要起草單位：浙江壽仙谷醫(yī)藥股份有限公司。本標準參與起草單位：浙江藍箭萬幫標準技術(shù)有限公司、武義縣標準化研究院、金華壽仙谷藥業(yè)有限公司、武義壽仙谷中藥飲片有限公司、浙江省中藥研究所有限公司、浙江康恩貝制藥股份有限公司、杭州方回春堂集團有限公司、浙江胡慶余堂本草藥物有限公司（排名不分先后）。本標準主要起草人：李明焱、李振皓、鄭化先、王瑛、徐靖、劉志風、陳美紅、徐凌艷、李振宇、鄭玲、朱盛霞、王志安、王如偉、潘君海、諸葛磊、范潛威、史月嬌、胡凌娟、王曉彤、俞飛龍。本標準由浙江藍箭萬幫標準技術(shù)有限公司負責解釋。T/ZZB0474—20181破壁靈芝孢子粉本標準規(guī)定了破壁靈芝孢子粉的術(shù)語和定義、基本要求、技術(shù)要求、檢驗方法、檢驗規(guī)則、標志、包裝、運輸、貯存、質(zhì)量承諾與服務(wù)。本標準適用于以去壁技術(shù)生產(chǎn)的破壁靈芝孢子粉全產(chǎn)業(yè)鏈的保健食品生產(chǎn)、質(zhì)量控制。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T191包裝儲運圖示標志GB4789.2食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定GB4789.3食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗大腸菌群計數(shù)GB4789.4食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗沙門氏菌檢驗GB4789.10食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗金黃色葡萄球菌檢驗GB4789.15食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗霉菌和酵母計數(shù)GB5009.3食品安全國家標準食品中水分的測定GB5009.4食品安全國家標準食品中灰分的測定GB5009.268食品安全國家標準食品中多元素的測定GB50457醫(yī)藥工業(yè)潔凈廠房設(shè)計規(guī)范JJF1070定量包裝商品凈含量計量檢驗規(guī)則國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局令[2005]年第75號定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標準。3.1靈芝孢子粉為多孔菌科真菌赤芝GanodermaLucidum(Leyss.exFranch.)Karst.的子實體發(fā)育產(chǎn)生，在成熟時彈射、采收、除去雜質(zhì)并干燥的孢子。3.2破壁靈芝孢子粉取靈芝孢子粉原料去癟去雜，采用擠壓、碾磨、剪切、氣流粉碎等方式將孢子破壁后經(jīng)萃取和提取去除壁殼、濃縮干燥等工藝制得的產(chǎn)品。T/ZZB0474—201824基本要求4.1研發(fā)技術(shù)選用2000倍以上掃描電子顯微鏡對靈芝孢子粉原料及破壁后孢子的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征進行觀察分析測算，通過研究試驗設(shè)計方法，分析得率及功效性成分轉(zhuǎn)移率等，并進行驗證，確定去癟、破壁、去壁等工藝的最佳參數(shù)。4.2原料要求4.2.1選用經(jīng)省級以上農(nóng)業(yè)部門審定的靈芝品種。選用在道地產(chǎn)區(qū)、國家生態(tài)原產(chǎn)地保護區(qū)域或國家地理標志產(chǎn)品保護的區(qū)域栽培，獲得有機認證的靈芝孢子粉原料。4.2.2原料要求應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1原料要求水分(%)灰分(%)4.3生產(chǎn)工藝采用去癟去雜防氧化的前處理工藝，經(jīng)超音速氣流等破壁，再對破壁后的靈芝孢子粉進行萃取和提取、分離去壁、濃縮干燥、包裝。4.4生產(chǎn)環(huán)境破壁、濃縮物干燥、內(nèi)包裝等生產(chǎn)環(huán)境應(yīng)符合GB50457十萬級潔凈車間標準要求。