2025年大學(xué)生物技術(shù)（生物技術(shù)技巧）試題及答案

（考試時(shí)間：90分鐘滿分100分）班級(jí)______姓名______第I卷（選擇題共40分）答題要求：本卷共20小題，每小題2分，共40分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。1.以下哪種生物技術(shù)可用于大量生產(chǎn)特定的蛋白質(zhì)藥物？A.基因編輯技術(shù)B.細(xì)胞融合技術(shù)C.蛋白質(zhì)工程技術(shù)D.發(fā)酵工程技術(shù)2.用于分離和純化蛋白質(zhì)的常用方法是？A.凝膠過(guò)濾層析B.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)C.限制性內(nèi)切酶切割D.熒光定量PCR3.下列關(guān)于基因克隆的說(shuō)法，正確的是？A.只能克隆原核生物基因B.克隆的基因一定能表達(dá)C.需利用載體將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞D.基因克隆與PCR無(wú)關(guān)4.哪種生物技術(shù)可用于檢測(cè)基因的表達(dá)水平？A.WesternblotB.基因芯片技術(shù)C.蛋白質(zhì)測(cè)序技術(shù)D.以上都是5.植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，誘導(dǎo)愈傷組織形成的關(guān)鍵激素是？A.生長(zhǎng)素B.細(xì)胞分裂素C.赤霉素D.脫落酸6.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常需要添加的成分不包括？A.血清B.抗生素C.葡萄糖D.纖維素酶7.以下哪種生物技術(shù)可用于改造生物的遺傳性狀？A.基因工程B.細(xì)胞工程C.酶工程D.以上都是8.蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)是指？A.氨基酸的種類和排列順序B.多肽鏈的折疊方式C.蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象D.亞基的組成9.基因工程中常用的工具酶不包括？A.限制性內(nèi)切酶B.DNA連接酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.淀粉酶10.用于鑒定蛋白質(zhì)純度的方法是？A.SDSB.雙向電泳C.等電聚焦電泳D.以上都是11.下列關(guān)于細(xì)胞融合技術(shù)的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是？A.可用于制備單克隆抗體B.能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙C.融合后的細(xì)胞一定能正常生長(zhǎng)D.常用聚乙二醇等誘導(dǎo)細(xì)胞融合12.酶工程中，固定化酶的優(yōu)點(diǎn)不包括？A.可重復(fù)使用B.穩(wěn)定性提高C.酶活性增強(qiáng)D.便于連續(xù)化生產(chǎn)13.以下哪種生物技術(shù)可用于快速繁殖優(yōu)良植物品種？A.植物體細(xì)胞雜交B.植物組織培養(yǎng)C.基因槍法轉(zhuǎn)化D.農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化14.蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)主要包括？A.α-螺旋和β-折疊B.無(wú)規(guī)卷曲C.結(jié)構(gòu)域D.以上都是15.基因工程載體應(yīng)具備的條件不包括？A.有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)B.有篩選標(biāo)記基因C.能在宿主細(xì)胞中自主復(fù)制D.能編碼目的蛋白16.用于蛋白質(zhì)定量分析的方法是？A.考馬斯亮藍(lán)染色法B.銀染法C.Bradford法D.以上都是17.下列關(guān)于發(fā)酵工程的說(shuō)法，正確的是？A.只能生產(chǎn)微生物細(xì)胞B.發(fā)酵過(guò)程中不需要控制條件C.可用于生產(chǎn)抗生素等藥物D.與基因工程無(wú)關(guān)18.植物基因工程中常用的受體細(xì)胞不包括？A.葉肉細(xì)胞B.根細(xì)胞C.花粉細(xì)胞D.動(dòng)物細(xì)胞19.蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)是指？