4.5檢測能力應(yīng)配備2000倍以上掃描電子顯微鏡、電感耦合等離子體質(zhì)譜儀、高效液相色譜儀（蒸發(fā)光散射檢測器）、紫外可見分光光度計等檢測儀器設(shè)備，具備鉛、鎘、砷、汞、銅、鉻、鎳等重金屬及有害元素以及功效性成分含量、指紋圖譜等的檢測能力。5產(chǎn)品技術(shù)要求5.1質(zhì)量要求應(yīng)符合表2的規(guī)定。T/ZZB0474—20183表2質(zhì)量要求5.2安全要求應(yīng)符合表3的規(guī)定。5.3凈含量按國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局令[2005]年第75號《定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法》執(zhí)行。6檢驗方法6.1感官取試樣，在室溫和非陽光直射下采用手握、鼻嗅、目測的方法進行檢驗。T/ZZB0474—201846.2雜質(zhì)取試樣，挑取少量置載玻片上，滴加甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其他適宜的試液，蓋上蓋玻片。必要時，按上法加熱透化。置顯微鏡下觀察。6.3水分按GB5009.3規(guī)定的方法測定。6.4灰分按GB5009.4規(guī)定的方法測定。6.5破壁率按附錄A規(guī)定的方法測定。6.6過氧化值按附錄B規(guī)定的方法測定。6.7功效性成分6.7.1三萜按附錄C規(guī)定的方法測定。6.7.2多糖按附錄C規(guī)定的方法測定。6.8指紋圖譜按附錄D規(guī)定的方法測定。6.9鉛、鎘、砷、汞、銅、鉻、鎳按GB5009.268規(guī)定的方法測定。6.10微生物檢驗6.10.1菌落總數(shù)按GB4789.2規(guī)定的方法測定。6.10.2霉菌和酵母菌總數(shù)按GB4789.15規(guī)定的計數(shù)法測定。6.10.3大腸菌群按GB4789.3規(guī)定的方法測定。6.10.4金黃色葡萄球菌按GB4789.10規(guī)定的方法測定。T/ZZB0474—201856.10.5沙門氏菌按GB4789.4規(guī)定的方法測定。6.11凈含量按JJF1070中規(guī)定的方法檢驗。7檢驗規(guī)則7.1出廠檢驗7.1.1產(chǎn)品出廠需經(jīng)工廠檢驗部門逐批檢驗合格，附產(chǎn)品合格證方能出廠。7.1.2出廠檢驗項目包括感官、雜質(zhì)、水分、灰分、破壁率、過氧化值、三萜、多糖、菌落總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)、大腸菌群、凈含量。如果大腸菌群呈陽性，應(yīng)檢驗致病菌。7.2型式檢驗7.2.1正常生產(chǎn)時每年度進行一次型式檢驗，有下列情況時也應(yīng)進行型式檢驗：a）新產(chǎn)品試制鑒定；b)正式生產(chǎn)時，如原料、工藝有較大改變可能影響到產(chǎn)品的質(zhì)量；c)長期停產(chǎn)，恢復(fù)生產(chǎn)時；d)出廠檢驗的結(jié)果與上次型式檢驗有較大差異時；e)國家質(zhì)量監(jiān)督機構(gòu)提出要求時。7.2.2型式檢驗項目應(yīng)包括5中的全部項目。7.3抽樣方法和判定原則7.3.1抽樣原則以相同工藝條件、品種、規(guī)格、生產(chǎn)日期的成品組成批。產(chǎn)品質(zhì)量檢驗應(yīng)在同批產(chǎn)品中按規(guī)定抽取試樣。7.3.2抽樣方法7.3.2.1樣品按批隨機抽取，設(shè)批量件數(shù)（包裝單位：箱、盒、板等）為X，X≤3時，每件取樣，當3≤X≤300時，按·X隨機抽樣；當X≥300時，按（JX/2）+1隨機抽樣。每批樣品取樣2份，每份樣品應(yīng)為全檢所需樣品的3倍量，一份送化驗室檢驗，一份貯存?zhèn)洳椤?.3.2.2型式檢驗時，可從任一批產(chǎn)品中隨機抽取用于各項指標檢驗和留樣的單位產(chǎn)品，按6檢驗方法檢驗。7.3.3判定規(guī)則7.3.3.1感官、雜質(zhì)、水分、灰分、破壁率、過氧化值、三萜、多糖、菌落總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)、大腸菌群、凈含量指標的檢驗結(jié)果按5技術(shù)要求判定。7.3.3.2檢驗結(jié)果如有指標出現(xiàn)不符合本標準要求，允許對留樣進行復(fù)檢。如復(fù)檢結(jié)果仍為不符合，則判該批產(chǎn)品不合格；微生物指標不得復(fù)檢，檢驗結(jié)果不符合本標準規(guī)定時，即判該批產(chǎn)品為不合格。7.3.3.3出廠檢驗項目全部檢驗合格，則認定該批產(chǎn)品出廠檢驗合格。7.3.3.4型式試驗項目全部檢驗合格，則判定該批產(chǎn)品型式試驗合格。T/ZZB0474—201868標志、包裝、運輸和貯存8.1銷售包裝的標志最小銷售包裝外應(yīng)標明：產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)單位名稱和地址、生產(chǎn)日期或生產(chǎn)批號、凈含量、保質(zhì)期及執(zhí)行標準。8.2包裝8.2.1運輸包裝外應(yīng)標明：產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)廠名、廠址、生產(chǎn)日期或批號、數(shù)量、凈含量、保質(zhì)期及貯運要求的圖形類標志等。包裝儲運圖形標志應(yīng)符合GB/T191的要求。8.2.2直接接觸產(chǎn)品的包裝材料應(yīng)符合食品級要求。8.3運輸運輸工具應(yīng)清潔衛(wèi)生，應(yīng)輕裝輕卸，按箱子圖示標志堆放。運輸過程防止日曬雨淋、避免劇烈震動、撞擊，不得與有毒、有害物品混運。8.4貯存產(chǎn)品應(yīng)貯存于密封、避光、陰涼干燥處，不得與有毒有害物品混放。9質(zhì)量承諾與服務(wù)9.1質(zhì)量承諾在正常運輸、貯存且包裝完善和未經(jīng)啟封的情況下，產(chǎn)品保質(zhì)期不少于2年。若在產(chǎn)品保質(zhì)期內(nèi)出現(xiàn)因廠家原因造成的產(chǎn)品質(zhì)量問題，生產(chǎn)商應(yīng)予以免費更換。9.2服務(wù)根據(jù)客戶需求，利用電話、微信、呼叫中心等途徑及時給予客戶技術(shù)咨詢和技術(shù)支持。用戶對產(chǎn)品質(zhì)量有異議時，生產(chǎn)商應(yīng)在24小時內(nèi)做出處理和響應(yīng)，及時為客戶提供服務(wù)和解決方案。T/ZZB0474—20187（規(guī)范性附錄）破壁率的測定方法方法如下：——取試樣0.15g，精密稱定，置100mL容量瓶中，加聚山梨酯800.1mL，加水至刻度，強力振搖3min，使混勻；——取血球計數(shù)板（25個中方格×16個小方格）；——用吸管吸取混勻的孢子液滴于蓋玻片邊緣，使液體緩緩滲入，多余的液體用吸水紙擦凈；——置200倍以上放大倍數(shù)顯微鏡下觀察，計數(shù)任意9個中方格中具完整形態(tài)的靈芝孢子個數(shù)；——應(yīng)至少做3次，計算平均數(shù)。每9個中方格檢出完整形態(tài)靈芝孢子總數(shù)不得超過10個，即破壁率不得少于98％。孢子壁殼破裂、有缺口者均視為已破碎。T/ZZB0474—20188（規(guī)范性附錄）過氧化值的測定方法B.1油脂提取取試樣20g，置500mL具塞錐形瓶中，加正己烷150mL，置超聲波清洗器中，將功率調(diào)節(jié)至4000W，超聲45min，放冷，置500mL離心瓶中，將轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)至4000轉(zhuǎn)，離心5min。濾過，濾液置500mL磨口錐形瓶中，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，將水浴溫度調(diào)節(jié)至40℃減壓回收溶劑至盡，即得。B.2過氧化值測定取油脂1g，精密稱定，置250mL的干燥碘瓶中，加三氯甲烷-冰醋酸（1：1）混合溶液30mL，使溶解。精密加新制碘化鉀飽和溶液1mL，密塞，輕輕振搖半分鐘，在暗處放置3分鐘。取出加100mL水，搖勻后立即用硫代硫酸鈉滴定液（用0.1mol/L標準溶液1mL，移入100mL量瓶中，加新沸過的冷水，稀釋至刻度）滴定析出的碘，滴定至淡黃色時，加1mL淀粉指示劑，繼續(xù)滴定并強烈振搖至溶液藍色消失為終點；同時做空白試驗。