A.多肽鏈的折疊方式B.亞基的組成和空間排列C.蛋白質(zhì)的整體空間構(gòu)象D.氨基酸的種類和排列順序20.基因工程中，篩選含有重組DNA分子的受體細(xì)胞常用的方法是？A.抗性篩選B.藍(lán)白篩選C.核酸雜交D.以上都是第II卷（非選擇題共60分）21.（10分）簡(jiǎn)述基因工程的基本操作步驟。22.（10分）請(qǐng)說(shuō)明蛋白質(zhì)工程的基本原理和主要應(yīng)用。23.（10分）在植物組織培養(yǎng)中，如何進(jìn)行培養(yǎng)基的配制和滅菌？24.（15分）閱讀材料：某科研團(tuán)隊(duì)欲利用生物技術(shù)生產(chǎn)一種新型的生物活性蛋白。他們首先從天然生物中獲取了該蛋白的基因序列，然后通過(guò)基因工程技術(shù)將其導(dǎo)入合適的表達(dá)載體，再將重組載體導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)。但在表達(dá)過(guò)程中遇到了一些問(wèn)題，表達(dá)量較低且產(chǎn)物活性不穩(wěn)定。請(qǐng)分析可能的原因，并提出改進(jìn)措施。25.（15分）閱讀材料：細(xì)胞融合技術(shù)在單克隆抗體的制備中發(fā)揮了重要作用。在制備抗某病毒單克隆抗體時(shí)，首先將免疫小鼠的脾臟細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，然后通過(guò)特定的篩選方法獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，并對(duì)其進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體的純化。請(qǐng)?jiān)敿?xì)描述細(xì)胞融合的方法、篩選雜交瘤細(xì)胞的原理以及抗體純化的常用方法。答案：1.D2.A3.C4.D5.B6.D7.D8.A9.D10.D11.C12.C13.B14.D15.D16.D17.C18.D19.C20.D21.基因工程基本操作步驟：獲取目的基因，可從生物基因組文庫(kù)、cDNA文庫(kù)等獲取，也可用PCR技術(shù)擴(kuò)增；構(gòu)建基因表達(dá)載體，將目的基因與載體連接；將重組載體導(dǎo)入受體細(xì)胞，如導(dǎo)入大腸桿菌、動(dòng)植物細(xì)胞等；目的基因的檢測(cè)與鑒定，通過(guò)核酸雜交、PCR篩選、蛋白質(zhì)檢測(cè)等方法確定目的基因是否成功導(dǎo)入及表達(dá)。22.蛋白質(zhì)工程基本原理：以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)。主要應(yīng)用：提高蛋白質(zhì)的活性、穩(wěn)定性，改善蛋白質(zhì)的功能，用于生產(chǎn)新型藥物、工業(yè)酶等。23.培養(yǎng)基配制：根據(jù)培養(yǎng)植物的種類和階段，選擇合適的基本培養(yǎng)基配方，添加各種營(yíng)養(yǎng)成分如大量元素、微量元素、維生素、植物激素等，調(diào)節(jié)pH值。滅菌：采用高壓蒸汽滅菌法，在121℃、1.05kg/cm2壓力下滅菌15-30分鐘，以殺死培養(yǎng)基中的微生物和芽孢。24.可能原因：密碼子偏好性問(wèn)題，大腸桿菌對(duì)某些密碼子使用頻率低，影響基因表達(dá)；表達(dá)載體構(gòu)建不合理導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄或翻譯效率低；培養(yǎng)條件不合適，如溫度、pH、營(yíng)養(yǎng)成分等；蛋白產(chǎn)物可能形成包涵體影響活性穩(wěn)定性。改進(jìn)措施：優(yōu)化密碼子，根據(jù)大腸桿菌密碼子偏好性改造基因序列；調(diào)整表達(dá)載體，更換強(qiáng)啟動(dòng)子增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄；優(yōu)化培養(yǎng)條件，摸索最適溫度、pH、添加誘導(dǎo)劑等；嘗試不同表達(dá)策略，如分泌表達(dá)避免包涵體形成。25.細(xì)胞融合方法：聚乙二醇（PEG）介導(dǎo)法，將兩種細(xì)胞混合，加入PEG促使細(xì)胞融合；電融合法，利用電場(chǎng)誘導(dǎo)細(xì)胞融合。篩選雜交瘤細(xì)胞原理：利用次黃嘌呤-氨基蝶呤-胸腺嘧啶核苷（HAT）培養(yǎng)基，骨髓瘤細(xì)胞缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT），正常細(xì)胞可