B.3計算按下式計算。.............................X——過氧化值，單位為克每百克（g/100gV——試樣消耗的硫代硫酸鈉標準溶液體積，單位為毫升（mL）；V0——空白試驗消耗的硫代硫酸鈉標準溶液體積，單位為毫升（mL）；C——硫代硫酸鈉標準溶液的濃度，單位為摩爾每升（mol/L）；0.1269——與1.00mL硫代硫酸鈉標準滴定溶液［c（Na2S2O3）=1.000moL/L］相當?shù)牡獾馁|(zhì)量；m——試樣質(zhì)量，單位為克（g100——換算系數(shù)。T/ZZB0474—20189（規(guī)范性附錄）功效性成分的測定方法C.1三萜的測定方法C.1.1所需儀器如下：a)紫外分光光度計；a)恒溫水浴鍋；b)離心機；c)萬分之一電子天平；d)十萬分之一電子天平。C.1.2所需試劑如下：a)齊墩果酸；e)無水乙醇；f)高氯酸；g)冰醋酸；h)香草醛；C.1.3測定步驟如下：——對照品溶液的制備：精密稱取10mg齊墩果酸，以無水乙醇為溶劑，配制成50mL濃度為0.2mg/mL的齊墩果酸乙醇溶液；——標準曲線的制備：精密吸取齊墩果酸標準液0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL分別置于具塞試管中，加熱揮去溶劑，再加入0.4mL新制的5％香草醛－冰醋酸恒溫水浴中加熱15min，流水冷卻至室溫，再加入4mL醋酸乙酯稀釋，搖勻，在560nm波長處測定，繪制標準曲線；——樣品溶液的制備：取試樣約0.5g，精密稱定，置100mL具塞三角瓶中，加入75％乙醇溶液50mL在80℃恒溫水浴中回流提取2h，過濾，濾液轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中；殘渣及濾紙置原三角瓶中加入75％乙醇溶液40mL在80℃恒溫水浴中回流提取1.5h，濾液合并至同一量瓶中，加75%乙醇至刻度，搖勻，配制成樣品溶液；——試樣測定：精密量取待測樣（0.1～1）mL，加熱揮去溶液，再加入0.4mL新制的5％香草醛-冰醋酸液及1.6mL高氯酸，在70℃恒溫水浴中加熱15min，流水冷卻至室溫，再加入4mL醋酸乙酯稀釋，搖勻，在560nm波長處測定。其中試劑空白以蒸餾水為參比液，根據(jù)標樣標準曲線計算三萜含量。按下式計算。...................................X——樣品中三萜的含量g/100gC——通過標準曲線計算所得的三萜含量，(μgV1——樣品溶液定容的體積mLT/ZZB0474—2018V2——吸取樣品溶液的體積mLM——樣品的重量g）。C.2多糖的測定方法C.2.1所需儀器如下：a)紫外分光光度計；b)離心機；c)恒溫水浴鍋；e)萬分之一電子天平；f)十萬分之一電子天平。C.2.2所需試劑如下：a)無水葡萄糖；d)無水乙醇；e)硫酸蒽酮溶液：精密稱取蒽酮0.1g，加80％的硫酸溶液100mL使溶解，搖勻。C.2.3測定步驟如下：——對照品溶液的制備：取無水葡萄糖對照品適量，精密稱定，加水制成每1mL含0.1mg的溶液；——標準曲線的制備：分別精密量取對照品溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL，置10mL具塞試管中，各加水補至2.0mL，精密加入硫酸蒽酮溶液5mL，搖勻，置沸水浴中加熱15分鐘，取出，放入冰浴中冷卻15分鐘，以相應(yīng)的試劑為空白，在625nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線；——樣品溶液的制備：取試樣約0.5g，精密稱定，置250mL具塞三角瓶中，精密加水100mL，稱定重量，加熱回流提取1小時，放冷，再稱定重量，用水補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液2mL，置15mL離心管中，精密加入乙醇10mL，搖勻，4℃放置12小時，取出，離心（4000r/min）10分鐘，棄去上清液，沉淀加水溶解，轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，加水至刻度，——試樣測定：精密量取待測液2mL，置10mL具塞試管中，照標準曲線的制備項下的方法，自“精密加入硫酸蒽酮溶液5mL”起，依